Preventive effect of nasal Timosaponin BII-loaded temperature-/ionsensitive in situ hydrogels on Alzheimer’s disease

Objective:To study the preventive effect of Timosaponin BII(T-BII)-loaded temperature/ion-sensitive nasal in situ hydrogels(ISGs)on Alzheimer's disease(AD),its preparation technology,characteristics and in vivo effects were evaluated.Methods:The morphological and rheological properties were evaluated.The preventive effects of T-BII ISG on scopolamine-induced AD in mice were determined with the index of muscarinicreceptor 1(M1)expression and pathological changes.Results:Results revealed that T-BII ISG significantly increased the content of M1 choline receptors in the hippocampus of mice and ameliorated the damage incurred to the hippocampal cornu ammonis 1(CA1)area.Conclusion:T-BII ISGs is a reasonable and convenient method of exerting an obvious preventive effect on mice with AD induced by scopolamine.This,thereby,lays forth a new treatment option for preventing AD.

HPLC-ELSD法测定清肺抑火丸中知母皂苷BII的含量

目的建立高效液相色谱-蒸发光散射检测器测定清肺抑火丸中知母皂苷BII含量的方法。方法采用Diamonsil-C8色谱柱,柱温为30℃;以乙腈-水(21∶79)为流动相,流速为1.0 mL.min-1;蒸发光散射检测器检测,漂移管温度为80℃,载气压力30 psi。结果在选定的色谱条件下,以知母皂苷BII峰面积的常用对数(Y)对浓度的常用对数(X)进行线性回归,回归方程为Y=1.7850X+1.9723,线性范围为8.2～82.0μg.mL-(1r=0.9997),知母皂苷BII的平均回收率为101.2%,RSD为1.05%(n=6)。结论该法可用于清肺抑火丸中知母皂苷BII的含量测定。

HPLC-ELSD同时测定知母药材中4种主要皂苷的含量

目的建立同时测定知母药材中4种主要皂苷成分的HPLC-ELSD方法。方法采用Agilent Zorbax SB-C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以水(冰醋酸调节pH 3.3)(A)-乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱,0～8 min,12%～23%B;8～25 min,23%B;25～35 min,23%～45%B;35～40 min,45%～95%B。蒸发光散射检测器漂移管温度55℃,以氮气为雾化气,压力为4.0 Bar。结果知母皂苷B、知母皂苷E1、知母皂苷BII、知母皂苷A III浓度分别在42.10～252.6μg/ml(r=0.9993)、48.80～292.8μg/ml(r=0.999 1)、192.2～1 153μg/ml(r=0.999 7)、8.512～85.12μg/ml(r=0.998 5)的范围内呈良好的线性关系。4种成分精密度试验RSD<1%,48 h内稳定性RSD<1%,加样回收率为96.04%～102.8%。结论该含量测定方法简便,分离效果好,能同时测定知母皂苷B、知母皂苷E1、知母皂苷BII和知母皂苷AIII 4种有效成分的含量,结果准确可靠。

HPLC-ELSD法同时测定知母总皂苷中知母皂苷BⅡ和知母皂苷BⅢ

目的建立同时测定知母总皂苷中知母皂苷BII和知母皂苷BIII含量的HPLC-ELSD法。方法 Shim-pack VP-ODS C18色谱柱(4.6mm×250 mm,5μm);流动相:乙腈-0.05%甲酸溶液,梯度洗脱;流速:1.0 ml/min;柱温:30℃;载气流速:3.0 L/min;漂移管温度:85℃;进样量:20μl。结果知母皂苷BII与知母皂苷BIII分离度良好,线性关系良好,平均回收率分别为98.7%和97.5%。结论该方法简便,准确,可靠,对知母总皂苷的质控和评价具有参考价值。

酒炙知母炮制工艺研究

目的研究酒炙知母的炮制工艺,为酒知母质量标准研究提供理论依据。方法以芒果苷含量、知母皂苷BⅡ含量为指标,以炒制时间、闷润时间、炒制温度为考察的因素,采用正交实验方法,优选出知母最佳酒炙工艺。结果优选出知母最佳酒炙的工艺为:称取知母100g,加18g黄酒,拌匀,闷润0.5小时,80℃下炒制20min,取出,晾干。结论本实验可为酒炙知母炮制工艺的进一步标准化研究提供参考。

