Th9细胞和Bregs细胞在溃疡性结肠炎免疫学致病中的研究及其与患者疾病活动度的相关性

目的:探讨Th9细胞和Bregs细胞在溃疡性结肠炎(UC)免疫学致病中的作用及其与患者疾病活动度的相关性。方法:前瞻性纳入2020年6月至2022年3月海安市人民医院收治的UC患者105例作为观察对象(UC组),其中48例处于疾病缓解期(缓解期UC组),57例处于疾病活动期(活动期UC组),并根据活动期UC组患者病情的严重程度划分亚组:轻型组(n=20)、中型组(n=24)和重型组(n=13),另选取同期健康志愿者50例作为对照组。应用流式细胞术对两组患者外周血中Th9和Bregs细胞比例进行分析,ELISA检测两组血清IL-9、IL-10、IL-35及C反应蛋白(CRP)水平,并采用Pearson相关性分析法分析Th9、Bregs细胞水平与疾病活动度和炎症程度的相关性。结果:UC组患者Bregs细胞比例、Th9细胞比例均明显高于对照组,活动期UC组CAI评分、Bregs细胞比例及Th9高于缓解期UC组(P<0.05)。重型活动期UC患者Th9细胞和Bregs细胞比例明显高于中型和轻型活动期UC患者,其中中型活动期组高于轻型活动期组(P<0.05)。活动期和缓解期UC组患者CRP、IL-9水平均明显高于对照组,且活动期高于缓解期(P<0.05);活动期和缓解期IL-10、IL-35水平均显著低于对照组,其中活动期低于缓解期(P<0.05)。重型组的CRP、IL-9水平高于轻型、中型组,其中中型组高于轻型组(P<0.05);重型组IL-10及IL-35水平明显低于中型和轻型组,其中中型组低于轻型组(P<0.05)。Pearson分析结果显示,Th9、Bregs细胞均与疾病活动度、CRP、IL-9水平呈正相关,与IL-10、IL-35水平呈负相关(P<0.05)。结论:活动期UC患者外周血中Th9、Bregs细胞比例均明显升高,均与其疾病的发生发展密切相关,有望成为辅助临床早期诊断、评估病情的良好指标。

外周血Th9、Th22和Treg细胞及细胞因子在过敏性鼻炎中的研究

目的检测过敏性鼻炎(AR)患者外周血辅助T细胞9(Th9)、辅助T细胞22(Th22)、调节性T细胞(Treg)的比例及血清中白细胞介素-9(IL-9)、白细胞介素-22(IL-22)、转化生长因子β(TGF-β)和总IgE的表达水平,讨论其与过敏性鼻炎的关系以及临床意义。方法选择48例过敏性鼻炎患者为患者组,40例健康成人作为对照组,采用流式细胞术检测外周血单个核细胞(PBMCs)中Th9、Th22和Treg细胞的比例;用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中细胞因子IL-9、IL-22和TGF-β的含量;用速率散射比浊法检测血清中总IgE的水平。测得数据用SPSS 24.0统计软件进行分析,用Pearson相关分析进行相关性检验。结果同对照组相比,AR患者组Th9细胞的百分比显著升高(P<0.0001),Treg细胞的百分比显著降低(P<0.0001),Th22细胞的百分比与健康对照组相比无显著差异(P=0.63)。与对照组相比,AR患者组血清IL-9、IL-22和总IgE表达水平显著升高(P<0.0001),而TGF-β则呈现明显下降(P<0.0001)。AR患者血清IL-9与总IgE水平呈正相关(r=0.487,P<0.05),TGF-β与总IgE水平呈负相关(r=-0.679,P<0.05)。结论外周血Th9、Treg细胞及细胞因子的分泌异常、比例失调在过敏性鼻炎的发病过程中起着重要作用,可作为病情诊断的重要参考指标,也可为临床病因的分析研究提供理论依据,而Th22细胞目前不明确,可能没有参与AR的发病机制。

