人工释放2种天敌昆虫的防治效果及其对烟田天敌昆虫种群的影响

为有效评价两种天敌昆虫烟蚜茧蜂和捕食螨对烟蚜和烟蓟马的防治效果,在四川攀枝花米易烟区连续两年开展了生物防治研究。分别采用烟蚜茧蜂、捕食螨和吡虫啉处理后,调查分析生物防治措施对田间害虫和主要天敌昆虫种群的作用。研究结果表明:(1)烟蚜茧蜂和捕食螨在前期对烟蚜和烟蓟马的防控效果分别为6.18%和33.94%,后期防治效果分别为55.38%和65.00%;吡虫啉防治效果与之相反。(2)烟蚜茧蜂和捕食螨分别使田间昆虫天敌种群数量下降了25.12%和20.02%,远低于吡虫啉的影响(53.29%)。其中对食蚜蝇影响最大,分别为39.36%和51.85%,对瓢虫类为20.77%和1.57%,对蜘蛛类为12.46%和1.60%。因此,释放烟蚜茧蜂和捕食螨可用于烟蚜和烟蓟马的长期防控,且对烟田昆虫天敌生态系统友好,具有较好的推广应用价值。

烟草扭脉病毒云南分离物rtp基因克隆及序列分析

探究来自云南不同时间和不同地区的烟草扭脉病毒(TVDV)各分离物间rtp基因序列差异,分析烟草丛顶病近年在田间发生趋势减缓的原因.以2020—2022年从云南楚雄、大理、保山及红河采集的染病烟草样品为材料,对TVDV的rtp基因进行扩增和序列分析,共得到TVDV 7个不同分离物的rtp基因序列,长度均为2172 nt,包含618 nt的cp基因及1554 nt的rtd区;推导的TVDVRTP蛋白共编码722个氨基酸,其中包含CP蛋白的205个氨基酸,RTD的517个氨基酸.多重序列比对结果发现,获得的7个TVDV分离物与GenBank上登录的其他TVDV分离物间cp基因核苷酸序列一致性为98.71%~100%,不同TVDV分离物间CP蛋白的氨基酸序列一致性为98.05%~100%,存在4个氨基酸的差异.获得的7个TVDV分离物与GenBank数据库登录的其他TVDV分离物间rtd区核苷酸序列一致性为96.68%~99.81%,RTD蛋白的氨基酸序列一致性为96.52%~100%,存在39个氨基酸的差异.这些TVDV分离物rtp基因的变异可能会对TVDV的蚜虫传播效率产生影响,进而影响到烟草丛顶病在田间的发生与流行.

烟蚜为害特征的高光谱比较

利用手持式高光谱仪测定不同蚜量为害后烟草冠层光谱反射率的变化,同时使用叶绿素计测量叶绿素含量。结果表明,烟草光谱呈现标准植被光谱曲线,烟蚜Myzuspersicae(Sulzer)为害造成烟草光谱反射率下降,近红外波段反射率下降更为明显。和健康烟株相比,轻度(单株顶尖和上部5片叶蚜量≤15头)、中度(15头<单株顶尖和上部5片叶蚜量≤50头)、重度(单株顶尖和上部5片叶蚜量>50头)危害在绿光波段反射率分别下降12%,27%,52%,在近红外波段分别下降15%,20%,38%。对反射率曲线进行微分分析,健康烟株、轻度、中度和重度为害后的一阶导数最大值分别为0.031,0.022,0.026和0.019,其值随着蚜量增加而下降,对应的波长重度为害为718.45nm,其它为716.91nm,红边位置向长波方向移动1.46nm。蓝光、绿光、红光和近红外4个波段反射率和叶绿素含量SPAD值存在良好的线性回归关系,相关系数都达到极显著,绿光波段反射率对叶绿素含量的回归关系尤为显著;同时SPAD值越大,光谱反射率越高。该研究对于应用遥感技术大面积监测烟草生产中病虫害的发生,确定防治适期以及适宜的防治措施具有重要的应用前景。

苋菜凝集素基因的克隆及在转基因烟草中抗蚜性研究

通过PCR从苋属植物千穗谷 (Amaranthushypochondriacus)的总DNA中扩增出苋菜凝集素 (AHA)的核基因片段。序列分析结果表明该基因为 2 45 3bp ,含有一 15 38bp的内含子和两个分别为 2 12bp和 70 3bp的外显子。采取反向PCR的方法获得仅含该基因的编码区克隆。以此为基础与二元表达载体 pBin438构建含内含子与不含内含子AHA基因的植物表达载体 pBAHAg和pBAHAc并通过土壤农杆菌介导转化了烟草。转化再生植株的PCR和Southernblot分析表明 ,AHA基因已整合到烟草的染色体中 ,有单拷贝和多拷贝的整合。用与AHA蛋白高度同源的ACA蛋白的抗血清进行了免疫斑点 (Immunodotblot)检测 ,结果初步表明转基因烟草有AHA蛋白的表达。虫试结果表明转pBAHAg和 pBAHAc烟草对蚜虫的平均抑制率分别达 5 7 2 %和 48 8% ,有的高达 90 %以上。

