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TIMELESS、RAB2A、ASPM在乳腺癌组织中的表达及与临床特征相关性
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作者 刘起鹏 张婷 郭婉莹 《广州医药》 2023年第5期80-86,共7页
目的分析TIMELESS、鼠肉瘤病毒家族相关蛋白2A(RAB2A)、异常纺锤体样小头畸形相关基因(ASPM)在乳腺癌组织中的表达及与临床特征相关性。方法选取2019年2月—2021年2月我院乳腺癌组织标本84例作为研究组、正常乳腺组织标本53例作为对照组... 目的分析TIMELESS、鼠肉瘤病毒家族相关蛋白2A(RAB2A)、异常纺锤体样小头畸形相关基因(ASPM)在乳腺癌组织中的表达及与临床特征相关性。方法选取2019年2月—2021年2月我院乳腺癌组织标本84例作为研究组、正常乳腺组织标本53例作为对照组,采用荧光定量聚合酶测定TIMELESS、ASPM,采用Western blot检测RAB2A蛋白表达情况,分析上述三个指标在乳腺癌中表达及与临床特征相关性。结果对比对照组,研究组TIMELESS、ASPM表达较高,RAB2A较低(P<0.05)。TIMELESS、RAB2A、ASPM与乳腺癌淋巴结浸润、TNM分期、分化程度相关(P<0.05)。TIMELESS、RAB2A、ASPM为影响乳腺癌发生的危险因素(P<0.05)。TIMELESS、RAB2A负相关(r=-0.383、P=0.001);TIMELESS、ASPM正相关(r=0.397、P=0.001);RAB2A、ASPM负相关(r=-0.257、P=0.018)。对比TIMELESS、RAB2A、ASPM单一检测,三者联合检测对乳腺癌的诊断价值较高(P<0.05)。结论乳腺癌患者TIMELESS、ASPM呈高表达,RAB2A呈低表达,上述三个指标与乳腺癌高度相关,可作为乳腺癌发生的检测指标。 展开更多
关键词 timeless 异常纺锤体样小头畸形相关基因 乳腺癌 临床特征
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生物钟基因Timeless在HBV相关肝癌组织中的表达及其与乙肝病毒X蛋白的关系 被引量:7
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作者 彭桦 何前进 +1 位作者 金涛 李常海 《山东医药》 CAS 北大核心 2016年第40期21-24,共4页
目的探讨生物钟基因Timeless在HBV相关肝癌中的表达及其与乙肝病毒X蛋白(HBx)的关系。方法选择60例HBV相关肝癌患者,取其癌组织及癌旁正常组织,采用免疫组化法观察Timeless的表达,分析Timeless表达与患者临床病理参数的关系。取人正常... 目的探讨生物钟基因Timeless在HBV相关肝癌中的表达及其与乙肝病毒X蛋白(HBx)的关系。方法选择60例HBV相关肝癌患者,取其癌组织及癌旁正常组织,采用免疫组化法观察Timeless的表达,分析Timeless表达与患者临床病理参数的关系。取人正常肝细胞系LO2、肝癌细胞系Hep G2,分别转染pc DNA3.1-HBx质粒和pc DNA3.1质粒,采用Real-time PCR和Western blotting法检测细胞内Timeless mRNA及其蛋白表达。结果肝癌组织及癌旁正常组织Timeless阳性表达率分别为60.0%(36/60)、38.3%(23/60),二者比较P<0.05。Timeless阳性表达与肝癌患者血管侵犯有关(P<0.05),与患者性别、年龄、肿瘤直径、肿瘤组织分化程度、血清AFP水平无关(P均>0.05)。转染pc DNA3.1-HBx质粒的Hep G2细胞和LO2细胞Timeless mRNA及其蛋白相对表达量均明显高于转染pc DNA3.1质粒细胞(P均<0.05)。结论 HBV相关肝癌组织中Timeless高表达,其表达变化与HBV相关肝癌的发生、发展有关;HBx可能是引起Timeless表达升高的原因之一。 展开更多
关键词 肝细胞癌 timeless 乙型肝炎病毒 乙肝病毒X蛋白
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生物节律基因Timeless的生物学功能研究进展 被引量:10
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作者 宋何煜 张耀 江红 《生物技术通讯》 CAS 2014年第3期421-424,共4页
Timeless基因广泛分布于生物体中,是主要的生物节律基因之一,它通过与节律基因Per和Cry家族成员的相互作用影响它们的表达水平。Timeless和Tipin能够稳定复制叉,促进姊妹染色单体凝聚,对DNA复制有促进作用;在细胞周期中激活S期检测点,参... Timeless基因广泛分布于生物体中,是主要的生物节律基因之一,它通过与节律基因Per和Cry家族成员的相互作用影响它们的表达水平。Timeless和Tipin能够稳定复制叉,促进姊妹染色单体凝聚,对DNA复制有促进作用;在细胞周期中激活S期检测点,参与ATR-Chk1和ATM-Chk2的DNA损伤修复通路,加强细胞周期的阻滞以修复DNA损伤。Timeless是生物节律和细胞周期的连接者,在多种癌组织(如肝癌、肺癌、乳腺癌、结直肠癌、肾癌和胰腺癌)中的表达水平与癌旁非癌组织相比有差异,提示Timeless表达异常可能与肿瘤的发生和发展相关。 展开更多
关键词 timeless 生物节律 细胞周期 癌症
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生物钟蛋白TIMELESS对乳腺癌细胞增殖和侵袭转移的差异调控 被引量:2