外周血Th9/Treg在不同程度慢性乙型病毒性肝炎患者中的变化及意义

目的 探讨外周血Th9/Treg在不同程度慢性乙型病毒性肝炎(CHB)患者中的变化及意义。方法 收集2019年1月至2020年12月杭州市第三人民医院收治的乙型肝炎病毒(HBV)感染者150例,分为HBV携带组、轻度CHB组、中度CHB组、重度CHB组及乙肝肝硬化组,每组各30例;同时选取健康志愿者20例设为对照组。记录患者及健康志愿者的性别及年龄,完成HBV血清学标志物、血清肝功能、HBV-DNA、外周血Th9及Treg等指标检测。结果HBV感染组与对照组Th9/Treg差异无统计学意义(P> 0.05),Th9及Treg水平差异均有统计学意义(均P <0.05)。随着CHB程度加重,Th9频率逐渐升高,Treg频率逐渐降低,Th9/Treg逐渐升高,5组Th9、Treg及Th9/Treg差异均有统计学意义(均P <0.05)。Th9与Treg呈负相关(r=-0.485,P=0.000);Th9细胞与丙氨酸氨基转移酶(ALT)呈正相关(r=0.364,P=0.000),与总胆红素(TBi L)呈正相关(r=0.407,P=0.000),与HBV-DNA呈负相关(r=-0.076,P=0.353);Treg细胞与ALT呈负相关(r=-0.188,P=0.02),与TBi L呈负相关(r=-0.146,P=0.075),与HBV-DNA呈负相关(r=-0.035,P=0.667)。结论 HBV感染中Th9可能起促炎作用,Treg可能起抗炎作用,Th9/Treg影响CHB炎症程度。

枯草杆菌二联活菌肠溶胶囊对肝脏储备功能不同的肝硬化患者的肠道屏障功能与Th9细胞表达的影响

目的探讨枯草杆菌二联活菌肠溶胶囊对肝脏储备功能不同的肝硬化患者的肠道屏障功能与Th9细胞表达的影响。方法在我院选取172例肝硬化患者作为研究对象,根据肝脏储备功能不同分为Child-Pugh A级(观察组)72例与Child-Pugh B-C级(对照组)100例,所有患者都在常规治疗手段的基础上加用美常安(枯草杆菌二联活菌肠溶胶囊)治疗,都治疗观察14 d。结果对比治疗后两组患者总有效率观察组与对照组的分别为98.6%和89.0%,观察组优于对照组(P<0.05)。两组治疗前肠道菌群比较无明显差异(P>0.05);双歧杆菌属及乳酸杆菌属在观察组中治疗后较治疗前有明显增加(P<0.05),但和治疗前相比,白色念珠菌属有明显的降低(P<0.05),比较对照组治疗前后肠道菌群变化无明显差异(P>0.05)。对比两组治疗后血清IL-6与TNF-α值,观察组与对照组均低于治疗前(P<0.05),且治疗后观察组低于对照组(P<0.05)。治疗后观察组与对照组的Th9细胞分别为(0.11±0.05)%和(0.32±0.10)%(P<0.05),都低于治疗前的(0.82±0.32)%和(0.83±0.24)%,观察组治疗后Th9细胞低于对照组(P<0.05)。结论相对于肝脏储备功能差的患者,枯草杆菌二联活菌肠溶胶囊在肝脏储备功能良好的肝硬化患者中的应用能改善肠道屏障功能,抑制Th9细胞表达,抑制炎症因子的表达,从而更好的发挥治疗效果。

