tRF-1:30对高糖诱导的肾小管上皮细胞炎性因子表达的影响

目的探讨tRF-1:30(tRF-1:30-Gln-CTG-4)对高糖(HG)诱导的肾小管上皮细胞(RTECs)中炎性因子表达的影响及分子机制。方法将小鼠RTECs分为Control组、HG组、HG+tRF-1:30 mimic组、HG+tRF-1:30 NC组、HG+si-IKZF2组(IKAROS家族锌指2,tRF-1:30抑制剂)、HG+si-NC组。实时荧光定量PCR检测tRF-1:30、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和IKZF2 mRNA的水平。酶联免疫吸附试验检测炎性因子水平,Western blot检测IKZF2蛋白表达水平,双萤光素酶报告实验验证tRF-1:30和IKZF2的关系。结果在HG诱导的RTECs中炎性因子的表达水平显著升高,而tRF-1:30表达水平显著降低。过表达tRF-1:30显著降低HG诱导的RTECs中炎性因子的表达水平。IKZF2在HG诱导的RTECs中显著高表达,进一步敲低IKZF2可抑制炎性因子的释放,而过表达tRF-1:30后IKZF2的表达水平下调。双萤光素酶报告实验进一步验证tRF-1:30与IKZF2可能存在靶向关系。结论过表达tRF-1:30可能通过负向调控IKZF2的表达进而抑制HG诱导的RTECs炎性因子的释放。

热损伤诱导的tRNA碎片tRF-Ile-AAT-1抑制膀胱尿路上皮癌细胞的增殖与侵袭

目的探讨热损伤诱导高度恶性与低度恶性膀胱尿路上皮癌(bladder urothelial cancer,BUC)细胞之间差异表达的tR NA碎片对BUC细胞增殖与侵袭的影响。方法对高度恶性BUC细胞株T24和低度恶性BUC细胞株5637行热损伤处理。对热损伤前后细胞进行tR NA碎片(transfer RNA stress-induced fragments,tR Fs)测序,筛选出热损伤后在T24中表达下降且在5637细胞中表达上升的tR Fs,并对其行细胞株及临床标本RT-PCR检测及验证。构建目的 tR F的单链模拟物(mimic)和反义链(inhibitor),并转染至热损伤后的T24及5637细胞中,分组为:相对应的Heat组、载体对照组、Mimic组、Inhibitor组。通过CCK-8、流式细胞术、Transwell实验检测tR F对BUC细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭的调控作用。结果通过测序及细胞株RT-PCR检测,所筛选出的tR Fs分别为tR F-chrM. Ser-GCT、tR F-IleAAT-1,而只有tR F-Ile-AAT-1在低级别BUC患者行第2次经尿道膀胱肿瘤电切(transurethral resection of bladder tumor,TURBT)所取标本中表达量较第1次TURBT的标本显著升高[(1.61±0.16)倍,P <0.01];且在高级别BUC患者中表达量较第1次TURBT标本显著降低[(0.75±0.14)倍,P <0.05]。CCK-8结果显示T24Heat+Mimic组BUC细胞的增殖受到明显抑制(P <0.05);流式细胞术结果显示T24Heat+Mimic组的凋亡率较T24Heat组显著上升[(5.88±1.01)倍,P <0.01];Transwell实验提示T24Heat+Mimic组迁移的T24数量较T24Heat组显著下降[(0.40±0.05)倍,P <0.01],侵袭的T24数量较T24Heat组显著下降[(0.23±0.04)倍,P <0.01]。5637Heat+Inhibitor组BUC细胞增殖明显增强(P <0.05),其凋亡率较5637Heat组显著下降[(0.11±0.02)倍,P <0.01],迁移细胞数较5637Heat组显著上升[(1.81±0.29)倍,P <0.01],侵袭细胞数较5637Heat组显著上升[(2.70±0.15)倍,P <0.01]。结论热损伤诱导的tR NA碎片tR F-Ile-AAT-1,可抑制BUC细胞的增殖与侵袭能力。

CK19、TTF-1、HBME-1、Galectin-3、TPO在桥甲实性细胞巢与甲状腺微小癌中的诊断价值

目的:探讨CK19、TTF-1、HBME-1、Galectin-3、TPO在桥本甲状腺炎实性细胞巢(solid cell nest,SCN)与甲状腺乳头状微小癌(papillary thyroid micro carcinoma,PTMC)中的表达及其诊断与鉴别诊断中的价值。方法:采用免疫组化检测30例SCN与15例PTMC中CK19、TTF-1、HBME-1、Galectin-3、TPO的表达。结果:CK19、TTF-1在SCN与PTMC中的阳性率差异无统计学意义(P>0.05),HBME-1、Galectin-3、TPO在SCN与PTMC中的阳性率差异有统计学意义(P<0.01),五者在SCN与PTMC中的着色形态也有不同。结论:CK19可作为SCN与PTMC诊断的重要标记物,HBME-1、Galectin-3可作为PTMC诊断的重要标记物,五者均可用于SCN与PTMC的鉴别诊断。联合应用价值更高。

TTF-1和SPA表达对早期肺腺癌术后复发预测及预后的判断价值

目的研究术后肺腺癌患者组织中TTF-1和SPA的蛋白表达对其复发的预测价值及预后的影响。方法收集行手术切除的Ⅰ~Ⅲ期肺腺癌患者112例,采用免疫组化方法检测组织中TTF-1以及SPA的表达。结果 68例患者出现复发,TTF-1阳性和阴性表达患者中位DFS分别为41个月和9个月(P=0.013),中位OS分别为65.0和23.0个月(P=0.037),SPA阳性与阴性表达患者中位DFS分别为59.0个月和15.0个月(P=0.018),中位OS分别为68.0个月和35.0个月(P=0.058)。结论早期肺腺癌术后组织中TTF-1和SPA的表达是其复发的有效预测指标,TTF-1阳性表达预后更好。

肾综合征出血热患者血清急性时相蛋白测定及其意义

为探讨急性时相蛋白 (APP)与肾综合征出血热 (HFRS)病情及预后的关系 ,采用 Beckman Array36 0特殊蛋白分析仪检测了 2 5 3例 HFRS患者 (观察组 )及 30例正常人 (对照组 )空腹静脉血清 APP[包括 α1 -抗胰蛋白酶 (α1 - AT)、α1 -酸性糖蛋白 (α1 - AG)、触珠蛋白 (HAP)、C反应蛋白 (CRP)及转铁蛋白 (Transferrin,TRF) ]含量。结果 :观察组急性期α1 - AT、α1 - AG、CRP含量明显升高 ,与对照组比较 ,P<0 .0 5 ;TRF含量明显下降 ,与对照组比较 ,P<0 .0 0 1。 CRP及 TRF的变化与病情轻重分别呈正负相关。认为急性时相蛋白含量变化可作为 HFRS估计病情、判断预后和指导治疗的可靠指标。