紫外线和^(60)Coγ射线对钝顶节旋藻(Arthrospira platensis)的诱变效应

将对数期的钝顶节旋藻(Arthrospira platensis)(原名钝顶螺旋藻,Spirulina platensis)A9菌株用超声波40 s预处理破碎成2个~4个细胞大小的片断,分别用不同剂量的紫外线(UV)和60Coγ射线处理,诱变后经3小时避光预培养分别接种于液体和固体培养基进行培养。固体培养时UV照射70 s和60Coγ照射3 500 Gy后无菌体存活,而在液体培养中高剂量处理的样品可以部分恢复生长。将诱变后的菌液分别加入20μg.mL-1的ρ-氟苯丙氨酸(-ρfluorophenylalan ine,FPA)和20μg.mL-1的刀豆氨酸(L-canavan ine su lphate,CS),放入光照培养箱中预培养3 d^4 d后涂于含相同浓度的氨基酸类似物FPA和CS平板,培养30 d后计算抗氨基酸类似物突变株的突变率。UV对A9菌株的完全致死剂量LD和存活率37%时的剂量D37值分别为70 s和22 s,LD/D37=3.18。A9菌株经UV诱变25 s时存活率为28.7%,抗FPA和抗CS突变率分别为2.31×10-3和1.50×10-3,最大诱变效应比(MME)分别为48.53和52.63。60Coγ射线对A9菌株的LD和D37值分别为3 500 Gy、1 250 Gy,LD/D37=2.8。60Coγ射线显著提高A9菌株的突变率,当诱变剂量为2 000 Gy、存活率为10.49%时A9菌株突变率最高,抗FPA和抗CS突变率分别为5.07×10-3和0.964×10-3,最大诱变效应比(MME)分别为241.43和74.15。60Coγ射线对钝顶节旋藻A9菌株的损伤比UV造成的损伤强烈(低的LD/D37值),比UV具有较大的诱变效应(高MME值)。采用两种诱变剂获得的抗FPA突变率都要高于抗CS突变率。通过诱变获得了大量的抗氨基酸类似物突变株,为遗传重组研究提供携带重要遗传标记的材料。

牙鲆抗淋巴囊肿系肌肉营养成分的分析

为研究牙鲆抗淋巴囊肿系及其亲本雌核发育系的肌肉品质,采用常规方法分析比较7月龄体质量分别为(219.88±33.82)g、(213.53±27.20)g和(237.51±26.04)g的母系、父系和抗淋巴囊肿系牙鲆肌肉的营养成分。试验结果显示:牙鲆抗淋巴囊肿系肌肉鲜样中的水分、蛋白质和灰分含量与亲本系无显著差异(P>0.05),但粗脂肪含量显著低于母系(P<0.05),而与父系差异不显著(P>0.05);3系均含有18种氨基酸,除色氨酸和酪氨酸含量差异显著(P<0.05)外,其他16种氨基酸含量均差异不显著(P>0.05)。根据氨基酸评分和化学评分,3系的第一限制性氨基酸均为色氨酸,必需氨基酸指数分别为抗淋巴囊肿系(87.40)>母系(79.86)>父系(79.04),必需氨基酸组成符合联合国粮食及农业组织/世界卫生组织标准;抗淋巴囊肿系的饱和脂肪酸、单不饱和脂肪酸、多不饱和脂肪酸含量显著低于亲本系,而母系的二十二碳六烯酸和二十碳五烯酸的含量丰富,显著高于抗淋巴囊肿品系和父系(P<0.05)。综上所述,牙鲆抗淋巴囊肿系及其亲本系的营养价值较高,其中抗淋巴囊肿系氨基酸含量最高,而母系的多不饱和脂肪酸中二十二碳六烯酸和二十碳五烯酸含量最丰富,可作为高脂肪酸选育的候选材料。本试验结果可为牙鲆抗淋巴囊肿新品种选育提供基础数据。

