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Genomic Analysis of MicroRNA Promoters and Their Cis-Acting Elements in Soybean 被引量:5
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作者 LIU Yong-xin HAN Ying-peng +3 位作者 CHANG Wei ZOU Quan GUO Mao-zu LI Wen-bin 《Agricultural Sciences in China》 CSCD 2010年第11期1561-1570,共10页
MicroRNAs (miRNAs) are derived from distinct loci in the genome and play crucial roles in RNA-mediated gene silencing mechanisms that regulate cellular processes during development and stress responses of plants. Th... MicroRNAs (miRNAs) are derived from distinct loci in the genome and play crucial roles in RNA-mediated gene silencing mechanisms that regulate cellular processes during development and stress responses of plants. The miRNAs are approximately 21 nucleotides long and code for the complementary strand to a larger genic mRNA. They are often found within the complementary primary transcript (pri-miRNAs). In the past few years, a growing number of soybean miRNAs have been discovered, however, little is known about the transcriptional regulation of these miRNAs. In this study, promoters and cis-acting elements of soybean miRNAs were analyzed using the genomic data for the first time. A total of 82 miRNAs were located among 122 loci in genome, some were present as double or multiple copies. Five clusters that included ten miRNAs were found in genome, and only one cluster share the same promoter. A total of 191 promoters from 122 loci of the soybean miRNA sequences were found and further analyzed. The results indicated that the conserved soybean miRNA genes had a greater proportion of promoters than that of non-conserved ones, and the distribution of the transcript start sites (TSSs) and TATA-boxes found had different motif styles between conserved and non-conserved miRNA genes. Furthermore, the cis-acting elements 5' of the TSSs were analyzed to obtain potential function and spatiotemporal expression pattern of miRNAs. The data obtained here may lead to the identification of specific sequences upstream of pre-miRNAs and the functional annotation of miRNAs in soybean. 展开更多
关键词 MIRNAS SOYBEAN promotER cis-acting elements miRNA clusters
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Act in the Spirit of the 15th Congress of the Party and Strive to Promote the Development of Foreign Trade and Economic Cooperation in Terms of Both Quantity and Quality
