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Maternal gene Ooep may participate in homologous recombination-mediated DNA double-strand break repair in mouse oocytes 被引量:1
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作者 Da-Jian He Lin Wang +5 位作者 Zhi-Bi Zhang Kun Guo Jing-Zheng Li Xie-Chao He Qing-Hua Cui Ping Zheng 《Zoological Research》 SCIE CAS CSCD 2018年第6期387-395,共9页
DNA damage in oocytes can cause infertility and birth defects. DNA double-strand breaks (DSBs) are highly deleterious and can substantially impair genome integrity. Homologous recombination (HR)-mediated DNA DSB r... DNA damage in oocytes can cause infertility and birth defects. DNA double-strand breaks (DSBs) are highly deleterious and can substantially impair genome integrity. Homologous recombination (HR)-mediated DNA DSB repair plays dominant roles in safeguarding oocyte quantity and quality. However, little is known regarding the key players of the HR repair pathway in oocytes. Here, we identified oocyte-specific gene Ooep as a novel key component of the HR repair pathway in mouse oocytes. OOEP was required for efficient ataxia telangiectasia mutated (ATM) kinase activation and Rad51 recombinase (RAD51) focal accumulation at DNA DSBs. Ooep null oocytes were defective in DNA DSB repair and prone to apoptosis upon exogenous DNA damage insults. Moreover, Ooep null oocytes exhibited delayed meiotic maturation. Therefore, OOEP played roles in preserving oocyte quantity and quality by maintaining genome stability. Ooep expression decreased with the advance of maternal age, suggesting its involvement in maternal aging. 展开更多
关键词 Ooep Homologous recombination DNA double-strand break repair ATM RAD51
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The study of a new n/p tunnel recombination junction and its application in a-Si:H/μc-Si:H tandem solar cells 被引量:6
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作者 李贵君 侯国付 +5 位作者 韩晓艳 袁育洁 魏长春 孙建 赵颖 耿新华 《Chinese Physics B》 SCIE EI CAS CSCD 2009年第4期1674-1678,共5页