LuxS基因缺失对变形链球菌耐酸性的影响

目的:探讨变形链球菌Ingbritt C(血清C型)国际标准株与LuxS基因缺失的变形链球菌突变株之间耐酸能力的差异。方法:配制相同浓度的变形链球菌标准株与LuxS缺陷株菌悬液,分别在不同pH值(pH3.5～7.0)的BHI液体培养基中培养相同时间后,用紫外分光光度计测定吸光度,比较2种菌株的生长情况;先在轻度酸性环境(pH5.5)中预酸化,再将2种菌株于致死性pH值环境(pH3.0)中培养,比较其适应性耐酸能力。结果:①pH值为6.0～7.0时,2种菌珠在相同pH值条件下生长情况间的差异无显著性(P>0.05),且3组不同pH值条件下细菌生长情况间的差异亦无显著性(P>0.05);②pH值为4.5～5.5时,2种菌株的生长情况的差异有显著性(P<0.05);③在pH值为3.0时,LuxS缺陷株的生存率(0.006 5%)要明显低于标准株的生存率(0.078%),差异有显著性(P<0.05)。④在pH值5.5环境下预酸化后,LuxS缺陷株的生存率(0.747%)约为标准株生存率(8.65%)的1/10。结论:在亚致死性pH值中,变形链球菌标准株与LuxS缺陷株的耐酸能力具有差异,标准株的耐酸能力强于LuxS缺陷株,2种菌株均表现出了适应性耐酸的能力;变形链球菌LuxS缺陷株对酸的敏感性增加,而适应性耐酸能力仍然存在。

^(60)Co辐射诱变姬松茸突变株J_3子实体不同部位的氨基酸分析研究

测定并比较了60Co辐射诱变姬松茸突变株J3与原菌株J1子实体不同部位的氨基酸含量。结果表明,除菌柄和盖皮外,姬松茸突变株J3子实体其它部位的必需氨基酸、儿童氨基酸、硫氨酸、支链氨基酸、鲜味氨基酸、芳香族氨基酸和甜味氨基酸均高于原菌株J1。姬松茸突变株J3子实体中谷氨酸含量占氨基酸总量的比例分别比原菌株J1、α-酪蛋白和卵清蛋白提高34.88%、56.68%和122.32%。

D-核糖生产菌性能的研究

以枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)T8(ade +his )为出发菌株,经紫外线诱变筛选到的突变株6 42培养24h后,菌体呈链状排列;在合成培养基中,不能同化D 葡萄糖酸、D 木糖、D 核糖和L 阿拉伯糖等必须经HMP途径进行代谢的碳源;在合成培养基中,利用葡萄糖的能力降低;培养基中芳香族氨基酸如L 色氨酸、L 酪氨酸和L 苯丙氨酸的含量影响着D 核糖的形成,其含量需严格控制。

植物抗氨基酸突变体研究进展

抗氨基酸突变体筛选是植物氨基酸品质改良的前提和基础。为进一步探讨抗氨基酸突变体的筛选方法及其有效利用,综述了植物抗氨基酸突变体研究现状、筛选方法及其取得的成就、存在的问题、应用前景,为植物的氨基酸品质改良提供参考。

臭鳜鱼中氨基酸产生菌的分离鉴定及其加工特性评价

针对我国传统臭鳜鱼制品存在风味稳定性差、安全性低等问题,采用传统微生物培养技术,在自然发酵臭鳜鱼中分离获得菌株,通过薄层层析法(thin-layer chromatograph, TLC)初步筛选获得10株产氨基酸菌株,测定菌株上清液中游离氨基氮总量,复筛获得1株优良氨基酸产生菌L2-2,经16S rRNA序列分析对其进行鉴定,并通过耐盐试验、氨基酸脱羧酶试验和抑菌试验确定菌株的加工特性。经鉴定菌株L2-2为清酒乳杆菌(Lactobacillus sakei),其耐盐特性较好,精氨酸脱羧酶呈阳性;对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌具有抑制活性。