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作者 Wu Yi, Minister of Foreign Trade and Economic Cooperation 《中国经贸画报》 1998年第1期91-93,共3页
China’s foreign trade continued to maintain its development momentum last year througn vigorous promotion of two fundamental changes,spurred by the smooth return of Hong Kong and propelled by the spirit of the 15th C... China’s foreign trade continued to maintain its development momentum last year througn vigorous promotion of two fundamental changes,spurred by the smooth return of Hong Kong and propelled by the spirit of the 15th Congress of the Communist Party of China. Imports and exports developed steadily。 展开更多
关键词 act in the Spirit of the 15th Congress of the Party and Strive to promote the Development of Foreign Trade and Economic Cooperat
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牡丹花青素苷合成关键基因PsDFR启动子活性分析
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作者 周琳 袁梦 +2 位作者 齐宇 张梦杰 王雁 《林业科学研究》 CSCD 北大核心 2024年第2期16-26,共11页
[目的]分析牡丹花青素苷合成关键基因PsDFR启动子的顺式作用元件及活性,为进一步研究PsDFR启动子的功能及其在牡丹花色形成中的调控机制奠定基础。[方法]以‘黑花魁’牡丹花瓣中提取的基因组DNA为模板,通过染色体步移法克隆PsDFR的启动... [目的]分析牡丹花青素苷合成关键基因PsDFR启动子的顺式作用元件及活性,为进一步研究PsDFR启动子的功能及其在牡丹花色形成中的调控机制奠定基础。[方法]以‘黑花魁’牡丹花瓣中提取的基因组DNA为模板,通过染色体步移法克隆PsDFR的启动子序列。利用生物信息在线软件预测分析启动子序列的顺式作用元件。构建5个不同长度缺失启动子与GUS基因融合的表达载体,并瞬时转化烟草叶片,通过GUS组织化学染色和酶活性检测分析缺失启动子的活性,及其对脱落酸(ABA)、茉莉酸甲酯(MeJA)、光照等不同胁迫处理的响应。[结果]克隆得到PsDFR上游1687 bp的启动子序列。生物信息学分析发现PsDFR启动子含有多个光信号、激素响应、逆境响应及组织特异表达等顺式作用元件,这暗示PsDFR的表达可能受光信号、激素和胁迫等多种信号的共同调节。GUS组织化学染色和酶活性检测表明,随启动子片段的缩短,启动子活性逐渐下降,-1623至-916区段对于启动子活性具有重要作用。MeJA和黑暗处理对各启动子片段活性均有显著抑制作用,恢复光照可促使启动子活性明显回升,而参与ABA响应的核心调控区域位于-443至-76 bp。[结论]PsDFR启动子含有多个光信号、激素响应、逆境响应及组织特异表达等顺式作用元件,其活性受光的正调控以及MeJA的负调控;-1623至-916 bp间的区域对于启动子活性具有重要作用,-443至-76 bp是响应ABA处理的核心区域。该研究为进一步揭示PsDFR应答环境信号参与牡丹花色形成的分子调控机制提供参考。 展开更多
关键词 牡丹 花青素苷 PsDFR 启动子 顺式作用元件 启动子活性
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公权力介入视域下家庭教育令的适用及完善研究——兼谈《家庭教育促进法》第四十九条之规定
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作者 周华 《北京科技大学学报(社会科学版)》 2024年第1期86-93,共8页
家庭教育经历了从着重权利到强调责任、从纯属私务到公私兼具的属性转变,为公权力介入家庭教育提供了理论基础。家庭教育令是以公权力引导和规范家庭教育的典型令状,其以《家庭教育促进法》为依托,由司法机关于实践中所创设。当前我国... 家庭教育经历了从着重权利到强调责任、从纯属私务到公私兼具的属性转变,为公权力介入家庭教育提供了理论基础。家庭教育令是以公权力引导和规范家庭教育的典型令状,其以《家庭教育促进法》为依托,由司法机关于实践中所创设。当前我国家庭教育令的适用在启动上具有明显的附带性和被动性,在文书样式上面临着与家庭教育指导令、督促监护令的混同,同时对拒不履行的法律后果亦存在设定不当。促进家庭教育令制度的完善,可从形式规范化和实质优化双管齐下,前者通过完善制发机制、促进文本的规范统一来实现,对于后者则应理性看待家庭教育主体责任属性,在既有法律体系内寻求妥善执行措施。 展开更多
关键词 公权力介入 家庭教育令 家庭教育促进法 形式规范 实质优化
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延胡索去甲乌药碱合成酶基因CyNCS1克隆及其表达模式分析
