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足月胎盘单核-巨噬细胞体外诱导分化为树突状细胞 被引量:2
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作者 陈赛英 张戎 +1 位作者 张明顺 季晓辉 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期444-448,I0001,共6页
目的:研究人类足月胎盘中的单核-巨噬细胞是否能分化为树突状细胞(DCs)。方法:机械分离足月胎盘中的单核-巨噬细胞,加入内皮细胞单层中,经正逆两次穿越内皮,48h后收集返回到内皮单层上方得到的细胞,以扫描电子显微镜和普通光学显微镜观... 目的:研究人类足月胎盘中的单核-巨噬细胞是否能分化为树突状细胞(DCs)。方法:机械分离足月胎盘中的单核-巨噬细胞,加入内皮细胞单层中,经正逆两次穿越内皮,48h后收集返回到内皮单层上方得到的细胞,以扫描电子显微镜和普通光学显微镜观察细胞形态,流式细胞仪分析细胞表型及3H-TdR检测DCs激发异体T细胞增殖能力。结果:足月胎盘中的单核-巨噬细胞经过(逆)穿越内皮系统后,具有典型的DCs的形态学特征,相对于胎盘单核-巨噬细胞而言高表达CD80、CD86以及HLA-DR,并具有激发异体T细胞增殖能力。结论:足月胎盘中的单核巨噬细胞在内皮(逆)穿越系统中可以分化为DCs。 展开更多
关键词 胎盘 单核-巨噬细胞 树突状细胞 内皮(逆)穿越
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血小板高敏性在“白细胞捕获”过程中的作用 被引量:1
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作者 叶开创 陆信武 +4 位作者 李维敏 刘晓兵 殷敏毅 施慧华 蒋米尔 《中国血管外科杂志(电子版)》 2010年第4期210-212,222,共4页
目的探讨下肢原发性慢性静脉功能不全(PCVI)患者血小板高敏性对单核细胞跨内皮迁移的影响。方法根据纳入和排除标准选择PCVI患者和正常人群,提取两组受试者不同体位时下肢静脉血液并分离其洗涤血小板悬液,建立人脐静脉内皮细胞单层的tra... 目的探讨下肢原发性慢性静脉功能不全(PCVI)患者血小板高敏性对单核细胞跨内皮迁移的影响。方法根据纳入和排除标准选择PCVI患者和正常人群,提取两组受试者不同体位时下肢静脉血液并分离其洗涤血小板悬液,建立人脐静脉内皮细胞单层的transwell膜,根据洗涤血小板来源分成空白对照组、PCVI患者站立30min组、正常人站立30min组、PCVI患者晨起平卧位组及正常人晨起平卧位组,各组transwell上室中注入200μl单核细胞悬液(单核细胞浓度为5×105个/ml)和对应的洗涤血小板悬液200μl共同培养,分别在2、4、8、24h后计数并比较各组transwell下室中单核细胞数量。结果在接种共同培养2h和4h后,各组transwell下室中单核细胞数量无明显差异(P>0.05);自8h后和24h后,PCVI患者站立30min时较其他组别transwell下室中单核细胞数量增多,差异具有统计学意义(P<0.05),其余各组transwell下室中单核细胞数量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论静脉压力变化引起的血小板活性异常是导致PCVI患者静脉管壁单核细胞异常增多的重要原因,可能与该病的发生、发展有密切的关系。 展开更多
关键词 静脉高压 慢性静脉功能不全 血小板高敏性 单核细胞 跨内皮迁移
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Effect of serum concentration on adhesion of monocytic THP-1 cells onto cultured EC monolayer and EC-SMC co-culture 被引量:1
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作者 Li-jie FAN Takeshi KARINO 《Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology)》 SCIE CAS CSCD 2008年第8期623-629,共7页
Background:The adhesion of monocytes to the endothelium following accumulation of low-density lipoprotein (LDL) in subendothelial spaces is an important step in the development of intimal hyperplasia in arterially imp... Background:The adhesion of monocytes to the endothelium following accumulation of low-density lipoprotein (LDL) in subendothelial spaces is an important step in the development of intimal hyperplasia in arterially implanted vein grafts and atherosclerosis in both animals and humans. However, it is not well known how serum factors affect the adhesion of monocytes. Methods: We have studied the effect of fetal calf serum (FCS), which we considered a source of LDL, on the adhesion of monocytes to endothelial cells (ECs) by using human monocytic THP-1 cells and both a monolayer of cultured bovine aortic endothelial cells (EC monoculture) and a co-culture with bovine aortic smooth muscle cells (EC-SMC co-culture). Results: It was found that the addition of FCS to the medium greatly affected the adhesion of THP-1 cells, and the higher the concentration of FCS in the medium, the greater the adhesion of THP-1 cells to endothelial cells. Adhesion of THP-1 cells to