基于SRAP分子标记的郁金香遗传多样性分析

为探究郁金香(Tulipa gesneriana)种质资源的遗传背景,精准评价和筛选优异种质用于郁金香遗传改良,该研究采用SRAP分子标记分析40个郁金香品种的遗传背景,明晰遗传多样性和亲缘关系。结果表明:在43对SRAP引物中可用于郁金香遗传多样性研究的多态性引物共21对,在40个品种中共扩增出249条清晰稳定的条带,其中多态性条带245条,多态性比率为98.39%。供试的40个品种遗传相似性指数为0.5020~0.8675,遗传多样性参数等位基因数(N*a)、有效等位基因数(N*e)、Nei’s基因多样性指数(H*)、Shannon’s信息指数(I*)和多态性信息含量分别为1.9810、1.5149、0.3042、0.4603和0.3212,供试材料遗传多样性丰富。聚类结果和主坐标分析将40个郁金香品种分为两大类,其中‘Christmas Magical’‘Banja Luka’‘Madame Lefeber’与其他品种亲缘关系较远,在遗传背景上具有一定差异。

郁金香品种评价及在武汉市园林应用中探讨

通过系统评价郁金香品种的生物学和生态学特性,筛选出本地适应性品种。通过实地调查法、专家评价法结合,对29种材料从景观特性、环境适应性、园林应用潜力三个方面选取群体花期、开花率等10个评价指标,使用层次分析法建立综合评价体系,将参试品种分成3个等级:Ⅰ级有14个品种,Ⅱ级有9个品种,Ⅲ级有6个品种。Ⅰ、Ⅱ级品种普遍具有较高观赏价值,且适应性较强,适合武汉地区的园林绿化应用。本研究结果对适应本地应用品种的筛选有重要指导作用,筛选出的品种可为今后华中地区郁金香的园林应用提供参考。

郁金香不同组织内参基因筛选及稳定表达分析

【目的】筛选郁金香在盐胁迫条件下稳定表达的内参基因,为开展郁金香耐盐相关基因表达调控相关研究提供理论参考。【方法】以郁金香栽培品种红色印象为材料,于苗期对其进行盐胁迫处理,不同时间(0、2、4、6、8、10、12、24和48 h)采集根、鳞茎和叶,通过实时荧光定量PCR检测候选内参基因在郁金香不同组织中的表达情况,再利用Delta CT计算每个样本的平均C_(t)值,再结合3个常用内参基因稳定性评估软件(geNorm、NormFinder、BestKeeper)的分析结果,利用RefFinder在线软件综合评价候选内参基因的表达稳定性,并通过目的基因质膜Na+/H+逆向转运蛋白基因(SOS1)和液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白基因(NHX1)的表达分析验证内参基因的可靠性。【结果】在15个候选内参基因中筛选到9个可用于郁金香各组织实时荧光定量PCR的内参基因。候选内参基因的C_(t)值分析结果显示,25S rRNA在不同组织中的平均C_(t)值最低,表达丰度最高,C_(t)值分布范围相对集中,是根、鳞茎和叶均能稳定表达的内参基因。geNorm和NormFinder分析结果均显示,18S rRNA均能在根、鳞茎和叶中稳定表达,25S rRNA在根和叶中表现出较好的基因稳定性,NADP基因在鳞茎中基因稳定性较好。BestKeeper分析结果显示,根、鳞茎和叶组织中最佳的内参基因为25S rRNA,同时18S rRNA在根和叶中稳定性较好。结合上述4种分析结果通过RefFinder软件得到各候选基因在郁金香不同组织中的表达稳定性综合排名,其中根组织:25SrRNA>18SrRNA>TUB-6>EF1α>NADP>EF-1α>β-actin;鳞茎组织:NADP>25S rRNA>18S rRNA>EF-1α>EF1α>TUB-6;叶组织:25S rRNA>18S rRNA>EF-1α>CYP>UBC。【结论】9个候选内参基因在郁金香不同组织中的表达情况存在差异,25S rRNA和18S rRNA是在郁金香各组织的不同盐胁迫处理中稳定表达的内参基因,同时使用2个内参基因更有利于得到准确的基因表达定量结果。

