罗非鱼(Tilapia nilotica)简达气单胞菌病的病原分离鉴定及药敏试验

从患病罗非鱼(Tilapia nilotica)体内分离得到细菌NL05,通过回归感染试验确定NL05为致病菌,并测出NL05对罗非鱼的半致死量(LD50)为1×103 CFU/g。结合细菌形态学特征、生理生化指标和16S r RNA基因同源分析,鉴定NL05为简达气单胞菌(Aeromonas jandaei)。形态学观察发现,NL05为革兰氏阴性、短杆状;生理生化试验中麦芽糖、甘露醇、葡萄糖、水杨素、硫化氢等13种指标为阳性,蔗糖、阿拉伯糖、木糖、肌醇、卫矛醇等10种指标为阴性。药敏试验显示,NL05对奥复星、丙氟哌酸、丁胺卡那霉素、多粘菌素B、氟哌酸、利福平、洁霉素等13种抗生素敏感,对阿奇霉素、菌必治、卡那霉素、链霉素、美满霉素5种抗生素中介,对氨苄青霉素、阿莫西林、恩诺沙星、复方新诺明、甲氧苄啶等13种抗生素耐药。

尼罗罗非鱼(Tilapia nilotica)不同月龄数量性状遗传力估计

采用不平衡巢式配对的技术,构建尼罗罗非鱼(Tilapia nilotica)半同胞家系30个,估计尼罗罗非鱼数量性状的遗传力。分别对3、4、5月龄的所有家系的家系个体的体重、全长、体长、头长、躯干长、体高、尾柄长、尾柄高及体宽共9个数量性状进行测量,运用半同胞组内相关法估计尼罗罗非鱼3、4、5月龄数量性状的遗传力。结果表明,3月龄尼罗罗非鱼数量性状遗传力的估计值较大为0.73—0.21,4月龄尼罗罗非鱼数量性状遗传力的估计值为0.21—0.06,5月龄尼罗罗非鱼数量性状遗传力的估计值为0.25—0.05,尼罗罗非鱼各性状的遗传力随着月龄增长而减小,遗传力在3月龄最高,4月龄和5月龄较低并接近。本研究结果为进一步开展尼罗罗非鱼选择育种研究奠定基础。

尼罗罗非鲫(Tilapia nilotia)仔鱼前期器官发育与分化的组织学观察

本文报道了尼罗罗非鲫发育到仔鱼前期器官发育与分化的研究结果。其中,消化管、肝脏、胰脏、胆囊、鳔、眼和鳃等的发育已达到最后阶段的造型,分化程度较高。胸腺、甲状腺、肾脏仍属器官原基,分化水平较低。口中孵化的方式对眼的分化有一定影响。直到仔鱼前期末,消化管和消化腺没有实质性变化。但胃,肠内出现许多大的卵黄颗粒。在这一阶段,性腺增大十分明显,且被毛细血管及血岛将组织分成许多小叶。性腺的迅速发育与卵黄快速吸收和利用可能有一定的对应关系。

乳酸菌利用罗非鱼下脚料水解液发酵L-乳酸的探讨

以罗非鱼(Oreochromis spp.)下脚料为原料,采用高温热水抽提法提取其蛋白质作为乳酸菌发酵L-乳酸的氮源。以酵母膏作为对照,探讨了保加利亚乳杆菌(Lactobacillus bulgaricus)、嗜热链球菌(Streptococcus thermophi-lus)和鼠李糖乳杆菌(L.rhamnosus)在罗非鱼下脚料水解液培养基中的生长情况及L-乳酸的产量。结果显示,3种乳酸菌在2种培养基中均能良好地生长,pH下降明显;L-乳酸产量随乳酸菌菌种不同而异,其中鼠李糖乳杆菌在罗非鱼下脚料水解液培养基中发酵10 h后,L-乳酸净产量为3.38 g.L-1,与以酵母膏作为氮源的产酸水平相当。可见罗非鱼下脚料水解液可以替代酵母膏作为L-乳酸发酵的一种低成本氮源。

