妊娠期尖锐湿疣患者外周血Thl/Th2型细胞因子的表达及相关机制研究

目的:针对妊娠期尖锐湿疣(CA)患者外周血Thl/Th2型细胞因子的表达及相关机制展开研究,为临床治疗提供一定的依据。方法:选取我院2011年12月至2012年12月间收治的30例处于妊娠期的尖锐湿疣患者作为本次的研究对象,即妊娠期尖锐湿疣组,并将其与另外30例非妊娠的尖锐湿疣患者进行比较,即非妊娠尖锐湿疣组。采用双抗体夹心ELLSA法检测妊娠期尖锐湿疣患者的血清白细胞介素-2(IL-2)与白细胞介素-10(IL-10)的表达,并将其与正常妊娠患者进行对比。结果:经过研究发现,妊娠期尖锐湿疣组血清IL-2的浓度明显低于与非妊娠尖锐湿疣组相比,两组对比有明显差异(P<0.05)。结论:妊娠可能会通过削弱患者的Th1型反应导加重患者的病情,而尖锐湿疣可能不会影响正常妊娠的母体免疫。

CpG DNA重组质粒对猪囊尾蚴抗原的免疫佐剂效应研究

用CpG基序寡核苷酸的重组质粒(CpGDNA)与猪囊尾蚴抗原制备疫苗免疫小鼠,检测小鼠抗囊尾蚴总抗体和IgG2a抗体亚类以及体外诱导免疫脾细胞分泌白介素-4(IL-4)和干扰素-γ(IFN-γ)的含量,观察其免疫佐剂效应。发现CpGDNA重组质粒中无论插入CpG基序多或少都能增强小鼠抗囊尾蚴总抗体和IgG2a抗体亚类含量,都具有免疫佐剂效应,但其免疫强度有差别,其中CpG2的佐剂效应最强;此外,CpGDNA重组质粒能与铝胶、206佐剂配伍发挥免疫增强协同作用。

重组幽门螺杆菌疫苗免疫保护作用与免疫后胃炎

目的:研究以减毒鼠伤寒沙门菌为载体构建的幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,Hp)疫苗的免疫保护机制。方法:将表达不同Hp抗原的减毒鼠伤寒沙门菌(Salmonellatyphimurium)分别免疫小鼠,免疫4周后以Hp攻击;在攻击前及攻击后5周分批处死小鼠,比较各组小鼠Hp定植密度及各项免疫指标的变化。结果:(1)和NS(Normalsalin,NS)对照组相比各免疫组的Hp定植密度显著下降。(2)和NS组相比攻击前后各免疫组血清IgG2a和胃黏膜Th1型细胞因子表达显著升高。(3)和NS组相比攻击后免疫组鼠胃黏膜出现明显的炎症反应。结论:以减毒鼠伤寒沙门菌为载体构建的重组幽门螺杆菌疫苗在小鼠体内诱导出以Th1反应为主并伴随免疫后胃炎的保护性免疫应答。

补肾益气中药对溴隐亭致流产大鼠蜕膜Th1/Th2型细胞因子的影响

目的:探讨补肾益气中药对流产大鼠的保胎机理。方法:采用孕6、7、8天皮下注射溴隐亭0.125mg/d 诱发 SD 大鼠流产模型,以半定量逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)方法测蜕膜 Th1/Th2型细胞因子的表达,观察中药治疗对以上指标的影响。结果:补肾益气中药可使溴隐亭致流产大鼠蜕膜 Th1/Th2型细胞因子平衡恢复正常。结论:中药可通过对母胎界面 Th1/Th2型细胞因子平衡的调控维持妊娠。

来氟米特对实验性变态反应性脑脊髓炎小鼠T细胞亚群及Th1型细胞因子的影响

目的探讨来氟米特(Leflunomide,LEF)对实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)小鼠模型发病防治作用及可能的免疫学机制。方法将30只雌性C57BL/6小鼠随机分为EAE对照组及高、低剂量LEF防治组,每组10只。通过注射髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55(MOG35-55)免疫介导构建EAE模型。从造模前3 d开始起EAE对照组及高、低剂量LEF防治组分别予以生理盐水8 mg/(kg·d)、LEF 2 mg/(kg·d)灌胃,连续10 d。观察小鼠发病情况及外周血中T细胞亚群及IFN-γ、IL-2水平的变化。结果 LEF各防治组小鼠临床症状较轻,发病高峰期外周血T细胞亚群CD4+、CD8+分布比例较EAE对照组明显升高(P<0.01),CD4+/CD8+值明显降低(P<0.01);发病高峰期外周血IL-2、INF-γ含量较EAE对照组明显降低(P<0.01),且高剂量降低更明显(P<0.01)。结论 LEF对EAE具有防治作用,效果与LEF剂量有关,其防治作用可能与调节T淋巴细胞亚群分布及抑制IFN-γ、IL-2水平有关。

