期刊文献+
共找到11篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
Mini-Tn10转座子构建欧文氏杆菌突变体的研究 被引量:1
1
作者 石岩 刘正初 +2 位作者 徐君飞 张居作 李炫 《湖北农业科学》 北大核心 2010年第1期12-16,共5页
构建细菌突变体是发现新基因、分析基因功能、了解某些生物机理的重要途径。本研究通过转座子Mini-Tn10对迄今报道草本纤维提取效率最高的菌株胡萝卜软腐欧文氏杆菌(Erwinia carotovor)变异菌株CXJZU120进行随机突变,获得5 523个突变体... 构建细菌突变体是发现新基因、分析基因功能、了解某些生物机理的重要途径。本研究通过转座子Mini-Tn10对迄今报道草本纤维提取效率最高的菌株胡萝卜软腐欧文氏杆菌(Erwinia carotovor)变异菌株CXJZU120进行随机突变,获得5 523个突变体。采用非纤维素降解实效法和水解圈法等功能性鉴定,筛选出3个非纤维素降解活性降低或丧失的突变体,为深入研究非纤维素降解机理,寻找与非纤维素降解相关基因并构建新一代高效菌株奠定了基础。 展开更多
关键词 欧文氏杆菌 转化 转座子 tn10 突变体
下载PDF
Tn10介导的Bit cryIVA基因在荧光假单胞菌染色体中的整合及表达
2
作者 刘国奇 蒋如璋 张自立 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1999年第6期715-720,共6页
苏云金杆菌以色列亚种的杀虫晶体蛋白基因cryIVA被亚克隆到自杀型转座子质粒载体pLOF/Km的TN10中,构建了转座子质粒PLF97A。通过电转化/转座作用,cryIVA随Tn10转座并整合到荧光假单胞菌FP.DE2染色体中,构建了工程菌株FP.DE202。S... 苏云金杆菌以色列亚种的杀虫晶体蛋白基因cryIVA被亚克隆到自杀型转座子质粒载体pLOF/Km的TN10中,构建了转座子质粒PLF97A。通过电转化/转座作用,cryIVA随Tn10转座并整合到荧光假单胞菌FP.DE2染色体中,构建了工程菌株FP.DE202。Southernblotting验证了cryIVA在FP.DE202中整合在不同的位点。Westernblotting证明了cryIVA在F.P.DE202中得到了表达,其产物对双翅目害虫韭菜迟眼蕈蚊的3龄幼虫有较强的毒杀效果。 展开更多
关键词 tn10 cryIVA基因 转座子质粒 工程菌株 基因表达
下载PDF
利用mini-Tn10转座子文库筛选鳗弧菌M3表型发生变化的基因
3
作者 李倩 李贵阳 +1 位作者 李杰 莫照兰 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2020年第5期160-167,共8页
为了寻找影响鳗弧菌(Vibrio anguillarum)表型变化的基因,本研究使用转座子mini-Tn10(pLOF/Kana)构建了鳗弧菌M3突变株文库,筛选影响表型变化的菌株及相关基因,证明这些表型变化的突变子与毒力存在一定的相关性。对M3突变文库的1152突... 为了寻找影响鳗弧菌(Vibrio anguillarum)表型变化的基因,本研究使用转座子mini-Tn10(pLOF/Kana)构建了鳗弧菌M3突变株文库,筛选影响表型变化的菌株及相关基因,证明这些表型变化的突变子与毒力存在一定的相关性。对M3突变文库的1152突变子进行筛选,获得泳动能力改变的突变子1个(编号为6G_1),酪蛋白酶活性发生改变的突变子3个(编号为5A_11、7B_12和7E_12),明胶酶活性发生改变的突变子1个(编号为7H_1),以及菌膜形成能力发生显著变化的突变子3个(编号为5E_2、6A_2和6E_12)。对转座子插入位点进一步分析显示,一个磷酸二酯酶相关基因突变引起泳动能力增强(P<0.05),leuD、rseB和thiQ突变引起酪蛋白酶活性显著减弱(P<0.05),potD突变引起明胶蛋白酶活性显著减弱(P<0.05),leuO、ilvH和grpB的突变引起菌膜形成能力明显减弱(P<0.05)。对这些表型变化的突变子进行毒力感染,发现野生型M3是6G_1突变子的半数致死剂量(Lethal dose 50%,LD50)的2.04倍,该突变子毒力相对增强。5A_11、7B_12和7E_12的突变子LD50分别为野生型M3的2.96、3.25和3.36倍。7H_1的LD50是野生型M3的1.25倍,5E_2、6A_2和6E_12的LD50分别为野生型M3的3.34、4.08和1.84倍,这些突变子毒力相对减弱。本研究结果为进一步阐明鳗弧菌的发病机制提供了理论基础。 展开更多