几种培养方法对萼花臂尾轮虫(Brachionus calyciflorus)种群密度及其环境因子影响的比较研究

分别利用泥鳅 -藻 -轮虫和罗非鱼 -藻 -轮虫共生隔离培养的方法 ,研究萼花臂尾轮虫 ( Brachionuscalyciflorus)的种群密度和主要环境因子的变化。研究结果表明 :加入泥鳅的培养缸中 ,有 1 1 d轮虫数量超过 1 0 0 ind/ml,其中有 5d超过 2 0 0ind/ml,最高密度达 2 50 ind/ml;在罗非鱼的培养缸中 ,在整个实验过程中 ,种群密度超过 1 0 0 ind/ml以上的时间有 6d(第5～ 1 0天 ) ;单纯利用藻类培养轮虫时 ,种群密度较低 ,且维持时间较短 ,最高种群密度不足 1 0 0 ind/ml,利用藻类 -轮虫 -鱼类共存同一生态系统中 ,并使鱼类和轮虫隔离进行生态培养时 ,能提高轮虫种群密度 。

不同饲料蛋白水平下L-肉碱对新吉富品系尼罗罗非鱼生长和饲料利用的影响

研究了三个蛋白水平(22%、25%、28%)和五个L-肉碱水平(0、200、400、600、800mg/kg)下尼罗罗非鱼生长和饲料利用率。结果表明,随着饲料中蛋白水平的提高,罗非鱼幼鱼的终体重、增重率(WGR)和特定生长率(SGR)呈上升趋势,而饲料系数(FCR)和蛋白质效率(PER)均随饲料蛋白水平的升高而显著下降(P<0.05);同等蛋白水平下,终体重、WGR和SGR均在L-肉碱添加量为200mg/kg时最高,不添加L-肉碱组最小;在添加400mg/kgL-肉碱时FCR最小,而PER最大,与不添加L-肉碱组比较,差异均显著(P<0.05)。说明饲料中蛋白含量和L-肉碱添加量能显著影响罗非鱼幼鱼的生长和饲料利用,而外源性L-肉碱可明显促进罗非鱼生长,提高饲料转化效率。

高效液相色谱法检测罗非鱼血浆中L-肉碱的方法研究

以罗非鱼为对象测定血浆中的肉碱含量,就流动相、柱温对色谱峰的影响等方面对样品处理方法及衍生化反应的条件进行研究,建立相应的高效液相色谱法,Kromasil Sil色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈—柠檬酸缓冲液(90∶10,体积比)。每1000mL流动相中加入0.25mL三乙胺,流速1.2mL/min,柱温35℃,检测波长260nm,进样量为20μL。选取10%的对溴苯乙酰基溴为衍生试剂,70℃水浴90min。方法学上考察结果表明,该方法专属性高,其线性回归方程和相关系数分别为y=0.08376x+0.09663(n=6,r^2=0.9995),最低检测限为1μmol/L,日内和日间变异系数分别为1.79%~5.56%、9.83%~11.81%,平均回收率为95.83%,12h峰面积变化相对标准偏差为6.58%,可将其作为检测L-肉碱的分析方法。

L-肉碱在罗非鱼体内的药代动力学

在水温(28±1)℃时,给体质量(82.72±3.65)g和(413.83±39.92)g的吉富罗非鱼口灌剂量12mg/kg的肉碱;另组中给(82.72±3.65)g的吉富罗非鱼口灌剂量12mg/kg和120mg/kg的肉碱,分别于口灌前(0h)和给药后0.083、0.13、0.20、0.25、0.33、0.5、1、2、4、8、12、24、36h和48h采样,数据用WinNonlin 5.2软件非房室模型统计矩方法分析,分别研究了肉碱对不同规格吉富罗非鱼的药代动力学和肉碱剂量对吉富罗非鱼的药代动力学。试验结果表明,口灌给药后,2个剂量组的达峰时间、清除率及平均滞留时间差异不显著(P>0.05),但12mg/kg剂量组的达峰浓度(82.28μmol/L)、药时曲线下面积(431.06h·μmol/L)显著高于120mg/kg剂量组的达峰浓度(21.27μmol/L)、药时曲线下面积(96.95h·μmol/L),说明药物剂量影响肉碱吸收。肉碱在(小规格罗非鱼体内的达峰浓度、清除率和消除半衰期均随个体增大而变小,但差异均不显著(P>0.05)。L-肉碱在大规格罗非鱼体内的分布程度较小规格罗非鱼广泛,即大规格罗非鱼清除率低于小规格罗非鱼,小规格罗非鱼的平均滞留时间比大规格罗非鱼长。

