目的检测哮喘小鼠与对照小鼠肺组织中Th1、Th2、Th17及Foxp3+Treg细胞占CD4+T细胞百分比,探讨哮喘小鼠中Foxp3+Treg/Th17比值变化及其在哮喘中的意义。方法将6周清洁级Balb/c小鼠随机分为对照组(control)和哮喘组(OVA),哮喘组给予OVA致...目的检测哮喘小鼠与对照小鼠肺组织中Th1、Th2、Th17及Foxp3+Treg细胞占CD4+T细胞百分比,探讨哮喘小鼠中Foxp3+Treg/Th17比值变化及其在哮喘中的意义。方法将6周清洁级Balb/c小鼠随机分为对照组(control)和哮喘组(OVA),哮喘组给予OVA致敏和激发,建立哮喘小鼠模型,对照组用PBS代替OVA。最后1次激发后24 h内检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数及细胞分类计数;HE染色制作肺组织病理切片,光镜下观察病理变化;小鼠肺功能仪检测小鼠气道高反应性;流式细胞术检测小鼠肺组织中Th1、Th2、Th17、Foxp3+Treg细胞占CD4+T细胞百分比。结果哮喘组BALF细胞总数、淋巴细胞、嗜酸性粒细胞及中性粒细胞比例显著高于对照组,肺部炎症反应与气道高反应显著高于对照组。哮喘组小鼠肺组织中Th2、Th17细胞百分比明显高于对照组[分别为(0.83±0.08)%vs(0.50±0.03)%;(1.74±0.17)%vs(1.07±0.07)%,P<0.01];而Th1、Foxp3+Treg细胞百分比显著低于对照组[分别为(1.39±0.14)%vs(2.56±0.18)%;(4.87±0.35)%vs(7.67±0.44)%,P<0.001];哮喘组Th1/Th2及Foxp3+Treg/Th17明显低于对照组(分别为1.66±0.17 vs 5.19±0.56;3.02±0.49 vs 7.38±0.71,P<0.001)。结论除Th1/Th2失衡外,Foxp3+Treg/Th17失衡在哮喘发病中亦有重要作用。展开更多
目的 :检测支气管哮喘小鼠外周血单个核细胞(PBMC)及肺泡灌洗液(BALF)炎性细胞中T细胞免疫球蛋白与黏蛋白域蛋白3(Tim-3)的表达及与Th17/Treg细胞的关系,探讨其在哮喘发病中的作用。方法 :建立小鼠哮喘动物模型,分为哮喘组和对照组。收...目的 :检测支气管哮喘小鼠外周血单个核细胞(PBMC)及肺泡灌洗液(BALF)炎性细胞中T细胞免疫球蛋白与黏蛋白域蛋白3(Tim-3)的表达及与Th17/Treg细胞的关系,探讨其在哮喘发病中的作用。方法 :建立小鼠哮喘动物模型,分为哮喘组和对照组。收集各组小鼠PBMC及BALF炎性细胞,应用实时荧光定量PCR检测PBMCs及BALF炎性细胞中的Tim-3 m RNA水平,流式细胞仪检测CD4细胞中IL-17(CD4+IL-17+)比例反映Th17水平,CD4细胞中CD4+CD25+Fox P3+反映Treg细胞水平;酶联免疫吸附法(ELISA)检测PBMCs上清液中IL-10、IL-17、TGF-β水平,分析Tim-3的表达与Th17/Treg水平的相关性。结果:哮喘组PBMCs及BALF炎性细胞中Tim-3 m RNA水平、CD4+IL-17+表达及Th17/Treg比例、IL-17均高于对照组(P<0.05),而CD4+CD25+Fox P3+水平、IL-10显著低于对照组。哮喘组PBMCs及BALF炎性细胞中的Tim-3 m RNA表达分别与CD4+IL-17+表达及Th17/Treg比例呈正相关(r=0.76,r=0.87,r=0.71,r=0.82,P<0.05),而与CD4+CD25+Fox P3+的表达呈负相关(r=-0.84,r=-0.79,P<0.05)。结论:哮喘小鼠PBMCs及BALF炎性细胞中Tim-3 m RNA水平显著升高,Tim-3可能在哮喘发生发展中起着重要作用并与Th17/Treg失衡有关。展开更多
目的:观察溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)大鼠Treg/Th17细胞的变化特点及薏苡附子败酱散对Treg/Th17的影响.方法:采用2,4,6-三硝基苯磺酸(2,4,6-trinitrob enzenesulfonic acid solution,TNBS)法制作UC大鼠模型,随机分为4组:正常...目的:观察溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)大鼠Treg/Th17细胞的变化特点及薏苡附子败酱散对Treg/Th17的影响.方法:采用2,4,6-三硝基苯磺酸(2,4,6-trinitrob enzenesulfonic acid solution,TNBS)法制作UC大鼠模型,随机分为4组:正常组、模型组、薏苡附子败酱散(Fuzi Baijiang powder,YFB)组、阳性药美沙拉嗪缓释颗粒(positive drug mesalazine SR Granules,5-ASA)组.