上海地区郁金香引种栽培与品种综合评价

通过建立郁金香(Tulipa gesneriana)品种评价体系,筛选生长适应性好、观赏价值高,适宜应用于园林景观的郁金香品种。对29个郁金香进口品种在上海地区进行引种栽培,观察记录其物候期,并对植株高、冠幅等12个生长特性,以及开花整齐度、花型、花色等32个观赏特性进行了观测。从观测指标中筛选出了包括开花整齐度、花色均匀度、花色等27个评价指标,使用层次分析法与灰色关联度分析法建立了评价体系。综合评价将29个品种分成了4个等级:Ⅰ级包含10个品种, Ⅱ级12个品种,而Ⅲ级和Ⅳ级包含品种数较少,分别只有4和3个品种。Ⅰ、Ⅱ级品种普遍具有较高的观赏价值,同时适应性较强,适合今后推广应用于上海及周边地区园林绿化。这对筛选适于上海及周边地区园林种植的郁金香品种有重要的指导作用,建立的评价体系对评价其他郁金香品种在园林中应用也有积极参考意义。

郁金香HKT1基因参与盐胁迫响应的时空表达模式分析

以郁金香盐敏感品种‘范思哲’为试材,通过水培试验分别设置胁迫处理(0.4 mol·L^(-1)NaCl)、对照(0 mol·L^(-1)NaCl),于胁迫后的0、4、8、12、24、48、72 h分别对郁金香的不同组织部位(根、鳞茎、地上茎、叶)进行取样,利用实时荧光定量PCR对4个组织在7个时间的HKT1基因时空差异表达水平进行分析,以期为探究HKT1基因在郁金香体内维持钾钠离子平衡的能力,进一步挖掘郁金香耐盐基因、完善郁金香耐盐机理提供参考依据。结果表明:郁金香在NaCl诱导下,随着盐胁迫的持续,HKT1基因在郁金香各组织中均有上调,但表达丰度不同,说明HKT1基因在各组织的响应进程存在差异,是郁金香盐胁迫过程中的差异表达基因。伴随着胁迫时间的增加,HKT1基因表达量在鳞茎、地上茎、叶组织中均呈现先上升后下降的趋势,而在根中通过持续高表达来维持体内钾钠离子的平衡,是郁金香响应盐胁迫最为敏感部位。HKT1基因是郁金香抵御盐胁迫相关的转录因子,其参与了郁金香对盐胁迫的调控过程。该研究发现郁金香HKT1基因时空表达模式,表明其在钾钠离子的选择性吸收过程中发挥着重要的作用,该研究结果可为后续郁金香耐盐机制的研究奠定基础,提供分子依据和有效的基因资源。

郁金香更新鳞茎发育的碳同化物积累与内源激素变化研究

应用扫描电镜和14C同位素标记技术,并结合内源激素测定,考察郁金香更新鳞茎膨大发育与碳同化物积累、分配的关系。结果表明:在鳞片细胞内观察到明显的淀粉颗粒,并随鳞茎的发育进程充满整个细胞腔。在盛花期前,14C同化物主要分配到地上部;进入叶枯期后14C同化物以向地下部运输为主,分配比例达66.01%,其中更新鳞茎中14C同化物的分配占60.85%,这时14C库活性表现为:鳞茎>叶片>花茎>根系。在郁金香更新鳞茎发育进程中,叶片中GA、IAA含量呈下降趋势,ABA含量则不断增高并在盛花期出现峰值,达65.86ng·g-1FM。比较不同生育期的GA3/ABA比值,在发叶期的叶片和盛花期的更新鳞茎中均出现高比值,表明内源激素的平衡可能是郁金香更新鳞茎发生和发育的调节因子。

郁金香器官离体培养再生小鳞茎的研究

以4个郁金香品种‘凯氏奈丽斯’、‘风流寡妇’、‘检阅’和‘金色检阅’的叶、花茎、花托、子房、鳞片及腋芽等不同器官为外植体,在MS+2,4-D0·1mg·L-1,MS+2,4-D0·5mg·L-1,MS+BA1·0mg·L-1,MS+BA5·0mg·L-1,MS+BA2·0mg·L-1+IAA0·5mg·L-15种培养基上进行离体培养。结果表明,花托外植体直接诱导小鳞茎的频率最高,在培养基MS+2,4-D0·5mg·L-1上诱导率达56·7%,平均每块外植体产生小鳞茎数达10·7个;其次是花茎,直接诱导小鳞茎的频率为33·3%,平均每块外植体产生小鳞茎数达19·9个;鳞片及鳞片中的腋芽诱导鳞茎较难且需时间较长;叶和子房则未能诱导出小鳞茎。

