旋毛虫肌肉期幼虫分泌排泄物中46-58kD蛋白的纯化及其在诊断中的应用

本研究以常规ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和电洗脱技术相结合，分离纯化旅毛虫肌肉期幼虫分泌排泄物（ＴＳＬＩ－ＥＳ）中４６－５８ｋＤ的蛋白组份，并用于Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ诊断旋毛虫病．检测结果：旋毛虫病人血清３４份，阳性３２份，阳性反应率为９４．１２％；正常人血精１００份未发现假阳性；对蛔虫病人（１２份）、囊虫病人（１５份）、血吸虫病人（１５份）及肺吸虫病人（２０份）血清亦无交叉叵应出现；建立的Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ易于操作．重复性和稳定性较好。用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ比较纯化抗原和ＴｓＬ１－ＥＳ的诊断效果，结果经卡方检验后显示：用纯化抗原和用ＴｓＬ１－ＥＳ检测的敏感性无显著差异，但纯化抗原的特异性显著优于ＴｓＬ１－ＥＳ。

旋毛虫肌肉期幼虫分泌排泄物及其46-58KD蛋白的保护性免疫作用的比较研究

观察旋毛虫肌肉期幼虫分泌排泄物（TsL1－ES）及其46－58KD蛋白的保护性免疫作用，并作比较研究。方法：通过无血清的RPMI1640培养基培养旋毛虫肌肉期幼虫，获得TsL1-ES；再以常规SDS-PAGE和电洗脱技术相结合纯化TsL1-ES中46-58KD蛋白。用TsL1－ES及其46－58KD蛋白加福氏完全佐剂（FCA）腹腔注射免疫昆明小鼠3次，每鼠再以旋毛虫300条感染攻击，观察感染后第7天鼠肠道成虫数、第30天肌肉幼虫数及血清抗体滴度。结果：46-58KD免疫组鼠的肠道成虫减虫率、肌肉幼虫减虫率及血清抗体的几何平均倒数滴度（GMRT）分别为46.4％、46．1％及2841．2；与TsL1-ES诱导的保护性免疫力接近（48．3％、50．2％及3458．6）；明显高于佐剂对照组（4．8％、8．2％及748．5。结论：TsL1-ES及其46－58KD蛋白均可产生明显的保护性免疫，且保护性免疫水平相近。

旋毛虫肌肉期幼虫分泌排泄物中46～58kD蛋白的纯化

证实了以转移于硝酸纤维膜（NC，paper）的标准蛋白为参照标准（Marker）用SDS－PAGE结合电洗脱技术，分离纯化靶蛋白的可行性。用该技术分离井纯化了旋毛虫肌肉期幼虫分泌排泄物（TsL1－ES）中具免疫原性的抗原组份－46～58kD蛋白，获得近2mg具有明显免疫反应性的高纯度的靶蛋白组份。为进一步研究该特异性抗原组份的诊断价值和保护性免疫作用提供了先决条件。