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作者 李淑晶 任薛莉 伍会健 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期207-216,共10页
生物钟蛋白TIMELESS是生物体周期节律相关的核心分子钟的一员。TIMELESS可以调节细胞的增殖和代谢,DNA损伤的识别和修复等。研究发现,TIMELESS的表达与肝癌、肺癌、结直肠癌和鼻咽癌等的发生发展明显关联。在乳腺癌中,TIMELESS的调节作... 生物钟蛋白TIMELESS是生物体周期节律相关的核心分子钟的一员。TIMELESS可以调节细胞的增殖和代谢,DNA损伤的识别和修复等。研究发现,TIMELESS的表达与肝癌、肺癌、结直肠癌和鼻咽癌等的发生发展明显关联。在乳腺癌中,TIMELESS的调节作用和机制仍不十分清晰。本文分别研究了TIMELESS在乳腺癌细胞增殖和转移方面的调控作用。通过细胞增殖实验发现,TIMELESS可明显促进乳腺癌细胞的增殖。克隆形成实验发现,在乳腺癌细胞ZR-75-30和T-47D中,TIMELESS过表达分别上调克隆数量约1.6倍和1.8倍。通过报告基因检测对雌激素信号通路的研究发现,TIMELESS和雌激素受体ERα(estrogen receptor)共表达与单转ERα相比,使得雌激素受体ERα的转录活性提高约3倍;而通过对于Basal型乳腺癌患者生存曲线分析发现,Timeless高表达与basal型乳腺癌患者的生存率正相关。基于此,我们进一步研究了TIMELESS对于乳腺癌细胞转移的调控作用。通过细胞划痕实验和F-肌动蛋白组装检测发现,TIMELESS抑制乳腺癌细胞的转移;同时,TIMELESS敲低提高了乳腺癌细胞的转移数量约1.6倍,并下调了上皮标志物E-钙黏着蛋白的表达,上调了间质标志物N-钙黏着蛋白表达。本研究提示,TIMELESS在调控乳腺癌的增殖和转移过程中存在差异调控,即TIMELESS促进乳腺癌细胞增殖,而抑制了乳腺癌细胞的转移。这为生物钟蛋白质调控乳腺癌的发生发展提供了分子基础,同时为乳腺癌的分型治疗提供了一定的理论依据。 展开更多
关键词 周期节律 生物钟蛋白timeless 增殖 侵袭转移 乳腺癌
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Timeless与生物钟基因 被引量:6
5
作者 刘仲敏 张亚平 《Zoological Research》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期497-501,共5页
综述了timeless基因的发现、多态性和重要功能。timeless是最先被发现的两个生物钟基因之一。生物钟的昼夜节律由PER、TIM、CLOCK和CYCLE 4个生物钟齿轮组成的正负反馈回路进行调节。其中TIM可以受光因子调控 ,它还可以与PER形成异二聚... 综述了timeless基因的发现、多态性和重要功能。timeless是最先被发现的两个生物钟基因之一。生物钟的昼夜节律由PER、TIM、CLOCK和CYCLE 4个生物钟齿轮组成的正负反馈回路进行调节。其中TIM可以受光因子调控 ,它还可以与PER形成异二聚体 。 展开更多
关键词 timeless基因 生物钟基因 分子机制 昼夜节律
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中华绒螯蟹Timeless基因在不同发育阶段的表达谱分析 被引量:1
6
作者 李豪 李鹏 +2 位作者 严洁 解文利 周开亚 《水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期208-214,共7页
Timeless基因是重要内源性的生物钟基因之一,在生物体内周期性表达,保持昼夜节律时间并激活输出途径。本文分析了中华绒螯蟹Timeless基因在其溞状幼体Ⅰ~Ⅴ期、大眼幼体期和仔蟹Ⅰ~Ⅲ期共9个不同发育阶段以及扣蟹、成蟹(性成熟)不同组... Timeless基因是重要内源性的生物钟基因之一,在生物体内周期性表达,保持昼夜节律时间并激活输出途径。本文分析了中华绒螯蟹Timeless基因在其溞状幼体Ⅰ~Ⅴ期、大眼幼体期和仔蟹Ⅰ~Ⅲ期共9个不同发育阶段以及扣蟹、成蟹(性成熟)不同组织间的mRNA表达情况。荧光定量PCR结果揭示Timeless基因在溞状幼体Ⅰ期至仔蟹Ⅲ期9个发育阶段均有表达,在溞状幼体Ⅴ期的表达量最高,显著高于其他时期(P<0.05),随后在大眼幼体时期急剧下降,最后仔蟹时期又呈稳步上升趋势。在扣蟹时期的8个组织中,Timeless基因在肝胰腺和肌肉中的表达量较高,与其他组织的表达均呈显著差异(P<0.05);在成蟹时期肝胰腺中的表达量最高且与其他组织中的表达水平均差异显著(P<0.05)。研究结果表明,中华绒螯蟹Timeless基因在幼体发育阶段均有表达,组织表达主要在肝胰腺和肌肉中,并且在不同性别的成蟹组织间Timeless mRNA表达存在显著差异。推测该基因可能在中华绒螯蟹的生长发育、生理适应和代谢调控过程中具有重要作用。 展开更多
关键词 中华绒螯蟹 timeless基因 荧光定量PCR MRNA表达
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生物钟基因Timeless及与肿瘤关系的研究进展 被引量:2
7
作者 张金玲 吴超 杨盛力 《临床与病理杂志》 2017年第5期1062-1065,共4页