冷藏对郁金香种球复壮的影响

郁金香种球经低温冷藏后种植 ,其植株子代球的收获量明显高于常温下贮藏后种植的植株 ,收获的更新球的单重和周径 (分别为 2 5 .0 g和 12 .0cm)明显大于常温贮藏的种球 (单重和周径分别为 2 1.0g和 11.0cm) ,其植株从基部起第 2张叶片的面积 (10 3.9cm2 )也明显大于后者 (85 .6cm2 )。相关回归分析表明 ,叶面积和更新球的大小。

杭州地区郁金香的鳞茎发育及碳水化合物代谢

在杭州地区连年观察郁金香Tulipagesneriana自然栽培的生育期,发现4月下旬至5月的高温天气造成郁金香花后的鳞茎膨大期缩短,也是种球出现退化的主要原因。收获球总质量和更新鳞茎的单质量(低于10g)明显降低是郁金香种球退化的主要标志。测定郁金香鳞茎的碳水化合物总量变化表明,盛花期后更新鳞茎中的蔗糖与可溶性糖总量明显增加,叶枯期开始后淀粉迅速积累,尤其是外层鳞片是淀粉的主要贮藏部位。

郁金香种子休眠特性及发芽条件的研究

针对郁金香(Tulipa gesneriana)种子在常温条件下难以萌发,冷藏条件下萌发时间过长、萌发率过低、易发霉等问题,在现有研究基础上通过刺破种子、改善芽床等手段对发芽条件进行改进,探讨常温条件下种子的萌发情况。结果显示,野生郁金香种子存在深度休眠现象,低温、激素处理、刺破种子、改善芽床等方法有助于解除休眠;光照、室温储藏对解除郁金香的休眠意义不大。在萌发过程中,郁金香种子有一个较长时间的吸胀萌动期,且表现出明显的序次萌发现象。常温条件下,储藏6个月后的当年郁金香种子在4℃条件下冷藏15 d后,刺破种子,接种在质量浓度为0.5 mg/L的GA3培养基上持续光照,10 d后有种子萌发,30 d种子萌发率达25%,45 d时达50%,50 d后发芽率为95%,而同样条件下没刺破的种子发芽率极低。4℃、-10℃的冷藏温度处理的种子,发芽率之间无显著差异(P>0.05)。郁金香胶质状的胚乳对胚有一定的束缚作用,刺破种子可显著提高种子的萌发率。芽床对种子的萌发具有重要的作用,培养基的使用,既保证了种子在萌发过程中的营养物质供应,又使种子受到培养基中GA3的持续作用,而纸床往往因为污染而使种子过早终止发芽。

郁金香衰老过程中几种保护酶活性的变化

两个郁金香品种在开花后随着可溶性蛋白质含量下降，细胞内超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、过氧化氢酶（ＣＡＴ）和过氧化物酶（ＰＯＤ）３种保护酶活性也随之下降，同时发生过氧化产物丙二醛（ＭＤＡ）的迅速累积；并且３种保护酶活性下降与ＭＤＡ含量的增加呈明显负相关。两品种之间变化趋势基本相同。

遮光对郁金香叶片叶绿素含量及叶绿体超微结构的影响

在遮光条件下,观察供试郁金香5个品种的生长特性,研究了不同遮光处理对郁金香不同品种叶片叶绿素含量及叶绿体超微结构的影响。结果表明,夜皇后和牛津两个品种耐荫性强,适当遮光后使花期延迟,且植株生长正常。两个品种叶片叶绿素含量均随遮光增加而减少,且叶绿体超微结构发生相应的变化。遮光率大于50%时,叶绿体超微结构发生明显变化,夜皇后叶绿体变化尤为突出,部分叶绿体呈不规则的椭圆形,基粒类囊体基粒片层数量减少且排列疏松,基质片层模糊。牛津遮光后叶绿体超微结构变化较小,说明其耐阴性强于夜皇后。

郁金香灰霉病的研究初报

初步研究结果证明：郁金香灰霉病的病原是郁金香葡萄孢〔Ｂｏｔｒｙｔｉｓｔｕｌｉｐａｒ（Ｌｉｂ．）Ｌｉｎｄ．〕；病菌生长及孢子萌发最适温度为２０℃和２５℃；在相对湿度１００％条件下孢子萌发率最高；菌丝在葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、果糖等多种碳源培养基上均能生长，但菌落形态略有差异，其中以ＰＤＡ培养基上的生长最快；该菌一般只危害郁金香，但在室内人工接种条件下，还侵染番茄、黄瓜、西葫芦等。