外周血Th9、Th22在药物性肝损伤中的表达及意义

目的观察外周血辅助性T淋巴细胞9(helper T cell 9,Th9)、辅助性T淋巴细胞22(helper T cell 22,Th22)及其效应因子在药物性肝损伤(drug-induced liver injury,DILI)中的表达及意义。方法选择56例DILI患者为DILI组,15例健康志愿者为健康对照组,其中DILI组分为轻度肝损伤组(n=15)、中度肝损伤组(n=15)、重度肝损伤组(n=15)、急性肝衰竭组(n=11)4组,治疗前后分别检测血清肝功能、外周血Th9、Th22,血清白细胞介素-9(interleukin-9,IL-9)、白细胞介素-22(interleukin-22,IL-22)等指标,观察并分析Th9、Th22、IL-9、IL-22在DILI中的变化,以及其与肝损伤程度及类型的关系。结果轻度肝损伤组治疗前后总胆红素(total bilirubin,TBIL)、丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotranferase,AST)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)差异均有统计学意义(t分别为5.777、10.347、4.225、2.948,P均<0.05),国际标准化比值(international normalized ratio,INR)差异无统计学意义(t=0.210,P>0.05);中度肝损伤组治疗前后TBIL、ALT、AST、ALP、INR差异均有统计学意义(t分别为7.642、5.842、5.747、3.924、5.206,P均<0.05);重度肝损伤组治疗前后TBIL、ALT、AST、ALP、INR差异均有统计学意义(t分别为6.410、5.369、4.726、3.893、6.487,P均<0.05);急性肝衰竭组治疗前后TBIL、ALP、INR差异无统计学意义(t分别为0.669、0.072、0.521,P均>0.05),ALT、AST差异有统计学意义(t分别为5.466、7.184,P均<0.05)。DILI组外周血Th9、Th22及相关细胞因子血清IL-9、IL-22均较健康对照组升高,两组比较差异均有统计学意义(t分别为2.269、2.481、6.014、4.987,P均<0.05)。轻度肝损伤组、中度肝损伤组治疗前后Th9、Th22、IL-9、IL-22差异均有统计学意义(t分别为3.556、-5.906、8.258、-2.219、5.906、-8.500、7.982、-5.403,P均<0.05);重度肝损伤组治疗前后Th9、IL-9差异有统计学意义(t分别为8.411、7.250,P均<0.05),Th22、IL-22差异无统计学意义(t分别为-1.463、-2.038,P均>0.05);急性肝衰竭组治疗前后Th9、IL-9差异无统计学意义(t分别为1.614、0.504,P均>0.05),Th22、IL-22差异有统计学意义(t分别为-3.825、-2.482,P均<0.05)。不同类型肝损伤外周血Th9、Th22及IL-9、IL-22差异均无统计学意义(F分别为0.636、0.330、0.051、0.376,P均>0.05)。Th9与ALT呈正相关(r=0.547,P<0.001);Th22与TBIL呈负相关(r=-0.657,P<0.001),与ALT呈负相关(r=-0.301,P=0.024)。结论外周血Th9、Th22及相关细胞因子IL-9、IL-22参与了DILI发病机制,Th9可能起促炎作用,Th22可能起抗炎作用,其与肝损伤类型可能无关。

Th9细胞及IL-9在嗜酸细胞性胃肠炎发病机制中的作用

目的儿童嗜酸细胞性胃肠炎(EG)的发病机制尚不明确,且Th9细胞在EG中的作用机制研究甚少。文中旨在检测EG患儿结肠黏膜中Th9细胞、IL-9及各种细胞间连接蛋白的表达水平,探讨Th9细胞在儿童EG发病中的可能作用。方法选取2017年9月至2019年10月在南京医科大学附属儿童医院消化科住院且诊断为EG的20例患儿为EG组。选取同期以腹痛、腹泻、便血、呕吐等胃肠道症状为主诉,排除EG诊断的20例患儿为对照组。两组患儿均进行血常规、血清总IgE、血清免疫球蛋白及补体测定、影像学和结肠镜检查,并留取结肠黏膜组织,用免疫荧光法标记结肠黏膜组织中的Th9细胞,用RT-PCR法测定结肠黏膜组织中IL-9、PU.1、STAT3、S100A8、S100A9和细胞间连接蛋白(包括Claudin-2、Claudin-3、Occludin、E-钙粘蛋白和β-连环蛋白)的mRNA表达。结果EG组患儿外周血嗜酸性粒细胞绝对值、血清总IgE水平较对照组显著升高(P<0.05),结肠黏膜组织中Th9细胞较对照组明显增多(P<0.05)。EG组患儿结肠黏膜组织中IL-9、PU.1、STAT3、Claudin-2和S100A8的mRNA表达量显著高于对照组(P<0.05),Claudin-3、Occludin、E-钙粘蛋白和β-连环蛋白的mRNA表达量显著低于对照组(P<0.05)。结论EG儿童结肠黏膜中Th9细胞增多,IL-9表达增高,可能影响细胞间连接蛋白的表达,使肠黏膜通透性增加,参与了EG的发病。

