斯氏并殖吸虫第一中间宿主拟钉螺属一新种记述(中腹足目,盖螺科)

为调查斯氏并殖吸虫拟钉螺宿主,现场采集螺标本,进行形态分类和生态考察及螺体寄生虫检查。发现拟钉螺属(Tricula)一新种,命名为建欧拟钉螺(Tricula jianouensissp.nov.),螺壳高3.125 mm,壳宽1.600 mm,体螺层高1.125 mm,壳口长径1.275 mm,壳口宽径0.925 mm。螺口外缘翘起呈铲状;轴缘与外缘形成较窄夹角,内唇嵴明显高出,与体螺层间有一沟状隙。齿舌每一横列有7枚齿,齿式:2-1-2/2-2.3-1-3.11(14).14(15)。该螺充当斯氏并殖吸虫第一中间宿主,斯氏并殖吸虫尾蚴感染率为0.11%。

异盘并殖吸虫第一中间宿主的发现

在广西那坡县异盘并殖吸虫流行区，从采集的拟钉螺（种名待定）体内首次检获子雷蚴和尾蚴，感染率为０．１１％（４／３５３０）。经用异盘并殖吸虫毛蚴感染正常的拟钉螺获得成功，其子雷蚴和尾蚴与自然感染者一致，证实该地拟钉螺是该虫自然界第一中间宿主。

中国不同种拟钉螺CO1基因序列差异分析及其系统学初探

目的研究中国拟钉螺线粒体CO1基因的差异并初步探讨其系统发生。方法收集4省7地拟钉螺标本,抽提基因组DNA,PCR扩增线粒体CO1基因,扩增产物纯化后进行序列测定,所测序列用Kimura双参数法计算遗传距离,NJ和UPGMA法构建系统进化树。结果PCR扩增得到大小约700bp的片段。遗传距离显示:台湾邱氏拟钉螺与湖北钉螺滇川亚种亲缘关系最近距离为0.124,而与其余6种拟钉螺遗传距离较远,遂将其分为两组。6种拟钉螺组内距离为0.127,两组间距离为0.179。两种方法构建进化树拓扑结构基本一致。台湾邱氏拟钉螺与湖北钉螺滇川亚种聚为一支,其余6种拟钉螺位于另一支。结论台湾邱氏拟钉螺应归入湖北钉螺,钉螺与拟钉螺属单源进化。中国不同种拟钉螺CO1基因存在差异。

RAPD技术研究6种拟钉螺的遗传变异

目的对来自中国3省5地的6种拟钉螺进行遗传变异研究,明确它们的亲缘关系,为拟钉螺的DNA分类提供依据。方法采用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术,对6种拟钉螺进行PCR扩增,根据扩增产物琼脂糖凝胶电泳的带型,计算各地拟钉螺的遗传距离,并绘制系统进化树;观察比较6种拟钉螺的外部形态和生态环境,并结合RAPD实验分类结果进行综合分析讨论。结果RAPD技术可将6种拟钉螺分为4类:①秉氏拟钉螺和向氏拟钉螺;②洪山拟钉螺和新店拟钉螺;③十堰拟钉螺;④武鸣拟钉螺。外部形态和生态环境方面,秉氏拟钉螺与向氏拟钉螺、洪山拟钉螺与新店拟钉螺的外部形态及生态环境较为相似,其它螺种间则差异较大。结论6种拟钉螺在基因水平上存在差异,此差异与拟钉螺外部形态、生态因素等传统分类因素相关联。

三峡库区的淡水贝类

1985—1986年作者等人对三峡库区及其邻近地区的人畜寄生虫中间宿主——淡水贝类进行了调查。共采获淡水贝类49种,隶属2纲,8科20属,其中16种为传播疾病的媒介贝类,有10个新种,文中对新种进行详细的叙述。调查地区在动物地理区划归属东洋界,华中区。该区东洋界山区型种类丰富,其中以拟钉螺属的种类为优势种群,占种类总数的45.7％。