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作者 冯飞雪 吕瑞华 +5 位作者 李依民 高静 王凯 周嘉迪 颜永刚 张岗 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2024年第3期146-154,共9页
【目的】克隆延胡索去甲乌药碱合成酶(norcoclaurine synthase, NCS)基因,分析其在延胡索异喹啉类生物碱合成中的关键作用。【方法】基于转录组数据库,利用逆转录PCR克隆延胡索CyNCS1基因及其启动子区域序列,采用生物信息学方法分析其... 【目的】克隆延胡索去甲乌药碱合成酶(norcoclaurine synthase, NCS)基因,分析其在延胡索异喹啉类生物碱合成中的关键作用。【方法】基于转录组数据库,利用逆转录PCR克隆延胡索CyNCS1基因及其启动子区域序列,采用生物信息学方法分析其编码蛋白的理化性质、结构特征及其启动子区域顺式作用元件,同时进行多序列比对和系统进化树分析,确定其进化关系;利用实时荧光定量PCR对其根、茎、叶及发育早、中、晚期块茎的组织表达模式进行分析;对茉莉酸甲酯(MeJA)、脱落酸(ABA)处理0,4,8,12 h的叶片进行表达谱分析,以体积分数75%酒精溶剂处理为对照(CK),确定该基因的表达特征。【结果】CyNCS1基因开放读码框长873 bp,编码291个氨基酸,编码蛋白分子量为33.09 ku,等电点为6.90,具有去甲乌药碱合成酶保守的催化结构域(GDGGVGTV/IL、YKEKF和MIEGGHLDMG),且不含信号肽,预测定位于细胞核中。多序列比对结果显示,CyNCS1与石生黄堇、罂粟的NCS蛋白同源性较高,分别为83.6%和82.1%;系统进化树结果显示,CyNCS1与石生黄堇CsNCS蛋白聚为一支,说明二者亲缘关系较近。该基因启动子区长2 238 bp,包含多种植物激素及低温、热胁迫等环境因子的顺式作用元件。实时荧光定量PCR结果显示,随着发育推进块茎中CyNCS1的表达量显著增高,且受到MeJA和ABA的诱导,MeJA处理8 h时表达量为0 h的3.10倍,ABA处理8 h为0 h的3.16倍;而对照CyNCS1表达量随时间推移无明显变化。【结论】克隆并鉴定了延胡索NCS酶基因CyNCS1,明确了其在发育进程中的表达模式,并确定该基因表达受MeJA和ABA的诱导。 展开更多
关键词 延胡索 去甲乌药碱合成酶 异喹啉生物碱 启动子 顺式作用元件
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蜡梅CpBEAT3启动子克隆及其互作蛋白的初步验证
6
作者 蔡艳梅 付雪梅 +2 位作者 王华波 杨楠 陈龙清 《山东农业科学》 北大核心 2024年第5期27-35,共9页
苯甲醇乙酰基转移酶(benzyl alcohol acetyltransferase,BEAT)能够以苯甲醇和乙酰辅酶A(acetyl-CoA)为底物催化合成乙酸苄酯,是植物乙酸苄酯生物合成代谢途径下游的关键酶。CpBEAT3是蜡梅叶中调控乙酸苄酯生物合成的关键基因,为了解析... 苯甲醇乙酰基转移酶(benzyl alcohol acetyltransferase,BEAT)能够以苯甲醇和乙酰辅酶A(acetyl-CoA)为底物催化合成乙酸苄酯,是植物乙酸苄酯生物合成代谢途径下游的关键酶。CpBEAT3是蜡梅叶中调控乙酸苄酯生物合成的关键基因,为了解析其在蜡梅乙酸苄酯生物合成中的转录调控机制,本研究克隆得到了CpBEAT3基因启动子区序列,使用生物信息学软件预测分析了该基因核心启动子区、顺式作用元件、CpG岛等结构特征,并通过酵母单杂交技术筛选可能与CpBEAT3结合的上游调控因子。结果表明,2115 bp的CpBEAT3核心启动子区可能位于-1844~-1794 bp处,有一个位于-1869~-1459 bp处且长度为410 bp的CpG岛,含有多种与光响应、激素调节、胁迫响应相关的顺式作用元件及多个转录因子结合位点。通过酵母单杂交技术筛选获得1个MYB类的转录因子,可以与CpBEAT3启动子结合。 展开更多
关键词 蜡梅 CpBEAT3基因 乙酸苄酯 启动子 酵母单杂交 互作蛋白
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基于启动子编辑的作物育种
7
作者 张洁萍 关跃峰 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期53-61,共9页
为了应对人类对粮食的需求,基于重要基因编码区编辑以产生有利性状的研究不计其数。转录调控是控制基因表达的关键,包括作物重要的农艺性状的控制。顺式作用元件和反式作用因子之间的相互作用决定基因的时空表达模式和表达水平,重要的... 为了应对人类对粮食的需求,基于重要基因编码区编辑以产生有利性状的研究不计其数。转录调控是控制基因表达的关键,包括作物重要的农艺性状的控制。顺式作用元件和反式作用因子之间的相互作用决定基因的时空表达模式和表达水平,重要的元件包括转录因子结合位点、增强子等在这个过程中发挥重要作用。其中启动子作为最大且最重要的顺式作用元件,对其进行改造从而改变相关基因的表达模式来创造作物有利性状是不同于编码区编辑育种的有效策略。目前,启动子编辑策略有两种应用的方式。其一是定向改造以生成确定的有利性状,其二是在特定的启动子区域内随机产生新的等位基因,根据表型进行选择,同时也产生新的变异资源。本文主要讨论了启动子编辑在作物中的应用,包括提高产量、改善品质以及增强对生物和非生物胁迫的耐受性,旨在关注农作物精准育种最新前沿,为启动子基因编辑技术的开发与应用提供研究思路和理论借鉴。 展开更多