外源木聚糖酶对尼罗罗非鱼消化器官消化酶活力及分布的影响

本试验以尼罗罗非鱼为试验对象,小麦日粮为对照,小麦日粮中分别添加不同水平的木聚糖酶(0.05%,0.10%,0.15%)作为试验饲料。每个处理设5个重复,每个重复放养40尾雄性尼罗罗非鱼。试验采用饱食方式,每天投喂4次(8:30,11:30,14:30,17:30)。在池塘浮式网箱(1.0 m×1.0 m×1.3 m)中进行饲养试验,75 d后测定罗非鱼胃、肠、肝胰脏的蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、木聚糖酶、纤维素酶、果胶酶6种消化酶的活力。结果表明:0.10%木聚糖酶试验组的胃蛋白酶、纤维素酶活力较对照组有极显著提高(P<0.01);木聚糖酶试验组的6种肠消化酶活力均有不同程度的提高,其中,0.10%木聚糖酶试验组的6种肠消化酶与对照组均存在极显著差异(P<0.01);外源性木聚糖酶抑制罗非鱼肝胰脏蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活力,但提升肝胰脏内源性木聚糖酶、纤维素酶和果胶酶的活力;外源性木聚糖酶的添加不影响淀粉酶、内源性木聚糖酶、纤维素酶和果胶酶在胃、肠、肝胰脏中的分布规律,但对蛋白酶、脂肪酶的分布规律有明显影响。

木聚糖酶对尼罗罗非鱼生长及血脂血糖水平的影响

目的研究木聚糖酶对尼罗罗非鱼生长及血脂、血糖水平的影响。方法初始平均体重为106.16±16.77g的尼罗罗非鱼分为小麦基础饲料对照组、0.05%木聚糖酶组、0.10%木聚糖酶组和0.15%木聚糖酶组,每组设5个重复,每个重复放养40尾雄性尼罗罗非鱼。实验采用饱食方式,每天投喂4次(8∶30、11∶30、14∶30、17∶30)。在池塘浮式网箱(1.0m×1.0m×1.3m)中进行饲养实验,75d后测定实验鱼体重、血清总胆固醇(Chol)、甘油三酯(Trig)及血糖(BGlu)的含量。结果与对照组比较,0.05%组和0.10%组的增重率分别提高8.29%和17.45%(P<0.01);0.10%组、0.05%组和0.15%组血清Trig水平较对照组显著增高(分别为P<0.01、P<0.05、P<0.05);0.10%组血清BGlu含量显著高于对照组(P<0.01)。相关分析表明:罗非鱼血脂、血糖与增重率之间均呈极显著正相关(P<0.01)。结论饲喂不同水平的木聚糖酶可提高尼罗罗非鱼的增重率,对其血脂和血糖水平影响也极为显著。

硒对罗非鱼慢性镉中毒肝抗氧化酶及转氨酶的影响

研究了罗非鱼在含镉 ( 5.6mg/L)和镉加硒 ( Cd5.6mg/L+Se0 .0 1 mg/L)的水环境中 ,肝脏抗氧化酶 SOD、Ct以及转氨酶 ALT和 AST的变化。结果表明 ,镉可使这 4种酶的活性明显降低 ,加硒可显著防止 SOD、ALT和 AST活性的下降 ,并对 Ct初期变化也有明显的影响。可见 ,硒通过预防 SOD、Ct等抗氧化酶的活性下降 。

