桑枝总黄酮体外抗炎活性及机制研究

目的研究桑枝总黄酮的体外抗炎活性及其作用机制。方法 IFN-γ和LPS协同造成小鼠RAW264.7细胞炎症模型;Griess反应测定细胞上清液中NO产量;FRAP测定细胞总抗氧化能力;RT-PCR检测iNOS、COX-2、HO-1、IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA表达;Western blot检测iNOS、p-ERK蛋白表达水平。结果桑枝总黄酮呈剂量依赖性抑制细胞上清液中NO含量并且无细胞毒性,提高细胞总抗氧化能力,下调iNOS、COX-2、IL-1β、IL-6 mRNA和iNOS、p-ERK蛋白的表达,上调HO-1 mRNA表达,但对TNF-α mRNA表达影响不大。结论桑枝总黄酮部分通过MAPK中的ERK信号转导通路抑制iNOS基因和蛋白的表达从而抑制NO的产量,提高细胞总抗氧化能力,同时下调COX-2、IL-1β、IL-6等炎症介质和上调抗炎介质HO-1的表达而发挥抗炎效果。

大孔吸附树脂分离纯化桑叶总黄酮及其动力学研究

目的:研究桑叶总黄酮(MTF)的分离纯化工艺,并探索其动力学过程。方法:考察3种大孔吸附树脂对MTF的吸附分离性能,以饱和吸附量、总黄酮回收率及纯度为考察指标综合评价,绘制渗漏曲线和洗脱曲线并用数学方程来描述其动力学过程。结果:NKA-9型树脂对MTF的吸附分离性能最好,饱和吸附量为43.4 m g.-g 1,洗脱率为98.2%;分离纯化MTF的最优工艺条件为:上样浓度20 m g.m-l 1,6倍量洗脱用水,70%乙醇洗脱,总黄酮纯度达58.2%;树脂可重复使用4次;动态吸附-洗脱过程的动力学方程为:y=u(1--e kx)。结论:NKA-9型树脂适用于MTF的分离纯化。

桑葚总多糖对对乙酰氨基酚诱导小鼠急性肝损伤的保护作用

目的:研究桑葚总多糖(MFP)对APAP引起的HepG2肝细胞毒性的缓解效应,探讨MFP对APAP诱导小鼠急性肝损伤的保护作用及可能机制.方法:采用MTT法检测MFP对细胞活力的影响,将32只小鼠随机分为正常组、模型组、MFP低、高剂量组(50,150 mg·kg^-1),腹腔注射300 mg·kg^-1 APAP建立小鼠急性肝损伤模型,检测血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和乳酸脱氢酶(LDH)活力,肝组织中丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)和总抗氧化能力(T-AOC)水平;用ELISA测定肝组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)水平;HE染色法观察肝脏组织的病理学变化;用Western blot检测小鼠肝组织中核因子-κB(NF-κB)p65、血红素加氧酶(HO-1)和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)的表达水平.结果:MFP可剂量依赖性地缓解APAP诱导的HepG2细胞死亡(P<0.01).与模型组相比,MFP能显著地降低肝损伤小鼠血清中ALT,AST,LDH水平(P<0.05或P<0.01),下调肝组织中MDA,TNF-α,IL-1β,IL-6的含量(P<0.05或P<0.01),改善APAP诱导的小鼠肝组织病变.此外,MFP还能明显上调模型小鼠肝组织中GSH,T-SOD,T-AOC水平(P<0.05或P<0.01),明显下调NF-κB p65蛋白的表达水平(P<0.05或P<0.01),上调HO-1和G6PD蛋白的表达水平(P<0.05或P<0.01).结论:MFP能保护APAP诱导的小鼠急性肝损伤,这与增强肝脏抗氧化能力,抑制肝脏炎症反应有关.