乙型肝炎肝硬化患者外周血Th9细胞水平与肝功能的相关性分析

【目的】探讨乙型肝炎肝硬化患者肝功能与外周血Th9细胞表达水平的相关性。【方法】两院收治的140例乙型肝炎肝硬化患者,其中代偿期肝硬化患者56例(A组),失代偿期肝硬化患者84例(B组),另选取60例同期健康体检者作为对照组。比较三组对象外周血Th9细胞表达水平和血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)、总胆红素(TBIL)水平;采用Pearson相关性分析肝功能指标与外周血Th9细胞表达的相关性。【结果】B组患者外周血Th9细胞亚群占比显著高于A组患者和对照组(P<0.05);A组患者外周血Th9细胞亚群占比显著高于对照组(P<0.05)。与对照组相比,A组和B组患者血清AST、ALT、ALP、γ-GT、TBIL水平明显升高(P<0.05),且B组患者上述指标均高于A组(P<0.05)。相关性分析结果显示,乙型肝炎肝硬化患者血清AST、ALT、γ-GT、TBIL水平与外周血Th9细胞表达均呈正相关(r=0.562、0.536、0.574、0.504,均P<0.05)。【结论】乙型肝炎肝硬化患者外周血Th9细胞呈高表达,且与AST、ALT、γ-GT、TBIL水平均呈正相关,提示其可能参与了乙型肝炎肝硬化的发生、发展。

外周血Th9细胞联合MELD评估失代偿期乙型肝炎肝硬化预后的价值

目的探究外周血Th9细胞联合终末期肝病模型(MELD)评估失代偿期乙型肝炎肝硬化(HBC)预后的价值。方法收集海安市人民医院消化科2017年5月至2022年5月收治的107例失代偿期HBC患者的临床资料,根据治疗后6个月内的生存情况分为生存组及死亡组。采用流式细胞仪检测外周血Th9细胞百分率,并进行MELD评估。比较两组患者的一般资料、MELD评分及外周血Th9细胞百分率,logistic回归分析失代偿期HBC预后的影响因素,根据ROC曲线分析外周血Th9细胞百分率联合MELD评分对失代偿期HBC预后的预测价值。结果107例失代偿期HBC患者治疗后6个月内存活81例,死亡26例。死亡组MELD评分为(23.87±4.16)分,外周血Th9细胞百分率为(3.16±0.34)%,均高于生存组的(16.95±3.35)分和(1.32±0.28)%,差异有统计学意义(P<0.05)。logistic分析显示,MELD评分(OR=3.651,95%CI:1.656~6.001,P<0.01)、外周血Th9细胞百分率(OR=3.846,95%CI:1.691~5.646,P<0.01)为失代偿期HBC预后不良的独立危险因素。经ROC分析显示,MELD评分、外周血Th9细胞百分率评估失代偿期HBC预后的AUC分别为0.744,0.779,95%CI:0.651~0.824,0.688~0.853,联合预测的AUC为0.913(95%CI:0.843~0.959)。结论外周血Th9细胞联合MELD评分对失代偿期HBC预后均有较高的预测价值,可为临床干预提供有效参考。

ITP患者外周血Th9、Th17和Treg细胞水平及IL-9、IL-17和TGF-β表达在ITP发病中的作用

目的:检测免疫性血小板减少症(ITP)患者外周血Treg、Th17、Th9细胞水平及转化生长因子-β(TGF-β)、白介素-17(IL-17)、白介素-9(IL-9)表达水平并探讨他们在ITP发病中的意义。方法:对54例ITP患者(病例组)与40例健康体检者(对照组)外周血Treg、Th17、Th9细胞水平,用流式细胞术检测2组外周血中TGF-β、IL-17、IL-9等细胞因子的表达用酶联免疫吸附法测定。结果:病例组外周血Treg细胞比例较对照组显著降低,而Th17、Th9细胞比例较对照组均显著升高(P <0.01)。病例组外周血中细胞因子TGF-β的表达水平较对照组显著降低,而IL-17、IL-9的表达水平较对照组均显著升高(P <0.01)。经Pearson相关性分析发现,病例组外周血Treg细胞比例与血小板计数(Plt)存在正相关关系(r=0.35,P <0.05),而Th17、Th9细胞比例与Plt均存在负相关关系(r=-0.37、-0.43,均P <0.05);病例组细胞因子TGF-β的表达水平与Plt存在正相关关系(r=0.46,P <0.05),而IL-17、IL-9的表达水平与PLT均存在负相关关系(r=-0.48、-0.54,均P <0.05)。结论:ITP患者外周血Treg、Th17、Th9细胞比例异常,伴有细胞因子TGF-β、IL-17、IL-9表达水平异常,提示可能在ITP的免疫发病中发挥着重要作用。