an EC-SMC co-culture was approximately twofold greater than that to an EC monoculture, and after adhering to endothelial cells, many THP-1 cells trans-migrated into the layer of smooth muscle cells. Conclusion: The results suggest that the elevation of the LDL (cholesterol) level in blood provides a favorable condition for the development of intimal hyperplasia and atherosclerosis by promoting the adhesion of monocytes to the endothelium and their subsequent migration into subendothelial spaces. 展开更多
关键词 Endothelial cells (ECs) Smooth muscle cells (SMCs) MONOCYTE THP-1 cells Low-density lipoprotein (LDL) Adhesion transendothelial migration Serum concentration
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支气管哮喘患者血清对内皮穿越模型中单核细胞分化为树突状细胞的作用 被引量:15
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作者 周林福 王文璐 +5 位作者 李红岩 张明顺 季晓辉 何韶衡 黄茂 殷凯生 《中华结核和呼吸杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期169-173,共5页
目的探讨支气管哮喘(简称哮喘)患者血清和正常血清对内皮穿越模型中单核细胞向树突状细胞(DC)分化和功能的作用及其机制。方法在江苏省哮喘联盟数据库中选择2008年5月至2009年5月轻一中度哮喘患者12例,募集匹配的健康志愿者12名,... 目的探讨支气管哮喘(简称哮喘)患者血清和正常血清对内皮穿越模型中单核细胞向树突状细胞(DC)分化和功能的作用及其机制。方法在江苏省哮喘联盟数据库中选择2008年5月至2009年5月轻一中度哮喘患者12例,募集匹配的健康志愿者12名,常规分离血清和外周血单个核细胞,免疫磁珠法获得单核细胞。选择健康产妇5名,胰酶消化法获得人脐静脉内皮细胞(第2代),培养融合至内皮细胞单层。在内皮细胞上方加入单核细胞及哮喘血清(哮喘组)或正常血清(对照组),构建内皮穿越模型。硝酸银染色法观察单核细胞来源的树突状细胞(MDDC)迁移行为。于48h收集MDDC,扫描电镜观察形态学特征,电泳迁移率实验检测核因子KB(NF-KB)活性,流式细胞术、ELISA和混合淋巴细胞反应分别检测其表型和功能。结果(1)在内皮穿越模型中,单核细胞2h后发生正向穿越,48h后发生逆向穿越并分化为DC。(2)与穿越前单核细胞[CD14(81±6)%、人白细胞抗原DR(HLA—DR)(24±5)%、CD80(2.8±2.0)%、CD86(14±4)%、CD83(0.9±0.8)%]比较,对照组MDDC的CD14[(20±5)%]显著下降(F=49.01,P〈0.05)、HLA-DR、CD80、CD86和CD83[(43±4)%、(17.9±3.5)%、(43±11)%和(6.7±1.8)%]均显著增高(均P〈0.05),但CD83仍较低,为未成熟DC。(3)与对照组比较,哮喘组MDDC的HLA—DR和CD。[(55±6)%和(59±12)%]相仿(F值分别为15.29和35.97,均P〉0.05)、CD80和CD83[(49.7±10.2)%和(30.2±6.8)%]显著增高(F值分别为34.Ol和20.68,均P〈0.05),为成熟DC。并且,哮喘组MDDC呈典型的树枝样突起,其NF—KB活性、白细胞介素-12pTO水平和T细胞增殖作用[(100±11)%、(568±43)ng/L和(2033±198)cpm]较对照组[(12±3)%、(220±35)ng/L和(952±64)cpm]显著增高(均P〈0.05)。结论哮喘血清可诱导内皮穿越模型中单核细胞向DC异常分化成熟,并与NF—KB过度激活有关。该模型为剖析哮喘免疫学发病机制和筛选新型抗哮喘药物建立了新的体外实验平台。 展开更多
关键词 哮喘 树突细胞 血清 NF—KB 内皮穿越模型 单核细胞
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内皮细胞穿越模型中系统性红斑狼疮患者树突状细胞分化及功能状态的初步研究 被引量:5
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作者 张明顺 张江全 +4 位作者 王慧娟 柯瑶 刘衍春 季晓辉 李玉峰 《中华风湿病学杂志》 CAS CSCD 2006年第1期18-22,i0001,共6页
目的利用已经成功构建的内皮细胞穿越模型研究系统性红斑狼疮(systemiclupusery-thematosus,SLE)患者的单核细胞起源的树突状细胞的分化和功能状态(膜表面分子和刺激功能及细胞因子分泌等)。方法构建内皮细胞穿越模型;分别诱导正常人单... 目的利用已经成功构建的内皮细胞穿越模型研究系统性红斑狼疮(systemiclupusery-thematosus,SLE)患者的单核细胞起源的树突状细胞的分化和功能状态(膜表面分子和刺激功能及细胞因子分泌等)。方法构建内皮细胞穿越模型;分别诱导正常人单核细胞和SLE患者单核细胞在模型中分化为树突状细胞(dendriticcells,DCs);电子显微镜观察其形态特征;流式细胞术检测其表型[人类白细胞抗原(HLA)-DR、CD80、CD86],混合淋巴细胞反应检测DCs刺激异源T细胞活化的能力,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测DCs分泌的干扰素(IFN)-!。结果正常人和SLE患者单核细胞在内皮细胞穿越模型中能分化成树突状细胞形态。正常人单核细胞来源的DCs(normalMonocyte-derivedDCs,NMDCs)和SLE患者单核细胞来源的DCs(SLEMonocyte-derivedDCs,SMDCs)都高表达HLA-DR;SMDCs的协同刺激分子CD80和CD86的表达水平明显高于NMDCs;刺激异源T淋巴细胞增殖的能力,SMDCs和NMDCs差异无统计学意义;SMDCs分泌IFN-!的水平明显低于NMDCs。结论SLE患者单核细胞异常分化为树突状细胞,这种异常涉及树突状细胞协同刺激分子CD80和CD86的表达升高以及细胞因子IFN-!分泌降低。 展开更多
关键词 红斑狼疮 系统性 单核细胞 树突状细胞 内皮穿越模型
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