宋氏r拟钉螺等位基因酶谱的研究及探讨其传病意义

为探讨宋氏ｒ拟钉螺在传病上的意义，采用微量平面淀粉胶电脉法检测了采自浙江、四川两省的宋氏ｒ拟钉螺、拟钉螺及钉螺共５个螺群的２１种等位基因酶谱，并进行数值分类学处理，从分子生物学水平揭示３螺类的亲缘关系。结果共得到２４个位点，６７个等位基因；宋氏ｒ拟钉螺与钉螺的Ｎｅｉ氏遗传距离（Ｎｅｉ′ｓＤ）为０．７８；宋氏ｒ拟钉螺与拟钉螺的Ｎｅｉ′ｓＤ为１．０５；钉螺与拟钉螺的Ｎｅｉ′ｓＤ为１．４０。显示三者有较近的亲缘关系，宋氏ｒ拟钉螺与钉螺的关系更密切，提示宋氏ｒ拟钉螺有可能为血吸虫（包括动物血吸虫）的螺类宿主。

拟钉螺的实验室饲养观察

在实验室饲养拟钉螺２年８个月，成螺在覆以苔藓植物的潮湿小环境中生长良好，存活率７３．５％。１６～２０℃（１月份）时，成螺无死亡；２２℃（５月份以后）以上时，死螺渐增。当２６．５～３３．５℃（６～９月份时，成螺死亡占全年死亡数的５７．４％，成虫于每年的４～５月开始产卵，到６月底结束。１９～２８℃时，螺卵经６～１１ｄ孵出幼螺。在２２～３３．５℃时。喂饲米粉和干酵母粉的幼螺经１１０～１３０ｄ可长为成螺。

SSR-PCR技术研究9种拟钉螺的遗传变异

目的对9种拟钉螺进行遗传变异研究,为拟钉螺从基因水平分类提供依据。方法采用微卫星锚定PCR（SSR-PCR）技术对海峡两岸4省7地的拟钉螺基因组DNA进行PCR扩增,根据扩增产物按Nei的方法计算遗传距离,并应用SPSS构建系统进化树。结果各地拟钉螺标本的PCR产物呈多态性,其中台湾邱氏拟钉螺与中国大陆拟钉螺地域株遗传距离为0.7391～0.9130;向氏拟钉螺和秉氏拟钉螺间扩增产物相似性最大,遗传距离为0.2174;神农架拟钉螺与向氏拟钉螺、秉氏拟钉螺的遗传距离为0.3333～0.3913;十堰拟钉螺和洪山拟钉螺之间的遗传距离为0.5556;福建拟钉螺与湖北拟钉螺地域株的遗传距离为0.3913～0.7000;武鸣拟钉螺与湖北拟钉螺地域株的遗传距离为0.6667～0.8889。结论9种拟钉螺在基因水平上至少可以分为4类：1）向氏拟钉螺、秉氏拟钉螺和神农架拟钉螺为一类;2）洪山拟钉螺和十堰拟钉螺为一类;3）武鸣拟钉螺为一类;4）福建拟钉螺为一类。台湾邱氏拟钉螺应为钉螺。

福建省并殖吸虫第1中间宿主种类、分布及感染率的调查

[目的 ]调查福建省并殖吸虫第 1中间宿主淡水螺的种类、地理分布和感染率。[方法 ]捕捉各地淡水螺类 ,检查其所携带不同虫种的并殖吸虫尾蚴感染率。[结果 ]在 2 5个县中 ,发现全省有 6种淡水螺类可充当并殖吸虫第 1中间宿主 ,即放逸短沟蜷、湖北钉螺闽亚种、福建拟钉螺、建瓯洱海螺、小桥拟钉螺和新店拟钉螺 ,其感染率 ( % )分别为 0 2 6、0 5 3、0 15、0 49、0 15和 6 5 7;放逸短沟蜷分布较广。[结论

