HPLC法测定小花棘豆中野决明碱含量的研究

目的建立小花棘豆中主体毒性物质野决明碱含量的HPLC测定方法。方法采用高效液相色谱法，色谱柱：ODS-C18（250mm×4.0mm,5μm）；柱温为30℃.流动相A：甲醛，流速为0.4mL·min^-1；流动相B：0.5％柠檬酸钠＋0.5％磷酸二氢钠，流速为0.6mL·min^-1；检测波长为254mm.结果野决明碱含量与对应的色谱峰面积在0.05～0.04mL·min^-1范围内具有良好的线性关系，r=0.9961;平均回收率为101.91％，精密度为RSD=0.42%（n=5）.结论本方法可有效地用于测定小花棘豆中野决明碱的含量，是一种准确、灵敏、可靠的分析方法。

披针叶黄华中2种生物碱单体的分离与鉴定

披针叶黄华含有多种生物碱类物质,这类物质是引起动物披针叶黄华中毒的毒性成分,但其也具有祛痰、止咳等药理作用。目前,披针叶黄华所含的生物碱种类已被广泛报道,而关于该植物中生物碱单体提取、分离方面的研究报道较少。该试验采用柱层析分离法,从披针叶黄华总生物碱中提取到2种结晶,进一步应用薄层层析、气相—质谱联用和红外光谱法对获得的结晶进行了鉴定,最终确定结晶Ⅰ为黄华碱,推测结晶Ⅱ为四氢脱氧阿艮亭碱。结果表明,该试验采用的方法简便、可靠,能够成功地对披针叶黄华所含的生物碱单体进行分离、纯化和鉴定,为进一步研究2种结晶的生物学活性提供了技术基础。

小花棘豆主要有毒成分黄花碱对氧自由基的影响

为了探讨小花棘豆中黄花碱的中毒机理及其对小鼠体内氧自由基代谢的影响,采用紫外可见分光光度法分别测定了对照组和黄花碱组小白鼠血浆、肝脏和脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPX)的活性、脂质过氧化终末代谢产物丙二醛(Malondialdehyde,MDA)的含量。结果表明,黄花碱组小白鼠血浆、肝脏和脑组织中SOD活性都显著低于对照组(P<0.05),血浆和脑中GSHPX活性极显著低于对照组(P<0.01),肝中显著低于对照组(P<0.05),黄花碱组MDA含量极显著增加(P<0.01)。黄花碱能诱发机体内氧自由基的产生,显著降低机体主要器官和组织中某些抗氧化酶的活性和提高MDA的含量,发生脂质过氧化反应而损伤机体主要组织器官,细胞发生空泡变性,可能是黄花碱引起中毒的原因之一。

小花棘豆生物碱对小白鼠外周血T淋巴细胞亚群CD_4^+、CD_8^+免疫功能的影响

试验采用小花棘豆生物碱苦马豆素(SW)、黄花碱(Ts)以及2种生物碱的混合物分别对小白鼠进行传统灌胃,并于试验开始后第7天、第14天、第21天、第28天、第35天,从各组中随机抽取4只小白鼠,自其眼球取抗凝血,利用流式细胞术检测外周血T淋巴细胞亚群CD4+、CD8+的百分检率,并计算出CD4+与CD8+的比值。结果表明,低浓度的SW具有提高机体免疫机能的作用,而中等浓度和高浓度的SW在短时间内仍然可以提高机体的免疫机能,长时间使用却会严重降低机体的免疫机能;Ts在低浓度下不会影响机体的免疫机能,中等浓度和高浓度能够降低机体的免疫机能;混合生物碱组在低浓度时对机体的免疫机能影响不大,但在高浓度时仍然能够显著降低机体的免疫机能。