This paper reports that a double N layer (a-Si:H/μc-Si:H) is used to substitute the single microcrystalline silicon n layer (n-μc-Si:H) in n/p tunnel recombination junction between subcells in a-Si:H/μc-Si... This paper reports that a double N layer (a-Si:H/μc-Si:H) is used to substitute the single microcrystalline silicon n layer (n-μc-Si:H) in n/p tunnel recombination junction between subcells in a-Si:H/μc-Si:H tandem solar cells. The electrical transport and optical properties of these tunnel recombination junctions are investigated by current voltage measurement and transmission measurement. The new n/p tunnel recombination junction shows a better ohmic contact. In addition, the n/p interface is exposed to the air to examine the effect of oxidation on the tunnel recombination junction performance. The open circuit voltage and FF of a-Si:H/μc-Si:H tandem solar cell are all improved and the current leakage of the subcells can be effectively prevented efficiently when the new n/p junction is implemented as tunnel recombination junction. 展开更多
关键词 double N layer tunnel recombination junction oxidation interface a-Si:H/μc-Si:H tan-dem solar cell
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双通道放气率测量装置器壁放气动态特性分析与碳化硼放气率测试
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作者 蔡洋洋 王国栋 +3 位作者 刘霄 王姣龙 陈长琦 胡庆生 《真空科学与技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期673-678,共6页
双通道法是一种高精度、低检测下限的材料放气率测量方法,适用于碳化硼等低放气率材料。该方法需要先测定测量系统的本底放气量,即在系统压力稳定后,选取某一时刻的压力值计算后作为本底放气量。针对装置本底放气量测量,文章基于吸附扩... 双通道法是一种高精度、低检测下限的材料放气率测量方法,适用于碳化硼等低放气率材料。该方法需要先测定测量系统的本底放气量,即在系统压力稳定后,选取某一时刻的压力值计算后作为本底放气量。针对装置本底放气量测量,文章基于吸附扩散理论,建立了双通道测量系统的吸附−扩散−解离模型,并进行了数值计算分析,研究了系统本底压力随温度的变化规律,计算结果与实验结果吻合良好。同时,文章对含B4C样品的系统进行了放气量测试,并减去装置本底放气量,得到碳化硼在室温与150℃下的放气率数值,计算得到碳化硼放气率测量的不确定度为11.78%。这为后续的测试研究提供了理论支持。 展开更多
关键词 放气率测量 双通道法 吸附−扩散−解离模型 碳化硼
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MRE11-RAD50-NBS1复合物的功能与人类疾病的研究进展
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作者 许晓慧 刘一丹 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期232-241,共10页