治疗14 d后取标本,观察肉眼形态学改变及显微镜下黏膜损伤情况,采用ELISA法测定血清中白介素-17(interleukin-17,IL-17)、IL-10活性;采用实时荧光定量PCR法检测结肠组织中RORγt、Foxp3 mRNA的表达.结果:与正常组相比,模型组大鼠结肠黏连伴肠腔扩张,肠壁增厚,组织水肿、充血,有溃疡形成.病理切片HE染色后在光镜下观察,部分黏膜出现充血坏死,肉芽组织形成,隐窝丢失,炎症细胞浸润.与模型组相比,YFB组及5-ASA组镜下病理组织评分明显降低(3.00±0.82 vs 8.00±0.82 vs 12.50±1.29,均P<0.05),血清IL-17、IL-10含量有显著差异(22.26±3.95 vs 39.62±4.26 vs 53.86±2.51,48.72±1.05 vs 44.16±1.90 vs 38.88±0.80,均P<0.05),YFB及5-ASA组间比较,YFB能显著降低IL-17含量,增加IL-10含量(均P<0.05).YFB及5-ASA组结肠组织RORγt、Foxp3 mRNA含量与模型组对比有显著差异(1.29±0.05 vs 1.32±0.87 vs 1.80±0.54;2.81±0.17 vs 2.00±0.20vs 0.47±0.04,均P<0.05),且与5-ASA组比较,YFB组RORγt mRNA含量明显下降(P<0.05),Foxp3 mRNA含量显著增加(P<0.05).结论:应用TNBS法成功建立了UC的大鼠模型.YFB能改善UC模型大鼠的炎症症状,能明显的降低结肠组织中RORγt mRNA的表达,降低血清IL-17的含量,提高Foxp3 mRNA的表达,增加IL-10的含量,YFB影响Treg/Th17细胞数量及功能是其发挥治疗溃疡性结肠炎大鼠炎症作用的机制之一.展开更多
文摘目的检测哮喘小鼠与对照小鼠肺组织中Th1、Th2、Th17及Foxp3+Treg细胞占CD4+T细胞百分比,探讨哮喘小鼠中Foxp3+Treg/Th17比值变化及其在哮喘中的意义。方法将6周清洁级Balb/c小鼠随机分为对照组(control)和哮喘组(OVA),哮喘组给予OVA致敏和激发,建立哮喘小鼠模型,对照组用PBS代替OVA。最后1次激发后24 h内检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数及细胞分类计数;HE染色制作肺组织病理切片,光镜下观察病理变化;小鼠肺功能仪检测小鼠气道高反应性;流式细胞术检测小鼠肺组织中Th1、Th2、Th17、Foxp3+Treg细胞占CD4+T细胞百分比。结果哮喘组BALF细胞总数、淋巴细胞、嗜酸性粒细胞及中性粒细胞比例显著高于对照组,肺部炎症反应与气道高反应显著高于对照组。哮喘组小鼠肺组织中Th2、Th17细胞百分比明显高于对照组[分别为(0.83±0.08)%vs(0.50±0.03)%;(1.74±0.17)%vs(1.07±0.07)%,P<0.01];而Th1、Foxp3+Treg细胞百分比显著低于对照组[分别为(1.39±0.14)%vs(2.56±0.18)%;(4.87±0.35)%vs(7.67±0.44)%,P<0.001];哮喘组Th1/Th2及Foxp3+Treg/Th17明显低于对照组(分别为1.66±0.17 vs 5.19±0.56;3.02±0.49 vs 7.38±0.71,P<0.001)。结论除Th1/Th2失衡外,Foxp3+Treg/Th17失衡在哮喘发病中亦有重要作用。
文摘目的 :检测支气管哮喘小鼠外周血单个核细胞(PBMC)及肺泡灌洗液(BALF)炎性细胞中T细胞免疫球蛋白与黏蛋白域蛋白3(Tim-3)的表达及与Th17/Treg细胞的关系,探讨其在哮喘发病中的作用。方法 :建立小鼠哮喘动物模型,分为哮喘组和对照组。收集各组小鼠PBMC及BALF炎性细胞,应用实时荧光定量PCR检测PBMCs及BALF炎性细胞中的Tim-3 m RNA水平,流式细胞仪检测CD4细胞中IL-17(CD4+IL-17+)比例反映Th17水平,CD4细胞中CD4+CD25+Fox P3+反映Treg细胞水平;酶联免疫吸附法(ELISA)检测PBMCs上清液中IL-10、IL-17、TGF-β水平,分析Tim-3的表达与Th17/Treg水平的相关性。结果:哮喘组PBMCs及BALF炎性细胞中Tim-3 m RNA水平、CD4+IL-17+表达及Th17/Treg比例、IL-17均高于对照组(P<0.05),而CD4+CD25+Fox P3+水平、IL-10显著低于对照组。哮喘组PBMCs及BALF炎性细胞中的Tim-3 m RNA表达分别与CD4+IL-17+表达及Th17/Treg比例呈正相关(r=0.76,r=0.87,r=0.71,r=0.82,P<0.05),而与CD4+CD25+Fox P3+的表达呈负相关(r=-0.84,r=-0.79,P<0.05)。结论:哮喘小鼠PBMCs及BALF炎性细胞中Tim-3 m RNA水平显著升高,Tim-3可能在哮喘发生发展中起着重要作用并与Th17/Treg失衡有关。