关键词 鳗弧菌 mini-tn10转座子 突变文库 表型 基因
下载PDF
利用mini-Tn10转座系统研究芽孢杆菌生物被膜形成相关基因 被引量:4
4
作者 高卫华 郝建安 +4 位作者 夏思源 徐海津 白艳玲 张秀明 乔明强 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期345-349,共5页
生物被膜对于细菌抵御外界环境的侵害具有重要的意义,其形成和发展过程受到很多基因的调控和影响。本文利用mini-Tn10转座系统对野生型解淀粉芽孢杆菌NK10.BAhjaWT进行突变库的构建并随机选择400个转化子进行验证,突变效率达到90%以上... 生物被膜对于细菌抵御外界环境的侵害具有重要的意义,其形成和发展过程受到很多基因的调控和影响。本文利用mini-Tn10转座系统对野生型解淀粉芽孢杆菌NK10.BAhjaWT进行突变库的构建并随机选择400个转化子进行验证,突变效率达到90%以上。从突变库中筛选到4株生物被膜缺陷株。经过鉴定,上述突变株citB、citG、gpsA和yvfB基因发生插入突变。其中citB、citG和gpsA均与能量代谢相关,yvfB功能未知。本实验证明mini-Tn10转座系统对于芽孢杆菌突变库的构建具有高效和稳定的优点,是研究基因功能的有利工具。 展开更多
关键词 生物被膜 解淀粉芽孢杆菌 mini—tn10转座系统
原文传递
PhoR/PhoP双因子调控系统在枯草芽孢杆菌NCD-2菌株解磷能力中的功能分析 被引量:4
5
作者 李晶 郭庆港 +1 位作者 李社增 马平 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 2009年第1期55-61,共7页
枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)NCD-2能有效的防治棉花黄萎病,同时还具有降解蛋黄卵磷脂的能力。将含有mini-Tn10转座子的pHV1249质粒电击转入NCD-2菌株中,51℃高温诱导转座子插入突变,构建了NCD-2菌株的解磷突变子库,筛选到3株丧失... 枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)NCD-2能有效的防治棉花黄萎病,同时还具有降解蛋黄卵磷脂的能力。将含有mini-Tn10转座子的pHV1249质粒电击转入NCD-2菌株中,51℃高温诱导转座子插入突变,构建了NCD-2菌株的解磷突变子库,筛选到3株丧失解磷能力的突变子。运用染色体步移技术对突变株M216中转座子插入位点基因的侧翼序列进行克隆和序列分析,结果表明丧失解磷能力突变株中转座子插入基因与B.subtilis168菌株中PhoR基因的相似率达到98%,Southern杂交验证突变株中转座子为单拷贝插入。将PhoR基因克隆到pHY300PLK质粒上构建重组质粒电击转化M216进行功能互补验证,互补菌株部分恢复了解磷能力,表明NCD-2菌株中PhoR基因与其降解卵磷脂能力具有相关性。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 转座子mini-tn10 降解卵磷脂 PhoR基因
下载PDF
转座子随机突变芽孢杆菌的研究进展 被引量:3
6
作者 马欣 高学文 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2015年第3期394-403,共10页
近年来,随着功能基因组学的发展,转座子随机突变技术因操作简便易行而被广泛应用。某些具有随机转座特性的转座子及其衍生物,已成为发现新基因、克隆功能基因、发掘已知基因的新功能以及研究蛋白功能的有效工具,其中转座子Tn917、Tn10及... 近年来,随着功能基因组学的发展,转座子随机突变技术因操作简便易行而被广泛应用。某些具有随机转座特性的转座子及其衍生物,已成为发现新基因、克隆功能基因、发掘已知基因的新功能以及研究蛋白功能的有效工具,其中转座子Tn917、Tn10及mariner类家族转座元件已被改造并成功应用于芽孢杆菌突变体库的构建及基因功能的研究中。本文介绍上述3种转座子的结构、转座特点及在芽孢杆菌中的应用,并分析了mariner类家族转座元件的优势及应用前景。 展开更多
关键词 转座子 TN917 tn10 MARINER 芽孢杆菌
下载PDF
利用枯草杆菌整合表达嗜铬粒蛋白抗真菌片段 被引量:4
7
作者 李瑞芳 罗进贤 +3 位作者 张添元 贺国安 吴江雪 官文俊 《中山大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期73-75,共3页