支气管哮喘患者外周血Th17与Th9细胞的变化及临床意义

目的:探讨Th17、Th9细胞水平在支气管哮喘患者中的表达及其临床意义。方法:选取67例哮喘患者为研究对象,30例健康体检者为对照组,根据全球哮喘防治倡议(GINA)将哮喘患者分为间歇与轻度持续组20例,中度持续组25例和重度持续组22例。收集患者临床资料,完成哮喘控制测试(ACT)评分、肺功能和呼出气一氧化氮(Fe NO)值测定,流式细胞仪检测外周血PBMC中CD3^+CD8^-IL-17^+、CD3^+CD8^-IL-9^+细胞水平。结果:与健康对照组相比,哮喘患者Th17、Th9细胞水平均明显升高(P<0.05);中重度哮喘患者Th17及Th9细胞水平显著高于间歇与轻度哮喘组(P<0.05),而间歇与轻度哮喘组患者与健康对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。哮喘患者外周血Th17及Th9细胞的表达均与FeNO值正相关(r值依次为0.501、0.438;P<0.05),与ACT评分、肺功能FEV1、FEV1/FVC及PEF负相关(r值依次为-0.441、-0.362;-0.307、-0.377;-0.419、-0.411;-0.428、-0.324;P<0.05),同时Th17与Th9细胞在哮喘患者外周血中的表达率正相关(r值为0.443,P<0.05)。结论:Th17、Th9细胞在哮喘患者中高表达,具有协同致炎作用,且与症状严重程度相关,提示Th17及Th9细胞对哮喘患者病情评估有潜在的参考价值。

过敏性哮喘患者调节性T细胞对Th17细胞和Th9细胞的影响

目的:深入研究过敏性哮喘病人(轻到中度)急性发作期的调节性T细胞对Th17和Th9细胞功能影响的异常。方法:招募30例过敏性哮喘病人(轻到中度)急性发作期和30例健康者,采集外周静脉血30 ml,分离PBMC,然后应用磁珠法体外分离CD4+CD25+CD127-/low调节性T细胞(Tregs)和CD4+CD25-效应T细胞(选取分离纯度90%以上的标本继续下一步试验)。在PHA刺激下体外培养,检测效应T细胞增殖情况和Th17细胞、Th9细胞特异性基因(RORC和PU.1)表达及特异性细胞因子(IL-17和IL-9)分泌情况,检测哮喘病人Th17细胞和Th9细胞的异常情况;并给予Tregs干预,检测Tregs对Th17细胞和Th9细胞分化的影响。结果:哮喘组和健康对照组的Tregs均可以抑制CD4+CD25-效应细胞增殖反应,但哮喘组Tregs的抑制功能较健康对照组明显下降(P=0.03)。哮喘病人RORC表达和IL-17分泌均高于对照组(P<0.05),Tregs对RORC表达的抑制能力在哮喘组有所下降(P<0.05),但对IL-17分泌的抑制能力在哮喘组和对照组没有显著差别(P>0.05);哮喘病人IL-9分泌无论是否加入Tregs干预均高于对照组(P<0.05),但PU.1表达只有在加入Tregs干预后才高于对照组(P=0.04);Tregs对PU.1表达和IL-9分泌的抑制能力在哮喘组和对照组没有显著差别(P>0.05)。结论:过敏性哮喘病人(轻到中度)急性发作期Tregs数量和功能下降,而Th17细胞和Th9细胞的特异性基因表达和特异性细胞因子生成增加,哮喘病人的Tregs在体外对Th17细胞的抑制功能有所下降,但尚未发现Tregs对Th9细胞的抑制功能明显降低。