文摘目的:通过比较不同治疗方法对慢性乙型肝炎(Chronic hepatitis B,CHB)患者外周血Th17(T helper lymphocyte 17)、Treg(regular T cell)细胞频率及Th17/Treg比率的变化,探讨其在CHB患者疾病转归中的意义。方法:CHB患者40例,根据保肝治疗基础上是否加用核苷酸抗病毒药物分为未抗病毒治疗组(Chronic hepatitis B without antiviral,CHBWA)20例、抗病毒治疗组(Chronic hepatitis B antiviral,CHBA)20例、乙肝病毒携带者(Asymptomatic hepatitis B carriers,As C)10例、健康对照组(Health control,HC)10例;采用流式细胞术检测CHBWA组0月、1月及CHBA组0月、1月、3月,As C患者和HC外周血Th17、Treg细胞频率,计算Th17/Treg比率,观察其在疾病不同阶段的动态变化。结果:CHBWA组保肝治疗1月后,Th17/Treg比率(0.39±0.11)比0月(1.20±0.26)明显降低(P<0.01),已接近As C组(0.39±0.14)及HC组(0.42±0.20)Th17/Treg比率水平(P>0.05),且Th17/Treg比率与ALT有良好的正相关关系(r=0.709,P=0.000);在CHBA组,Th17/Treg比率在1月(0.73±0.32)、3月(0.76±0.44)均较0月(1.18±0.27)明显下降,与0月比较差异有统计学意义(P<0.01),但继续治疗到3月时Th17/Treg比率较1月时变化不明显,Th17/Treg比率在0、1、3月均高于As C组及HC组(P<0.01,0.05);Th17/Treg比率与ALT、HBV DNA有良好的正相关关系(r=0.500,P=0.000;r=0.345,P=0.007);两组间比较,0月时两组间Th17/Treg比率差异无统计学意义(P>0.05),但经治疗1月后CHBA组Th17/Treg比率高于CHBWA组(t=4.471,P<0.01)。结论:CHB患者中,抗病毒治疗将迅速影响Th17、Treg细胞频率,导致Th17/Treg比率的变化,其变化可能与清除病毒有关。
文摘目的:观察溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)大鼠Treg/Th17细胞的变化特点及薏苡附子败酱散对Treg/Th17的影响.方法:采用2,4,6-三硝基苯磺酸(2,4,6-trinitrob enzenesulfonic acid solution,TNBS)法制作UC大鼠模型,随机分为4组:正常组、模型组、薏苡附子败酱散(Fuzi Baijiang powder,YFB)组、阳性药美沙拉嗪缓释颗粒(positive drug mesalazine SR Granules,5-ASA)组.治疗14 d后取标本,观察肉眼形态学改变及显微镜下黏膜损伤情况,采用ELISA法测定血清中白介素-17(interleukin-17,IL-17)、IL-10活性;采用实时荧光定量PCR法检测结肠组织中RORγt、Foxp3 mRNA的表达.结果:与正常组相比,模型组大鼠结肠黏连伴肠腔扩张,肠壁增厚,组织水肿、充血,有溃疡形成.病理切片HE染色后在光镜下观察,部分黏膜出现充血坏死,肉芽组织形成,隐窝丢失,炎症细胞浸润.与模型组相比,YFB组及5-ASA组镜下病理组织评分明显降低(3.00±0.82 vs 8.00±0.82 vs 12.50±1.29,均P<0.05),血清IL-17、IL-10含量有显著差异(22.26±3.95 vs 39.62±4.26 vs 53.86±2.51,48.72±1.05 vs 44.16±1.90 vs 38.88±0.80,均P<0.05),YFB及5-ASA组间比较,YFB能显著降低IL-17含量,增加IL-10含量(均P<0.05).YFB及5-ASA组结肠组织RORγt、Foxp3 mRNA含量与模型组对比有显著差异(1.29±0.05 vs 1.32±0.87 vs 1.80±0.54;2.81±0.17 vs 2.00±0.20vs 0.47±0.04,均P<0.05),且与5-ASA组比较,YFB组RORγt mRNA含量明显下降(P<0.05),Foxp3 mRNA含量显著增加(P<0.05).结论:应用TNBS法成功建立了UC的大鼠模型.YFB能改善UC模型大鼠的炎症症状,能明显的降低结肠组织中RORγt mRNA的表达,降低血清IL-17的含量,提高Foxp3 mRNA的表达,增加IL-10的含量,YFB影响Treg/Th17细胞数量及功能是其发挥治疗溃疡性结肠炎大鼠炎症作用的机制之一.