两种凝集素基因在转基因烟草中表达的研究

构建了含尾穗苋凝集素基因(ACA)的cDNA序列和改造后的雪花莲凝集素基因(GNA)的植物表达载体pBACG。在此表达载体中,ACA和GNA基因的表达分别由35S启动子和CoYMV启动子控制。通过农杆菌介导,将ACA和GNA基因转化到烟草中,经卡那霉素筛选获得60株转化再生植株。对PCR检测呈阳性的50株植株进行接蚜虫实验,结果表明,其平均抑虫率达83.9%。Southernblotting分析表明,ACA和GNA基因都已整合到烟草基因组中。Westernblotting结果显示这两个基因在不同植株中都可表达其相应的蛋白质,但表达水平不同。部分Westernblotting分析呈阳性植株的抗蚜性与T0代相近,达85.3%,说明这两个基因的抗蚜功能可以稳定遗传。

烟田烟蚜茧蜂的活动规律及其对烟蚜的防治效果

田间释放烟蚜茧蜂能很好地抑制烟蚜种群数量的增长。以常规施药烟田、不施药烟田作对照 ,在前期其对烟蚜的相对防效分别为 8.4%和 5 2 .8% ,中期为 6 4.0 %～ 79.0 %和 6 8.6 %～ 82 .3% ,后期为 93.0 %和 93.5 %。放蜂田烟蚜茧蜂成虫喜欢在烟株中下部叶片活动 ,1 3∶0 0～ 1 4∶0 0是其在烟株中下部活动的高峰期。烟蚜茧蜂对烟株下部叶片上烟蚜的较强选择性与烟蚜密度无关 ,下部叶片上的僵蚜数量均显著高于中、上和顶部。 1 3∶0 0～ 1 4∶0 0利用生物农药对烟株上部叶片上的烟蚜进行防治 ,既是烟蚜茧蜂与生物农药集成组装的切合点 ,又是保护利用田间烟蚜茧蜂的有效措施。

不同体色烟蚜的消长动态及对药剂的敏感性

对江淮烟区未施药烟田中烟蚜的发生情况进行了２年调查，结果表明，烟蚜种群数量消长呈明显的双峰型；红色烟蚜在第２个高峰期是主要类型。同时用浸渍法分别检测了红、绿色烟蚜对３种药剂的敏感性，发现红色烟蚜敏感性低。

黄淮烟区有翅蚜发生动态与病毒病流行的关系

从2006年4月初至6月底,对平顶山烟区宝丰、叶县、郏县3个县进行了烟蚜有翅蚜发生期的定点调查,以及有翅蚜发生动态与病毒病流行关系的初步研究。结果表明:烟蚜有翅蚜迁飞活动高峰在4月底至5月中旬;在所诱集的有翅蚜中,烟蚜的比例最大;在诱集方式上,黄板的灵敏度明显高于黄皿,效果较好;而烟区病毒病盛发期在5月底至6月初,病毒病的流行与有翅蚜迁飞存在显著的正相关关系;周边不同环境因素、盖膜及移栽方式、移栽期等对有翅蚜发生动态和病毒病的流行也存在着一定的影响。

烟蚜与其天敌种群在数量和分布格局上的关系

研究结果表明：烟蚜与烟蚜茧蜂、草间小黑蛛等几种主要天敌在田间分布的关系均为聚集分布，说明烟蚜是聚集分布时，几种天敌也是聚集分布，借以提高天敌对害虫的控制作用。烟蚜与烟蚜茧蜂间的垂直分布关系是两者聚集场所间极相关，证明烟蚜茧蜂对烟蚜的聚集场所有明显的追随关系，两者在烟草叶片叶序上的分布吻合。

捕杀特黄板对烟蚜及烟田蚜传病毒病防治效果的研究

通过对捕杀特黄板烟田药效试验和使用技术的研究,分析捕杀特黄板对烟蚜的防治效果,并通过2007、2008年连续2年调查捕杀特黄板防治蚜虫及烟田蚜传病毒病发病率的相关性,分析捕杀特黄板治蚜对病毒病的减退率。单因素分析结果表明,捕杀特黄板具有较好的持效杀虫性,悬挂7d具有优于对照药剂防治0.05水平差异显著性,20d后治蚜效果均具优于对照药剂的差异显著性,捕杀特黄板在烟田0～300范围内,高出烟株5～10cm,诱虫、杀虫效果最好达86.1%和89.2%,连续2年的研究发现,捕杀特黄板的使用可明显降低田间CMV的发病率。