生物钟基因的功能不仅局限于调节生物节律,更与细胞内DNA的修复、细胞的增殖等一系列过程相关联,Timeless是生物钟基因成员之一,对Timeless基因的研究起步较晚。近年来研究发现生物钟基因在多种肿瘤中普遍存在表达异常,而对Timeless研... 生物钟基因的功能不仅局限于调节生物节律,更与细胞内DNA的修复、细胞的增殖等一系列过程相关联,Timeless是生物钟基因成员之一,对Timeless基因的研究起步较晚。近年来研究发现生物钟基因在多种肿瘤中普遍存在表达异常,而对Timeless研究较少。 展开更多
关键词 timeless 生物钟 基因 肿瘤
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沉默生物钟基因Timeless对卵巢癌SKOV3细胞凋亡和侵袭能力的影响 被引量:4
8
作者 粟连秀 陈静平 +4 位作者 杨达平 钟再婵 黄丽芳 宋建华 韦翠容 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期1169-1175,共7页
目的:探讨沉默生物钟基因Timeless(TIM)对人卵巢癌SKOV3细胞凋亡和侵袭能力的影响。方法:免疫组化法检测卵巢癌组织及正常卵巢组织中TIM蛋白表达,分析TIM表达与卵巢癌病理特征的相关性。选取卵巢癌SKOV3细胞,随机分为空白对照组、siRNA... 目的:探讨沉默生物钟基因Timeless(TIM)对人卵巢癌SKOV3细胞凋亡和侵袭能力的影响。方法:免疫组化法检测卵巢癌组织及正常卵巢组织中TIM蛋白表达,分析TIM表达与卵巢癌病理特征的相关性。选取卵巢癌SKOV3细胞,随机分为空白对照组、siRNA对照组和TIM沉默(TIM siRNA)组。采用Western blot检测TIM、Bcl-2、Bax、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9、caspase-3和caspase-9蛋白的表达,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell小室实验检测细胞侵袭能力。结果:TIM蛋白在正常卵巢组织中呈阴性表达,在卵巢癌组织中呈阳性表达。卵巢癌组织中TIM阳性表达率(84.0%)显著高于正常卵巢组织(10.0%;P<0.01)。TIM表达与卵巢癌分化程度、浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关(P<0.05),而与年龄和病理类型无关(P>0.05)。TIM siRNA组中TIM、MMP-2、MMP-9和Bcl-2的蛋白表达显著低于空白对照组和siRNA对照组(P<0.01),而Bax、caspase-3和caspase-9的蛋白表达显著高于空白对照组和siRNA对照组(P<0.01);空白对照组和siRNA对照组之间TIM、MMP-2、MMP-9、Bcl-2、Bax、caspase-3和caspase-9蛋白表达的差异无统计学显著性(P>0.05)。TIMsiRNA组的细胞凋亡率显著高于空白对照组和siRNA对照组(P<0.01);空白对照组和siRNA对照组之间细胞凋亡率的比较差异无统计学显著性(P>0.05)。TIM siRNA组的细胞穿膜数显著低于空白对照组和siRNA对照组(P<0.01);空白对照组和siRNA对照组之间细胞穿膜数的差异无统计学显著性(P>0.05)。结论:利用siRNA沉默卵巢癌SKOV3细胞中TIM表达,可促进细胞凋亡,抑制细胞侵袭。 展开更多
关键词 卵巢癌 timeless蛋白 生物钟 细胞凋亡 细胞侵袭
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昼夜节律蛋白Timeless在肿瘤生长与侵袭中的作用
9
作者 张益梦 邹博亮 +1 位作者 李源 潘燕 《生理科学进展》 2021年第6期461-465,共5页
Timeless不仅是一种重要的生物钟蛋白,还是连接生物节律与细胞周期的关键分子。近年来,Timeless在癌症中的作用越来越受到关注。流行病学研究显示,Timeless在大多数癌症中高表达,且其高表达可能预示着更差的肿瘤分期、更强的肿瘤细胞侵... Timeless不仅是一种重要的生物钟蛋白,还是连接生物节律与细胞周期的关键分子。近年来,Timeless在癌症中的作用越来越受到关注。流行病学研究显示,Timeless在大多数癌症中高表达,且其高表达可能预示着更差的肿瘤分期、更强的肿瘤细胞侵袭性和更差的患者五年生存率,还可能与肿瘤的复发和化疗药物的耐药有关。细胞实验及动物实验研究发现,Timeless高表达可以通过延迟细胞衰老、避免细胞周期停滞等方式促进肿瘤的生长,并通过与多种已知的癌基因相互作用来增强癌细胞的侵袭性。本文就Timeless在维持昼夜节律和细胞周期中的作用及其促进肿瘤发生发展的分子机制做一综述。 展开更多
关键词 timeless 昼夜节律 细胞周期 癌症
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干扰Timeless表达对SGC-7901胃癌细胞凋亡与周期及β-catenin表达的影响
10
作者 李翔 《当代医学》 2020年第9期83-87,共5页