茵陈与熊去氧胆酸联用对妊娠肝内胆汁淤积症大鼠T辅助细胞因子Th1/Th2平衡状态及妊娠结局的影响

目的:探讨茵陈与熊去氧胆酸(UDCA)片联用对妊娠肝内胆汁淤积症(ICP)大鼠T辅助细胞因子Th1/Th2及妊娠结局的影响。方法:50只孕大鼠中任选40只诱发建立ICP模型,且随机分成4组。茵陈组10只孕鼠于妊娠第15天起用50%茵陈煎剂灌胃,5mL.d-1,连服10天;UDCA组10只孕大鼠于妊娠第15天起喂UDCA片,15mg.kg-1.d-1,连服10天;联合组10只孕大鼠于妊娠第15天起用50%茵陈煎剂灌胃,5mL.d-1,同时加用UDCA片灌胃,15mg.kg-1.d-1,连服10天;诱发后未治疗10只孕大鼠作为对照组。其余10只孕大鼠为正常组。应用酶联免疫吸附实验(ELISA法)测定50只孕鼠妊娠第15天(治疗前)和第21天血清中IL-2、IFN-γ、IL-4水平。记录各组孕大鼠妊娠天数及仔鼠存活率。结果:(1)ICP孕鼠(对照组)IL-2、IFN-γ水平高于正常组(P<0.05),IL-4水平低于正常组(P<0.05)。(2)茵陈组治疗后IL-2水平较治疗前、对照组下降(P<0.05);IL-4水平比治疗前、对照组上升(P<0.05);IFN-γ水平的变化无统计学意义(P>0.05)。UDCA组IL-2水平较治疗前、对照组下降(P<0.05);IL-4水平比治疗前、对照组上升(P<0.05);IFN-γ水平较治疗前下降(P<0.05),与对照组比较无统计学意义(P>0.05)。(3)联合组治疗后IL-2、IFN-γ水平较治疗前、对照组下降(P<0.05);IL-4水平比治疗前、对照组上升(P<0.05);且联合组IFN-γ水平较茵陈组、UDCA组低(P<0.05),各药物组的IL-2、IL-4水平比较无统计学意义(P>0.05)。(4)对照组孕鼠妊娠天数、仔鼠存活率与正常组比较(P<0.05)。治疗后各药物组妊娠天数与对照组比较明显延长(P<0.05),与正常组比较无差异(P>0.05);仔鼠存活率较对照组均明显提高(P<0.01),但茵陈组与UDCA组仍较联合组和正常组低(P<0.05),而联合组仔鼠存活率与正常组比较无差异(P>0.05)。结论:ICP孕鼠T辅助细胞功能发生了变化,Th1细胞因子过度表达导致Th1/Th2失衡。茵陈与UDCA联用对ICP孕鼠Th1/Th2平衡状态向Th2细胞因子转化及仔鼠存活率提高作用较单一使用茵陈、UDCA更明显。

rhTPO对原发性免疫性血小板减少性紫癜患者T、B淋巴细胞免疫功能的影响

目的:探讨ITP患者使用重组人血小板生成素(rhTPO)治疗前、后外周血Th1和Th2细胞因子及B淋巴细胞水平变化及其临床意义。方法:采用CBA技术检测48例ITP患者治疗前后及正常对照组35例外周血Th1和Th2细胞因子水平及B淋巴细胞数的变化,结果:治疗前48例ITP组外周血Th1细胞因子水平明显高于正常对照组,而Th2细胞因子明显低于正常对照组,B淋巴细胞数明显高于正常对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05);外周血CD19+细胞和CD5+CD19+细胞数及IL-2水平与血小板数呈负相关(r=-0.75),IL-4与血小板数呈正相关(r=0.81),经rhTPO治疗后Th1细胞因子水平及外周血CD19+和CD5+CD19+细胞数均较治疗前明显下降,Th2细胞因子水平较治疗前明显上升(P<0.05);结论:ITP患者外周血Th1和Th2细胞因子异常表达及B淋巴细胞数明显升高,ITP病情严重程度与Th1和Th2细胞因子及B淋巴细胞相关。TPO治疗后血小板数上升,可能通过调节ITP患者外周血Th1和Th2免疫平衡及B淋巴细胞水平而发挥作用。