野苋菜凝集素基因的克隆及抗蚜性

通过PCR从苋科植物野苋菜Amaranthus viridis L.基因组DNA中扩增出野苋菜凝集素的核基因片段AVA。序列分析结果表明该基因为1831 bp,含有一个922 bp的内含子和两个分别为212 bp和697 bp的外显子。采用反向PCR技术获得了该基因的编码区克隆。分别构建含有内含子和不含内含子的AVA基因植物表达载体pBI121AVA-GUS和pBI121AVAc-GUS,通过根癌农杆菌介导法转化烟草。PCR、GUS检测结果均表明AVA基因不仅已整合到烟草基因组DNA中,而且初步表明转基因烟草有AVA蛋白表达。抗蚜实验表明含内含子和无内含子的AVA基因在转基因烟草中的抗蚜能力不同,转AVA和AVAc烟草对蚜虫的抑制率分别为60.81%和50.63%,有的植株高达97%。实验结果表明所克隆的AVA基因是具有抗蚜能力的苋菜凝集素基因家族中的新成员。

雪花莲凝集素基因(gna)的改造及其抗蚜性(英文)

用定点突变方法对编码雪花莲凝集素 (Galanthusnivalisagglutinin ,GNA)前体蛋白的DNA序列进行了改造和转基因烟草 (NicotianatabacumL .)抗蚜性的研究。结果表明 ,将GNA编码序列中含有的稀有密码子改造后 ,GNA的表达水平从占总可溶性蛋白的 0 .17%增加到 0 .2 5 % ,转基因烟草的抗蚜性也随之增强 ,从平均抑制桃蚜 (Myzusper sicae (Sulzer) )虫口密度 6 3.7%显著地提高到 71.0 %。

河南省烟草病毒病的介体蚜虫种类及与发病关系的研究

在烟草栽培区，利用黄皿和绿皿共诱集传毒介体有翅蚜３２种，其中桃蚜Ｍｙｚｕｍｐｅｒｓｉｃａｅ（Ｓｕｌｚｅｒ）棉蚜ＡｐｈｉｓｇｏｓｙｐｉＧｌｏｖｅｒ分别占诱集蚜量的４７％和２３％。烟田类型不同病毒病发生程度不同，单作田和临菜田烟草病毒病发生严重，麦烟套种田较轻；５月迁入烟田的有翅蚜量与病毒病发生关系密切；提出防治烟草病毒病应通过早期防治病源地有翅蚜和麦烟套种等配套的措施，建立新的烟田农业生态体系。

生物农药“力杀死”对烟青虫和烟蚜的药效试验

为更有效地防治烟田害虫,测定了生物农药4%“力杀死”乳油对烟青虫和烟蚜的室内毒力和田间药效。结果表明,4%“力杀死”乳油对烟青虫和烟蚜的半致死浓度(LC50)分别为0.896 mg/L和0.03mg/L。4%“力杀死”乳油2500倍液对烟蚜的校正防效,施药后第4d和第6d达98%以上,和“甲胺磷”2000倍液没有显著差异;对烟青虫的防效低于烟蚜,但施药后第5d时,2500倍“力杀死”的防效达79.4%,与“甲胺磷”没有显著差异。

玫烟色拟青霉代谢产物对烟蚜的毒杀活性

用萨氏培养液培养玫烟色拟青霉菌菌株sw03085获得代谢产物,以生物检测方法为导向,研究代谢产物的杀虫活性、热稳定性、安全性和溶解性.结果表明:玫烟色拟青霉菌sw03085菌株能够产生杀虫活性物质;活性物质易溶于甲醇、丙酮、乙酸乙酯,能部分溶解于氯仿,是一种中等极性的物质;活性物质对植物没有明显伤害作用;活性物质对低温和高温都不敏感,具有较强的稳定性;活性物质对蚜虫和粉虱毒杀活性较高,对小蠹虫、菜青虫、刺蛾和铜绿金龟活性低,表现出一定的选择性.

烟蚜消长动态及体色变化的研究

调查了江淮烟区一末施药烟田中烟蚜的发生情况，结果表明烟蚜发生的总量呈明显的双峰型。

针对烟草蚜传病毒病的避蚜与防病关系研究再报

通过对苗床不同避蚜措施在移栽后病毒病发生情况的对比,研究避蚜时期及设施与病毒病发生的关系,结果表明,40目防虫网避蚜防病效果最佳,悬挂塑料条带和苗床四周平铺薄膜也有较好的避蚜防病效果。网室栽培条件下,对照的烟苗带毒率都在30%以上,防虫网等避蚜防病效果显著。大田地膜栽培条件下,移栽后25d,防虫网等处理对蚜传病毒病有显著的预防效果。移栽后30d-40d,所有处理同对照无显著差异。移栽后45d-60d,防虫网处理的发病情况显著轻于对照。因此,苗期避蚜结合大田地膜覆盖对预防病毒病有重要意义。

