前列腺结核与前列腺癌临床误诊分析

目的分析前列腺结核(PTB)及前列腺癌(PCa)的临床特点、诊断和鉴别诊断措施,以及误诊原因、防范措施。方法回顾性分析2019年1月—2024年1月收治的曾误诊的2例PTB及1例PCa的临床资料。结果3例均表现为排尿困难、排尿等待、尿流变细或分叉以及尿频和尿急等典型的下尿路症状。根据临床表现及相关医技检查,2例误诊为PCa,1例误诊为PTB。误诊为PCa的2例经直肠前列腺穿刺活检,最终确诊为PTB,1例于外院接受规律抗结核治疗,1例拒绝接受进一步治疗。误诊为PTB的1例经尿道前列腺电切术后病理检查确诊为PCa,术后随访显示无肿瘤生化复发迹象。结论PTB及PCa临床表现有相似性,可相互误诊。PTB在临床相对罕见,其临床表现无明显特异性,容易误诊,临床医生应警惕PTB,以免延误治疗。

肺吸虫病误诊为结核性胸腔积液原因并文献复习

目的探讨肺吸虫病所致胸腔积液的误诊原因及防范误诊的措施。方法分析1例误诊为结核性胸腔积液的肺吸虫病患者的临床诊疗经过,结合相关文献分析其误诊原因。结果本例主要症状为咳嗽、咳痰、发热,胸部CT提示左侧胸腔积液,结核抗体阳性、红细胞沉降率明显升高。误诊为结核性胸腔积液,给予抗结核治疗效果差。5个月后再次因“咳嗽、咳痰、发热”入院,查外周血、胸腔积液及胸膜组织中嗜酸粒细胞异常升高,患者1年前有生食淡水蟹史,查肺吸虫特异性抗原皮内试验(IDTPA)阳性,诊断为肺吸虫病,误诊时间5个月。确诊后给予吡喹酮治疗4个疗程,患者达到临床治愈。结论外周血、胸腔积液及胸膜活检组织中嗜酸粒细胞升高对肺吸虫病的诊断具有重要价值。详细询问个人史,及时进行IDTPA是肺吸虫病早发现、早诊断的关键。

结核感染T细胞斑点试验中结核特异性抗原/植物血凝素比值对肺外结核的诊断价值

目的探讨结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)中结核特异性抗原(TBAg)/植物血凝素(PHA)比值在肺外结核(EPTB)诊断中的应用价值。方法选择2018年1月至2020年1月新乡医学院第一附属医院收治的522例疑诊的EPTB患者为研究对象,根据最终是否诊断为EPTB,将患者分为EPTB组(n=209)和非EPTB组(n=313)。2组患者均行T-SPOT.TB检测,比较2组患者T-SPOT.TB检测结果阳性率、PHA斑点形成细胞(sfc)数、早期分泌靶向抗原6(ESAT-6)sfc数、培养滤液蛋白10(CFP-10)sfc数及TBAg/PHA比值。比较ESAT-6 sfc数、CFP-10 sfc数及TBAg/PHA比值对EPTB的诊断价值。结果EPTB组和非EPTB组患者T-SPOT.TB检测结果阳性率分别为88.5%(185/209)和24.3%(76/313);EPTB组患者T-SPOT.TB检测结果阳性率显著高于非EPTB组(χ^(2)=206.840,P<0.05)。EPTB组患者T-SPOT.TB检测结果中ESAT-6 sfc数、CFP-10 sfc数、TBAg/PHA比值均显著高于非EPTB组,PHA sfc数显著低于非EPTB组(P<0.05)。根据受试者工作特征(ROC)曲线,TBAg/PHA比值诊断EPTB的特异度显著高于ESAT-6 sfc数和CFP-10 sfc数(P<0.05);ESAT-6 sfc数、CFP-10 sfc数、TBAg/PHA比值诊断EPTB的ROC曲线下面积和灵敏度比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论TBAg/PHA比值可显著提高T-SPOT.TB诊断EPTB的特异度,在EPTB诊断中具有较好的应用前景。