生物体的DNA常遭受着来自体外和体内各种因素的攻击,其中DNA双链断裂(DSB)是严重的一种DNA损伤方式。为了保证遗传信息的稳定性,生物体自身存在应对DNA损伤的修复机制。同源重组修复是精确的修复DSB的方式,MRE11-RAD50-NBS1(MRN)复合物... 生物体的DNA常遭受着来自体外和体内各种因素的攻击,其中DNA双链断裂(DSB)是严重的一种DNA损伤方式。为了保证遗传信息的稳定性,生物体自身存在应对DNA损伤的修复机制。同源重组修复是精确的修复DSB的方式,MRE11-RAD50-NBS1(MRN)复合物是参与同源重组修复的关键蛋白,在不同物种之间存在保守性。从前关于MRN复合物的功能研究主要来源于酿酒酵母和线虫等低等生物,近些年来对哺乳动物MRN复合物的研究提示MRN复合物在高等动物DNA损伤修复中存在功能。本文综述了MRN复合物的组成和结构及其在DNA损伤同源重组修复中的功能,同时也介绍了MRN复合物异常所带来的人类疾病共济失调性毛细血管扩张综合征类似病症、奈梅亨断裂综合征和奈梅亨断裂综合征类似病症,并对这3类DNA损伤修复缺陷疾病的临床表型和相关小鼠模型研究进行了总结。 展开更多
关键词 DNA损伤修复 DNA双链断裂 同源重组 MRE11-RAD50-NBS1复合物
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木犀草素对人胃癌细胞DNA双链断裂及同源重组修复的影响 被引量:2
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作者 李冲慧 米阳 +4 位作者 任飞飞 孙向东 周潇潇 王万聪 夏兴洲 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2023年第4期385-391,共7页
目的探讨木犀草素对人胃癌细胞DNA双链断裂(DNA double-strand breaks,DSBs)及同源重组(homologous recombination,HR)修复的影响。方法采用流式细胞仪检测作用木犀草素后各组细胞内ROS水平变化及GFP阳性率;彗星实验检测木犀草素对DSBs... 目的探讨木犀草素对人胃癌细胞DNA双链断裂(DNA double-strand breaks,DSBs)及同源重组(homologous recombination,HR)修复的影响。方法采用流式细胞仪检测作用木犀草素后各组细胞内ROS水平变化及GFP阳性率;彗星实验检测木犀草素对DSBs的影响;Western blotting检测DNA损伤标志性蛋白γH2AX和HR修复蛋白Rad51的表达;免疫荧光检测DNA损伤修复相关蛋白表达的募集情况。结果木犀草素以剂量依赖性方式增加胃癌细胞内ROS含量;用I-Scel质粒转染DR-GFP后木犀草素处理组GFP阳性细胞比例明显少于未加木犀草素组;但彗星实验表明,木犀草素处理后人胃癌AGS细胞后增加彗星尾炬;经木犀草素处理后,胃癌细胞中DNA的γH2AX上调,修复关键蛋白Rad51的表达下调;免疫荧光结果表明,在木犀草素处理人胃癌AGS细胞后HR修复蛋白Rad51在DNA损伤位点的募集减少。结论木犀草素能够促进人胃癌细胞DSBs,并抑制其HR修复。 展开更多
关键词 木犀草素 DNA损伤 DNA双链断裂 同源重组修复 胃癌细胞
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重组人血管内皮抑制素联合TACE对兔VX-2肝癌模型微血管密度及Notch通路的影响 被引量:1
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作者 杨波 李玉伟 +1 位作者 潘峰 刘玉宇 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2023年第8期1428-1434,共7页
目的:探讨重组人血管内皮抑制素(rhES)联合经导管动脉内化疗栓塞术(TACE)对果蝇双翅边缘缺刻同源基因(Notch)通路的调控作用,及对兔VX-2肝癌模型微血管密度(MVD)的影响。方法:取新西兰大白兔60只,随机取50只用肿瘤种植法建立兔VX-2肝癌... 目的:探讨重组人血管内皮抑制素(rhES)联合经导管动脉内化疗栓塞术(TACE)对果蝇双翅边缘缺刻同源基因(Notch)通路的调控作用,及对兔VX-2肝癌模型微血管密度(MVD)的影响。方法:取新西兰大白兔60只,随机取50只用肿瘤种植法建立兔VX-2肝癌模型,分为模型组、TACE组、TACE+rhES组(TACE术+rhES溶液0.75 mg/kg)、Notch激活剂jagged1组(TACE术+jagged1溶液13 ng/kg)、TACE+rhES+jagged1组(TACE术+rhES溶液0.75 mg/kg+jagged1溶液13 ng/kg),每组10只,未造模的10只兔作为正常对照组。治疗2周后,行CT成像,获取兔肿瘤周边血流量(BF)、血容量(BV)、毛细血管表面渗透面积(PS)值;称取兔体重并处死取肝脏,计算肝脏指数、肿瘤体积;免疫组化法检测肝脏MVD;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测癌灶周边非坏死肝脏组织Notch、Notch配体(jagged1)、血管内皮生长因子(VEGF)、活化蛋白1(AP-1)蛋白相对表达水平。