知母皂苷BⅡ的提取及大孔树脂纯化工艺研究

目的:优选知母药材中知母皂苷BⅡ的提取纯化工艺。方法:以知母皂苷BⅡ提取率为考察指标,采用L9(34)正交试验,对知母皂苷BⅡ回流提取工艺进行优化;并考察8种大孔树脂对知母皂苷BⅡ的吸附和解析性能,选出最优树脂,确定最佳纯化工艺条件。结果:正交试验表明,知母皂苷BⅡ的最佳提取工艺为:50%乙醇加热回流提取2次,每次2h,溶剂用量分别为8.5倍、6倍、6倍。通过对树脂的考察,优选出对知母皂苷BⅡ吸附率和解析率都很高的HPD100树脂,上样浓度为0.23g/mL,最大上样量为4/5BV,以3BV水和6BV的20%乙醇洗脱杂质后,用5BV的50%乙醇洗脱得到质量分数为50%左右的知母皂苷BⅡ。结论:优选得到的提取工艺稳定可行,适合知母皂苷BⅡ的工业化提取生产。

基于客观赋权法结合正交优选玉女煎提取工艺

目的 基于现代制剂和古方标准煎液的质量一致性研究,优选玉女煎现代提取工艺参数。方法 以玉女煎指标成分转移率和浸膏得率为评价指标,建立15批玉女煎标准煎液关键参数的范围,以其为标准,通过单因素和正交试验对玉女煎现代制剂工艺参数进行筛选。在分析中采用客观赋权法,确定评价指标的权重系数计算综合评分,并以15批标准煎液平均值综合评分为基准值,设计公式最终评分(Y)=1/|综合评分-15批标准煎液平均值综合评分|对综合评分进行预处理作为正交试验最终评分,筛选玉女煎提取最佳工艺。结果 传统计算方法筛选的工艺制备的水提液浸膏得率超出标准煎液范围。通过客观赋权法和优化计算方式的实验显示各项指标均在15批标准煎液的范围内,筛选的玉女煎提取工艺为加水量10倍量,浸泡15 min,提取30 min。结论 按照经方现代制剂的研究要求,采用客观赋权法和优化的计算方式筛选的玉女煎提取工艺制备提取液更接近于玉女煎标准煎液,为经典名方工艺筛选提供了新的思路和方法。

三生合欢饮减压提取工艺研究

目的探索减压提取在中药复方三生合欢饮制备中的应用优势。方法首先以辛弗林、厚朴酚等为评价指标,获得三生合欢饮减压提取法的工艺参数,然后比较了减压与常压水提取的有效成分提取率、浸出物得率、挥发性成分、浸膏粉粉体性质,以及枳实和厚朴提取前后的微观结构。结果减压提取的优化工艺为真空度0.08 MPa(温度60℃),料液比为1∶10,提取2次,每次30 min;与常压相比,减压提取辛弗林提取率提高了约13%,厚朴酚提取率提高了约10%,知母皂苷BII提取率与常压提取相当;干膏收率降低了约33%。挥发性成分比较表明,减压提取所得挥发成分基本与常压提取相同,但其量比常压提取低。浸膏粉与常压水提醇沉粉体的流动性、吸湿性相似。厚朴、枳实的扫描电镜图表明,减压提取未使细胞壁破裂,细胞呈现排列紊乱、皱缩,但完整性比常压提取好。结论三生合欢饮采用减压提取从能耗、提取效果、对后续制剂的便利上看均优于传统的常压提取方法,可以推广到中药复方制剂的提取工艺中。

知母药材和饮片含量测定修订研究

目的:建立全面反映和控制知母药材和饮片质量状况的含量测定方法。方法:HPLC-UV法测定知母中芒果苷含量,采用Kromasil C18柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为乙腈-0.2%醋酸水溶液(15∶85),流速1mL·min-1,检测波长258nm;HPLC-ELSD法测定知母皂苷BII含量,采用C8柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为乙腈-水(25∶75),流速0.8mL·min-1,蒸发光散射检测器蒸发温度为105℃,雾化气体流速为2.7L·min-1。结果:芒果苷在8.4～420μg·mL-1范围内浓度与峰面积呈良好的线性关系(r2=0.9997),平均回收率(n=6)为103.2%,RSD为0.7%。知母皂苷BII在101.2～1012μg·mL-1范围内其浓度的常用对数与峰面积的常用对数呈良好的线性关系(r2=0.9993),平均回收率(n=6)为104.0%,RSD为2.2%。不同操作者测定两种成分,含量测定结果偏差RSD均小于3.0%。结论:本文所建立的含量测定方法具有较高的专属性,准确、简便、耐用性好,是控制知母药材和饮片质量的较理想方法。