关键词 启动子编辑 顺式作用元件 作物育种
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基于行为纠错的安全知识提升途径研究
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作者 付净 王泽恒 +3 位作者 张海燕 刘辉 陈卓 付顺 《吉林化工学院学报》 CAS 2024年第4期32-37,共6页
为有效改善行为纠错效果,提升安全知识的指导作用,基于24Model致因路径明确了安全知识缺欠的4种致因模式。以企业安全检查人员为例,利用NVivo分析工具开展实证研究,构建出以弥补知识漏洞为切入点的六阶段行为纠错培训模式。研究结果表明... 为有效改善行为纠错效果,提升安全知识的指导作用,基于24Model致因路径明确了安全知识缺欠的4种致因模式。以企业安全检查人员为例,利用NVivo分析工具开展实证研究,构建出以弥补知识漏洞为切入点的六阶段行为纠错培训模式。研究结果表明,从事故致因角度出发通过辨识作业人员的不安全动作,准确定位知识漏洞而形成的“知识三角形”学习程序为弥补安全知识缺欠提供了途径。六阶段行为纠错专项培训突出安全知识提升的动态完整性,可实现与现有岗位培训教育的有机契合,为组织安全教育的多模式化开展提供了理论参考。 展开更多
关键词 行为纠错 24Model 安全知识 提升途径
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番茄磷酸盐转运蛋白SlPT2基因启动子克隆及功能分析
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作者 王佳音 张云逸 +3 位作者 薛婷婷 闫品月 朱姝 李文静 《河南农业科学》 北大核心 2024年第6期120-127,共8页
为研究番茄磷酸盐转运蛋白SlPT2基因启动子的功能及活性,以番茄Micro-Tom为材料,利用荧光定量PCR检测SlPT2基因表达模式,利用PCR技术克隆SlPT2启动子(p SlPT2)序列,通过启动子在线分析网站Plant Care和New Place分析p SlPT2内部所含有... 为研究番茄磷酸盐转运蛋白SlPT2基因启动子的功能及活性,以番茄Micro-Tom为材料,利用荧光定量PCR检测SlPT2基因表达模式,利用PCR技术克隆SlPT2启动子(p SlPT2)序列,通过启动子在线分析网站Plant Care和New Place分析p SlPT2内部所含有的顺式作用元件,利用同源重组法构建p1300GN-p SlPT2重组载体,转化拟南芥,通过GUS组织化学染色研究SlPT2启动子表达模式及表达活性。荧光定量PCR结果表明,SlPT2主要在番茄根部表达。通过Plant Care和New Place分析发现,启动子(1 801 bp)内部除含有CAAT-Box与TATA-Box等核心启动子元件外,还包含与根特异性表达有关的元件(ROOTMOTIFTAPOX1、RAV1AAT、OSE1ROOTNODULE),以及参与光响应(Box 4、G-Box、TCTmotif)、茉莉酸甲酯反应(CGTCA-motif)、脱落酸反应(ABRE)、玉米醇溶蛋白代谢调控(O2-site)的顺式作用元件等。GUS组织化学染色结果表明,SlPT2启动子驱动GUS基因在拟南芥根部特异表达,将其初步鉴定为根特异性表达启动子。 展开更多
关键词 番茄 磷酸盐转运蛋白 组织特异型启动子 GUS组织化学染色 顺式作用元件
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从“以食育人”到“以食立国”:日本《食育推进基本计划》解读
10
作者 谭建川 《日本问题研究》 2024年第2期35-43,共9页
日本是世界上食育最为发达的国家之一。自2005年颁布《食育基本法》之后,每隔5年制定并实施《食育推进基本计划》,不断推动食育体系全面发展,成为深刻影响日本国民生活习惯、道德观念、行为举止以及地方经济发展的重要国策。到目前为止... 日本是世界上食育最为发达的国家之一。自2005年颁布《食育基本法》之后,每隔5年制定并实施《食育推进基本计划》,不断推动食育体系全面发展,成为深刻影响日本国民生活习惯、道德观念、行为举止以及地方经济发展的重要国策。到目前为止,《食育推进基本计划》已制定实施4期,每期计划的总体目标和重点工作均有不同。总体而言,前两期更强调加深国民对食育的重视程度,普及基本饮食常识,为“以食育人”奠定基础,第三期更重视食育对经济发展、文化传承的重要推动作用,希望实现“以食立国”,第四期则在此基础上提出构建可持续发展的数字化食育。《食育推进基本计划》具有重视法律保障、实施目标管理、强调课程体系建设、调动各类社会资源等特点,对中国发展食育具有重要的参考价值。但是也面临着影响因素复杂、部分目标值无法按时达标等现实挑战,体现出食育体系构建的长期性和复杂性。 展开更多
关键词 日本 食育 《食育基本法》 《食育推进基本计划》 以食育人 以食立国
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Isolation and analysis of a TIR-specific promoter from poplar 被引量:12
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作者 Zheng Hui-quan Lin Shan-zhi Zhang Qian Zhang Zhen-zhen Zhang Zhi-yi Lei Yang Hou Lu 《Forestry Studies in China》 CAS 2007年第2期95-106,共12页