结核分枝杆菌特异基因MPT64-Rv1985c融合蛋白的免疫诊断价值研究

目的表达和纯化结核分枝杆菌特异蛋白MPT64、Rv1985c及其融合蛋白MPT64-Rv1985c,探讨3种抗原在结核病免疫诊断中的价值。方法通过PCR获得基因MPT64、Rv1985c及其融合基因,并克隆到pET32a(+)表达载体,转化E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导表达后用镍柱进行纯化,再用SDS-PAGE及Western blot方法检测并鉴定目的产物。采用ELISA方法检测3种抗原在血清及胸腔积液样本中的结核病诊断效率。结果 3种目的蛋白均以包涵体形式表达。经过纯化及复性获得纯度较高的可溶性蛋白。血清及胸腔积液样本中特异性IgG抗体检测结果显示,融合蛋白MPT64-Rv1985c在诊断肺结核、肺外结核的敏感性为87.1%和88.9%,特异性为75.6%;诊断结核性胸膜炎的敏感性为91.2%,特异性为84.6%,敏感性较单一抗原MPT64及Rv1985c有显著提高(P﹤0.05)。结论融合蛋白MPT64-Rv1985c诊断效果显著高于单一抗原,在结核病诊断中具有重要的研究价值。

Dot-ELISA法检测结核分枝杆菌特异性抗原CFP10的改进和建立

目的建立一种检测结核分枝杆菌特异性抗原培养滤液蛋白10(culture filtrate protein 10,CFP10)的斑点酶联免疫吸附试验(dot enzyme linked i mmunesorbant assay,Dot-ELISA)方法。方法采用真空泵抽吸浓缩检测样本,改进Dot-ELISA用改进前的和改进后的Dot-ELISA方法检测同一批临床确诊的结核性胸膜炎的胸腔积液25例和非结核性胸腔积液31例,比较方法改进前后检测CFP10的敏感性和特异性;改变实验程序中的工作条件(硝酸纤维素膜的孔径、滴加样本的体积、真空泵抽吸的压力、不同的封闭液、温育的温度和时间及抗体的滴度),确定最适工作条件及重复性和稳定性。结果改进前检测CFP10的敏感性为76.0%,改进后并应用最适条件的敏感性为96.0%,差异有统计学意义(P=0.042);特异性和重复性、稳定性实验结果表明,所建立的Dot-ELISA法特异性和改进前差异无统计学意义(P=0.641),且稳定性和重复性较好。结论所建立的Dot-ELISA是一种比较敏感、特异和稳定的检测方法,能用于结核特异性抗原的检测和疾病的诊断。

结核分支杆菌分泌蛋白Mtb81克隆、表达、纯化及血清学诊断价值的初步研究

目的通过结核分支杆菌Mtb81基因在大肠杆菌中的表达,获得大量纯化的重组Mtb81蛋白。通过Western-blot和ELISA方法评价Mtb81抗原,检测血清中抗结核抗体的灵敏度和特异性,为进行结核病血清学诊断打下基础。方法应用PCR技术扩增结核分支杆菌H37Rv Mtb81DNA序列;构建pET24b-Mtb81重组质粒,然后转化入表达宿主大肠杆菌BL21(DE3);通过Western-blot鉴定重组Mtb81蛋白,采用Chelating Sepharose Fast Flow纯化重组Mtb81蛋白;将纯化的重组Mtb81蛋白通过Western-blot、酶联免疫吸附试验(ELISA)方法,检测结核病人及正常人血清中的抗体,应用Microsoft Excel软件统计分析实验数据。结果pET24b-Mtb81在大肠杆菌BL21(DE3)细胞内以包涵体形式存在,表达量占菌体总蛋白的30%左右。纯化后的Mtb81样品经SDS-PAGE和光密度扫描分析表明其纯度为95%左右。纯化后的Mtb81蛋白通过Western-blot鉴定,结果显示:加入结核病人血清抗体于目的蛋白位置有一条显色带,而加入正常人血清组则无显色反应;酶联免疫吸附试验(ELISA)方法,检测30例结核病人及正常人血清中的抗体,结果显示:rMtb81的特异性和灵敏度分别为96%、93%。结论pET24b-Mtb81大肠杆菌工程菌株能高效表达Mtb81蛋白,Western-blot结果证明表达蛋白具有很好的免疫反应性和抗原特异性;ELISA结果证明重组Mtb81检测结核病人血清中的抗结核抗体,具有较高的灵敏度和特异性。