结果:与正常对照组相比,模型组兔出现饮食、活动减少及精神萎靡现象,肿瘤结节为暗红色且出现坏死、液化及囊性改变等病理损伤,肝脏指数、肿瘤体积、肝组织MVD、Notch、jagged1、VEGF、AP-1蛋白表达升高(P<0.05),体质量、BF、BV及PS水平下降(P<0.05)。与模型组相比,TACE组肿瘤结节为乳白色,肿瘤体积显著下降(P<0.05),其余指标差异无统计学意义(P>0.05);jagged1组兔精神萎靡及肿瘤组织坏死程度加重,肝脏指数、肿瘤体积、MVD、Notch、jagged1、VEGF、AP-1蛋白表达升高(P<0.05),体质量、BF、BV及PS水平下降(P<0.05);TACE+rhES组兔饮食、精神等好转,肿瘤组织坏死程度减轻,肝脏指数、肿瘤体积、Notch、jagged1、VEGF、AP-1蛋白表达降低(P<0.05),体质量、BF、BV及PS水平升高(P<0.05)。与TACE+rhES组相比,TACE+rhES+jagged1组上述指标变化趋势相反且有统计学差异(P<0.05)。结论:TACE+rhES联合治疗可通过抑制Notch/jagged1信号通路激活,抵抗肝癌模型兔肿瘤血管生成。 展开更多
关键词 重组人血管内皮抑制素 经导管动脉内化疗栓塞术 肝癌 果蝇双翅边缘缺刻同源基因(Notch)通路 微血管密度
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NMM抗肿瘤DNA疫苗原液大肠杆菌菌体蛋白质残留量检测方法的建立与验证 被引量:1
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作者 郭润姿 伊君梅 +4 位作者 孙澳 田园 车亦伟 邱创钧 王宇 《中国医药科学》 2023年第9期85-89,共5页
目的建立并验证检测NMM抗肿瘤DNA疫苗原液中大肠杆菌菌体蛋白质残留量的双抗体夹心ELISA试验方法。方法使用双抗体夹心ELISA试验方法检测NMM抗肿瘤DNA疫苗原液中大肠杆菌菌体蛋白残留量,采用四参数logstic曲线进行回归分析,并对该方法... 目的建立并验证检测NMM抗肿瘤DNA疫苗原液中大肠杆菌菌体蛋白质残留量的双抗体夹心ELISA试验方法。方法使用双抗体夹心ELISA试验方法检测NMM抗肿瘤DNA疫苗原液中大肠杆菌菌体蛋白残留量,采用四参数logstic曲线进行回归分析,并对该方法的专属性、检测限、定量限、线性与范围、精密度、准确度、耐用性等进行验证,验证通过对5批样品进行检测。结果采用双抗体夹心ELISA试验方法进行大肠杆菌蛋白质残留量检测时,DNA疫苗原液无需进行稀释。NMM抗肿瘤DNA疫苗原液对大肠杆菌菌体蛋白质的检测无干扰及抑制作用,方法的专属性良好;本法检测限为0.41 ng/ml;定量限为0.98 ng/ml;该方法测定宿主菌蛋白质残留量在0~100 ng/ml范围内线性良好,R^(2)≥0.9999;本方法重复性试验中宿主菌蛋白质含量RSD值均低于15%,中间精密度实验中样品吸光值RSD值低于10%,精密度结果良好。在检测线性范围内加入高、中、低3种浓度的大肠杆菌菌体蛋白,回收率均值为100.35%(n=9,RSD=3.58%);本方法检测实验条件发生微小变动时(不同人员、不同批次试剂盒),对测定结果的影响在可接受范围内。应用该方法对5批NMM抗肿瘤DNA疫苗原液中大肠杆菌蛋白质残留量进行检测,大肠杆菌菌体蛋白残留量均在1 ng/mg左右,远低于相关指导原则中规定的不高于1μg/mg的质量标准。结论该方法可用于NMM抗肿瘤DNA疫苗原液中宿主菌蛋白质含量的检测。 展开更多
关键词 抗肿瘤DNA疫苗 重组生物制品 双抗原夹心ELISA法 大肠杆菌菌体蛋白残留 质量控制
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DNA双链断裂修复缺陷在神经退行性疾病发生中的作用
8
作者 接欣雨 唐铁山 刘红美 《生物医学转化》 2023年第2期31-41,共11页
DNA双链断裂修复(DNA Double-Strand Break Repair,DSBR)在保持神经元基因组稳定性和细胞存活方面发挥着重要作用。DSBR主要通过同源重组(Homologous Recombination,HR)及非同源末端连接(Non-Homologous End Joining,NHEJ)来完成,这两... DNA双链断裂修复(DNA Double-Strand Break Repair,DSBR)在保持神经元基因组稳定性和细胞存活方面发挥着重要作用。DSBR主要通过同源重组(Homologous Recombination,HR)及非同源末端连接(Non-Homologous End Joining,NHEJ)来完成,这两种修复途径对于维持神经元的正常生理功能至关重要。另外,DSBR异常在多种神经退行性疾病中扮演重要角色,因此,深入剖析DSBR机制对于理解神经退行性疾病的病理发生及研发有效治疗手段具有重要意义。本文综述了常见的DSBR途径,并概述了DSBR异常与几种常见神经退行性疾病发病机制的最新研究进展。 展开更多