A 5' flanking region of the well-conserved Toll/interleukin-1 receptor domain (TIR)-encoding sequence was isolated from the genomic DNA ofMelampsora magnusiana Wagner resistant clones of hybrid triploid poplars [(... A 5' flanking region of the well-conserved Toll/interleukin-1 receptor domain (TIR)-encoding sequence was isolated from the genomic DNA ofMelampsora magnusiana Wagner resistant clones of hybrid triploid poplars [(Populus tomentosa × P. bolleana) × P. tomentosa]. Sequencing results and alignment analysis show that the obtained TIR-specific promoter (named as PtTIRp01) was 1,732 bp in length; moreover 3' region of the PtTIRp01 contains a responds to the 5' composition of TIR-NBS type gene PtDRG02, of 747 bp long 5' region of TIR-NBS type gene PtDRG02 and its 398 bp complete TIR-encoding sequence, which significantly corindicating that the obtained TIR-specific promoter region consists upstream region of promoter (985 bp). It was found that the 5' region of TIR-NBS type gene PtDRG02 was characterized in the downstream region of the transcriptional start, named as 5'-untranslated region (5' UTR), consisting of one 93 bp 5'-untranslation exon, one 213 bp intron and one 441 bp TIR-encoding open reading frame (ORF). In addition, several putative cis-acting motifs were present in the obtained TIR-specific promoter of PtDRG02, including one TATA box, one GC-rich, one AT-rich, one P-box, one 3-AF1 binding site, two CAAT boxes, two GT-1 motifs, three typical W-boxes, four I-boxes, and one multi-cis-acting fragment (MCF). The latter contains five types of regulatory elements (E4, G-box, ABRE motif, box 1 and HVA 1 s), most of which were homologous to the cis-acting regulatory elements involved in the activation of defense genes in plants. Thus, it can be suggested that TIR-specific promoter might be a pathogen-inducible promoter and be necessary for the inducible expression of defense-related genes. Key words Toll/interleukin- 1 receptor domain, promoter, Cis-acting element, poplar 展开更多
关键词 Toll/interleukin- 1 receptor domain promotER Cis-acting element POPLAR
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pACTE3质粒的构建及其在转基因烟草中的表达
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作者 尹岚 李学宝 《华中师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期498-502,共5页
将1个从棉花中分离的新的启动子ACTE3插入质粒pBI101,ACTE3与GUS基因融合,构建成pACTE3表达载体.通过农杆菌介导转化法将ACTE3/GUS融合基因导入烟草.GUS组织化学染色分析表明,在ACTE3启动子控制下,GUS基因仅在叶片及茎等组织中特异表达.