干扰素γ与系统性红斑狼疮

系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)的病因及发病机制至今尚未完全清楚,作为Th1型细胞因子之一的干扰素γ(IFN-γ)可能参与了SLE的发病及炎症过程。本文就近年来国内外对狼疮患者及狼疮鼠模型的血清、体外细胞培养分泌的IFN-γ水平、IFN-γ诱导蛋白和IFN-γ相关基因表达以及中医药治疗等方面的研究作一综述。

黄芪穴位注射对运动性疲劳大鼠TH1/TH2细胞因子的影响

目的通过检测血清中白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)、γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)、IL-4,IL-10的含量,分析黄芪穴位注射对运动型疲劳大鼠TH1/TH2细胞因子的影响。方法健康SD雄性大鼠分为:正常对照组8只;疲劳模型空白干预组8只;疲劳模型黄芪注射组8只;疲劳模型0.9%氯化钠注射液注射组8只。疲劳模型黄芪注射组予以足三里穴位注射黄芪注射液0.1 mL。疲劳模型0.9%氯化钠注射液组予以足三里穴位注射0.1 mL 0.9%氯化钠注射液。每天游泳后称量体质量。末次游泳结束后,穴位注射1 h后,予以水合氯醛麻醉,心脏取血后,检测血清中IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10的含量。结果疲劳模型空白干预组血清IL-2及血清IFN-γ低于正常对照组;疲劳模型黄芪注射组的血清IL-2及血清IFN-γ高于疲劳模型空白干预组(P<0.01)。结论黄芪穴位注射可以减少运动性疲劳大鼠的体质量下降;可以调节运动性疲劳大鼠Th1/Th2细胞因子的平衡。

Th1/Th2型细胞因子与移植排斥及免疫耐受

移植免疫学与临床器官移植一直是密不可分的,随着移植器官技术的飞跃发展,术后发生的排斥现象成了人们需要解决的关键问题之一。如何有效地避免或降低排斥现象,诱导免疫耐受的产生仍是一个富有挑战性的课题,其中细胞因子在排斥反应中的作用在近年来已受到了广泛的关注。更多学者主要从Th1/Th2型细胞因子入手,对其在移植排斥反应和免疫耐受中的作用进行研究。

运用胸腔镜技术探索细支气管肺泡细胞癌中医证型与Th1/Th2关系

目的研究细支气管肺泡细胞癌(bronchioloalveolar carcinoma,BAC)中医证型与1型T细胞辅助细胞/2型T细胞辅助细胞(Th1/Th2)的相关性。方法 60例BAC患者按照中医辨证分为气阴两虚证组和气滞痰瘀证组,每组30例;同期收集肺部结节体检良性者30例设为对照组。运用胸腔镜技术检测3组肿瘤组织γ干扰素(INF-γ)、白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素2(IL-2)及白细胞介素5(IL-5)含量。结果 Th1(INF-γ、IL-2),对照组>气滞痰瘀证组>气阴两虚证组(P<0.05);Th2(IL-4、IL-5),气阴两虚证组>气滞痰瘀证组>对照组(P<0.05);Th1/Th2(INF-γ/IL-4,IL-2/IL-5),对照组>气滞痰瘀证组>气阴两虚证组(P<0.05)。结论 BAC患者肿瘤组织较良性结节体检者组织,Th1功能低下,Th2功能亢进;BAC中医证型与Th1/Th2存在一定相关性,实证患者细胞免疫较强,Th1/Th2左偏;虚证患者则偏向于体液免疫,Th1/Th2右偏。

太极拳运动后白细胞Th1/Th2型细胞因子mRNA的表达

目的:探讨太极拳运动诱导外周血白细胞Thl/Th2型细胞因子mRNA表达情况,以进一步了解太极拳运动对Th1/Th2型细胞因子平衡的影响,探讨太极拳健身的可能免疫学机制。方法:在健康中老年女性学练太极拳前、练习3月和6月时对其外周血白细胞自发性Thl/Th2型细胞因子mRNA表达进行实时定量观测。结果:经过太极拳运动干预,中老年妇女外周血白细胞INF-γmRNA的表达量逐渐降低,3、6月时表达量均与干预前相比存在明显差异;IL-4 mRNA表达量先降低后回升,但仍未达初始水平,且3月时的表达量与干预前相比存在显著性差异;INF-γmRNA与IL-4 mRNA比值逐渐降低,与干预6月相比干预前和干预3月均存在明显差异。结论:太极拳运动使健康中老年妇女Th1/Th2平衡向Th2极化,提示太极拳运动调节机体Thl/Th2型细胞因子的平衡也许是太极拳调节中老年机体免疫力、增强健身效果的可能机制。