目的探讨干扰Timeless表达对SGC-7901胃癌细胞凋亡、周期及β-连环蛋白(β-catenin)表达的影响。方法合成Timeless的siRNA,通过Lipofectamine?3000转染SGC-7901细胞,检测并选择干扰效率高的siRNA用于Timeless干扰组细胞造模。设置分组:... 目的探讨干扰Timeless表达对SGC-7901胃癌细胞凋亡、周期及β-连环蛋白(β-catenin)表达的影响。方法合成Timeless的siRNA,通过Lipofectamine?3000转染SGC-7901细胞,检测并选择干扰效率高的siRNA用于Timeless干扰组细胞造模。设置分组:空白组,siRNA-对照组和siRNA-Timeless组。Realtime PCR及western blot法检测Timeless、β-catenin mRNA及蛋白表达,MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期。结果Realtime PCR及western blot法均证实Timesless-siRNA-2转染效率最高。与空白组及siRNA-对照组比较,siRNA-Timeless组Timeless、β-catenin mRNA及蛋白表达量下调(P<0.01),细胞活力降低(P<0.01),细胞凋亡率升高(P<0.01),细胞周期阻滞于S期(P<0.01)。结论干扰Timeless表达能显著诱导SGC-7901胃癌细胞凋亡,抑制细胞增殖,与下调β-catenin表达有关。 展开更多
关键词 timeless SGC-7901胃癌细胞 凋亡 周期 Β-CATENIN
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Everything Is Timelessly Connected: Metaphysics, Physics, Consciousness, Spacetime Travel, DNA, and the Dry Bones Prophesy (Ezekiel Ch. 37)
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作者 Yosef Joseph Segman 《Natural Science》 CAS 2022年第7期265-288,共24页
This paper provides a perception that all things are connected. Starting with the perception of Metaphysics and how matter exists out of total void, complementary matter, or dark matter, the incompleteness of Einstein... This paper provides a perception that all things are connected. Starting with the perception of Metaphysics and how matter exists out of total void, complementary matter, or dark matter, the incompleteness of Einstein relativistic theory. Multi spacetime universes and the jump drive for jumping within and between spacetime universes. Warp drive for space travel. DNA as sequence of momentary frequencies and how it related to Ezekiel’s dry bones prophecy. The outcome of neural patterns as cords of consciousness, consciousness as the collection of all cords of consciousness and the lack of uniqueness of individual consciousness. Finally, all things are cords of consciousness. 展开更多
关键词 VOID COMPLEMENTARY Void Complementary MATTER Complementary Matter METAPHYSICS CONSCIOUSNESS Neural Patterns Time timeless Synchronization Order Disorder Universe Group Representation Jump Drive Warp Drive Frequency Phase Fourier Transform Schrödinger Representation Gabor Transform DNA Hologram Virtual2
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A Timeless Masterpiece─Bertolt Brecht and His "Three Penny Opera" in China
12
《China & The World Cultural Exchange》 1999年第2期35-38,共4页
关键词 in China Three Penny Opera Bertolt Brecht and His A timeless Masterpiece
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Timelessness and Time Dependence of Human Consciousness From a Scientific Western Viewpoint
13
作者 Franz Klaus Jansen 《Journal of Philosophy Study》 2014年第8期525-536,共12页
关键词 西方科学 科学观 时间依赖 人类意识 东方哲学 物质世界 达尔文理论 时间变化
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笔谈:中国教育家精神与现代教育 被引量:1