关键词 pactE3质粒 转基因烟草 actE3启动子 载体构建 组织特异性表达 植物基因工程 基因表达
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In silico Analysis of osr40c1 Promoter Sequence Isolated from Indica Variety Pokkali 被引量:1
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作者 W.S.I.deSILVA M.M.N.PERERA +2 位作者 K.L.N.S.PERERA A.M.WICKRAMASURIYA G.A.U.JAYASEKERA 《Rice science》 SCIE CSCD 2017年第4期228-234,共7页
The promoter region of a drought and abscisic acid (ABA) inducible gene, osr40c1, was isolated from a salt-tolerant indica rice variety Pokkali, which is 670 bp upstream of the putative translation start codon. In ... The promoter region of a drought and abscisic acid (ABA) inducible gene, osr40c1, was isolated from a salt-tolerant indica rice variety Pokkali, which is 670 bp upstream of the putative translation start codon. In silico promoter analysis of resulted sequence showed that at least 15 types of putative motifs were distributed within the sequence, including two types of common promoter elements, TATA and CAAT boxes. Additionally, several putative cis-acing regulatory elements which may be involved in regulation of osr40c1 expression under different conditions were found in the 5′-upstream region of osr40c1. These are ABA-responsive element, light-responsive elements (ATCT-motif, Box I, G-box, GT1-motif, Gap-box and Sp1), myeloblastosis oncogene response element (CCAAT-box), auxin responsive element (TGA-element), gibberellin-responsive element (GARE-motif) and fungal-elicitor responsive elements (Box E and Box-W1). A putative regulatory element, required for endosperm-specific pattern of gene expression designated as Skn-1 motif, was also detected in the Pokkali osr40c1 promoter region. In conclusion, the bioinformatic analysis of osr40c1 promoter region isolated from indica rice variety Pokkali led to the identification of several important stress-responsive cis-acting regulatory elements, and therefore, the isolated promoter sequence could be employed in rice genetic transformation to mediate expression of abiotic stress induced genes. 展开更多
关键词 osr40c1 promotER cis-acting regulatory element rice
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MicroRNA Primary Transcripts and Promoter Elements Analysis in Soybean (Glycine max L. Merril.) 被引量:1
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作者 LI Jing LIU Yong-xin +3 位作者 HAN Ying-peng LI Yong-guang GUO Mao-zu LI Wen-bin 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2013年第9期1522-1529,共8页
The importance of microRNA (miRNA) at the post-transcriptional regulation level has recently been recognized in both animals and plants. In recent years, many studies focused on miRNA target identification and funct... The importance of microRNA (miRNA) at the post-transcriptional regulation level has recently been recognized in both animals and plants. In recent years, many studies focused on miRNA target identification and functional analysis. However, little is known about the transcription and regulation of miRNAs themselves. In this study, the transcription start sites (TSSs) for 11 miRNA primary transcripts of soybean from 11 miRNA loci (of 50 loci tested) were cloned by a 5" rapid amplification of cDNA ends (5" RACE) procedure using total RNA from 30-d-old seedlings. The features consistent with a RNA polymerase II mechanism of transcription were found among these miRNA loci. A position weight matrix algorithm was used to identify conserved motifs in miRNA core promoter regions. A canonical TATA box motif was identified upstream of the major start site at 8 (76%) of the mapped miRNA loci. Several cis-acting elements were predicted in the 2 kb 5" to the TSSs. Potential spatial and temporal expression patterns of the miRNAs were found. The target genes for these miRNAs were also predicted and further elucidated for the potential function of the miRNAs. This research provides a molecular basis to explore regulatory mechanisms of miRNA expression, and a way to understand miRNA-mediated regulatory pathways and networks in soybean. 展开更多
关键词 SOYBEAN miRNA primary transcript RACE TATA box MOTIF promotER cis-acting element
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Analysis on Sequence and Elements of Cucumisin Promoter
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作者 Siming HOU Lingyun LIU Xiaohong YANG 《Agricultural Biotechnology》 CAS 2017年第2期19-21,44,共4页
Abstract Leaves of melon were collected and extracted by the CTAB method for total DNA which was used for PCR amplification, obtaining the gene sequence of cucumisin promoter. The sequence results were processed and a... Abstract Leaves of melon were collected and extracted by the CTAB method for total DNA which was used for PCR amplification, obtaining the gene sequence of cucumisin promoter. The sequence results were processed and analyzed with DNAman, DNAstar and other softwares, and bioinformatic element analysis was performed with PlantCARE and PLACE. The analysis results showed that the cucumisin promoter shared 100%, 99% and 99% homology with AY055805, LN713264 and LN681897, respectively. The promoter sequence contains a variety of c/s-acting elements common in fruit promoters of higher plants such as TATA-Box and CAAT-Box, and light-responsive elements, some of which involved in ABA and VP1 responsiveness and salicylic acid responsiveness. This study provides a scien- tific basis for further research on genetic engineering of fruits. 展开更多
关键词 Fruit promoter Sequence analysis Melon gene Bioinformatics analysis Cis-acting elements
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Promotion of Wind Energy in Germany
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作者 Rainald S. Kasprik 《Journal of Energy and Power Engineering》 2014年第4期671-676,共6页
This paper concentrates on the most important findings and the lessons learned from German experience in the field of wind energy integration. It reflects the work of the governmental experts who were auditing the 200... This paper concentrates on the most important findings and the lessons learned from German experience in the field of wind energy integration. It reflects the work of the governmental experts who were auditing the 2008-revision of the Renewable Energy Sources Act (EEG 2008) in the EEG-Report 2011 and the actual political debate in Germany in 2013. The EEG report 2011 makes it clear that a feed-in-tariff-mechanism lowers entry barriers and open the market for new competitors but, also, that incentives without a favorable legal framework fail to fulfill the purpose. 展开更多
关键词 promotion of wind energy in Germany renewable energy sources act incentive policies.
