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鸡胸腺素β_4串联体的原核表达、纯化与活性 被引量:2
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作者 王国卿 郭弄潮 刘丽 《东北大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1517-1520,共4页
构建鸡Tβ4基因串联体(2Tβ4)原核表达体系,利用Ni-NTA纯化重组2Tβ4,MTT法检测其免疫活性.结果表明,构建的PET-32a(+)-2Tβ4表达载体在BL21(DE3)感受态细胞中,经0.05 mmol/LIPTG诱导表达,每克菌体平均可获6.7mg 2Tβ4.2Tβ4对淋巴细胞... 构建鸡Tβ4基因串联体(2Tβ4)原核表达体系,利用Ni-NTA纯化重组2Tβ4,MTT法检测其免疫活性.结果表明,构建的PET-32a(+)-2Tβ4表达载体在BL21(DE3)感受态细胞中,经0.05 mmol/LIPTG诱导表达,每克菌体平均可获6.7mg 2Tβ4.2Tβ4对淋巴细胞增殖能力与Tβ4标准品相比无显著差异,证明了所构建的鸡2Tβ4原核表达系统的有效性,为Tβ4的应用提供了基础材料. 展开更多
关键词 胸腺素Β4 串联体 原核表达 纯化 免疫活性
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转化生长因子-β2体外抑制人角膜内皮细胞增殖的作用
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作者 樊廷俊 王晶 +3 位作者 赵君 杨洪收 赵文卓 杨秀霞 《国际眼科杂志》 CAS 2010年第5期841-843,共3页
目的:研究转化生长因子TGF-β2对体外培养人角膜内皮细胞(HCEC)增殖的影响机制。方法:体外培养经血清饥饿法获得同步化的HCEC,用不同浓度TGF-β2对HCEC进行不同时间的处理,采用细胞计数、MTT染色以及流式细胞仪(FCM)和RealtimePCR检测T... 目的:研究转化生长因子TGF-β2对体外培养人角膜内皮细胞(HCEC)增殖的影响机制。方法:体外培养经血清饥饿法获得同步化的HCEC,用不同浓度TGF-β2对HCEC进行不同时间的处理,采用细胞计数、MTT染色以及流式细胞仪(FCM)和RealtimePCR检测TGF-β2对HCEC的增殖、细胞周期及细胞中p27kip1和p21cip1表达的影响。结果:TGF-β21~15μg/L对HCEC有显著的增殖抑制作用,具有浓度和时间依赖性,9μg/L是TGF-β2抑制HCEC细胞增殖的峰浓度。9μg/LTGF-β2处理后,处于G1/G0期HCEC数量显著增加,并具有时间依赖性。9μg/LTGF-β2处理24h后,p27kip1表达量显著增加,48h后p27kip1和p21cip1的表达量均显著增加,也具有时间依赖性。结论:TGF-β2对HCEC具有显著的浓度和时间依赖性增殖抑制作用,可能通过先后诱导p27kip1和p21cip1表达量的增加将细胞拘留在G1/G0期来实现的。 展开更多
关键词 人角膜内皮细胞 转化生长因子Β2 增殖 抑制 细胞周期 P27KIP1 p21cip1
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胸腺素β4对细胞迁移和转分化的影响及在眼科的研究进展
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作者 陈红芮 曹阳 《国际眼科杂志》 CAS 2011年第12期2141-2143,共3页
胸腺素β4(thymosin beta 4,Tβ4)作为一种主要的G-肌动蛋白偶联蛋白存在于绝大多数哺乳动物细胞,具有促进细胞迁移、干细胞分化、血管形成,并抗细胞凋亡、调节免疫功能等多种生物学作用,在创伤修复、肿瘤转移、控制炎症等过程中发挥重... 胸腺素β4(thymosin beta 4,Tβ4)作为一种主要的G-肌动蛋白偶联蛋白存在于绝大多数哺乳动物细胞,具有促进细胞迁移、干细胞分化、血管形成,并抗细胞凋亡、调节免疫功能等多种生物学作用,在创伤修复、肿瘤转移、控制炎症等过程中发挥重要作用。我们就Tβ4对细胞迁移和转分化的影响及其在眼科的研究进展进行综述。 展开更多
关键词 胸腺素Β4 细胞迁移 转分化 眼科疾病
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Potential role of thymosin beta 4 in the treatment of nonalcoholic fatty liver disease 被引量:4
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作者 Yong Jiang Tao Han +4 位作者 Zhi-Guang Zhang Man Li Feng-Xiang Qi Ying Zhang Ying-Lan Ji 《Chronic Diseases and Translational Medicine》 CSCD 2017年第3期165-168,共5页
As a result of increased prevalence of obesity worldwide, non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD) has become one of the most common causes of chronic liver disease. Although most NAFLD cases remain benign, some prog... As a result of increased prevalence of obesity worldwide, non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD) has become one of the most common causes of chronic liver disease. Although most NAFLD cases remain benign, some progress to end-stage liver diseases