抗原特异性T细胞活化试验对结核病鉴别诊断的价值

目的建立抗原特异性T细胞活化试验方法,用于结核病的鉴别诊断。方法采用纯化蛋白衍生物(PPD)在体外对58例结核患者和42例非结核患者外周血细胞进行刺激后,定量检测抗原特异性细胞分泌γ-干扰素(IFN-γ),比较结核患者与非结核患者免疫应答的差别。结果结核组PPD刺激培养后IFN-γ的含量显著高于非结核组(P<0.01)。结论该方法可用于结核病与其它胸部疾病的鉴别诊断。

利用结核分枝杆菌抗原特异性γ-IFN体外释放测定评估抗结核治疗疗效的临床应用价值

探讨利用结核分枝杆菌抗原特异性γ-IFN体外释放测定评估抗结核治疗疗效的临床应用价值。研究了66例培养阳性肺结核病人抗结核治疗过程中抗原特异性γ-IFN体外释放测定结果的变化,并与结核菌素皮试结果的变化相比较。结果,抗原特异性γ-IFN体外释放测定于抗结核治疗前期(满2个月)的阳性率显著高于后期(疗程满6个月)[55/66(83.3%)vs12/66(18.2%);P≤0.01],而PPD结素皮试于抗结核治疗前期及后期的阳性率分别为[50/66(75.8%)vs38/66(57.6%);P>0.05]。结论:结核分枝杆菌抗原特异性γ-IFN体外释放测定评估抗结核治疗疗效较PPD结素皮试临床应用价值更大。

结核杆菌特异性抗原对结核病诊断价值研究

目的评价结核杆菌特异性抗原对结核病的诊断价值。方法分别以CFP10-ESAT6、38k Da、Ag85B、Hsp X单一或联合采用ELISA实验,计算敏感度、特异度、符合率、Youden指数。结果 38KDa+CE、38k Da+Hsp X、38k Da+CE+Hsp X,灵敏度、特异度、符合率均在72%以上;38k Da+CE+Hsp X联合诊断,实测敏感度达80.39%、特异度18.99%,X线片结核空洞影敏感度97.06%(33/34)。结论单一与联合结核杆菌特异性抗原效用存在一定差异,38k Da+CE+Hsp X诊断效用相对较好。

结核分枝杆菌特异基因MPT64-Rv1985c融合蛋白的免疫诊断价值研究

目的表达和纯化结核分枝杆菌特异蛋白MPT64，Rv1985c及其融合蛋白MPT64-Rv1985c，并探讨三种抗原在结核病免疫诊断中的价值。方法通过PCR获得基因MPT64，Rv1985c及其融合基因，并克隆到pET32a（＋）表达载体，转化E．coli．BL21（DE3），经IPTG诱导表达后用镍柱进行纯化，再用SDS-PAGE及Western blot方法检测并鉴定目的产物。采用ELISA方法检测在血清（肺结核患者31例、肺外结核患者45例、健康人135例）及胸腔积液样本（结核性胸膜炎患者91例、肺癌性胸膜炎患者91例）中三种抗原的结核病诊断效率。结果三种目的蛋白均以包涵体形式表达。经过纯化及复性获得纯度较高的可溶性蛋白。血清及胸腔积液样品中特异性IgG抗体检测结果显示，融合蛋白MPT64-Rv1985c在诊断肺结核、肺外结核敏感性为87．1％和88．9％，诊断结核病的特异性为75．6％；诊断结核性胸膜炎敏感性为91．2％，特异性为84．6％，敏感性较单一抗原MPT64及Rv1985c有显著提高。结论融合蛋白MPT64-Rv1985c诊断效果显著高于单一抗原，在结核病诊断研究中具有重要的研究价值。