Th9细胞和白介素-9在细粒棘球蚴感染患者中的变化特点及意义

目的探讨辅助性T细胞9(Th9)在肝囊型包虫病患者慢性感染中的作用。方法通过流式细胞术和实时荧光定量PCR法分别检测2010年8月至2012年12月新疆医科大学第一附属医院33例囊型包虫病患者(CE)及20例健康体检者外周血Th9细胞和特异性转录因子PU.1的表达。结果 1)CE组Th9细胞占CD4+T的比值(CD3+CD4+IL-9+/CD4+T cells)(0.91%±0.57%)高于健康对照组(0.61%±0.2%),差异具有统计学意义(P=0.042);2)CE组PU.1、IL-9 mRNA的表达水平明显高于健康对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 CE患者体内Th9/IL-9表达上调,Th9细胞可能参与了细粒棘球蚴慢性感染的免疫应答和调控。

支气管哮喘小鼠肺组织Th9细胞数量及相关细胞因子水平增加

目的观察支气管哮喘小鼠肺组织Th9细胞数量及其相关细胞因子水平,了解它们与支气管哮喘发病的关系。方法16只SPF级雌性BALB/c小鼠按随机数字表法分为正常对照组和哮喘组,每组8只。建立哮喘模型后,2组小鼠分别用小动物无创肺功能仪行气道反应性检测;ELISA检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素9(IL-9)、IL-10、IL-13水平;HE染色及PAS染色观察肺组织病变情况;流式细胞术检测肺脏IL-9+、IL-10+、IL-13+淋巴细胞占CD3+淋巴细胞百分数。结果哮喘组气道反应性明显高于正常组,气道炎症明显;BALF中IL-9、IL-13水平较正常组明显升高,IL-10明显降低;肺脏IL-9+、IL-13+淋巴细胞占CD3+淋巴细胞百分数明显高于正常组,IL-10+淋巴细胞占CD3+淋巴细胞百分数明显低于正常组。结论支气管哮喘小鼠肺内IL-9+细胞数量增加、IL-9水平升高,IL-10表达减少,Th9细胞可能在哮喘发病中发挥一定作用。

Th9细胞:一种新型效应性CD4^+ T细胞亚群

长期以来,人们认为IL-9是Th2类细胞因子,作用于多种炎症细胞和组织细胞,在对抗寄生虫感染和诱导变应性疾病,尤其是过敏性哮喘中发挥着重要的作用。近来研究发现,机体内存可能在着一群新型的不同于已知的Th1、Th2及Th17的CD4+Th细胞亚群,具有分泌IL-9和IL-10的能力,有学者称之为"Th9"细胞。由于IL-9主要由Th9细胞分泌,这就需要对原本归于Th2类的生理或病理改变机制进行重新探讨,以阐明Th9细胞在细胞免疫中的作用。现就Th9细胞的生物学功能及与相关疾病的关系进行简要综述。

原发性胆汁性肝硬化患者外周血Th9细胞表达增高及其临床意义

目的探讨原发性胆汁性肝硬化（primary biliary cirrhosis，PBC）患者外周血Th9细胞所占百分比并初步探讨其临床意义。方法应用流式细胞术检测PBC患者（n＝38）和健康对照者（n＝38）外周血Th9细胞所占百分比，利用临床资料对患者进行 Mayo评分。采用实时荧光定量PCR法检测患者组和健康对照组外周血单个核细胞（PBMC）中 IL-9，PU-1， TGF-β的表达量。并采用 ELISA方法检测患者血清中 IL-9的表达量。进一步分析 Th9细胞百分比与 PBC患者生化指标和Mayo评分的相关性。结果与健康对照组相比，PBC患者Th9细胞百分比增高（t＝27.29；P＜0.01），且随疾病分期加重逐渐增高。IL-9，PU-1和TGF-βmRNA的表达量显著增高（t＝14.69，23.92，10.48；均P＜0.01），且血清中 IL-9的表达量也显著增高（t＝11.66；P＜0.01）。生化指标（ALP，AST，ALT，GGT，TBIL）较健康对照组均显著增高（t＝10.94，12.95，10.56，14.92，27.70；均P＜0.01）。Th9细胞百分比与患者 Mayo评分、AST，ALT，GGT和TBIL间呈正相关（P＜0.05）。结论 Th9细胞可能参与了PBC发病机制，且与疾病的发展相关，这为未来免疫调节治疗靶点的探索提供了新的依据。

