Study on Anti-diarrhea Effect of the Prescription of 4 Tibetan Veterinary Drugs

This study was conducted to investigate the effects of extracts of 4 Tibetan veterinary drugs on bacterial diarrhea, and to guide the clinical treatment of the disease. The inhibitory effects of the extracts of the 4 Tibetan veterinary drugs, Veronica ciliate Fisch, Usnea diffracta Vain, Sophoraflavescens var. flavescens, Lamiophlomis rotata （ Benth. ） Kudo on 14 common diarrheagenic bacteria were detected by K-B diffusion method and micro-broth dilution method. Optimization was performed on prescriptions of the 4 Tibetan veterinary drugs using orthogonal design software, and a mouse bacterial diarrhea model was established with a clinical isolate, Salmonella blegdam. According to the LD50 value of the optimal prescription of the 4 Tibetan veterinary drugs, the established mouse bacterial diarrhea model was treated in 3 dose groups, i. e. , the high, middle and low dose groups （0. 060, 0. 030 and 0. 020 g/ml, respectively）. The results showed that the 4 Tibetan veterinary drugs had very good inhibitory effects on most of the tested diarrheagenic bacteria, and among them, U. diffracta had better inhibitory effects on all the tested bacteria. The optimal prescription of the d Tibetan veterinary drugs （high dose, 0.06 g/ml） exhibited very good inhibitory effect on mouse diarrhea, indicating that the prescription has very good anti-diarrhea effect, which is beneficial to the clinical treatment of such disease and the development of Tibetan veterinary drugs.

基于数据挖掘的藏医泻治方配伍规律及用药特点分析

为藏医泻治方临床合理用药及新药研发提供理论依据,搜集《藏医经典文献集成》中关于历代藏医泻治方的古籍文献;共收集到92本有关藏医泻治方的古籍文献及356首藏医泻治方,应用SPPS Modeler 18软件分析法等方法,对其进行整理及分析,结果发现356首藏医泻治方中使用频次最高的前10的药物依次为白狼毒、长蝝诃子、巴豆、大果大戟、硇砂、大黄、漆树脂、荜拔、斑蝥、甘青大戟.其次,应用Apriori算法的关联规则分析法,将支持度设置为5%,置信度15%条件下发现94条藏医泻治方常用药对;其中白狼毒-长蝝诃子、白狼毒-巴豆、长蝝诃子-巴豆、白狼毒-大果大戟等是藏医泻治方2399条药对中最为常用的药物组合.356首藏医泻治方剂中使用频次最高的药物及组方关联最强的核心药对都以白狼毒、长蝝诃子、巴豆、大果大戟、硇砂等毒性较强的药物为主,而藏医临床上针对这些毒性药物具有非常严格的入药条件,必须经过专业的藏医炮制工艺技术,才能入药服用;同时,提高自身临床经验,确保泻治药物质量,搞清泻治药物炮制原理,掌握泻治疗法的具体操作方法是藏医泻治疗法临床合理应用的前提和所需条件.