小麦基础饲料添加木聚糖酶对尼罗罗非鱼肠道食糜粘度和绒毛、微绒毛发育的影响

以尼罗罗非鱼[体重(106.16±16.77)g]为实验对象,小麦基础饲料为对照,小麦基础饲料中分别添加不同水平的木聚糖酶(0.05%、0.10%、0.15%)作为试验饲料。每个处理设5个重复,每个重复放养40尾雄性尼罗罗非鱼。饱食投喂,饲养75d后测定尼罗罗非鱼肠道食糜粘度以及前、中、后肠的肠绒毛显微与超微结构。结果表明,对照组与0.05%、0.10%、0.15%木聚糖酶试验组的肠道食糜粘度分别为(15.21±0.29)cps、(13.75±0.45)cps、(12.23±0.16)cps和(11.92±0.22)cps,试验组的肠道食糜粘度极显著低于对照组(P<0.01)。随着木聚糖酶添加量的增加,试验组尼罗罗非鱼前、中、后肠绒毛表面的粘附性颗粒数量较对照组明显减少,颗粒直径减小;试验组前、中、后肠微绒毛的密度和高度均得到不同程度的改善。0.10%木聚糖酶试验组前、中、后肠绒毛高度、宽度、密度均极显著高于对照组(P<0.01)。

两种有胃真骨鱼胃肠胰系统中内分泌细胞的鉴别与定位

使用４种哺乳动物抗血清；胰高血糖素（ｇｌｕｃａｇｏｎ，Ｇｌｕ），胃泌素（Ｇａｓｔｒｉｎ，Ｇａｓ），生长抑素（ｓｏｍａｔｏｓｔａｔｉｏｎ，Ｓｏｍ）５－羟色胺（５－ｈｙｄｒｏｘｙｔｒｙｐｔａｍｉｎｅ，５－ＨＴ），采用过氧化物酶标记的链霉亲和素（Ｓｔｒｅｐｔａｖｉｄｉｎ－Ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ，简称Ｓ－Ｐ法）免疫细胞化学技术，对尼罗非鲫（Ｔｉｌａｐｉａｎｉｌｏｔｉｃａ，简称非鲫）和短盖巨脂鲤（Ｃｏｌｏｓｏｍａｂｒａｃｈｙｐｏｍｕｍ，简称白鲳）的胃肠胰（Ｇａｓｔｒｏ－Ｅｎｔｅｒｏ－Ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ，ＧＥＰ）内分泌系统进行了研究。结果表明：２种鱼的消化道和胰岛都不同程度地存在ＡＰＵＤ（ＡｍｉｎｅＰｒｅｃｕｒｓｏｒＵｐｔａｋｅａｎｄＤｅｃａｒｂｏｘｙｌａｔｉｏｎ）细胞的分布。除了Ｇｌｕ在消化道中为阴性外，其余３种抗体在２种鱼的消化道中均有阳性特异性反应，其中５－ＨＴ细胞最多，Ｓｏｍ次之，Ｇａｓ仅存在于白鲳贲门上皮细胞之间。在２种鱼的胰岛中均鉴别出Ｇｌｕ细胞，Ｓｏｍ细胞仅分布在非鲫的胰岛中。本文描述了不同部位内分泌细胞的分布密度和形态学特征并讨论了它们分布的特点。