关键词 DNA双链断裂修复 同源重组 非同源末端连接 神经退行性疾病
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非同源末端连接中DNA连接酶Ⅳ抑制剂研究进展
9
作者 贺越 王秀梅 《陕西医学杂志》 CAS 2023年第3期358-360,F0003,共4页
DNA连接酶Ⅳ(LIG4)主要通过非同源末端连接(NHEJ)参与V(D)J重组和DNA双键断裂(DSB)修复,具有独特调控作用和广泛应用前景。研究发现,LIG4抑制剂在NHEJ中可作为增敏剂,与放化疗联合治疗肿瘤时具有较好的抗癌效果。此外,LIG4抑制剂还可作... DNA连接酶Ⅳ(LIG4)主要通过非同源末端连接(NHEJ)参与V(D)J重组和DNA双键断裂(DSB)修复,具有独特调控作用和广泛应用前景。研究发现,LIG4抑制剂在NHEJ中可作为增敏剂,与放化疗联合治疗肿瘤时具有较好的抗癌效果。此外,LIG4抑制剂还可作为一种有效的生化抑制剂介导CRISPR/Cas9基因编辑,有提高基因编辑效率的作用。近年来,许多研究基于此机制不断进行大规模药物筛选以发现新型抗癌药物,来为肿瘤治疗提供一种新思路。现对目前已报道的LIG4抑制剂及其衍生物的各种形式进行综述,并重点介绍目前应用较广的SCR7。 展开更多
关键词 DNA连接酶Ⅳ抑制剂 非同源末端连接 DNA双键断裂 DNA修复 同源重组 肿瘤治疗
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籼粳交DH群体和RIL群体的构建及籼粳分化 被引量:19
10
作者 程式华 毛传澡 +2 位作者 占小登 斯华敏 孙宗修 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期257-260,共4页
对籼粳杂交组合“0 2 42 8(粳 ) /特青 (籼 )”F1 进行一步成苗法花药培养 ,对该组合的分离世代采用连续自交随机选择 ,分别获得由 132个株系组成的加倍单倍体 (DH)群体和由 15 7个株系组成的重组自交系 (RIL )群体。通过形态指数法和... 对籼粳杂交组合“0 2 42 8(粳 ) /特青 (籼 )”F1 进行一步成苗法花药培养 ,对该组合的分离世代采用连续自交随机选择 ,分别获得由 132个株系组成的加倍单倍体 (DH)群体和由 15 7个株系组成的重组自交系 (RIL )群体。通过形态指数法和分子标记法对两个群体的籼粳分化进行了研究 ,结果表明 ,无论是 DH群体还是 RIL群体 ,各株系的籼粳形态指数和分子标记指数分布均呈正态分布 ,但 RIL群体的偏态性强于 DH群体 。 展开更多
关键词 加倍单倍体 重组自交系 籼粳分化 籼粳杂交 水稻
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不同遗传背景下水稻剑叶形态性状的QTL分析 被引量:23
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作者 彭茂民 杨国华 +2 位作者 张菁晶 安保光 李阳生 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期247-252,共6页
以典型的籼粳交窄叶青8号/京系17的加倍单倍体(DH)群体和籼籼交珍汕97/明恢63的重组自交系(RIL)群体为材料,并应用这两种群体已构建的分子图谱,对剑叶形态性状中的叶面积、周长、叶长、叶宽、长宽比等进行了QTL分析。在这两个群体中,剑... 以典型的籼粳交窄叶青8号/京系17的加倍单倍体(DH)群体和籼籼交珍汕97/明恢63的重组自交系(RIL)群体为材料,并应用这两种群体已构建的分子图谱,对剑叶形态性状中的叶面积、周长、叶长、叶宽、长宽比等进行了QTL分析。在这两个群体中,剑叶的这些形态性状均呈连续性分布,存在一定数量的超亲分离。在DH群体中,4个剑叶性状共检测到8个QTL,分布在4条染色体上,其中第4、8染色体上各有1个QTL同时影响了叶长、叶周长和面积。在RIL群体中,5个剑叶性状共检测到16个QTL,分布在5条染色体上。其中第1染色体上有1个QTL同时影响叶长、叶周长、长宽比3个性状,第6染色体上有2个影响叶面积的QTL同时也影响叶宽,还有1个QTL同时影响叶长、叶周长2个性状,第11染色体上有1个QTL同时影响叶长、叶周长、叶面积3个性状。研究表明,不同群体的QTL初级定位结果存在较大差异,影响叶片相关性状的一些QTL位于同一染色体的相同或者相邻区域上。 展开更多
关键词 水稻 剑叶 形态性状 加倍单倍体群体 重组自交系群体 数量性状位点