四种藏兽医药用植物和屎肠球菌联用对大肠杆菌E6生物被膜的影响

采用改良结晶紫半定量法和微量肉汤稀释法分别对152株大肠杆菌进行生物被膜形成能力分析和12种常用抗菌药物敏感性试验。同时,利用棋盘稀释法评价四种藏兽医药用植物(马蹄黄、偏翅唐松草、华丽龙胆和岩生忍冬)不同提取部位(甲醇、二氯甲烷、乙酸乙酯和石油醚)、屎肠球菌乙酸乙酯提取物与高耐药率抗生素(氯霉素、土霉素、氨苄西林和磺胺甲噁唑)联合对10株多重耐药大肠杆菌(E1-E10)杀菌活性,以探讨不同药物组合对E6生物被膜的清除作用。实验结果显示:152株大肠杆菌多表现为中等成膜能力和无成膜能力表型,对氯霉素、磺胺二甲嘧啶、土霉素、氨苄西林、磺胺甲噁唑的耐药率均高于90%,对二氟沙星、环丙沙星、阿米卡星、头孢噻呋、妥布霉素和头孢曲松的耐药率均低于50%,其中阿米卡星的敏感率最高,耐药率仅为19.90%;马蹄黄甲醇提取物、偏翅唐松草乙酸乙酯提取物、华丽龙胆甲醇提取物和岩生忍冬乙酸乙酯提取物、屎肠球菌S16和S17乙酸乙酯提取物对E1~E10的MIC范围分别为3.93~15.63、3.93~31.52,7.81~15.63、7.81~31.52、0.42~13.38和0.45~3.63 mg/mL;四种藏兽医药用植物不同提取部位和屎肠球菌乙酸乙酯提取物与高耐药率抗菌药物分别呈现不同的联合作用;在MIC浓度下,药物联合对E6表现出较强的生物被膜清除能力,其中岩生忍冬和偏翅唐松草乙酸乙酯提取物与土霉素和氨苄西林联用对E6生物被膜的抑制率高于其他组合,岩生忍冬和偏翅唐松草乙酸乙酯提取部位与土霉素联用的抑制率分别为48.92%、42.58%,与氨苄西林联用的抑制率分别为48.58%、47.84%。选用的四种藏兽医药用植物、益生菌和抗菌药物联合应用在一定程度上能够解决本研究藏猪和藏鸡源大肠杆菌耐药性和生物被膜形成等问题。

西藏自治区藏药质量标准建设现状分析及对策研究

藏医药学历史悠久,是藏族人民几千年来同恶劣的自然环境和疾病斗争的过程中逐步积累起来的巨大财富。近年来,在各级政府的大力支持和藏医药生产企业和研究机构的积极努力下,藏医药产业得到了较好的发展,标准也更加完善、更加严谨,但随着产业的不断发展,标准研究不充分,标准执行不规范的问题更加凸显。文章就近年来藏药标准建设存在的问题进行了分析研究,并提出了对策建议,以供藏医药界参考。

多基原藏药噶吾尔的本草考证

噶吾尔是藏医临床治疗热性疾病的基础药之一。通过查阅藏医药古籍文献资料,结合地方标准,对其不同基原的用药标准、名称、别名、基原、炮制、药性、化学成分、药理作用等进行研究,并对用药混乱现象等进行梳理分析。研究发现,噶吾尔最早记载于《月王药诊》,后逐渐以标准名噶吾尔记载于《四部医典》及各类以四部医典注释为主的藏医药学著作中。经本草考证,11世纪前的古籍文献中未见噶吾尔的优劣之分,12世纪起被分为3类,即布玛拉树(■)树脂叫芒噶吾尔,甘赞树(■)树脂叫达色噶吾尔,沧岗树(■)树脂叫谢噶吾尔。查阅资料得知,来源与产物、时间及季节分为9种,强下品为冰片Borneol campho-ra,弱下品为艾片Camphor、龙脑香Dryobalanops aromatica Gaertn.f、艾脑香(艾纳香)Blumea blsamifera(L.)DC;强中品为薄荷脑Mentha haplocalyx Briq,弱中品为薄荷Mentha haplocalyx Briq;强上品为樟脑Camphora,弱上品为云南樟Cinnamomum glandu-liferum(Wall.)Nees、樟木Cinnamonum cam-phora(L.)Persl。经过对比临床常用的9个品种,其功效相近,且已知主要化学成分均为挥发油和萜类等。噶吾尔的本草考证将为藏医临床的科学、合理用药和质量标准建立提供理论参考。