饲料中添加木聚糖酶对尼罗罗非鱼生长及血清激素水平的影响

以尼罗罗非鱼(Tilapia nilotica)为实验对象,初始体质量为(106.16±16.77)g,以小麦基础饲料为对照,小麦基础饲料中分别添加不同质量百分比水平的木聚糖酶(0.05%、0.10%、0.15%)作为实验饲料。每个处理设5个重复,每个重复放养40尾雄性罗非鱼。采用饱食方式饲喂75 d后测定罗非鱼体质量、血清胃泌素(Gas)、三碘甲腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)、胰岛素(Ins)、胰高血糖素(Glu)和类胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)的含量。结果表明:0.05%和0.10%木聚糖酶添加组的增重率较对照组分别提高8.29%、17.45%(P<0.01),0.15%组的增重率与对照组相比没有统计学差异(P>0.05)。0.05%组、0.10%组、0.15%组的血清Gas水平分别比对照组提高22.55%(P>0.05)、88.46%(P<0.01)和167.84%(P<0.01);0.10%组和0.15%组血清中T3水平极显著高于对照组(P<0.01),0.05%组T3水平与对照组无显著差异,0.05%组、0.10%组和0.15%组的血清T4水平分别比对照组提高42.36%、65.66%和68.58%(P<0.01);0.05%组、0.10%组和0.15%组的血清Ins水平有极显著差异(P<0.01),并分别比对照组提高54.95%、73.42%和36.04%(P<0.01),其Ins水平从大到小依次为:0.10%组、0.05%组、0.15%组;0.05%组、0.10%组、0.15%组的血清Glu含量分别比对照组降低11.59%、17.15%和13.31%(P<0.01),0.10%组的血清Glu水平极显著低于0.05%组和0.15%组(P<0.01);0.05%组、0.10%组、0.15%组的血清IGF-I水平分别比对照组提高75.57%、102.46%、39.96%(P<0.01)。因此,本研究认为,在小麦基础饲料中适量添加木聚糖酶可以调控尼罗罗非鱼内分泌系统,调节血清激素水平,促进尼罗罗非鱼生长。

海带废渣处理条件及其在罗非鱼饲料中的利用

海带废渣经过洗涤，可以提高褐藻胶回收率近０．５％。洗涤后的海带渣含２０％粗蛋白，用作罗非鱼饲料组分，可以改善饲料适口性。用含有５％海带渣作饲料的养殖效果优于对照组，总氨基酸表现消化率为７６．２％，６种氨基酸表现消化率达到９５％以上，饲料系数为２．１１，肌肉中总氨基酸蓄积率为１６．６％。回收利用海带废渣，全国每年可回收２０００ｔ纯蛋白质和２５０ｔ褐藻胶。在罗非鱼饲料中添加海带废渣，可以提高饲料利用率。

鸡β-防御素13对尼罗罗非鱼生长和疾病抗性的影响

为探讨禽类β-防御素13(gallinacin-13,Gal-13)作为鱼用抗生素替代品的可能性,将150尾同塘同规格尼罗罗非鱼鱼种随机等分为2组:对照组喂商品罗非鱼饵料;Gal-13组在该饵料中添加100mg/kg的Gal-13。通过观测试验鱼的生长表现及其对凡隆气单胞菌BJCP-9株的抵抗力和黏附能力,并采用cell-ELISA法体外测试Gal-13对BJCP-9黏附罗非鱼肠上皮的影响。结果显示,罗非鱼饲料中添加100mg/kgGal-13可显著提高其生长表现和抗BJCP-9感染能力(P<0.05);100μg/mL的Gal-13并不能抑制BJCP-9生长,但能在体内外抑制BJCP-9对罗非鱼肠道上皮细胞的黏附。离体模拟黏附试验表明,Gal-13在25和2.5μg/mL的低浓度下有抗黏附作用(P<0.05),提示Gal-13的抗黏附作用可能是其促进动物生长和提高罗非鱼抗凡隆气单胞菌感染的机制之一,这种抗黏附作用同离子桥和/或配体-受体连接有关,同疏水性无关。

罗非鱼迟缓爱德华氏菌的分离与鉴定

从广西某鱼场的发病罗非鱼（Tilapianilotica）中分离到1株呈β溶血的革兰氏阴性杆菌，在普通琼脂平板上生长，菌落圆形，边缘整齐，灰白色，湿润菌落，直径为0．5～1．0mm，有动力，接触酶阳性，赖氨酸及鸟氨酸脱梭酶阳性，还原硝酸盐为亚硝酸盐，发酵葡萄糖、蔗糖、麦芽糖，经细菌形态、培养特征、生化特性测定结果均符合迟缓爱德华氏菌的特征。应用PCR技术扩增出576bp目的片段，通过PCR产物核苷酸序列测序及Blast比对结果，进一步确定为迟缓爱德华氏菌。致病性试验结果显示分离菌株具有致病性，对氧氟沙星、氯霉素、氟哌酸、恩诺沙星、先锋霉素等高度敏感。