枯草杆菌二联活菌肠溶胶囊对乙肝肝硬化患者血清中Th9、IL-9表达影响及与肠道屏障功能的相关性研究

目的探讨枯草杆菌二联活菌肠溶胶囊对乙肝肝硬化患者血清中Th9、IL-9表达影响及与肠道屏障功能的相关性。方法将乙肝肝硬化患者共124例按照入院顺序,根据随机抽签原则分为观察组与对照组各62例。对照组给予常规对症治疗,观察组在对照组治疗的基础上加用枯草杆菌二联活菌肠溶胶囊进行治疗,各治疗14 d,记录与检测治疗前后患者肠道屏障功能、Th9、IL-9、肝脏储备功能的变化。结果两组在治疗期间都无不良反应发生。观察组与对照组的治疗总有效率分别为98. 4%和88. 7%,观察组优于对照组(P <0. 05)。观察组与对照组治疗后的Child-Pugh分级评分与尿液乳果糖/甘露醇排除比明显低于治疗前,观察组治疗后的上述值也较对照组低(P <0. 05)。两组患者治疗后Th9、IL-9都呈现明显下降的趋势,治疗后观察组的Th9、IL-9明显低于对照组(P <0. 05)。Pearson相关分析显示治疗前后患者的尿液乳果糖/甘露醇排除比变化与Th9含量变化呈明显正相关性(r=0. 443,P=0. 003)。结论应用枯草杆菌二联活菌肠溶胶囊能有效改善乙肝肝硬化患者的肠道屏障功能,改善肝脏储备功能并提高治疗效果,有利于调节Th9、IL-9表达水平,且Th9、IL-9与肠道屏障功能存在明显的相关性。

小细胞肺癌患者外周血中Th9细胞水平检测及其临床意义

目的:检测小细胞肺癌(SCLC)患者血清中白细胞介素9(IL-9)的水平和外周血中Th9的细胞比例,探讨Th9在SCLC疾病进展过程中的作用。方法:选择20例局限期SCLC患者(局限期SCLC组)、16例扩散期SCLC患者(扩散期SCLC组)和10名健康对照者(健康对照组)。ELISA法检测各组研究对象血清中IL-9水平,流式细胞术检测各组研究对象外周血Th9细胞在CD4+T细胞中所占比例。结果:SCLC组患者外周血中Th9细胞比例高于健康对照组(t=3.731,P<0.01),局限期SCLC患者外周血中Th9细胞比例低于扩散期SCLC组(t=2.825,P<0.01)。SCLC组患者血清IL-9水平高于健康对照组(t=4.001,P<0.01),局限期SCLC组患者血清中IL-9水平低于扩散期SCLC组(t=3.089,P<0.01);结论:Th9可能通过分泌IL-9直接促进SCLC的疾病进展,外周血中Th9细胞和IL-9可能成为评价小细胞肺癌的分子标志。

特异性免疫治疗对变应性鼻炎患者外周血中Th9细胞分化及转录因子表达的影响

目的观察变应性鼻炎(AR)患者变应原特异性免疫治疗(specific immunotherapy,SIT)前、后外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)中Th9细胞分化因子及相关转录因子GATA-3、PU.1、IRF4 mRNA表达的变化。方法采用视觉模拟量表(visual analogue scale,VAS)评估71例AR患者(实验组)症状严重程度。流式细胞术检测36例AR患者PBMC中Th9细胞百分率,ELISA法检测血清特异性IgE(specific IgE,sIgE)、特异性IgG4(specific IgG4,sIgG4)、白细胞介素9(interleukin-9,IL-9)和IL-10水平在治疗前及治疗1、2年后变化,对鼻部症状计分。并取32例健康者血清作为对照组。用实时荧光定量PCR法检测实验组与对照组PBMC中Th9细胞相关转录因子GATA-3、PU.1和IRF4mRNA表达水平。结果①AR患者治疗前,PBMC中Th9细胞百分率明显高于对照组(P<0.01),而治疗1、2年后Th9细胞百分率均明显低于治疗前(P<0.01)。②AR患者治疗前,血清sIgE及Th9细胞中IL-9水平高于对照组(P均<0.01),而sIgG4及IL-10水平低于对照组(P均<0.01);治疗1、2年后sIgE和IL-9均低于治疗前(P均<0.01),而治疗2年后,sIgG4和IL-10水平均低于治疗1年后,但高于治疗前(P均<0.01),治疗2年后sIgE水平高于治疗1年后(P<0.01)。③治疗前、后各组GATA-3mRNA表达量与对照组相比均无显著差异(P>0.05),治疗前PU.1、IRF4 mRNA表达量均高于对照组(P均<0.01),而治疗1、2年后PU.1、IRF4 mRNA表达量均低于治疗前(P均<0.01)。结论 SIT可能通过抑制Th9细胞分化,调节相关转录因子的表达而调节机体免疫状态,诱导免疫耐受。