基于数据挖掘含阿魏藏药方剂的配伍规律及药性研究

目的:探讨含阿魏藏药方剂的配伍规律及药性研究,为临床合理用药提供有力的理论依据和数据参考。方法:从《藏药方剂大全》搜集明确含阿魏的102首方剂,运用Microsoft Excel 2019软件对含阿魏的方剂构建数据库并分析药材,并运用R软件上构建药物的核心组合并分析。结果:共收集到含阿魏的102首方剂,152种单味药,其中使用频次≥21次的共有14味,居前五位有阿魏(102次)、川木香(41次)、干姜(40次)、肉豆蔻(38次)、紫硇砂(35次)等。含阿魏的方剂中共有60组合,以支持度≥10%,置信度≥80%为准,组合共有52个,2味药物的核心组合有13个,3味药物的核心组合有39个,其中频次≥30次的组合共有7个,阿魏-川木香(41次)、阿魏-干姜(43次)、阿魏-肉豆蔻(39次)、阿魏-紫硇砂(32次)、阿魏-荜拨(31次)、阿魏-诃子(30次)、阿魏-麝香(30次)等。高频次药材中辛味偏盛,具有糙、轻、干、动等药性。辛属温性。因此主治寒性疾病。“培根型的心脏病”(20次)、消化不良症(18次)、虫病(12次)、耳病(8次)等。结论:藏药阿魏常与、干姜、肉豆蔻、紫硇砂、诃子等温性药材联用,这符合了藏医在治疗培根型的心脏病和消化不良症等寒性疾病的治病原则,阿魏也可以与川木香、麝香等寒性药材联用,体现了藏药凉温并用的用药规律。

舍饲条件下藏仔猪腹泻源大肠杆菌毒力和粘附因子基因检测与耐药性分析

为有效预防和治疗藏仔猪腹泻,采用PCR和Kirby-Bauer纸片扩散法对西藏林芝市舍饲藏仔猪分离的102株腹泻源大肠杆菌(Escherichia coli)毒力基因、粘附因子基因和耐药性进行检测。大肠杆菌毒力基因和菌毛粘附因子基因检测结果表明,检出率最高的菌毛粘附因子基因是F18(45.10%),其次是F4(15.69%),所有菌株均未检出F41基因;102株菌株中有37株菌株未检出菌毛粘附因子基因。毒力基因中检出率最高的是Stx2e基因(25.49%),其次为STb:EAST-1基因(21.57%)和STa:STb基因(17.65%)。大肠杆菌菌毛粘附因子基因和非菌毛粘附因子基因检测结果表明,在检出AIDA-1基因的菌株中菌毛粘附因子基因(F18、F4)的菌株占比为44.73%,在检出paa基因的菌株中菌毛粘附因子基因(F18、F4)的菌株占比为54.17%;在检出eae基因的菌株中没有检测到F4基因。大肠杆菌对氯霉素、四环素、氨苄西林和链霉素表现出高的耐药性,对3种及以上抗生素产生耐药性的大肠杆菌菌株数占总菌株数的86.27%。

基于数据挖掘探讨藏成药治疗萨滞布病的遣方用药规律

目的:分析藏成药治疗萨滞布病的组方配伍规律,挖掘核心药物,为藏医临床与科研提供参考。方法:收集2020年版《中国药典》《四部医典》等著作中治疗萨滞布病的藏医方剂,在中国知网检索相关文献进行筛选和补充。运用Microsoft Excel 2021、IBM SPSS Modeler 18.0和SPSS 26.0软件进行频数分析、Apriori关联规则分析和系统聚类分析,通过Cytoscape 3.8构建藏药核心复杂网络,提取核心药组。结果:共收集28首主治萨滞布病的藏医方剂,涉及中药156种,其中毒性藏药14种,铁棒锤是使用频次最多的毒性藏药。频次≥6次的高频药物有28种,包括诃子、肉豆蔻、沉香等,药性以凉、温为主,六味以苦、辛、甘味偏盛,三化味以苦化味为主。常用药组包括诃子-沉香(支持度64.29%,置信度94.44%)、沉香-肉豆蔻-诃子(支持度57.14%,置信度87.50%)等。核心药物为诃子、丁香、沉香、肉豆蔻、麝香、木香。聚类分析为6类。结论:藏医治疗萨滞布病采用温散祛隆、清除坏血、协调三因、兼顾脉管的治疗思路,组方配伍注重寒热同调、隆血并治、标本兼顾。

基于超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱技术的藏药八味小檗皮胶囊化学成分分析研究

目的:采用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Exacutive Orbitrap MS)技术对八味小檗皮胶囊的化学成分进行分析鉴定。方法:采用ZORBAX SB-C18柱进行色谱分离,以甲醇-0.1%甲酸溶液为流动相,采用HESI离子源,在正负离子模式下,捕捉化合物的精准相对分子质量及二级碎片离子信息,结合ChemSpider、mzCloud和mzVault数据库,并查阅相关文献,对八味小檗皮胶囊中所含的化学成分进行快速、准确的定性分析。结果:共鉴定出70种化学成分,包括12种生物碱类、19种黄酮类、6种胆汁酸类、19种有机酸类、3种三萜皂苷类、3种香豆素类和8种氨基酸类成分。结论:本研究首次对八味小檗皮胶囊的化学成分进行了全面的定性表征,为其进一步的质量控制和药效物质基础奠定了基础。

