硫氧还蛋白对大鼠睾丸缺血再灌注损伤保护作用的研究

目的探讨硫氧还蛋白对大鼠睾丸缺血再灌注损伤的保护作用。方法选取雄性SD大鼠60只，随机分为4组：假手术对照组（A组）；睾丸扭转／复位组（B组）；睾丸扭转／复位＋腹腔内注射生理盐水组（C组）；睾丸扭转／复位＋腹腔内注射硫氧还蛋白组（D组）。无菌条件下制作左侧睾丸扭转模型，扭转持续4h，复位4h后取睾丸标本（D组在复位前15min腹腔内注射硫氧还蛋白）。对标本进行病理组织学检查；检测睾丸组织中超氧化物歧化酶（s0D）和丙二醛（MDA）的含量。结果睾丸扭转／复位后可见生精小管退变，间质出现水肿及出血，腹腔注射硫氧还蛋白使睾丸扭转／复位诱发的组织学改变明显改善。B组及C组睾丸损伤评分（8．3±0．96；8±0．87）明显高于A组（O．78±0．36）（P〈0．01），而腹腔注射硫氧还蛋白可以使睾丸损伤分值（3．1±0．42）显著降低（P〈0．05）。B组及C组MDA含量（4．39±0．21；4．42±0．17）升高，SOD活性（269±27．1；271±21．3）降低，与对照组（MDA：1．61±0．18；SOD：317±22．3）相比，差别具有显著性意义（P〈0．01）。而腹腔注射硫氧还蛋白能有效降低MDA含量（2．03±0．03）并升高SOD活性（315±24．2）（P〈0．01）。结论本实验为硫氧还蛋白作为治疗睾丸扭转继发损害的有效物质提供了组织学及生化依据。为临床预防和治疗睾丸缺血再灌注损伤提供了理论依据。

诊断用丁肝抗原的基因优化及其蛋白表达、纯化和鉴定

目的获取有生物活性的丁肝抗原蛋白，探讨其作为诊断试剂的应用价值。方法经密码子优化，合成人工编码的丁肝抗原基因序列；以M48作为表达载体，构建带有硫氧还蛋白的重组表达质粒；在大肠埃希氏菌中经IPTG诱导表达；以亲和层析纯化并以ELISA鉴定该蛋白。结果酶切鉴定构建的质粒正确；SDS—PAGE结果显示表达和纯化的外源蛋白与预期相对分子质量大小一致；ELISA鉴定该蛋白有与丁肝抗体特异性结合的活性。结论成功获得有生物活性的可供诊断用的丁肝抗原蛋白，为丁肝诊断试剂的研发奠定了基础。