云南省拟钉螺作为狸殖吸虫与血吸虫中间宿主的研究

自1981年开始,我们与美国费城自然科学院、云南省卫生防疫站以及大理州血吸虫病防治所等单位协作,先后对云南省南部西双版纳州、西北部大理州以及中部的昆明市周围有代表性的地区进行拟钉螺的调查。已发现6个新种,其中一种景洪拟钉螺(Tricula jinghongensis Guo and Gu,1985),是斯氏狸殖吸虫(Pagumogonimus skrjabini)和类中华血吸虫(Schistosoma sinensium-like blood fluke)的中间宿主。另一种博氏拟钉螺(T.bollingi),是我国新纪录,其始发现于泰国。感受性试验表明,其可感染中华血吸虫和湄公血吸虫(Schistosoma mekongi),因此在血吸虫病流行病学上应予以重视。

日本血吸虫和中华血吸虫尾蚴外部形态及运动方式比较

目的了解日本血吸虫和中华血吸虫尾蚴外部形态特征与运动方式差异。方法对日本血吸虫和中华血吸虫尾蚴分别进行热固定,随机选取形态舒展较好的两种尾蚴各50条,测量其体长、体宽、尾干长、尾叉长,比较两种血吸虫尾蚴外部形态特征。对日本血吸虫感染钉螺和中华血吸虫感染拟钉螺压碎镜检,比较两种血吸虫尾蚴的运动方式。结果日本血吸虫尾蚴平均体长、体宽、尾干长、尾叉长分别为(0.16±0.01)、(0.05±0.01)、(0.14±0.01)mm和(0.06±0.01)mm,中华血吸虫尾蚴平均体长、体宽、尾干长、尾叉长分别为(0.13±0.01)、(0.05±0.01)、(0.13±0.01)mm和(0.06±0.01)mm,两种血吸虫尾蚴体长(t=14.583,P<0.05)、尾干长(t=3.861,P<0.05)差异均有统计学意义,而体宽(t=0.896,P>0.05)、尾叉长(t=-0.454,P>0.05)差异均无统计学意义。镜下观察发现,两种血吸虫尾蚴运动方式均表现为尾部左右摆动,无明显差异。结论中华血吸虫与日本血吸虫尾蚴外部形态及运动方式相似度较高。

中国拟钉螺属两新种记述(中腹足目,盖口螺科)

报道了采自福建省建瓯市和华安县的拟钉螺属Tricula2新种,分别命名为建瓯拟钉螺T.jianouensis sp.nov.和华安拟钉螺T.huaanensis sp.nov.,并与近似种福建拟钉螺比较。上述两种螺类,均为斯氏并殖吸虫第1中间宿主。

云南省血吸虫病流行区一种拟钉螺及其寄生吸虫尾蚴的分子鉴定

目的对云南省血吸虫病流行区的一种拟钉螺及其寄生吸虫进行分子生物学鉴定,了解其种属分类地位。方法采集云南省祥云县拟钉螺和钉螺,压碎镜检采集螺软体腹足部组织,并观察其体内尾拗寄生情况。采用逸拗法采集拟钉螺寄生的不同形态尾拗,螺体组织和尾拗样本分别提取基因组DNA,采用PCR法扩增螺体内16S核糖体RNA(16S rRNA)、细胞色素c氧化酶I(COI)、28S核糖体DNA(28S rDNA)基因及其体内寄生吸虫尾拗的NADH脱氢酶亚基1(ND1)、28S rfNA基因,对扩增产物进行测序,并通过序列比对及系统进化分析鉴定样本螺和寄生吸虫种属。结果共检测拟钉螺样本382只,发现无叉形、双叉形、燕子形等3种形态吸虫尾拗,阳性率分别为20.94%(80/382)、3.40%(13/382)、7.07%(27/382)。基于16S rRNA、COI、28S rDNA基因的分子进化分析显示,该拟钉螺与滇池德拉维螺(Delavaya dianchiensis)同源性较高、聚在同一个分支。基于ND1、28S rDNA4基因的序列分析显示,无叉形尾拗吸虫属侧殖吸虫科,燕子形尾拗吸虫属孔肠科,双叉形尾拗吸虫可能为不同于中华血吸虫(Schistosoma sinensium)和勾形卵血吸虫(Schistosoma ovuncatum)的另一种血吸虫。结论初步了解了云南省血吸虫病流行区拟钉螺及其寄生吸虫种属分类,但更明确的分类关系和危害性等尚有待深入研究。