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与人类关系密切的7种动物对戊型肝炎病毒易感性的初步研究 被引量:20
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作者 丁福 孟继鸿 +5 位作者 张兰芳 程险峰 张汇东 贺星亮 杨志国 许家璋 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第1期52-55,共4页
目的 用双抗原夹心法ELISA (DS -ELISA)和逆转录巢式PCR法 (RT -nPCR)研究与人类生活关系密切的猪、犬、山羊、鸡、鸭、鸽子和兔等 7种动物对戊型肝炎病毒 (HEV)的易感性。方法 用多基因型HEV重组蛋白建立检测HEV抗体的DS -ELISA ,并... 目的 用双抗原夹心法ELISA (DS -ELISA)和逆转录巢式PCR法 (RT -nPCR)研究与人类生活关系密切的猪、犬、山羊、鸡、鸭、鸽子和兔等 7种动物对戊型肝炎病毒 (HEV)的易感性。方法 用多基因型HEV重组蛋白建立检测HEV抗体的DS -ELISA ,并用于 5 91份猪、警犬、家犬、宠物犬、山羊、鸡、鸭、鸽子和兔等多种动物血清标本的HEV抗体检测 ;用HEV多基因型通用性引物RT -nPCR扩增 14 3份犬血清标本HEVRNA。结果 在猪、家犬和宠物犬血清标本中检测到HEV抗体 ,阳性率分别为 4 3 93%、15 19%和 4 6 5 % ,但在警犬、山羊、鸡、鸭、鸽子和兔血清标本中未检测到HEV抗体 ;14 3份犬血清标本用RT -nPCR未扩增出HEVRNA。结论 用多基因型HEV重组蛋白建立的双抗原夹心法ELISA适用于多种动物血清标本HEV抗体的检测 ;猪和犬对HEV易感 ,在HEV传播中可能起重要作用。 展开更多
关键词 戊型肝炎病毒 易感性 重组蛋自 双抗原夹心法ELISA 逆转录巢式PCR
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整合型vgb基因载体的构建和研究 被引量:10
13
作者 吴奕 杨胜利 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第3期276-283,共8页
运用染色体-质粒同源基因重组的方法将外源Vitreoscilla血红蛋白基因(vgb)整合在大肠杆菌JM105染色体的苏氨酸操纵子位置上,构建单拷贝的vgb表达载体VG1。VG1保持了vgb基因的生理功能,可在低氧条件下表达Vitreoscilla血红蛋白使细胞适... 运用染色体-质粒同源基因重组的方法将外源Vitreoscilla血红蛋白基因(vgb)整合在大肠杆菌JM105染色体的苏氨酸操纵子位置上,构建单拷贝的vgb表达载体VG1。VG1保持了vgb基因的生理功能,可在低氧条件下表达Vitreoscilla血红蛋白使细胞适应贫氧环境;同时它克服了以质粒作为表达载体时vgb基因剂量和表达量过高带来的生理负担,因此可作为一种适于高密度培养的基因工程宿主菌。实验结果还显示vgb基因的表达使VG1与普通大肠杆菌相比在低氧条件下仍能维持较高的呼吸强度,说明vgb基因产物参与了细胞处于低氧水平时的代谢过程。 展开更多
关键词 基因载体 VGB基因 整合型
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猪MSTN基因双筛选标记打靶载体的构建及其功能鉴定 被引量:4
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作者 王向鹏 肖一红 +3 位作者 刘园园 杜永坤 马玉萍 周恩民 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2012年第8期47-53,59,共8页
【目的】利用正负筛选策略,构建猪肌肉生长抑素(Myostatin,MSTN)基因的双筛选标记打靶载体。【方法】以猪胎儿成纤维细胞DNA为模板,PCR扩增MSTN基因同源长、短臂;采用PCR和Overlap PCR扩增打靶载体正筛选标记嘌呤霉素和绿色荧光蛋白基... 【目的】利用正负筛选策略,构建猪肌肉生长抑素(Myostatin,MSTN)基因的双筛选标记打靶载体。【方法】以猪胎儿成纤维细胞DNA为模板,PCR扩增MSTN基因同源长、短臂;采用PCR和Overlap PCR扩增打靶载体正筛选标记嘌呤霉素和绿色荧光蛋白基因及负筛选标记单纯疱疹病毒胸苷激酶基因。以pUC57载体为骨架载体,在其多克隆位点连接一段包括Frt序列在内的酶切位点的多克隆位点序列,在2个Frt序列之间连接正筛选标记嘌呤霉素基因和绿色荧光蛋白基因,在Frt序列两侧分别连接5.7和1.9kb的MSTN基因同源长、短臂;在同源短臂后连接负筛选标记单纯疱疹病毒胸苷激酶基因,将目的片段与载体定向连接克隆。用脂质体法将打靶载体转染猪肾细胞(PK15细胞),用嘌呤霉素和丙氧鸟苷进行正负筛选,验证正负筛选标记基因的功能。【结果】成功克隆了猪MSTN基因同源长、短臂及正筛选嘌呤霉素和绿色荧光蛋白基因及负筛选单纯疱疹病毒胸苷激酶基因,构建了猪MSTN基因双筛选标记打靶载体,打靶载体长14kb。在打靶载体转染的PK15细胞中,正负筛选标记基因均有生物学活性。【结论】成功构建了猪MSTN基因双筛选标记打靶载体。 展开更多