such as cirrhosis and hepatocellular carcinoma. Therefore, treatment should be considered for NAFLD patients who are likely to progress to nonalcoholic steatohepatitis (NASH) or fibrosis. Thymosin beta 4 (Tβ4), a G-actin sequestering peptide, regulates actin polymerization in mammalian cells. In addition, studies have reported anti-inflammatory, insulin-sensitizing, and anti-fibrotic effects of Tβ4. However, no research has been done to investigate the effects of Tβ4 on NAFLD. Based on the findings above mentioned, we hypothesize that Tβ4 may represent an effective treatment for NAFLD. 展开更多
关键词 thymosin beta 4 Nonalcoholic fatty liver disease Nonalcoholic steatohepatitis HYPOTHESIS
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三种炎性因子在慢性乙型肝炎合并非酒精性脂肪性肝病患者血清中的表达及作用 被引量:12
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作者 梁静 韩涛 +2 位作者 景丽 高英堂 马喆 《中华传染病杂志》 CSCD 北大核心 2017年第10期600-604,共5页
目的探讨细胞角蛋白(CK18)片段M30和M65、胸腺素β4(Tβ4)及TNF-α在CHB合并脂肪肝患者的脂肪变及炎症、纤维化发展过程中的作用。方法选择CHB合并非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者46例,单纯CHB患者42例。采用ELISA法检测两组患者... 目的探讨细胞角蛋白(CK18)片段M30和M65、胸腺素β4(Tβ4)及TNF-α在CHB合并脂肪肝患者的脂肪变及炎症、纤维化发展过程中的作用。方法选择CHB合并非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者46例,单纯CHB患者42例。采用ELISA法检测两组患者血清CK-18 M30、CK-18 M65、Tβ4及TNF-α水平。同时分析CHB合并NAFLD患者血清炎性因子与生物化学指标和病理指标的相关性。统计学处理采用t检验和χ2检验,相关性分析采用Pearson和Logistic回归分析。结果CHB合并NAFLD患者血清CK-18 M30的水平为(614.48±471.43) U/L,明显高于单纯CHB患者的(374.50±231.04) U/L,差异有统计学意义(t=2.988,P〈0.01)。CHB合并NAFLD患者血清CK18 M65、Tβ4和TNF-α水平分别为(369.41±262.21) U/L、(0.80±0.32) mg/L和(54.87±20.36) ng/L,单纯CHB患者分别为(296.50±231.44) U/L、(0.68±0.30) mg/L和(51.88±20.60) ng/L,差异均无统计学意义(t值分别为1.378、1.810、0.685,均P〉0.05)。CHB合并NAFLD患者血清CK-18 M30水平与ALT、三酰甘油、空腹血糖、肝组织炎症活动度分级(G)、纤维化分期(S)及脂肪变分级(F)呈正相关(r值分别为0.507、0.456、0.384、0.551、0.458、0.457,均P〈0.01),Tβ4水平与肝组织炎症活动度和纤维化分期呈负相关(r值分别为-0.371、-0.308,均P〈0.05),TNF-α水平与肝组织炎症活动度及脂肪变分级呈正相关(r值分别为0.570、0.441,均P〈0.01)。Logistic回归提示,CK-18 M30、Tβ4和TNF-α分别是CHB合并NAFLD、显著炎症纤维化及中重度脂肪变的独立预测因子。结论CK-18 M30、Tβ4和TNF-α与CHB合并NAFLD患者肝组织脂肪变的发生、炎症纤维化进展相关。 展开更多
关键词 肝炎 乙型 慢性 非酒精性脂肪性肝病 细胞角蛋白18 胸腺素Β4 肿瘤坏死因子A
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梅花鹿胸腺素β4基因真核表达载体的构建及鉴定
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作者 王佳雯 高云鹏 +3 位作者 王敏 王思明 赵雨 白雪媛 《畜牧与兽医》 北大核心 2017年第8期43-47,共5页
为了构建梅花鹿胸腺素β4(Tβ4)基因真核表达载体,使用TRIzol法提取梅花鹿鹿茸总RNA,RT-PCR方法特异性扩增梅花鹿Tβ4基因,目的基因插入真核表达载体VR1012构建表达质粒,将质粒瞬时转染到293T人胚肾细胞系,使用Western blot和免疫荧光... 为了构建梅花鹿胸腺素β4(Tβ4)基因真核表达载体,使用TRIzol法提取梅花鹿鹿茸总RNA,RT-PCR方法特异性扩增梅花鹿Tβ4基因,目的基因插入真核表达载体VR1012构建表达质粒,将质粒瞬时转染到293T人胚肾细胞系,使用Western blot和免疫荧光方法检测目的基因的表达。结果显示:克隆得到的梅花鹿Tβ4基因长度为135 bp,编码44个氨基酸,成功构建真核表达载体VR1012-Tβ4-HA,转染后梅花鹿Tβ4在293T细胞中表达,而且主要表达在细胞浆中。本试验为进一步研究Tβ4在鹿茸生长中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 梅花鹿 胸腺素Β4 质粒构建 转染 真核表达
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