结核分支杆菌H_(37)Rv株抗原成份分析

通过免疫印迹技术(W estern b lotting),用结核杆菌的单克隆抗体及兔抗结核菌多克隆抗体对结核分支杆菌H37R v的菌体蛋白和培养液蛋白成份进行了初步分析,发现固体培养菌与液体培养菌的菌体具有基本一致的多肽抗原成份,而培养液中的抗原成份与前两者差异稍大。通过筛选和鉴定结核分枝杆菌的特异性和保护性抗原,研究结核杆菌的免疫反应特点,为探索结核病的诊断和治疗的新途径奠定了一定的基础。

抗结核治疗中患者外周结核分枝杆菌抗原水平与特异性免疫应答相关性分析

目的:活动期结核病患者外周呈现相当水平的结核特异性细胞免疫应答,在治疗过程中也呈现一定的动态变化特征,这种结核特异性细胞免疫应答的抗原驱动因素则还未知。本研究通过同步分析肺结核患者在抗结核治疗过程中外周特异性抗原和抗原特异性T细胞应答水平的动态变化,探讨外周抗结核特异性细胞免疫应答的理论依据。方法:利用外周血抗原富集-质谱鉴定技术动态检测外周血浆中结核特异性抗原CFP-10在患者抗结核治疗过程中含量的动态变化,并采用流式细胞术同步分析CFP-10刺激后的T细胞应答水平,分析CFP-10含量变化与不同细胞因子分泌T细胞数量的相关性。结果:CFP-10抗原水平在患者治疗过程中呈现个体化差异,同时在TB治疗中CFP-10含量与CFP-10特异性IFN-γ^+CD4^+T细胞比例具有显著相关性(P=0.029),但是CFP-10的含量与TNF-α^+CD4^+T细胞比例之间则无相关性(P=0.98)。结论:本研究获得了结核病患者治疗过程中外周结核病原菌抗原的动态变化特征,据此可推断目前所采用的IFN-γ释放实验某种程度上可以反映患者外周结核分枝杆菌抗原的载量,上述基于结核病原学和机体免疫应答水平的同步检测,有利于进一步解析抗结核免疫应答的抗原驱动因素,并为建立新型抗结核治疗疗效评价的生物标志物提供前期理论依据。

γδT细胞TCR分子与Mtb-Ag表位结合的初步探讨

探讨采用毛细管电泳(CE)法分离检测结核杆菌抗原(Mtb-Ag)的活性成分能与γδT细胞TCR分子进行表位结合.试验温度25℃;电泳毛细管:熔融石英毛细管55cm(40cm处检测窗口)×50μm i.d.;进样压力0.5 psi;进样时间5.0s;缓冲溶液浓度为0.05mol·L^(-1)(p H=10.20)的乙酸钠溶液;分离电压+15 k V.该方法能依据相对分子质量大小分离Mtb-Ag样品活性成分.样品加标回收率为96.75%,相对标准偏差低于7.45%.采用CE法分离检测Mtb-Ag样品中的活性成分能与γδT细胞TCR分子进行表位结合.

