LCRG1 SUPPRESSES TUMOR GROWTH IN VIVO BY LIPOSOME-MEDIATED GENE TRANSFER

Objective: To investigate whether LCRG1 (Laryngeal Carcinoma Related Gene 1) has tumor suppressor function. Methods: The recombinant plasmid pcDNA3.1(+)/LCRG1 was successfully constructed. The biological effects of LCRG1 on Hep-2 cell line were studied by cell transfection, cell growth observation colony formation analysis and tumorigenicity experiments. Results: The LCRG1 gene potently inhibited tumorgenesis in vitro and in vivo, as showed by dramatic growth arrest observed in cell growth analysis and suppression of anchorage-independent growth and tumorigenicity in nude mice. Conclusion: Our results suggested that LCRG1 may be a candidate of tumor suppressor gene.

Glucocorticoids suppress tumor angiogenesis and growth of prostate cancer

Hormone-refractory prostate cancer ( HRPC) sometimes is responsive to treatment with glucocorticoids, such as prednisolone, hydrocortisone and dexamethasone, but the underlying mechanisms are not well established. In a recent paper (Clin Cancer Res, 2006, 12:3003-3009), Yano et al. Hypothesized and confirmed that the therapeutic effect of glucocorticoids on HRPC is attributed to inhibition of angiogenesis. A prostate cancer cell line DU145 that expresses glucocorticoid receptor was used to study the effect of dexamethasone (Dex) on the expres-

p14^(ARF)基因抑制肿瘤细胞增殖的研究

目的 :从正常人肝细胞系L0 2细胞中扩增人的肿瘤抑制基因 p14 ARF,以研究其对人的多种肿瘤细胞生长的影响。方法 :应用RT -PCR技术 ,从培养的正常人肝细胞系L0 2细胞中扩增出 0 .4Kb的p14 ARFcDNA片段 ,测序正确后插入真核表达载体 pcDNA3上的BamHI和EcoRI位点 ,命名为 pcDNA3ARF。此质粒由脂质体Lipofec tamineTM介导转染肿瘤细胞Hep2、KB、KB -v2 0 0、HepG2、HLE、Huh7以及MCF7和MCF7/ADR ,经G4 18筛选 2周后统计形成的集落数。结果 :经抗生素G4 18筛选 2周后 ,发现p5 3阳性的肿瘤细胞HepG2、Hep2、MCF7形成的集落数较少 ,分别为 5 9± 2 .1,60± 2 .1和 66± 7.0 ,占各自对照组的 4 7% ,5 7% ,5 8% ;而 p5 3异常的肿瘤细胞KB ,HLE ,Huh - 7,则形成相对较多的集落 ,分别为 91± 2 .5 ,4 8± 2 .0 ,4 1± 2 .0 ,占各自对照组的 74 % ,65 % ,80 % ,但是二种p5 3异常的耐药肿瘤细胞株KB -v2 0 0和MCF7/ADR ,形成的集落数最少 ,分别为 13± 2 .0和 2 1± 1.5 ,占各自转染空载体 pcDNA3的对照组的 15 %和 17%。 结论 :p14 ARF能明显抑制 p5 3阳性肿瘤细胞的生长 ,具有 p5 3相关性 ;然而 p14 ARF对 p5 3阴性的耐药肿瘤细胞却具有强烈的抑制作用 ,由此提示 :p14 ARF抑制耐药肿瘤细胞的生长是 p5

喉癌相关基因LCRG1蛋白的细胞亚定位及生物学特性研究

目的:研究我们实验室最近克隆的喉癌相关基因LCRG1编码蛋白的细胞亚定位以及其是否具有抑瘤功能。方法:采用绿色荧光蛋白(GFP)荧光定位的方法,研究该基因编码蛋白的细胞亚定位;通过绘制细胞生长曲线,以及运用转染细胞软琼脂集落形成试验和裸鼠致瘤试验,研究喉癌相关基因LCRG1在喉癌细胞系Hep-2中的生物学特性。结果:喉癌相关基因LCRG1编码的蛋白定位在细胞核内;将LCRG1cDNA导入到不表达该基因的喉癌细胞系Hep-2中,观察到明显的生长抑制作用,表现为抑制Hep-2细胞的停泊非依赖性生长和抑制裸鼠致瘤性。结论:喉癌相关基因LCRG1具有一定的抑瘤功能。