恩施烟区无翅桃蚜在烤烟田空间动态的地统计学分析

恩施烟区是湖北省最大烟叶生产基地,桃蚜Myzuspercicae(Sulzer)是恩施烟叶最重要的害虫之一,桃蚜在田间的发生以及传播的病毒病害逐年加重,给烟业生产带来巨大损失。进一步了解桃蚜发生动态和空间分布规律,将提高对桃蚜的预测效果并为其综合防治提供理论依据。烟区和烟田之间的迁移以有翅蚜为主,田块内部的种群动态和发生规律,无翅桃蚜发挥着更加重要的作用。受寄主生理生化特性影响,不同烟叶生育期,桃蚜空间结构的差异需要进一步验证。经典的统计学方法以纯随机变量为基础,而昆虫种群的田间分布存在空间相关性,地学统计学承认空间相关性的存在,为区域化变量的空间分布分析提供新的理论和方法。在烟叶不同生育期进行无翅桃蚜的田间密度调查,运用地统计学的方法分析了其空间特征和发生动态,模拟了无翅桃蚜在烟叶不同生育期的田间分布图,并对无翅桃蚜在不同烟叶生育期田间分布格局的相关性进行了分析。结果表明:无翅桃蚜在烟叶苗期密度最小为(5.59±4.07)头/株,烟叶旺长期虫口密度最大为(14.5±9.6)头/株;种群密度变异系数均较大(0.6147-0.7281),表明其空间分布的不均匀性,并随密度的增大而减小,表明种群密度的增大一定程度上提高了种群结构的稳定性。烟叶苗期的种群分布曲线峰度最大,表现出更高的聚集性。无翅桃蚜在烟叶苗期的135°方向和团棵期的45。方向表现为随机分布。烟叶苗期的0°方向和45°方向可用线性有基台模型拟合,其他均可用球形+指数套合模型拟合,判断球形+指数套合模型是无翅桃蚜田间分布的主要模型,属于聚集型分布的范畴。块金值、基台值和变程均随田间虫口密度的增大而增大,苗期的随机程度(0.1905—0.7186)明显大于其他时期(0.0116—0.1620)。无翅桃蚜空间分布模拟图可以清晰地看出无翅桃蚜苗期迁移,旺长期后逐渐稳定的特性。无翅桃蚜的田间分布在烟叶苗期与团棵期无明显相关性,而团棵期与旺长期以及旺长期与成熟期显著相关,再次证明烟叶苗期到团棵期,无翅桃蚜的田间分布发生较大迁移,而团棵期以后基本定殖。烟叶苗期的无翅桃蚜高度聚集在少数烟株上,及早预防可以减少烟叶苗期虫口基数,有利于桃蚜种群数量的控制。首次将平面坐标系划分为4个方向,更加准确、全面地描述昆虫种群的空间分布特征。

不同烟草品种接种蚜虫后NtCPI1基因表达分析

半胱氨酸蛋白酶抑制剂(CPI)与植物抗病抗虫性密切相关,为了明确烟草半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因NtCPI1功能,研究其与烟草品种抗虫性的关系,对不同蚜虫抗性烟草品种进行了接虫前后NtCPI1荧光定量表达分析。结果表明,抗蚜烟草品种接种蚜虫后,NtCPI1表达量显著增加,664-01接种蚜虫3 h后,NtCPI1表达量为对照的10.8倍,Blue River接种蚜虫6 h后,NtCPI1表达量为对照的6.28倍;而螺丝头2474、云烟97和中烟100等感蚜品种接虫后,NtCPI1表达量极显著降低。NtCPI1可以作为高效抗蚜候选基因,具有潜在的应用价值。

烟蚜数量分级标准及其估计模型的研究

采用线性方程、幂函数方程及指数方程3种模型回归分析了在不同的分级标准下烟株蚜量与蚜情指数的相关性,结果表明幂函数及指数回归模型的相关性好于直线回归模型,以指数回归模型的相关性最好。通过对可能的分级标准进行比较筛选,确定了烟株叶片蚜量的分级标准为0级:0头/叶、Ⅰ级:0～5头/叶、Ⅱ级:6～20头/叶、Ⅲ级:21～100头/叶、Ⅳ级:101～500头/叶、Ⅴ级:大于500头/叶,并建立了蚜情指数(x)与烟株平均单叶蚜量(y)的回归估计模型为y=0.9362·e0.07386x(R=0.9696 )。对该分级标准及回归模型的拟合检验结果表明,当蚜情指数小于80、抽样量在100株以上时,对蚜量的估计可达90%的准确度。