4种靶特异性抗体检测对肺结核的临床诊断价值

目的:探讨4种靶特异性抗原结核抗体对肺结核的临床诊断价值。方法:选取分别含LAM、38ku/16ku蛋白、纯化BCG蛋白、人型PPD的4种结核抗体检测试剂盒,对110例肺结核、100例对照标本进行测定,运用卡方(χ2)检验,比较各组间敏感性、特异性的差异。结果:LAM-IgG、38ku/16ku-IgG、BCG-IgG和PPD-IgG的敏感性分别为74.5%、70.9%、80.0%和83.6%;特异性分别为91.0%、99.0%、93.0%和84.0%;痰菌阳性的阳性检出率分别为85.7%、88.6%、91.4%和91.4%;痰菌阴性的阳性检出率分别为69.3%、62.7%、74.7%和80.0%。结论:4种靶特异性抗原结核抗体对肺结核诊断的敏感性无显著差异,特异性存在非常显著的差异;以PPD为靶抗原的国产结核抗体试剂盒价格低廉,有很高的敏感性和较高的特异性,适宜推广使用。

时间分辨荧光免疫法检测脑脊液结核分枝杆菌特异性抗原的诊断价值

目的对时间分辨荧光免疫法检测脑脊液结核分枝杆菌特异性抗原的诊断价值进行研究。方法整群选取2012年6月—2013年6月于该院确诊为结核性脑膜炎患者48例,收集患者的脑脊液,建立时间分辨荧光免疫分析法检测脑脊液中ESAT-6-CFP10抗原。同时采用TRIFA法和ELISA法对结核性脑膜炎患者脑脊液检查特异度进行检测。结果 ESAT6/CFP10的TRIFA法稳定性好,线性宽,其检测灵敏度为2.5 ng/m L,平均回收率为97.6%,批内变异系数平均为3.35%,批间CV平均为5.32%。TRFIA法结核性脑膜炎患者脑脊液检查特异度为92.6%,明显高于ELISA法的82.4%,差异有统计学意义(P<0.05,χ2=5.5311)。结论 TRFIA法敏感度、精密度、重复性、线性相关性较好,检测脑脊液中ESAT-6-CFP10抗原对诊断结核性脑膜炎有很高的敏感度和特异度。

8种痰液细菌血平板培养菌落生理盐水冲洗液MPT64检测结果分析

目的探讨痰液细菌培养常见临床分离细菌分泌物中的MPT64检测情况,为准确评价MPT64检测在结核病诊断中的价值提供科学依据。方法选取2019年3月至2020年12月期间本院痰培养得到的50株常见临床细菌分离株,用无菌生理盐水轻轻冲洗痰液细菌血平板培养菌落,应用凯必利结核分枝杆菌抗原检测试剂(胶体金法)检测冲洗液MPT64。结果对铜绿假单胞菌(15株)、肺炎克雷伯菌(9株)、嗜麦芽窄食单胞菌(8株)、大肠埃希菌(8株)、金黄色葡萄球菌(5株)、鲍曼不动杆菌(3株)、表皮葡萄球菌(1株)和奇异变形杆菌(1株)8种痰中常见临床细菌分离株的生理盐水冲洗液进行了MPT64检测,在铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、嗜麦芽窄食单胞菌和金黄色葡萄球菌中分别有2、5、4、2株MPT64阳性,同时铜绿假单胞菌中有1株呈现可疑阳性结果。结论在某些细菌分泌物中存在结核分枝杆菌特异蛋白MPT64抗原性类似结构物,值得进一步深入研究。

结核菌特异性抗原ESAT-6及CFP-10在肺结核及肺炎患者中的诊断价值

目的分析结核菌特异性抗原ESAT-6及CFP-10在肺结核及肺炎患者中的诊断价值。方法将48例肺结核患者作为观察组,30例肺炎患者作为对照组,分别进行PPD及ELISA实验,对两组患者的结核菌特异性抗原在两种疾病中的诊断价值进行分析。结果经ELESA实验检测,观察组结核菌阳性率、特异度及灵敏度分别为87.50%、93.75%、89.58%;对照组结核菌阳性率、特异度及灵敏度分别为60.00%、66.67%、70.00%;组间比较差异具有统计学意义(P<0.05)。经PPD实验检测,观察组结核菌阳性率、特异度及灵敏度分别为45.83%、50.00%、47.92%;对照组结核菌阳性率、特异度及灵敏度分别为46.67%、50.00%、53.33%;组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论采用ELISA法对肺结核及肺炎患者ESAT-6及CFP-10抗原进行检测可鉴别两者的不同,与PPD法相比,ELISA法在肺结核及肺炎的鉴别中诊断价值更优。