Th9和Th22细胞及其细胞因子在儿童支气管哮喘发病中的作用

目的检测支气管哮喘患儿外周血辅助性T细胞(Th)9和Th22细胞的比例以及血清中白细胞介素(IL)-9、IL-22和总IgE的表达,探讨其在儿童支气管哮喘发病中的作用及临床意义。方法选取56例哮喘患儿,其中哮喘发作组32例,哮喘缓解组24例。另选取20例健康儿童为对照组。采用流式细胞术(FCM)分别检测哮喘发作组、哮喘缓解组和健康对照组外周血中Th9细胞和Th22细胞的比例;应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组儿童血清中IL-9和IL-22的含量;应用特定蛋白分析仪检测各组儿童血清中总IgE的水平。测得数据用SPSS 22.0统计软件进行分析,采用Pearson直线相关分析进行相关性检验。结果与哮喘缓解组和对照组相比,哮喘发作组外周血Th9和Th22细胞比例显著升高(P<0.05);与对照组相比,哮喘缓解组外周血Th9和Th22细胞比例显著升高(P<0.05)。与哮喘缓解组和对照组相比,哮喘发作组血清中IL-9、IL-22和总IgE水平显著升高(P<0.05);与对照组相比,哮喘缓解组血清中IL-9、IL-22和总IgE水平显著升高(P<0.05)。相关分析结果表明,支气管哮喘患儿血清中IL-9、IL-22与总IgE水平均呈正相关(P值均<0.05)。结论支气管哮喘患儿外周血Th9和Th22细胞及其细胞因子在儿童支气管哮喘发病中发挥重要作用,并与哮喘的严重程度呈正相关。

成人原发免疫性血小板减少症患者外周血Th9细胞的表达及其临床意义

目的观察Th9细胞及IL-9在成人原发免疫性血小板减少症(primary immune thrombocytopenia,ITP)患者中的表达,探讨其在ITP发病过程中的作用。方法纳入新诊断的成人ITP患者25例及年龄性别匹配的健康对照患者25例,利用流式细胞术检测研究对象外周血Th9细胞比例,实时荧光定量PCR检测IL-9、TGF-β、PU.1和IRF4的相对表达量,ELISA法检测IL-9的表达情况,血细胞计数仪进行血小板(PLT)计数。结果与健康对照组相比,ITP患者外周血Th9细胞比例增高,且PLT≤30×109/L的患者Th9细胞比例高于PLT>30×109/L的患者(P<0.05)。ITP患者IL-9mRNA及蛋白水平均增高,且PLT≤30×109/L的患者IL-9mRNA及蛋白水平高于PLT>30×109/L的患者(P<0.05)。与健康对照组相比,ITP患者Th9细胞发育的主要调控因子TGF-β、PU.1和IRF4水平增高(P<0.05)。ITP患者Th9细胞比例和IL-9蛋白水平均与PLT负相关(r=-0.428 1,P=0.032 8;r=-0.537 5,P=0.005 6)。随访11例患者,发现经有效治疗后,Th9和IL-9与治疗前相比均呈下降趋势(P<0.05)。结论 Th9的异常活化可能参与了成人ITP疾病的发生与发展,这为进一步理解ITP的免疫学发病机制及选择免疫调节治疗潜在靶点提供了新的线索。