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一种快速提取烟草病毒的方法
1
作者
谷瑞华
王进忠
+4 位作者
文思远
王升启
张爱环
孙淑玲
赵世恒
《北京农学院学报》
2006年第4期68-70,共3页
为寻找高效快速提取植物总RNA的检测方法,以白肋烟叶片为材料,用Trizol试剂盒提取总RNA。依据黄瓜花叶病毒和马铃薯X病毒的外壳蛋白保守序列设计特异性引物,进行RT-PCR检测,从感病叶片中分别扩增出326bp、392bp的目的片断,而对照叶片中...
为寻找高效快速提取植物总RNA的检测方法,以白肋烟叶片为材料,用Trizol试剂盒提取总RNA。依据黄瓜花叶病毒和马铃薯X病毒的外壳蛋白保守序列设计特异性引物,进行RT-PCR检测,从感病叶片中分别扩增出326bp、392bp的目的片断,而对照叶片中无此扩增带。将PCR产物连接pGEM-T载体上,转化大肠杆菌DH5α,得到了含有目的片断的重组子。序列分析表明,与Gene Bank中报道的这两种病毒核苷酸序列进行比较,同源性均达到96%以上。从而证明Trizol试剂盒可以在1 h内提取到纯度高、含量高、完整性好的总RNA,快速、简便、可靠。
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关键词
黄瓜花叶病毒
马铃薯X病毒
RT-PCR
trizol
试剂盒
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职称材料
题名
一种快速提取烟草病毒的方法
1
作者
谷瑞华
王进忠
文思远
王升启
张爱环
孙淑玲
赵世恒
机构
北京农学院植物科学技术系
军事医学科学院放射医学研究所
出处
《北京农学院学报》
2006年第4期68-70,共3页
基金
北京市教委会资助项目(KM200610020007)
北京市自然基金资助项目(5043026)
北京市市管高校人才强教计划资助项目
文摘
为寻找高效快速提取植物总RNA的检测方法,以白肋烟叶片为材料,用Trizol试剂盒提取总RNA。依据黄瓜花叶病毒和马铃薯X病毒的外壳蛋白保守序列设计特异性引物,进行RT-PCR检测,从感病叶片中分别扩增出326bp、392bp的目的片断,而对照叶片中无此扩增带。将PCR产物连接pGEM-T载体上,转化大肠杆菌DH5α,得到了含有目的片断的重组子。序列分析表明,与Gene Bank中报道的这两种病毒核苷酸序列进行比较,同源性均达到96%以上。从而证明Trizol试剂盒可以在1 h内提取到纯度高、含量高、完整性好的总RNA,快速、简便、可靠。
关键词
黄瓜花叶病毒
马铃薯X病毒
RT-PCR
trizol
试剂盒
Keywords
cucumber mosaic virus
potato X virus
RT-PCR
trizol reagent box
分类号
Q503 [生物学—生物化学]
S435.72 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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作者
出处
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被引量
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1
一种快速提取烟草病毒的方法
谷瑞华
王进忠
文思远
王升启
张爱环
孙淑玲
赵世恒
《北京农学院学报》
2006
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