TB-SA抗体检测结核病的临床研究

目的：研究结核分枝杆菌特异性蛋白（ TB-SA）抗体用于结核病检测的价值。方法可疑结核病患者353例和健康志愿者74例同时进行结核分枝杆菌TB-SA抗体检测和结核菌素纯蛋白衍生物（ PPD）试验，并对可疑结核病患者进行痰涂片显微镜检查和分离培养鉴定。结果结核分枝杆菌TB-SA抗体检测菌阳肺结核的敏感度为87.92%（80/91）；诊断菌阴肺结核的敏感度为78.23%（194/248）；诊断结核病的总体敏感度为81.42%（276/339），特异度为86.36%（76/88）。结论结核分枝杆菌TB-SA抗体检测结核病有较好的敏感度和特异度，有利于结核病的辅助诊断和鉴别诊断。

人类白细胞抗原DRB1基因与肺结核的相关性研究

目的 探讨HLA DRB1基因多态性与肺结核 (PTB)的遗传关联性及其与临床表现的关系。方法 采用聚合酶链反应 序列特异性引物 (PCR SSP)方法 ,对 74例PTB患者及 90名正常人的HLA DRB1等位基因进行分型。结果 与对照组相比 ,PTB病例组的DRB1 15等位基因频率显著增高 (34 3%比 17 0 % ,Pc<0 0 5 ,RR =2 91) ,HLA DRB1 12基因频率高 (15 4%比 7 5 % ) ,但统计学上无显著性差异 (Pc>0 0 5 ) ;而DRB1 11基因频率显著低于对照组 (1 4%比 9 9% ,Pc <0 0 5 ,RR =0 12 )。HLA DRB1 15阳性患者中复治病例数和耐药病例数均显著高于HLA DRB1 15阴性组 (P <0 0 5 )。结论 HLA DRB1 15可能是PTB的易感基因 ,DRB1 11可能为保护基因 ,HLA DRB1 15基因与PTB临床特征有一定相关性。

外周血T细胞抗原刺激试验(T-SPOT)在结核病检测中的应用

目的通过分析T细胞抗原刺激试验(T-SPOT)在结核感染临床检测中的特异性和敏感性,探讨T-SPOT法在普通人群、高危人群和疑似人群中结核病筛检的准确性和适应范围。方法研究对象为湖南省湘西自治州人民医院2016年5-9月期间确诊的结核病和非结核病患者。取研究对象外周血并分离出外周血单个核细胞(PBMC),应用T-SPOT法、抗酸杆菌染色、PPD试验、结核抗体检测四种方法对两组病人的感染情况进行检测,对四种方法的敏感性和特异性进行统计学分析。对T-SPOT法在不同人群中检测结核感染中的阳性率进行预测。结果 T-SPOT法检测结核感染的敏感性和特异性分别为93.4%和77.3%。T-SPOT在结核病组的阳性率为93.3%,高于非结核病组的阳性率22.6%(χ~2=152.81,P<0.01)。在结核病组内和非结核病组内不同病症比较,结果提示T-SPOT方法应用于对结核病的辅助诊断具有医学意义。T-SPOT法、抗酸杆菌染色、PPD试验、结核抗体检测的Kappa值分别为0.691、0.183、0.525、0.185,从Kappa值上看,只有T-SPOT法的值大于0.6,说明此诊断方法与真实情况一致性比较高,准确性更好。预测T-SPOT法在普通人群、高危人群和疑似人群中的阳性率分别为23.03%、31.07%和67.75%,但是其中真正有结核感染比率分别为1.87%、34.85%和43.60%。结论 T-SPOT法对结核病的诊断准确性优于抗酸杆菌染色、PPD试验和结核抗体检测三种方法,但T-SPOT法不适用于对普通人群结核病的筛检,仅适合于对高危人群的筛检和对疑似结核病的辅助诊断。