14
作者 杜时忠 冯建军 +1 位作者 刘铁芳 李建华 《现代大学教育》 北大核心 2024年第1期1-13,111,共14页
2023年教师节前夕,习近平总书记致信全国优秀教师代表时勉励全国广大教师“以教育家为榜样,大力弘扬教育家精神”,并从理想信念、道德情操、育人智慧、躬耕态度、仁爱精神、弘道追求六个方面提出了具体要求。这不但为教育现代化提供了... 2023年教师节前夕,习近平总书记致信全国优秀教师代表时勉励全国广大教师“以教育家为榜样,大力弘扬教育家精神”,并从理想信念、道德情操、育人智慧、躬耕态度、仁爱精神、弘道追求六个方面提出了具体要求。这不但为教育现代化提供了精神支柱,而且为建设教育强国提供了行动指南。基于此,我们不能停留于对具体要求的阐释,必须从宏观与微观的结合上正确把握中国教育家精神的深刻内涵、整体特质和时代气息,特别是要同现代教育紧密结合起来。本期的四篇文章分别从中国教育家精神的内构性特点、教育家精神的内在理路、教育家与时代精神、教育家精神的超越性向度等视角各抒己见,但又彼此关联,为中国教育家精神的培育提供新的思路。 展开更多
关键词 教育家 时代精神 中国教育家精神 教育伦理 超越性 育人之道
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节律分子Timeless调控糖代谢重编程促进肝癌细胞生长 被引量:4
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作者 张建省 袁鹏 +5 位作者 颜昭勇 鲁睿 李波 耿晓恩 牟佼 张洪新 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期499-505,共7页
目的探讨节律分子Timeless对肝癌细胞生长的影响及其分子机制。方法采用肝癌公共数据信息分析Timeless在肝癌及癌旁组织中的表达;在高表达Timeless的肝癌细胞株MHCC97H和低表达Timeless的肝癌细胞株MHCC97L中,分别用RNA干扰和真核表... 目的探讨节律分子Timeless对肝癌细胞生长的影响及其分子机制。方法采用肝癌公共数据信息分析Timeless在肝癌及癌旁组织中的表达;在高表达Timeless的肝癌细胞株MHCC97H和低表达Timeless的肝癌细胞株MHCC97L中,分别用RNA干扰和真核表达质粒方法沉默或上调肝癌细胞中Timeless的表达后,采用实时荧光定量PCR和Westernblot检测干扰和过表达Timeless的效果以及Timeless下游分子的表达。采用葡萄糖摄取实验、乳酸检测实验、细胞外液pI-I检测实验、细胞氧耗实验和MTS实验,分析Timeless对肝癌细胞糖酵解、氧化磷酸化和细胞生长的影响。结果肝癌组织中TimelesS的表达高于癌旁组织(P〈0.05)。敲低Timeless后.Timeless干扰组1和Timeless干扰组2细胞葡萄糖相对摄取水平分别为0.510±0.119和0.508±0.099,与对照组比较,差异均有统计学意义(均P〈0.05):Timeless过表达组细胞葡萄糖相对摄取水平为1.953±0.324,与空质粒组比较,差异有统计学意义(P〈0.05)。Timeless干扰组1和Timeless干扰组2细胞乳酸产生相对水平分别为0.579±0.096和0.550±0.120,与对照组比较.差异有统计学意义(P〈0.05):Timeless过表达组细胞乳酸产生相对水平为1.463±0.179,与空质粒组比较,差异有统计学意义(P〈O.05)。Timeless干扰组1和Timeless干扰组2细胞外pH值为7.390+0.035和7.370±0.060,与对照组比较,差异有统计学意义(P〈0.05);Timeless过表达组细胞外pH值为7.130±0.031,与空质粒组比较,差异有统计学意义(P〈0.05)。Timeless干扰组1和Timeless干扰组2细胞耗氧率分别为3.686±0.389和3.955±0.431,与对照组(1.690±0.297)比较,差异有统计学意义(P〈0.05);Timeless过表达组细胞耗氧率为1.302+0.336,与空质粒组(3.185±0.262)比较,差异有统计学意义(P〈0.05)。Timeless抑制p53的表达。与Timeless+p53对照组比较,Timeless+p53干扰组细胞葡萄糖相对摄取水平、乳酸产生相对水平、细胞外培养液pH和细胞氧耗率差异均无统计学意义(均P〉0.05);与Timeless+p53空质粒组比较,Timeless+p53过表达组细胞葡萄糖相对摄取水平、乳酸产生相对水平、细胞外培养液pH和细胞氧耗率差异均无统计学意义(均P〉0.05)。Timeless通过抑制p53的表达促进肝癌细胞生长。结论Timeless通过抑制p53的表达促进细胞糖酵解和抑制氧化磷酸化,进而促进肝癌细胞生长。 展开更多
关键词 肝细胞 timeless P53 糖代谢重编程 生长
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CRISPR/Cas9-based knockout reveals that the clock gene timeless is indispensable for regulating circadian behavioral rhythms in Bombyx mori 被引量:1
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作者 Moses Addo Nartey Xia Sun +2 位作者 Sheng Qin Cheng-Xiang Hou Mu-Wang Li 《Insect Science》 SCIE CAS CSCD 2021年第5期1414-1425,共12页