西藏牦牛粪便大肠杆菌毒力特性、耐药性与Ⅰ类整合子分子特征相关性分析

【目的】牦牛作为西藏自治区人畜共患及多重耐药病原体的重要宿主之一,在养殖过程中滥用抗菌药物是导致牦牛多重耐药发展及传播的主要原因。本研究旨在对西藏牦牛源大肠杆菌菌株毒力特性、耐药性、整合酶、生物被膜表型的相关性进行分析。【方法】在西藏拉萨、林芝、那曲养殖户采集200份牦牛腹泻样品,利用细菌学方法使用麦康凯培养基和伊红-美蓝培养基分离纯化大肠杆菌,用16S rDNA通用引物对疑似大肠杆菌进行PCR扩增及测序,所获序列用NCBI数据库进行BLAST比对。对大肠杆菌进行7类16种抗菌药物敏感性试验,选择致病性关系密切的4类10种毒力基因,以及20个常见耐药基因和2个Ⅰ类整合子进行PCR检测,采用改良半定量结晶紫染色法确定分离大肠杆菌生物被膜表型并进行相关性分析。【结果】共分离鉴定出91株牦牛源大肠杆菌,对7类16种抗菌药物的纸片扩散试验结果表明,大肠杆菌对克林霉素耐药性最强(87.91%),存在多重耐药现象且最多出现13耐。在毒力基因检测中,STEC、ETEC、EPEC、NTEC 4类毒力基因均有阳性存在,其中F 17毒力基因占59.34%(54/91),stx 1毒力基因占49.45%(45/91)。在22种耐药基因分析中,bla TEM基因在分离菌株中占主导地位;其次为tetA和sul 1基因;在Ⅰ类整合子中,intⅠ1和intⅠ2整合酶基因检出率分别为29.67%(27/91)和1.10%(1/91)。细菌在恶劣环境中生存的主要机制之一是生物被膜形成,在91株大肠杆菌中有48.35%(44/91)表现为弱黏附能力。当大肠杆菌STEC、ETEC检测率高时,耐药基因、Ⅰ类整合子生物被膜检测率也较高,二者呈正相关。【结论】91株西藏牦牛源大肠杆菌毒力基因丰富,耐药基因呈多样化并与Ⅰ类整合子和生物被膜的形成具有一定的相关性。试验结果为牦牛源大肠杆菌耐药机制研究和抗菌药物的合理使用提供了理论依据。

藏药组合用药治疗原发性高血压(查隆)的自身对照研究

目的:观察藏药组合用药治疗原发性高血压(查隆)的临床疗效。方法:采用自身对照研究方法,150例原发性高血压(查隆)患者给予二十五味余甘子丸+拉麦丸+清血康+二十味沉香丸的藏药组合,连续治疗4周。初诊时进行量表评估,检测血液一般检查、血脂四项、肝功能、肾功能、心电图、心脏彩超等指标,4周后复查。所有数据录入Excel 2010后,采用Rversion 4.1.0软件进行统计分析。结果:150例原发性高血压患者有效率为88.7%(133/150),藏医症状疗效判定有效率为89.3%(134/150)。藏药组合用药可降低女性患者血红蛋白(HGB)、TC、HDL-C、LDL-C。未发现损害脏器及严重的不良反应。结论:藏药组合用药治疗对原发性高血压共存的高原性红细胞增多症、高血脂等复杂疾病有明显疗效,是治疗原发性高血压的一种切实可行的方法。