为实现CGA1-76片段基因在枯草杆菌中的稳定表达,将CGA1-76片段基因的表达元件重组到枯草杆菌转座子质粒pHV1249微转座子mini_Tn10内,利用mini_Tn10将CGA1-76片段基因的表达元件整合到枯草杆菌DB1342染色体上,用氯霉素和红霉素筛选枯... 为实现CGA1-76片段基因在枯草杆菌中的稳定表达,将CGA1-76片段基因的表达元件重组到枯草杆菌转座子质粒pHV1249微转座子mini_Tn10内,利用mini_Tn10将CGA1-76片段基因的表达元件整合到枯草杆菌DB1342染色体上,用氯霉素和红霉素筛选枯草杆菌转座工程菌DB1342(TnSVTQ)。DB1342(TnSVTQ)在无选择压力条件下经10d连续传代培养,转座子内氯霉素抗性丢失率为0%,说明转座子稳定整合在DB1342染色体上。SDS_PAGE和免疫印迹分析结果表明,在蔗糖诱导下,CGA1-76片段基因在DB1342(TnSVTQ)中获得表达,产物被分泌到细胞外。孔穴琼脂扩散法测定表达上清的抑制真菌活性,结果表明重组CGA1-76能抑制烟曲霉菌和黄曲霉菌的生长,抑菌圈直径分别为9mm和8mm。 展开更多
关键词 嗜铬粒蛋白N区 基因表达 枯草杆菌 微转座子 抗真菌活性
下载PDF
自蔓延高温合成(SHS)材料TN_(12)M_(10)中的孔洞 被引量:2
8
作者 杨国涛 周洛三 《稀有金属》 EI CAS CSCD 北大核心 1994年第5期365-369,386,共6页
分析了SHS法合成材料TN_(12)M_(10)中孔洞的形成原因,指出这些孔洞来源于:原始压坯(未经SHS反应)中带来的孔洞;碳扩散到Ti、Mo中形成Ti(Mo)Cn后所留下的孔洞;SHS反应前的加热过程中样品内析出... 分析了SHS法合成材料TN_(12)M_(10)中孔洞的形成原因,指出这些孔洞来源于:原始压坯(未经SHS反应)中带来的孔洞;碳扩散到Ti、Mo中形成Ti(Mo)Cn后所留下的孔洞;SHS反应前的加热过程中样品内析出的气体所形成的气泡。根据这种观点所计算出的SHS产品中孔洞的体积百分含量与测量结果相符。 展开更多
关键词 粉末合金 TN12M10材料 SHS法 孔洞
下载PDF
碳内标法对TN_(12)M_(10)合金SHS反应与结晶过程的研究
9
作者 李普超 杨国涛 《稀有金属》 EI CAS CSCD 北大核心 1998年第2期106-110,共5页
利用所发现的碳内标(CIS)法研究了TN12M10合金的自蔓延高温合成(SHS)反应与结晶过程的某些规律,指出了AK机制所存在的问题。
关键词 碳内标法 SHS反应 结晶 燃烧合成 TN12M10合金
下载PDF
纤维C-内标技术对TN_(12)M_(10)合金的SHS反应过程
10
作者 杨国涛 聂跃庄 《中南工业大学学报》 CSCD 北大核心 1997年第5期444-447,共4页
利用特殊的C-内标技术对TN_(12)M_(10)合金的SHS反应结晶过程进行了实验研究,发现包裹C-粒的包覆熔体(BFT)中含有杂质与合金元素;随着温度升高,Ca,Si,Fe,Ni的含量减少,直至消失,Ti,Mo含量则随之增加;BFT最后流到就近的Ti(Mo)C晶粒上结... 利用特殊的C-内标技术对TN_(12)M_(10)合金的SHS反应结晶过程进行了实验研究,发现包裹C-粒的包覆熔体(BFT)中含有杂质与合金元素;随着温度升高,Ca,Si,Fe,Ni的含量减少,直至消失,Ti,Mo含量则随之增加;BFT最后流到就近的Ti(Mo)C晶粒上结晶。因之,作者提出了TN_(12)M_(10)合金SHS反应结晶过程的顺序:(1)Ca,Si,Ni,Fe,Ti,Mo等杂质及合金元素随着加热温度的升高,依次先后熔化并随之被吸附于C-粒表面;(2)被吸附元素与C生成各自相应的亚稳定中间相,BFT正是由这些中间相组成的混合熔体;(3)BFT朝就近的燃烧波前处流动,使得包裹C-粒的BFT数量减少,上述熔体便继续包裹C-粒并形成新的BFT平衡数量;(4)当BFT中的C,Ti,Mo含量达到Ti(Mo)C的配比时,BFT就在近旁燃烧波前处的Ti(Mo)c晶粒表面结晶出新的Ti(Mo)C晶粒,最后完成SHS反应。文末讨论了A-K模型存在的问题。 展开更多
关键词 SHS反应 结晶 C内标 纤维 TN12M10合金
下载PDF
TN12M10合金SHS过程中碳的传输
11
作者 杨国涛 《中国有色金属学报》 EI CAS CSCD 1994年第A12期222-225,共4页
关键词 合金 TN12M10合金 碳纤维 SHS 碳传输
全文增补中
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部