Circadian rhythms,which are ubiquitous and adaptive,occur across all species,from microbes to humans,in which they organize and modify behavior and physiology.timeless(im)is a canonical clock gene.The core composition... Circadian rhythms,which are ubiquitous and adaptive,occur across all species,from microbes to humans,in which they organize and modify behavior and physiology.timeless(im)is a canonical clock gene.The core composition of the Drosophila melanogaster endogenous circadian clock has been extensively investigated;however,in lepidopteran insects,including Bombyr mori,the mechanism is complicated and little is known regarding the participation of tim in the negative feedback loop responsible for behavioral activities.To arrive at a comprehensive understanding of the role of tim in the B.mori endogenous circadian clock,we exploited the clustered regularly interspaced short palindromic repeats(CRISPR)/CRISPR-associated protein 9 gene editing system.We attermpted to elucidate the functions of tim in the circadian clock of B.mori using Bmtim mutants.The knockouts affected two circadian behavioral activities:adult emergence and embryo hatching rhythms.Quantitative real-time polymerase chain reaction results confirmed that tim-knockouts induced relative reductions in the expression levels,and thereby the oscillation amplitudes,of Bmper and Bmclk messenger RNAs during both the photophase and scotophase.Additionally,the daily rhythmic expression of Bmndbt was up-regulated in the photophase and downregulated in the scotophase in a tim-knockout.Our study reveals that tim is integral to the B.mori circadian clock and may be involved in regulating eclosion and hatching rhythms. 展开更多
关键词 Bombyx mori circadian trhythm CRISPR/Cas9 ECLOSION HATCHING JKT_CYCLE timeless
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Functional analysis of the circadian clock gene timeless in Tribolium castaneum
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作者 Cheng-Jun Li Xiao-Pei Yun +1 位作者 Xiao-Juan Yu Bin Li 《Insect Science》 SCIE CAS CSCD 2018年第3期418-428,共11页
Circadian rhythms are endogenous oscillations with a period of about 24 h driven by a circadian clock. So far, variable oscillators have been found in insects. To explore the circadian clock of Tribolium castaneum, we... Circadian rhythms are endogenous oscillations with a period of about 24 h driven by a circadian clock. So far, variable oscillators have been found in insects. To explore the circadian clock