95部颁标准中的二十五味大汤方剂治疗胃溃疡出血的原理和方解研究

目的 应用95部颁标准中的二十五味大汤方剂治疗胃溃疡出血,探讨其临床治疗原理,并进行方解分析研究。方法 于2021年8月—2022年8月选取于本院诊断为胃溃疡出血的患者72例作为研究对象,按照随机数字表法分为对照组(36例)与观察组(36例),其中对照组采用奥美拉唑,观察组采用95部颁标准中的二十五味大汤方剂进行治疗。观察两组患者治疗期间的血清指标与胃肠激素水平变化,并对二十五味大汤方剂所用藏药的性味和性能进行统计分析,对其进行方解研究。结果 与治疗前比较,治疗后两组患者的SOD、EGFR以及血清内炎症因子表达水平均显著升高(P<0.05),其中以观察组患者在治疗后血清内各指标表达水平升高情况更为显著(P<0.05)。治疗后两组患者的胃肠激素水平均较治疗前降低(P<0.05),其中观察组降低水平更为显著(P<0.01)。结论 95部颁标准中的二十五味大汤方剂可通过改善患者胃部炎症反应与溃疡出血等情况达到愈溃疡止血作用,且各藏药性味以苦、寒、温等为主,具有收敛止血、和胃止痛等作用,具有较高应用价值。

中藏医诊治冠状动脉硬化性心脏病比较研究

冠状动脉粥样硬化性心脏病(coronary atherosclerotic heart disease,CHD)是一种发病率相当高的常见病、多发病。中医和藏医对该病的诊治具有较深入的认识和丰富的临床经验,但关于中藏医诊治该病的异同尚未见相关报道,该研究就中医和藏医对冠状动脉硬化性心脏病的辨证治疗,从中医和藏医基本理论、治疗方法及药物对比研究入手进行比较,对各自的特点进行分析,在病因、分类、治疗方法等方面进行两者异同研究。通过网络分析法与网络药理学法对比中藏药治疗冠心病的用药规律,探索中藏药治疗冠心病的作用机制。网络分析法发现中藏药治疗冠心病的药物中,加权度较高的药物主要包括炙甘草、诃子、茯苓、红花、当归、余甘子、党参、肉豆蔻等,边权重较高的主要包括党参-炙甘草、肉豆蔻-诃子、当归-生地黄、红花-诃子等。在此基础上通过网络药理学方法,从共同药物和加权度较高药物角度分别进行探讨,筛选出中藏药物有效成分、作用靶点,采用蛋白质-蛋白质互作(PPI)网络筛选关键基因进行拓扑分析,从而进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析,建立“中藏药-成分-靶点-通路”的网络图,结果显示中藏药治疗冠心病存在共同的靶点及通路,即JUN、MAPK3、STAT3、IL-6、FOS等基因;参与Proteoglycans in cancer、TNF signaling pathway、cAMP signaling pathway、Fluid shear stress and atherosclerosis多种信号通路,体现现代医学多药物、多成分、多靶点、多通路的理念,从而为建立中藏医的用药规律系统和现代机制,并结合中医和藏医与现代医学的治疗优势提高疗效打下基础。

1株藏猪源Moraxella pluranimalium的分离鉴定及生物学特性分析

【目的】确定四川省甘孜藏族自治州发病藏猪的病原菌,探究各菌株之间的亲缘关系及耐药性,为对其进行有效防控提供科学依据。【方法】从病死猪肺脏中分离出1株可疑病原菌,通过细菌分离培养、16S rRNA PCR扩增测序、遗传演化分析、药敏试验、耐药基因与23S rRNA突变位点检测、生物被膜试验、小鼠致病试验对分离菌株进行鉴定和分析。【结果】经16S rRNA PCR扩增与遗传进化分析显示,该菌与西班牙菌株CR-18、LG6-7g、AR-5A、GM5-1的核苷酸序列相似性均为100%,并与猪源莫拉菌聚为一个遗传分支,表明该病原菌为Moraxella pluranimalium,命名为KD-4。形态学观察显示该菌为双肾型革兰阴性双球菌。生物被膜试验测定显示,该菌可形成生物被膜,使动物病变痊愈后仍有细菌定植在体内,长期成为该病原菌的宿主。药敏试验结果显示,该菌对抗菌药物复达欣、磺胺异噁唑高度敏感;对盐酸大观霉素、美罗培南中度敏感;对氨苄青霉素、庆大霉素、阿莫西林、头孢噻呋钠、氟苯尼考、四环素、恩诺沙星耐药。其中,复达欣、磺胺异噁唑、盐酸大观霉素和美罗培南对该菌的最小抑菌浓度(MIC)分别为2、128、64和2μg/mL。耐药基因检测结果显示,ermF、ermB、tetB、tetD、bla TEM、bla CTX-M基因均未检出。23S rRNA序列分析显示,存在A2982T、C3132T等15个突变位点,推测与分离菌株出现多重耐药有关。小鼠致病性试验结果显示,该菌可引起小鼠肺脏出现少量出血点,脾脏明显肿大,但不致死,耐过后可恢复健康。【结论】本研究为国内首次报道藏猪源Moraxella pluranimalium,药敏试验结果可为该菌引起的疾病防治与流行病学调查提供参考依据。