Th1细胞在NOD小鼠糖尿病早期的应用

目的评价Th1细胞对NOD小鼠糖尿病早期变化的作用。方法选择4 w、8 w和16 w的雌性NOD小鼠,采用流式细胞术测定脾Th1细胞,采用免疫组化法检测胰腺内Th1细胞。结果随年龄增加,雌性NOD小鼠脾和胰腺内Th1细胞逐渐增加。结论 Th1细胞参与NOD小鼠糖尿病早期的病理过程。

特应性皮炎患者单个核细胞Th1/Th2和IFN-γ及IL-4mRNA表达

目的:探讨外周血单个核细胞Th1/Th2在特应性皮炎(AD)发病中的作用和IFN-γ及IL-4mRNA表达的情况。方法:分别用流式细胞仪及RT-PCR方法检测97例AD患者(AD组)及20例健康人(对照组)外周血单个核细胞(PBMCs)Th1/Th2水平和IFN-γ、IL-4mRNA表达。结果:AD组外周血Th1细胞百分比低于对照组(P<0.01),而Th2百分比高于对照组(P<0.01);AD组PBMCsIFN-γmRNA表达水平与对照组差异无统计学意义(P>0.05),而IL-4mRNA表达显著高于对照组(P<0.01)。结论:AD患者体内存在Th1/Th2的失衡,并提示AD属Th2优势疾病。

NOD小鼠糖尿病早期Th1细胞与CD4^+CD25^+Treg细胞的变化

目的研究Th1细胞和CD4+CD25+Treg细胞在NOD小鼠糖尿病早期的变化,并评价其作用。方法选择4周(A组)、8周(B组)和16周龄(C组)的雌性NOD小鼠,取脾、胸腺和胰腺组织,采用流式细胞术测定脾Th1和CD4+CD25+Treg细胞的比例,计算Th1/CD4+T、CD4+CD25+Treg/CD4+T和Th1/CD4+CD25+Treg的比值,再测定胸腺CD4–CD8–T、CD4+CD8+T、CD4–CD8+T和CD4+CD8–T细胞比例,计算CD25+Treg/CD4+CD8–T的比值。取胰腺组织,行HE染色和Foxp3免疫组化染色,观察胰腺病理学变化。结果 C组小鼠脾脏Th1细胞比例以及Th1/CD4+T和Th1/CD4+CD25+Treg比值明显高于A组和B组,但是A、B、C三组脾脏CD4+CD25+Treg细胞比例及CD4+CD25+Treg/CD4+T比值差异无统计学意义。三组间胸腺CD4–CD8–T、CD4+CD8+T、CD4–CD8+T和CD4+CD8–T细胞比例差异无统计学意义,但是B组和C组胸腺CD25+Treg/CD4+CD8–T比值明显高于A组。HE染色结果显示,B组和C组的胰岛周围可见淋巴细胞浸润,但胰岛周围淋巴细胞浸润部位免疫组化染色未见Foxp3阳性细胞。结论 NOD小鼠糖尿病早期外周Th1细胞呈进行性增加,但CD4+CD25+Treg细胞相对缺乏,考虑与NOD小鼠糖尿病进展有关。

系统性红斑狼疮患者th1/th2失衡的研究

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)病人th1/th2的失衡状况。方法利用三荧光标记法流式细胞术检测抗细胞表面抗原,抗细胞因子。检测出CD4+干扰素(IFN)-γ+白细胞介素(IL)4-及CD4+IFN-γ-IL-4+细胞作为Thl及Th2细胞,从单细胞水平研究初发SLE患者Thl/Th2平衡。结果未用药治疗的SLE病人其Thl细胞明显低于正常对照组(P=0.02)。31例SLE患者按Thl/Th2可分成两组,Thl/Th2降低组与Thl/Th2升高组。Thl/Th2降低组其Thl细胞的降低十分明显。Thl/Th2升高组中Thl细胞仅轻度下降。结论Thl型反应与Th2型反应均参与了SLE的发病。不同患者可能免疫系统的异常并不同。