黄花棘豆的喹诺里西定生物碱

豆科棘豆属有毒植物含多种有毒生物碱,有关棘豆属中生物碱成分的研究,早在1929年Couch由兰伯氏棘豆(Oxytropis lambertii DC.)中分离到一种多羟基化的含氮有机化合物,这是最早报道由棘豆属植物中分离出的生物碱成分,由于当时条件限制未能确定其结构。1982年美国农业部西部研究中心的植物化学家Molyneux从绢毛棘豆(Oxytropis sericea)中分离到苦马豆碱(swainsonine)等吲哚里西定生物碱(indolizidinealkaloids);1989年沈阳药学院于荣敏等由小花棘豆(Oxytropis glabra DC.)中分离出多种喹诺里西定生物碱。喹诺里西定生物碱具有多种生理活性,对试验动物中枢神经系统产生抑制,呼吸抑制或兴奋,致幻、流产和致畸等作用。本文报道由黄花棘豆(Oxytropis ochrocephala Bunge)中测得4种喹诺里西定生物碱。

黄花棘豆的毒性生物碱的研究

采用离子交换和吸附柱层析方法，从宁夏黄花棘豆（ＯｘｙｔｒｏｐｉｓｏｃｈｒｏｃｅｐｈａｌａＢｕｎｇｅ）茎叶的总生物碱成份中，首次分得四种化合物，根据其理化性质、波谱分析并与文献对照，确定同属喹诺里西啶（ｑｕｉｎｏｌｉｚｉｄｉｎｅ）类生物碱，分别鉴定为黄华碱（ｔｈｅｒｍｏｐｓｉｎｃ，Ｉ）、臭豆碱（ａｎａｇｙｒｉｎｅ，Ⅱ）、白羽扇豆减（ｌｕｐｅｎｉｎｅ，Ⅲ）和鹰爪豆碱（ｓｐａｒｔｅｉｎｅ，Ⅳ）．

藏药镰形棘豆中总生物碱的含量测定

目的:建立无紫外吸收的藏药镰形棘豆总生物碱的定量分析方法。方法:采用酸性染料比色法,以野决明碱为对照品,溴麝香草酚蓝为酸性染料,药材先用酸水提取,碱化后经有机溶剂振摇提取,检测波长为413nm。结果:野决明碱进样量在20.06～100.30μg范围内与吸光度呈良好线性关系(r=0.9995);平均加样回收率为100.7%,RSD=1.41%(n=6)。结论:该方法简便、准确、可靠,可用作镰形棘豆中总生物碱的定量分析方法,为其质量评价提供科学依据。

超声波辅助提取披针叶黄华碱的工艺优选研究

采用超声波辅助甲醇浸提法对披针叶黄华碱进行提取,并设计正交试验对提取工艺进行优化,筛选披针叶黄华碱的最佳提取工艺条件。结果表明,优选工艺为甲醇浓度70%、固液比(g/m L)1∶20、超声时间60 min、超声功率500 W和超声温度60℃,最高提取率达1.195%。超声波辅助甲醇浸提法是提取披针叶黄华碱的有效方法,提取工艺科学合理,可以作为披针叶黄华碱的最佳提取方法。

小花棘豆黄华碱小鼠增重效应研究

小花棘豆是内蒙古西部地区主要的有毒植物之一,可以引起家畜慢性中毒,小花棘豆中毒早期动物体重增长较快,但是否与黄华碱-小花棘豆的主要生物碱之一有关尚不清楚。本研究以blab/c小鼠为研究对象,分别经灌胃给予18.5 mg/kg、37 mg/kg、74 mg/kg小花棘豆黄华碱,连续9d。结果发现37 mg/kg和74 mg/kg试验组小鼠增重明显,肝脏指数明显上升,血糖明显降低。该结果表明黄华碱是导致动物小花棘豆中毒早期体重增长较快的主要因素之一。

荧光法研究黄华碱对α—甘露糖苷酶的抑制作用

以发强荧光的4—甲基—7—羟基香豆素作为酶的底物,可用荧光分光光度计测定α—甘露糖苷酶、α—葡糖苷酶、β—半乳糖苷酶及β—葡糖苷酸苷酶的浑度和活性。用荧光法研究黄华碱对容酶体内α—甘露糖苷酶的抑制作用,尚未见报道。4—甲基—7—羟基香豆素与δ—甘露糖苷结合成无荧光的底物,后者在α—甘露糖苷酶(AMA)的作用下水解而释放出发荧光的4—甲基—7—羟基香豆素。AMA的活性越低,对底物的作用也越差,检测出的荧光强度亦弱。