消渴清颗粒UPLC-PDA-ELSD指纹图谱的建立及5个主要成分的测定

目的建立消渴清颗粒的UPLC-PDA-ELSD指纹图谱研究方法,并对新芒果苷、芒果苷、知母皂苷BII、巴马汀和小檗碱进行定量测定,为消渴清颗粒的质量控制提供依据。方法采用RP-UPLC-PDA-ELSD法,分别以芒果苷和知母皂苷BII为参照峰,确定了23个紫外检测共有指纹峰和10个蒸发光检测共有指纹峰,建立了消渴清颗粒的数字化定量指纹图谱,并以三级系统指纹定量法鉴定28批消渴清样品的质量等级。采用外标法,测定了28批样品中新芒果苷、芒果苷、知母皂苷BII、巴马汀和小檗碱的量。结果 19批消渴清颗粒合格,9批不合格;8批消渴清颗粒中5个主要成分的量有异常,定量测定与指纹图谱结果具有一致性。结论 UPLC指纹图谱和5个成分的定量测定方法准确、稳定、简便,可作为消渴清颗粒的质量控制依据。

整合指纹图谱与多成分含量测定的酸枣仁汤质量评价研究

目的 利用HPLC-DAD-ELSD分析技术,建立酸枣仁汤指纹图谱结合多成分含量测定方法,为其质量控制提供参考。方法 采用Phenomenex C色谱柱(250 mm×4.6 mm,5.0μm),以0.1%甲酸水溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱,体积流量为1.0 mL/min,柱温30℃,在282 nm和335 nm检测波长下,分别以芒果苷和斯皮诺素为参照峰;ELSD漂移管温度105℃,载气体积流量2.5 L/min条件下,以酸枣仁皂苷A为参照峰,采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统对10批自制酸枣仁汤进行相似度评价;同时建立13个指标成分含量测定方法,应用于市售产品及自制样品的质量评价。结果 10批自制酸枣仁汤的平均出膏率为21.57%,在282 nm和335 nm分别标定了5个和4个共有峰,相似度分别为0.907~0.999、0.926~0.999;HPLC-ELSD指纹图谱中标定了4个共有峰,相似度为0.946~0.999。13种指标成分在各自的线性范围内线性关系良好(r>0.995 9),平均加样回收率为93.69%,RSD值平均为2.04%。10批不同剂型市售产品中新芒果苷、乌药碱、芒果苷、异芒果苷、甘草苷、斯皮诺素、阿魏酸、6′′′-阿魏酰斯皮诺素、异甘草苷、知母皂苷BII、酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷B和甘草酸的质量分数分别为0.30~3.38、0.02~0.20、0.27~6.04、0.33~1.38、1.54~12.02、0.16~0.87、0.16~1.27、0.04~0.35、0.25~3.12、3.66~20.92、0.36~0.98、0.32~0.89、4.90~36.37 mg/g,波动范围大。自制酸枣仁汤13种成分含量波动范围小。结论 建立了酸枣仁汤HPLC-DAD-ELSD指纹图谱与多成分含量测定相结合的质量评价方法,方法准确、可靠,为市售酸枣仁汤产品的质量控制和体内药动学研究提供参考。

HPLC-ELSD法测定周络通胶囊中知母皂苷BⅡ

目的建立HPLC-ELSD法测定周络通胶囊中知母皂苷BⅡ的方法。方法采用ESAquaSepC18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,以乙腈-水(24:76)为流动相,体积流量1.0mL/min;柱温30℃;ELSD检测器,漂移管温度为75℃,加热级别为66%,载气压力为172.4kPa。结果知母皂苷BII在0.62～7.79μg呈良好的线性关系,平均回收率为98.75%,RSD1.77%。结论该方法简便快捷、准确可靠,为周络通胶囊的质量控制提供了依据。