替吉奥+顺铂与吉西他滨+顺铂对EGFR野生型晚期NSCLC患者血清及肿瘤组织中恶性指标的影响

目的:研究替吉奥+顺铂与吉西他滨+顺铂对EGFR野生型晚期NSCLC患者血清及肿瘤组织中恶性指标的影响。方法:回顾下分析58例EGFR野生型的晚期非小细胞肺癌患者的病历资料,将接受替吉奥+顺铂化疗的患者纳入实验组、将接受吉西他滨+顺铂化疗的患者纳入对照组,测定血清中肿瘤标志分子的含量以及肿瘤组织中原癌基因、抑癌基因的表达量。结果:治疗后,实验组血清中肿瘤标志物CEA、NSE、Cyfra21-1、PCDGF、VEGF、TK1的含量显著低于对照组;实验组肿瘤组织中Pim-1、LUNX、PFKFB3、PFKFB4、Ki67的含量显著低于对照组,TCF21、PDCD5、ASPP1、ASPP2、p53、EFEMP1的含量显著高于对照组。结论:替吉奥+顺铂治疗EGFR野生型晚期NSCLC的疗效优于吉西他滨+顺铂,能够更为有效的杀伤癌细胞、调节原癌基因和抑癌基因的表达。

一种具有抗肿瘤活性的新型尿激酶原Kringle结构域变体蛋白的研究

利用PCR技术获得人尿激酶原Kringle结构域基因,将其克隆至具有T7启动子的表达质粒pET29a中,并进而插入plasminogenKringle5一段16肽片段构建了其变体,重组质粒转化至大肠杆菌BL21中,经IPTG诱导表达,其产物以包涵体形式存在.通过体外复性,得到可溶性的prourokinaseKringle及其变体.所得蛋白质经过动物肿瘤模型测活,确定变体蛋白具有抑制肿瘤生长作用.

人胚胎脑组织中低分子肿瘤抑制物的实验研究

人胚胎脑组织提取液可以抑制人白血病细胞系的生长。分析表明:肿瘤抑制活性主要分布在小于10kDa组分,经Sephadex-G25凝胶过滤可初步分离为单一组分。这种低分子肿瘤抑制物具有广谱的抗肿瘤效应,在体外可以抑制人白血病、肝癌、胃癌细胞系和小鼠粒、单核和淋巴系白血病细胞,但对人骨髓CFU-GM和小鼠骨髓CFU-GM的抑制作用较弱,说明人胎脑低分子肿瘤抑制物对肿瘤细胞具有一定的选择性抑制作用。

多抗甲素对小鼠S180实体瘤生长的影响及其抑瘤机制的初步分析

多抗甲素是我国首创的甲型链球菌抗癌制剂。动物实验及临床应用证明该药具有抑瘤作用,但对其作用机制不甚明了。本文用小鼠S180实体瘤对多抗甲素抑制肿瘤的机制进行了初步探讨实验结果表明多抗甲素确有抑瘤作用。多抗甲素可激活Mφ,使其呈现典型的活化特征,活化Mφ在体外粘附及杀伤瘤细胞能力增强:用药后瘤周浸润的Mφ数目增多,肿瘤出血坏死更为显著;提示在多抗甲素抑瘤效应中活化的Mφ起着重要作用。实验结果还提示多抗甲素的直接细胞毒性作用及宿主的特异性抗肿瘤免疫在本实验的抑瘤效应中并无实际意义。

SAFB1蛋白的表达纯化及其对乳腺癌细胞抑制作用的验证

利用RT-PCR方法从7721细胞系中分离野生型SAFB1基因,将该基因分别克隆入PET28a和pcDNA3.1载体来构建原核表达及真核表达载体.重组质粒经IPTG诱导表达后亲和层析纯化,用Western印迹实验验证蛋白表达的正确性.将SAFB1基因转入MCF7中,以RT-PCR的方法检测蛋白的表达,检测其对XOR基因的调控作用及做生长曲线验证其对乳腺癌细胞抑制作用.结果证实了SAFB1对乳腺癌细胞生长抑制作用非常明显,且对XOR基因的表达有一定的抑制作用.