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大麦醇溶蛋白启动子HorD的克隆及其种子特异性表达分析
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作者 刘宝龙 姜燕燕 +2 位作者 曹东 常砚梓 李云 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期1234-1240,共7页
种子特异性启动子的克隆和功能分析不仅有助于阐明作物种子发育和胚乳特异性基因的表达调控机制,也是进行作物品质改良和种子生物反应器在内的植物基因工程改造的基础。本研究从大麦品种Golden pormise中克隆到大麦胚乳特异性启动子HorD... 种子特异性启动子的克隆和功能分析不仅有助于阐明作物种子发育和胚乳特异性基因的表达调控机制,也是进行作物品质改良和种子生物反应器在内的植物基因工程改造的基础。本研究从大麦品种Golden pormise中克隆到大麦胚乳特异性启动子HorD,生物信息学分析表明,其具备启动子的基本元件,如A-box、TATA-box、CAAT-box等,此外还含有胚乳特异性表达所需要的元件Prolamin-box。为验证HorD启动子的表达特性,以pU1300载体为骨架,将HorD启动子和新型冠状病毒(SARA-CoV-2)刺突蛋白基因LPS通过双酶切连接的方式构建表达载体phorD-LPS,并利用农杆菌介导的遗传转化试验验证其种子表达特性。结果表明,HorD启动子能驱动LPS基因在转基因大麦各组织中表达,但在根、茎、叶及颖壳中表达量较低,在种子中表达量较高。这说明HorD启动子可以驱动外源目的基因在大麦种子中特异高效表达。 展开更多
关键词 大麦 HorD启动子 顺式作用元件 遗传转化
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木薯根组织特异性启动子的克隆及鉴定
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作者 李远超 李可 +3 位作者 王连南 陈新 李有志 王文泉 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期1925-1932,共8页
【目的】克隆鉴定木薯根组织特异性启动子,为深入解析和鉴定木薯块根发育及淀粉合成调控机制中关键基因的功能提供理论参考。【方法】根据木薯不同组织部位转录组数据,并结合实时荧光定量PCR检测结果,鉴定出木薯块根和初生根中特异高表... 【目的】克隆鉴定木薯根组织特异性启动子,为深入解析和鉴定木薯块根发育及淀粉合成调控机制中关键基因的功能提供理论参考。【方法】根据木薯不同组织部位转录组数据,并结合实时荧光定量PCR检测结果,鉴定出木薯块根和初生根中特异高表达基因,使用PLACE在线网站分析该基因上游1464 bp启动子序列,依据其根特异顺式作用元件ROOTMOTIFTAPOX1(RMT1)的分布情况,对该序列进行截短分析,并设计其特异性引物,PCR扩增获得长度为1464、705和319 bp的启动子序列,与β-葡萄糖苷酶(GUS)基因融合并通过农杆菌介导转入拟南芥,对转基因植株进行GUS染色和GUS活力测定,从而鉴定启动子的组织特异性及启动活性。【结果】根据木薯不同组织的转录组数据,筛选出3个在初生根、块根和根尖分生组织中特异高表达的候选基因MeHPS(Phytozome13登录号Manes.01G078200)、MeSR2(Phytozome13登录号Manes.04G017600)和MeSR3(Phytozome13登录号Manes.14G006300)。结合实时荧光定量PCR检测结果,鉴定出木薯块根和初生根中特异高表达基因MeHPS。通过对MeHPS基因启动子分析发现,1464 bp启动子序列含有5个顺式作用元件RMT1。转基因植株的GUS染色结果显示,p1464启动子具有明显的根特异性,p705启动子具有输导组织和根部特异性,而p319启动子基本丧失组织特异性。根系的GUS活力测定结果显示,p1464、p705和p319驱动的GUS活力分别为8.33、7.87和10.52 U/g,均显著高于35S启动子驱动的GUS活力6.69 U/g(P<0.05)。【结论】MeHPS基因在根中特异高表达,其p1464启动子具有根特异表达活性,可用于在根中特异驱动目的基因高水平转录,p705具有较强的输导组织特异性,可用于驱动具有转运功能蛋白类基因的转录,而p319可视为组成型启动子,能部分替代35S启动子的应用。 展开更多