黄芪多糖诱导的树突状细胞疫苗对S180荷瘤小鼠Th1/Th2类细胞因子的影响

目的探讨黄芪多糖诱导成熟的树突状细胞(DC)肿瘤疫苗对S180荷瘤小鼠的抗肿瘤作用及作用机制。方法体外培养小鼠骨髓来源的DC,加入黄芪多糖诱导成熟,以S180肿瘤抗原致敏获得DC肿瘤疫苗。建立S180荷瘤小鼠模型,分为模型组、环磷酰胺组、黄芪多糖组、细胞因子组,在荷瘤第5天和第10天分别给予相应治疗。荷瘤第12天摘取肿瘤组织、胸腺、脾脏称质量,计算抑瘤率、胸腺指数、脾脏指数;ELISA法检测小鼠血清白细胞介素(IL)-4、干扰素(IFN)-γ水平。结果黄芪多糖组、细胞因子组的抑瘤率高于环磷酰胺组(64.25%、64.10%vs35.11%),胸腺指数高于环磷酰胺组(1.69±0.26、1.74±0.38 vs 1.45±0.22),脾脏指数高于环磷酰胺组(5.44±0.76、5.31±0.81 vs 3.54±0.52),IL-4水平(ng/L)低于环磷酰胺组(15.66±2.57、14.72±4.84 vs 23.95±6.07),IFN-γ水平(ng/L)高于环磷酰胺组(16.54±3.71、17.20±2.03 vs 10.37±2.19),差异均有统计学意义。结论黄芪多糖诱导的DC疫苗可有效发挥抑瘤作用,其机制可能与提高荷瘤小鼠胸腺指数与脾脏指数,调节细胞因子表达,促进Th1/Th2失衡向Th1细胞占优势的细胞免疫偏移,增强机体的抗肿瘤免疫功能有关。

HBV感染研究中Th细胞分化的调节和意义

Th细胞免疫失衡是乙型肝炎病毒（HBV）慢性感染的重要机制之一。Th细胞分化受细胞因子及其受体、T细胞受体（TCR）-抗原提呈细胞（APC）-抗原／主要组织相容性复合物、细胞信号转导、HBV基因型及变异、调节性T细胞（Treg）等方面的影响。了解Th细胞分化情况，对HBV感染的防治有重要指导意义。一是有助于了解乙型肝炎疫苗的接种效果和改进疫苗；二是指导研发抗病毒药物和治疗性疫苗，通过上调Th1免疫反应或调节Th2优势反应向Th1优势反应转化来治疗慢性乙型肝炎。

慢性日本血吸虫感染对小鼠实验性1型糖尿病的影响

目的探讨慢性日本血吸虫感染对小鼠实验性自身免疫性1型糖尿病发病的影响及其机制。方法19只雄性BALB/c小鼠随机分为3组:日本血吸虫感染+糖尿病造模组(A组,7只),糖尿病模型组(B组,6只)和正常对照组(C组,6只)。A组每只小鼠感染25条日本血吸虫尾蚴后9周,与B组小鼠同时腹腔注射链脲佐菌素诱导1型糖尿病,动态观察血糖变化。至12周末剖杀小鼠,留取血清,取胰腺组织切片HE染色,进行胰岛炎评分,用ELISA测定血清干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)水平。结果给药后,小鼠血糖逐渐升高,在第21d、28d两个时间点B组显著高于A组(P<0.05);A组<40%的胰岛可见淋巴细胞浸润,B组有80%的胰岛可见淋巴细胞浸润,两者比较差异有显著性(P<0.01);至感染12周末,A组小鼠血清IL-4水平显著高于B组(P<0.01);B组小鼠血清IFN-γ水平显著高于A组(P<0.05)和C组(P<0.01)。结论慢性日本血吸虫感染对小鼠实验性1型糖尿病具有拮抗作用,其机制与Th1/Th2免疫偏移有关。

HCG联合免疫球蛋白对溴隐亭致大鼠流产模型Th1/Th2型细胞因子的影响

目的:研究人绒毛膜促性腺激素(HCG)联合免疫球蛋白对溴隐亭致大鼠流产模型蜕膜局部Th1/Th2型细胞因子及妊娠结局的影响。方法:采用孕第6、7、8天大鼠皮下注射溴隐亭0.3mg/kg,诱导SD大鼠流产模型,随机分为4组:即流产模型(A)组、HCG(B)组、HCG联合免疫球蛋白(IVIG)(C)组及正常妊娠(D)组,每组10只,妊娠第14天麻醉处死并观察妊娠结局,取胚胎吸收邻近的蜕膜研磨并裂解,离心后取上清液,-80℃保存。ELISA方法测定标本中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)以及白细胞介素-10(IL-10)的水平。结果:胚胎吸收率:A组明显高于其余3组,B组高于C、D组,差异均有统计学意义(P均<0.05)。Th1型细胞因子(TNF-α、IFN-γ)水平,A组明显高于其余3组,差异有统计学意义(P<0.05);Th2型细胞因子(IL-4、IL-10)水平,A组明显低于其余3组,差异均有统计学意义(P<0.05);IL-10细胞因子水平,B、D组低于C组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:HCG联合免疫球蛋白通过上调蜕膜局部细胞因子IL-10水平来改善胚胎发育,二者具有协同作用。