大孔树脂纯化桑叶总黄酮的工艺条件研究

[目的]为桑叶总黄酮的开发利用提供依据。[方法]选取7种型号的大孔树脂进行纯化试验，利用静态吸附和动态吸附的方法，研究大孔树脂纯化桑叶总黄酮的工艺条件。[结果]D140型大孔树脂能更有效地纯化桑叶总黄酮。当上样浓度在1．041～3．122mg／ml范围内时，桑叶总黄酮的回收率较高。上样速率为1、2BV／h时，总黄酮回收率较高。上样体积为4．5BV时，树脂基本达到动态饱和吸附。当乙醇浓度为70％、洗脱速率为1BV／h时，洗脱率最大，产物纯度最高。[结论]D140型大孔树脂纯化桑叶总黄酮的最佳工艺为：以浓度约为3mg／ml的桑叶总黄酮上样，上样速率控制在2BV／h左右，上样体积为4．5BV，再用3BV、70％乙醇，以1BV／h的速率洗脱，获得的桑叶总黄酮的纯度为41．1％。

白桑活性黄酮类化合物研究概述

目的研究分析白桑中的黄酮类成分及其生物活性,为该药材的深度开发提供参考。方法利用Reaxys、中国知网等文献检索工具查阅白桑的化学成分,选择其中的黄酮类成分作为研究对象分析其结构特点,从中寻找具有生物活性的化合物并整理归类。结果近几十年来,国内外学者从白桑中分离鉴定了140余个化合物,约占白桑中已知化合物的50%,部分化合物具有抗肿瘤、抗病毒、抗菌等多种生物活性。结论白桑中富含黄酮类成分,是开发中药新药和新资源食品的良好原材料。

桑叶中的黄酮类化合物

为了研究桑叶的化学成分与生物活性之间的相关性,采用硅胶、Sephadex LH-20、RP-C18等色谱方法分离纯化,通过核磁共振谱、质谱等波谱分析手段鉴定化合物结构。从长穗桑的95%乙醇提取物中分离到4个Diels-Alder类加合物,分别鉴定为mulberrofuran F1(1)、mulberrofuran F(2)、chalcomoracin(3)和kuwanon J(4);2个查耳酮类化合物,鉴定为morachalcone A(5)和isobavachalcone(6);3个黄酮类化合物,鉴定为norartocarpetin(7)、kuwanonC(8)和6-geranylapigenin(9)。化合物1和6为首次从该种植物中分离,化合物4～5、7～9为首次从桑叶中分离得到,其中化合物1为新化合物。采用MTT法对化合物1～5进行了抗肿瘤活性筛选,结果显示化合物1～3对人肿瘤细胞A549、Bel7402、BGC823、HCT-8以及A2780具有抑制作用。

应用电喷雾质谱技术分析鉴定桑叶中黄酮类化合物

通过电喷雾多级串联质谱技术分析、鉴定了桑叶提取物中的槲皮素、山奈酚-7-葡萄糖苷、异槲皮苷、山奈酚-3-O-(6″-O-乙酰基)-β-D-吡喃葡萄糖苷、槲皮素-3-O-(6″-O-乙酰基)-β-D-吡喃葡萄糖苷和芦丁6种黄酮类化合物.根据一些特征的中性碎片丢失,提出了该类化合物的质谱裂解规律.通过得到的相对分子质量和中性碎片信息并与文献中的已知化合物比较,建立了这一类化合物快速鉴定的质谱新方法.

桑白皮有效成分分离纯化的工艺研究

目的:优化桑白皮有效成分的分离纯化工艺。方法:用大孔树脂静、动态吸附解吸法,以吸附率、解吸率等为指标,优选总黄酮分离纯化工艺中大孔树脂类型、上样液量、洗脱剂体积分数、洗脱剂用量;采用水提醇沉法,以多糖得率和纯度为指标,优选总多糖分离纯化工艺中沉淀多糖所用乙醇体积分数;用离子交换法,以总生物碱吸光度为指标,优选总生物碱分离纯化工艺中上样液量、洗脱剂用量;并进行验证试验。结果:桑白皮总黄酮最优工艺为D101大孔树脂为吸附剂,上样液质量浓度为0.1 g(生药)/ml,上样液量为9倍柱体积(BV),用5 BV 70%的乙醇洗脱;总多糖最优工艺中沉淀多糖的乙醇体积分数为80%;总生物碱最优工艺为上样液量3 BV,用8 BV 0.5 mol/L的氨水洗脱。分离纯化后桑白皮总黄酮、总多糖、总生物碱平均纯度分别为35.68%、47.14%、55.79%,RSD分别为1.28%、1.61%、1.14%(n=3)。结论:优选的工艺条件稳定,适合桑白皮有效成分的分离纯化。