双孢蘑菇新菌株蛋白质的营养评价与分析

本研究测定了双孢蘑菇亲本FA15与突变株FA15-5、FA15-6子实体的氨基酸含量,并利用非生物学指标,以鸡蛋蛋白为标准蛋白,以WHO/FAO必需氨基酸参考模式为评价标准,对双孢蘑菇子实体的蛋白质营养价值进行了全面评价。结果表明:亲本与两个突变株的氨基酸种类齐全,必需氨基酸占氨基酸总量的百分比分别为36.99%、39.31%、36.53%。亲本和突变株的限制性氨基酸均为异亮氨酸。氨基酸评分(AAS)显示,FA15-5、FA15-6比FA15分别低31.71%高25.00%。突变株FA15-6的必需氨基酸指数(EAAI)值较FA15高39.97%,生物价(BV)较FA15高54.73%,营养指数(NI)值较FA15高40.00%。因此,在营养价值方面,FA15-6是优于亲本的良好突变菌株。

芳香族氨基酸及其衍生物的细胞工厂构建策略

芳香族氨基酸及其衍生物由于其特定的生理活性,已广泛应用于医药、食品、饲料和化工等行业。利用重组微生物发酵生产芳香族氨基酸及其衍生物是满足全球日益增长需求的有效途径。通过将代谢工程策略与合成生物学、系统生物学和生物工程的发展相结合,在菌株的改造及优化方面取得了显著的进展。然而,合成芳香族氨基酸及其衍生物的代谢途径长且调控机制复杂,通过简单的代谢途径改造难以大幅提高产量,因此,近年来出现了很多相关的改造方法,为克服代谢途径中的限速问题提供了很好的借鉴意义。本文回顾和比较了最近在芳香族氨基酸及其衍生物合成方面应用的成熟技术和策略,包括常用的代谢途径改造策略(如增加前体供给、解除关键酶和阻遏蛋白的反馈抑制和阻遏抑制、改造转运系统、全局调节系统)以及菌株生长与生产产品耦联和菌株构建方法(如基于生物传感器的高通量筛选以及对培养基和培养条件的优化等),未来相关前沿技术如计算机辅助途径酶改造技术和筛选高产菌株的定向进化技术将助力芳香族氨基酸及其衍生物高产菌株的构建。

抗赖氨酸加苏氨酸玉米突变体后代的育性、遗传和氨基酸分析

通过组织培养选择的玉米突变体,已收获抗性纯合的第6代种子。该突变体对赖氨酸加苏氨酸抑制的抗性能稳定遗传。但育性很差。通过抗性愈伤组织的再生植株与野生型植株回交,而从回交后代选择的抗性纯合体,其育性部分得到恢复。遗传分析表明,该抗性是作为单个显性核基因遗传。抗性纯合种子中,除苯丙氨酸外,所有的游离氨基酸都增高(为野生型的5倍,而游离的必需氨基酸为6倍),总氨基酸也增高5.53％。其中,游离苏氨酸显著增高(为野生型的12倍),从而使总的苏氨酸增加17.73％。蛋白质含量无明显改变。

利福霉素B产生菌─—地中海诺卡氏菌的推理选育

利福霉素Ｂ的生物合成受芳香族氨基酸（Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ）的反馈抑制。用紫外线处理Ｎ．ｍｅｄｉｔｅｒｒａｎｅｉＸＣ－１０２菌丝悬浮液后，并在含０．１％芳香族氨基酸的琼脂平板上分离芳香族氨基酸抗性变种。结果表明，芳香族氨基酸抗性变种的发酵效价高于自然分离株和紫外线诱变株；色氨酸抗性变种（Ｔｒｐｒ）的发酵效价又高于酪氨酸抗性变种（Ｔｙｒｒ）和苯丙氨酸抗性变种（Ｐｈｅｒ）；０．５％Ｔｒｐｒ变种比０．１％Ｔｒｐｒ变种更高产。其中０．５％Ｔｒｐｒ变种ＸＣ－５４０的生产能力较出发菌株ＸＣ－１０２增加４２．１６％。传代试验表明ＸＣ－５４０的遗传特性稳定，在７ｍ３罐做发酵放大，与出发菌株相比，发酵效价和发酵指数分别提高５１．１１％和５１．０２％。