低分子壳聚糖对罗非鱼肝组织抗氧化能力和肝脂含量影响的研究

采用单因子浓度梯度法 ,研究低分子壳聚糖 (SMW chitosan)对尼罗罗非鱼 (Tilapianilotica)肝组织抗氧化能力和肝脂含量的影响。实验发现 ,0 .2 5 %低分子壳聚糖能显著提高罗非鱼肝组织抗超氧阴离子自由基和超氧化物岐化酶 (SOD)浓度。适宜剂量的低分子壳聚糖可降低罗非鱼的肝脂含量 ,其中 0 .5 0 %低分子壳聚糖的降肝脂效果最为显著。实验表明 ,适宜剂量的壳聚糖可有效地提高罗非鱼的肝组织抗氧化能力 。

饲料中添加木聚糖酶对尼罗罗非鱼生长性能的影响

以尼罗罗非鱼(Tilapia nilotica)为试验对象,初始平均体重为(106.16±16.77)g,小麦基础饲料为对照,小麦基础饲料中分别添加不同水平的木聚糖酶(0.05%,0.10%,0.15%),75 d后测定其增重率、内脏指数、肝胰脏指数、肠道指数、表观消化率及肌肉营养成分。结果表明,对照组尼罗罗非鱼的增重率为258.24%,0.05%和0.10%组的增重率较对照组分别提高8.29%和17.45%(P<0.01)。对照组肠道指数和肝胰脏指数分别为1.90和2.82,0.05%组的肠道指数显著低于对照组(P<0.05),0.10%组极显著低于对照组(P<0.01)。0.05%,0.10%和0.15%组的肝胰脏指数分别比对照组降低14.54%,27.30%和12.06%(P<0.01)。对照组饲料干物质和总糖表观消化率分别为67.35%和61.48%。0.05%,0.10%和0.15%组的干物质消化率分别比对照组提高7.69%(P<0.05),11.00%(P<0.01)和2.87%(P<0.05)。3个试验组的总糖表观消化率均极显著高于对照组(P<0.01)。0.05%和0.10%组肌肉粗蛋白含量分别显著(P<0.05)、极显著高于对照组(P<0.01)。0.05%和0.10%组肌肉粗脂肪含量分别比对照组提高14.43%和33.89%(P<0.01)。0.05%,0.10%和0.15%组试验鱼肌肉中粗灰分含量分别比对照组提高4.11%,7.54%和2.77%(P<0.01)。0.05%,0.10%和0.15%组肌肉总钙含量分别比对照组提高19.70%,25.76%和15.15%(P<0.01),总磷含量分别比对照组提高4.78%,3.83%和3.83%(P<0.01)。0.05%和0.10%组试验鱼肌肉水分含量极显著低于对照组(P<0.01)。因此,本研究结论:在含50%小麦的基础饲料中适量添加木聚糖酶,可以提高尼罗罗非鱼的生长性能,其适宜添加水平为0.10%。

甲氰菊酯对尼罗罗非鱼组织乙酰胆碱酯酶、谷丙转氨酶和谷胱甘肽活性的影响

用急性染毒法研究6种浓度(0、0.4、0.6、0.8、1.0、1.5μg/L)的甲氰菊酯对(34.89±9.99)g的尼罗罗非鱼(Tilapia nilotica)分别处理6、12、24、48、96 h后,其组织内乙酰胆碱酯酶(AChE)、谷丙转氨酶(GPT)和谷胱甘肽(GSH)的动态变化。结果显示:AChE活性在同一时间内不同浓度间差异不显著(P>0.05),而同一浓度不同时间点有极显著差异(P<0.01)。GPT活性随试验浓度增加及试验时间延长变化较大,但均无显著差异(P>0.05),表明在低浓度范围内,甲氰菊酯对尼罗罗非鱼肝脏GPT活性影响很小。GSH活性在各浓度间和不同浸毒时间间均有显著差异(P<0.05),6 h试验组GSH活性显著高于对照组,随后逐渐降低。