郁金香花芽分化的解剖学研究

利用石蜡切片法研究了郁金香花芽分化的进程及温度变化对花芽分化的影响。结果表明：郁金香鳞茎内顶端生长点的分化过程可以分为营养生长期、生殖茎端形成期、花器官分化期、花器官伸长期４个时期，花芽分化从７月上旬开始，８月中旬结束。在贮藏期间，郁金香鳞茎内顶端生长点前期发育速度较慢，后期发育速度较快，并按由外向内的顺序进行。花芽分化的最适宜温度为２０℃。

荷兰郁金香在长沙地区的生长

观测湖南省森林植物园引种栽培的50个荷兰郁金香品种的生长情况,结果表明,1)种植10 d后,大部分郁金香品种开始生根,14 d全部生根,大多根长2～4 cm;2)所引进的郁金香除2个晚花品种外,其余都能正常生长开花,花期集中在3月中旬至4月上旬,10～20 d不等;早花品种和晚花品种花期前后相差20 d左右,持续时间可达40 d;3)郁金香的花期长短受温度的影响较大,气温在10～20℃可使花期延长;晚花品种开花后,大部分时间处在20℃以下的低温阴雨天气,花期普遍比早花和中花品种长2～3 d.

光照强度对郁金香生长和开花的影响

通过对郁金香进行遮荫处理，研究不同光照条件对郁金香生长和开花的影响。结果表明：光照强度影响了郁金香的生长和开花。遮荫条件下，郁金香叶片叶绿素含量大大降低，植株变高，叶片变窄、变长，遮荫使郁金香花期延迟，花冠变小，花葶变高，适度遮荫能提高郁金香开花率，但重度遮荫下其开花率显著降低，花质量下降。综合分析认为，55％～60％的光照强度比较适合郁金香生长。

光照强度对郁金香生长发育和内源激素含量的影响

通过对郁金香进行遮荫处理,研究全光照(CK)、55%～60%光照(B1)、25%～30%光照(B2)、10%～15%光照(B3)4种不同光照强度对郁金香生长和内源激素的影响。结果表明:遮荫提高了郁金香在自身支撑结构的投入,株高变大,叶片变长,叶面积增大,过度遮荫抑制了有性生殖,表现为开花率降低,花径变小。随着光照强度的降低,郁金香叶片内吲哚乙酸含量和赤霉素含量升高,而脱落酸含量降低,遮荫降低了ABA/IAA与ABA/GA3比值,过低比值的ABA/IAA与ABA/GA3不利于成花。

生长调节剂促进3种球根花卉开花的研究

生长调节剂 (A1 ,A2 )能有效地促进郁金香花芽分化 ,A1效果比A2显著 ,经A1处理后 ,开花率比对照提高 40 % ,花茎长度增加 1 1cm ,花期提早 1 0d ,寿命延长 4d .生长调节剂 (B1 ,B2 )可促进彩色马蹄莲开花 ,B2的效果优于B1 ,开花率比对照提高 5 2 % ,花茎长度增加 1 8cm ,花朵直径增加 1 .4cm ,同时有效地克服了花畸形现象 .生长调节剂 (C1 ,C2 )能明显改善唐菖蒲切花品质 ,C2处理较对照的单株平均花数增加 5朵 ,种球围径增加 3 .8cm .

对杭州地区郁金香退化原因的研究

研究证实了郁金香在杭州地区栽培出现普遍退化现象的原因不是气候问题,而是栽培技术问题,我们以荷兰郁金香商品球的重量、花瓣大小和繁殖系数为检验退化的标准,连续四年栽培试验,所得第四代更新球与引进的商品球相比,重量由原来的25.10 g增加到35.927 g,花瓣大小与商品球花瓣火小一致,繁殖系数与荷兰同品种的记载一致,更新球的合格率与开花率均达100％。由此证明,郁金香在杭州地区完全可以正常地完成其生活史并繁衍健康的后代,为进一步大面积生产性栽培提供了理论依据。最后,作者还提出了在杭州地区正确栽培郁金香的技术要点,

上海地区郁金香引种与物候期观察

从荷兰引进了282个郁金香品种,种植于上海鲜花港郁金香展示公园内,进行了生物学特性观察。记录了各郁金香品种的物候期,测量了植株茎杆高度。对不同类型郁金香的出苗期、盛花期、枯苗期等进行了比较。