奥沙利铂对不同p53状态肝癌细胞中DNA损伤修复基因GADD45β的诱导差异及调控机制

目的探索奥沙利铂对不同p53状态肝癌细胞的DNA损伤修复基因（GADD45β）诱导差异及可能调控机制。方法转染p53全序列建立Hep3B如”。体外合成GADD451]近端启动子序列群（-618至-314），构建荧光素表达质粒，转染肝癌细胞株HepG2、Hep3B和Hep3B＋p53。以实时荧光定量PCR比较奥沙利铂对GADD4β表达诱导及其近端启动子活性影响差异；比较对DNA合成和细胞克隆形成能力抑制差异；通过Caspase-3的表达变化测定凋亡的发生和发展。结果奥沙利铂对Hep3B中GADD45β诱导并不明显。转染p53全基因序列后，Hep3B＋p53对奥沙利铂的敏感性明显增加，并呈现出剂量-效应的正相关关系。荧光素分析提示奥沙利铂作用Hep3B＋p53后的启动子NF-κB（-618／＋6）和E2F-1（-470／＋6）活性较Hep3B明显增强约1．5倍和0．8倍。奥沙利铂能够更加明显地抑制Hep3B邯”的DNA合成能力和细胞克隆形成能力，100μmol／L奥沙利铂作用后Hep3B＋p53 DNA合成率为30．41％，对细胞克隆形成能力的抑制率则达到75．60％，与Hep3B相比差异显著。奥沙利铂作用后Hep3B＋p54的Caspase-3能够迅速地启动凋亡的发生和发展。结论p53对铂类化疗药物对肝癌细胞的GADD45β诱导具有重要作用，增强转录调节因子的表达水平是其可能的作用机制。

C^(2)H^(2)型锌指蛋白家族与喉恶性肿瘤的研究进展

喉恶性肿瘤是头颈部常见的恶性肿瘤之一。尽管喉癌的治疗手段有了很大的改善,但在过去的30年中,生存率仍然不理想。C^(2)H^(2)型锌指蛋白是人类最大的转录因子家族,具有多个排列整齐的锌指的特点。C^(2)H^(2)型锌指蛋白除了参与正常的生物学,包括转录调节,器官、组织的发育分化作用外,还与肿瘤的发生发展有关。目前,锌指蛋白家族已经被证实在很多肿瘤中有发挥着重要的作用。对C2H2型锌指蛋白家族以及其与喉恶性肿瘤的研究进展进行综述。

促甲状腺激素抑制疗法对甲状腺癌患者可溶性白细胞介素-2受体、白细胞分化抗原44变异型6、肿瘤特异性生长因子、外周血T淋巴细胞亚群及预后的影响

目的探讨促甲状腺激素抑制疗法对甲状腺癌患者s IL-2R、CD44V6、TSGF、外周血T淋巴细胞亚群及预后的影响。方法分析本院2014年1月-2016年1月收治的60例甲状腺癌患者临床资料,依据治疗措施不同进行分组,对照组(甲状腺素替代治疗)30例和观察组(促甲状腺激素抑制疗法)30例。结果 2组甲状腺癌患者治疗前s IL-2R、CD44V6、TSGF、CD3^+、CD4^+、CD8^+差异均无统计学意义(P>0.05);治疗后对照组和观察组甲状腺癌患者s IL-2R、CD44V6、TSGF、CD8^+均低于治疗前,CD3^+、CD4^+均高于治疗前,观察组甲状腺癌患者治疗后s IL-2R、CD44V6、TSGF均低于对照组,观察组甲状腺癌患者治疗后CD3^+、CD4^+均高于对照组,CD8^+低于对照组,观察组甲状腺癌患者1年后复发率、转移率均低于对照组(P<0.05),上述差异均有统计学意义。结论促甲状腺激素抑制疗法在甲状腺癌患者中应用,可以明显的改善患者的s IL-2R、CD44V6、TSGF、外周血T淋巴细胞亚群,提高患者预后水平,值得临床推广应用。