of Tribolium castaneum, we cloned the clock gene timeless (Tctimeless). Its open reading frame is 3240 bp in length and consists of 10 exons. Tctimeless' is highly expressed in the late pupal stage. Tissue-specific expression analysis in late adult stages revealed high expression of Tctimeless in the head, epidermis, fat body and accessory glands. Silencing of Tctimeless by RNA interference (RNAi) at the late larval stages caused a failure to initiate eclosion. Tctimeless knockdown in late pupal stages led to a gender-independent decline in egg production and progeny survival. As a core clock gene, Tctimeless exhibited one expression peak in the middle of the circadian day. Knockdown of Tctimeless disrupted daily expression patterns of Tccycle, Tcclock, Tcperiod and itself, while Tctimeless and Tcperiod expression patterns over the circadian day were also perturbed when Tccycle or Tcclock is suppressed by RNAi. This study identified a complex transcriptional relationship among circadian clock genes in T. castaneum. 展开更多
关键词 circadian rhythms CLOCK cycle ECLOSION REPRODUCTION timeless
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粘虫生物钟timeless基因的克隆及时空和昼夜表达分析 被引量:1
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作者 冀佳悦 张蕾 +3 位作者 程云霞 罗礼智 仵均祥 江幸福 《植物保护学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期670-678,共9页
为明确生物钟timeless基因对粘虫Mythimna separata迁飞、交配等周期性活动的调节作用,利用PCR技术克隆了粘虫timeless基因,命名为Mstim,采用生物信息方法分析其序列特征,使用实时荧光定量PCR技术检测该基因在不同发育阶段、组织及昼夜... 为明确生物钟timeless基因对粘虫Mythimna separata迁飞、交配等周期性活动的调节作用,利用PCR技术克隆了粘虫timeless基因,命名为Mstim,采用生物信息方法分析其序列特征,使用实时荧光定量PCR技术检测该基因在不同发育阶段、组织及昼夜的表达特征。结果表明,Mstim的c DNA全长为3 132 bp,编码1 043个氨基酸,其预测的蛋白质Ms TIM分子量为117 k D,等电点5.14,具有timeless保守的PIS、NLS等结构域,与甜菜夜蛾Spodoptera exigua及棉铃虫Helicoverpa armigera的氨基酸序列相似性高达97%。荧光定量PCR结果显示成虫期的Mstim表达量最高,卵期和蛹期次之,6龄幼虫的表达量最低;在雌、雄蛾中均以触角及头部中的表达量较高,飞行肌、足及生殖腺中的表达量较低。粘虫雌、雄蛾触角中Mstim的昼夜表达模式相似,均为光期表达量低于暗期,光期5 h的表达量最低,光期末期逐渐升高,至暗期后3 h达到最高值,暗期末期表达量开始下降。说明Mstim基因在粘虫中的表达不仅具有发育时期和组织的时空特异性,而且表现出明显的昼夜特性,推测其可能参与粘虫生长发育和迁飞与生殖等行为、生理节律的调节。 展开更多
关键词 粘虫 永恒蛋白基因 克隆 时空及昼夜表达
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Timeless Entertainment
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《空中英语教室(高级版.彭蒙惠英语)》 2009年第10期24-25,共2页
关键词 英语学习 学习方法 阅读 timeless Entertainment》
原文传递
Timeless腕表系列——如梦初醒般的简约
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《大视野》 2008年第3期58-58,共1页
如梦初醒般简约设计的Timeless腕表拥有充满魅惑力的椭圆形表盘,如同女性身体曲线一般优美的Timeless腕表以其简练而婉约的风格使您过目难忘。
关键词 简约设计 timeless
原文传递
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