藏药“策敦木”与中药麻黄的区别探析

麻黄,作为中医药与藏医药的常用药材,具有较高的应用价值。由于海拔和气候的差异,在入药部位、药物配置和加工等方面存在一定差异。通过查阅历代本草、医集等文献概述麻黄在中、藏两传统医药中的来源,功效、用药价值、炮制等方面的异同点,旨在为今后药物的安全性、合理性提供一定参考依据。

藏药石榴日轮丸的质量标准研究

目的 建立常用藏药石榴日轮丸的质量标准。方法 薄层色谱鉴别和薄层扫描含量测定。结果 鉴别出石榴日轮丸中肉桂、红花和西藏棱子芹等药材 ,阴性样品对鉴别无干扰 ;测得石榴日轮丸中胡椒碱含量为 0 4～0 .5mg。结论 该研究提高了本品质量标准的专属性和规范性。

藏药柳茶的化学成分研究

目的 研究藏药柳茶的化学成分。方法 乙醇回流提取,反复硅胶柱层析。结果 分得5个化合物,光谱鉴定分别为甲基阿魏酸(Ⅰ)、β-谷甾醇(Ⅱ)、二十醇(Ⅲ)、二十九烷醇-10(Ⅳ)和十一烷醇(Ⅴ)。结论 除二十九烷醇-10外,其余4种化合物为首次从该植物中获得。

RP-HPLC测定藏药柳茶中阿魏酸和异阿魏酸的含量

目的建立测定藏药柳茶中阿魏酸与异阿魏酸含量的方法。方法采用高效液相色谱法。岛津CLC—ODS色谱柱（150mm×6mm，5μm），流动相为0．1％磷酸水溶液-甲醇（71：29），流速1ml·min^-1，检测波长322nm，柱温30℃。结果阿魏酸和异阿魏酸浓度分别在2．31—36．96μg·ml^-1（r=0．9989）和8．09—129．44μg·ml^-1（r=0．9998）范围内与峰面积呈良好的线性关系；样品中阿魏酸和异阿魏酸平均回收率分别为98．16％和98．58％，RSD分别为0．49％和0．70％（n=3）。结论所建方法准确、简便，适用于藏药柳茶中阿魏酸和异阿魏酸的含量测定。

藏药治疗小鼠继发性棘球蚴超微结构的观察

目的通过应用藏药25味铜灰散治疗小鼠继发性棘球蚴病的疗效观察,探讨藏药治疗棘球蚴病的免疫机理及为临床更好的应用药物治疗棘球蚴病奠定一个良好基础。方法给予药物治疗90d后,解剖小鼠,检测各小鼠棘球蚴囊的湿重,对棘球蚴囊进行超微结构的观察。结果治疗90d后,棘球蚴囊病理及超微结构都有明显的变化。结论藏药25味铜灰散对小鼠棘球蚴有比较好的治疗作用,这将为棘球蚴病的临床治疗提供一个新的前景与思路。

藏药柳茶挥发油化学成分的研究

目的 对藏药柳茶的挥发油进行化学成分分析。方法 应用水蒸气蒸馏法从藏药柳茶中提取挥发油 ,用GC -MS联用法鉴定化合物 ,峰面积归一法测定其百分含量。结果 鉴定了 4 3个化合物 ,占挥发油总量的 82 .6 8%。结论 柳茶的主成分为E -罗勒烯酮和芳樟醇。