关键词 木薯 启动子 组织特异性 顺式作用元件
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辣椒miR169家族在非生物胁迫下的表达及启动子顺式作用元件分析 被引量:1
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作者 黄渺 宋泽洋 +2 位作者 蔡骏一 南红 肇瑾 《西部林业科学》 CAS 北大核心 2023年第1期165-174,共10页
miRNA169(miR169)是植物中保守且规模较大的一类miRNA基因家族,其在非生物胁迫下的功能被广泛报道。为深入研究辣椒miR169基因家族(Can-miR169)在非生物胁迫下的表达及上游转录调控机制,以‘遵辣一号’(Zunla-1)为研究对象,利用生物信... miRNA169(miR169)是植物中保守且规模较大的一类miRNA基因家族,其在非生物胁迫下的功能被广泛报道。为深入研究辣椒miR169基因家族(Can-miR169)在非生物胁迫下的表达及上游转录调控机制,以‘遵辣一号’(Zunla-1)为研究对象,利用生物信息学手段分析辣椒与其他植物miR169成熟体和前体保守性和进化关系。采用real-time PCR技术对干旱、低温、高盐、高温胁迫下辣椒miR169基因家族前体进行应答检测。克隆辣椒Can-miR169基因家族12个成员启动子,进行顺式作用元件预测及元件功能验证。结果显示:(1)miR169成熟体在植物中保守性强。(2)4种非生物胁迫下,辣椒miR169家族成员前体表达量相对于对照组差异显著。(3)成功克隆了Can-miR169基因家族12个启动子,顺式作用元件预测其家族启动子中含有大量与非生物胁迫相关的元件,如MYB、MYC、MBS、ABRE、LTR、DRE等。(4)经验证明,这些元件为干旱、低温、高盐等胁迫应答元件。本研究结果为进一步挖掘非生物胁迫下调控Can-miR169的转录因子,明确其上游调控机制提供新信息,为辣椒分子育种及品种改良提供新视野。 展开更多
关键词 辣椒 miR169家族 启动子 非生物胁迫 顺式作用元件
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6个大豆GmBES1基因干旱诱导表达及启动子分析
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作者 张军 陈炯辛 +5 位作者 尹珺伊 王欢 刘秋瑾 田秋丰 白长胜 翟莹 《齐齐哈尔大学学报(自然科学版)》 2023年第1期70-74,共5页
BES1/BZR1转录因子在油菜素内酯信号通路中发挥重要作用,该通路调控植物的生长发育及对各种胁迫的抗性。本研究对6个大豆GmBES1基因在干旱胁迫下的表达量进行检测,同时对6个Gm BES1基因启动子中的顺式作用元件进行预测分析。实时荧光定... BES1/BZR1转录因子在油菜素内酯信号通路中发挥重要作用,该通路调控植物的生长发育及对各种胁迫的抗性。本研究对6个大豆GmBES1基因在干旱胁迫下的表达量进行检测,同时对6个Gm BES1基因启动子中的顺式作用元件进行预测分析。实时荧光定量PCR结果显示,6个GmBES1基因在干旱胁迫下的表达量随着时间存在不同程度的变化,其中GmBES1-9的表达量升高最明显。启动子序列预测分析结果显示,GmBES1-2/3/6/9/11/12启动子序列中分别含有3、6、4、3、4和7种激素及逆境响应相关顺式作用元件。这些结果为大豆GmBES1基因的抗旱机制研究及应用提供理论依据。 展开更多
关键词 大豆 油菜素内酯 干旱胁迫 启动子 顺式作用元件
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