关键词 同源重组 基因打靶 猪肌肉生长抑素基因 双筛选标记
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禽流感病毒H5HA、H7HA基因共表达核酸疫苗质粒的构建及其在体外的表达 被引量:5
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作者 张芳芳 刘光亮 +2 位作者 姜永萍 陈化兰 陈怀涛 《动物医学进展》 CSCD 2004年第4期107-110,共4页
为了获得既能对 H5亚型又能对 H7亚型 AIV攻击产生保护的核酸疫苗 ,设计构建了含有双顺反子的真核表达载体 ,用限制性内切酶从 PCIH7HA载体上切得 AIV H7HA基因的c DNA,此 c DNA含有 CMV启动子和 Poly(A)终止序列 ,使用 DNA 连接酶引入... 为了获得既能对 H5亚型又能对 H7亚型 AIV攻击产生保护的核酸疫苗 ,设计构建了含有双顺反子的真核表达载体 ,用限制性内切酶从 PCIH7HA载体上切得 AIV H7HA基因的c DNA,此 c DNA含有 CMV启动子和 Poly(A)终止序列 ,使用 DNA 连接酶引入载体PCIH5HA中 ,最后获得双顺反子真核表达载体PCI-H5HA-H7HA,其中 H5HA和 H7HA基因都带有自己的 CMV启动子和 Poly(A)终止序列。选用 2 93 -T真核表达细胞系 ,用脂质体转染法导入细胞进行瞬时表达 ,转染后 48h用荧光标记的兔抗鸡 Ig G进行间接免疫荧光试验。结果表明双顺反子真核表达载体构建正确 ,且在真核表达细胞系中 H5HA和 H7HA基因都能获得表达 ,且 H5HA 基因的表达效果优于H7HA。 展开更多
关键词 禽流感病毒 H5HA基因 H7HA基因 基因表达 核酸疫苗 质粒 间接免疫荧光
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戊型肝炎病毒抗体双抗原夹心法ELISA的建立与初步应用 被引量:8
16
作者 何志强 葛胜祥 +5 位作者 邱艳 彭耿 陈毅歆 何水珍 张军 夏宁邵 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2002年第6期18-21,共4页
目的 建立抗戊型肝炎病毒 (HEV)抗体检测的双抗原夹心ELISA(DS -ELISA) ,并应用于多种动物血清的检测。方法 将大肠杆菌表达的一段HEVORF2区重组抗原分别包被微孔板和进行辣根过氧化物酶 (HRP)标记 ,利用 5份阳性血清和 4 0份阴性血... 目的 建立抗戊型肝炎病毒 (HEV)抗体检测的双抗原夹心ELISA(DS -ELISA) ,并应用于多种动物血清的检测。方法 将大肠杆菌表达的一段HEVORF2区重组抗原分别包被微孔板和进行辣根过氧化物酶 (HRP)标记 ,利用 5份阳性血清和 4 0份阴性血清建立双抗原夹心ELISA ;用 4 0 0份义务献血员血清比较双抗原夹心ELISA与间接法IgG抗体ELISA的符合情况 ;用 3只HEV感染猴系列血清比较双抗原夹心ELISA试剂和Genelabs公司HEVIgG试剂 ;用双抗原夹心ELISA试剂检测新疆地区的部分牛、绵羊、山羊、猪血清和上海地区的部分鸡血清中的HEV抗体。结果 建立了检测HEV抗体的双抗原夹心ELISA方法 ,对 4 0 0份义务献血员血清的检测表明其与间接法IgG抗体ELISA试剂的符合情况良好 ,并且有更高的s/co比值 ;与Genelabs公司HEVIgG试剂的比较表明双抗原夹心ELISA试剂的检出更早 ,尤其是持续时间及强度明显优于Genelabs试剂 ;在所检测的各种动物中均发现了HEV抗体 ,其中猪抗体的阳性率最高 ,表明双抗原夹心ELISA试剂可同时用于不同动物的抗HEV抗体检测。结论 利用大肠杆菌表达的HEV重组抗原建立了双抗原夹心法ELISA ,并可同时用于不同动物的抗HEV抗体检测。 展开更多
关键词 戊型肝炎 抗体检测 双抗原夹心法ELISA 重组抗原 HEV
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重组人血管内皮抑素联合NP方案治疗晚期NSCLC随机、双盲、对照、多中心Ⅲ期临床研究 被引量:625
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作者 王金万 孙燕 +26 位作者 刘永煜 于起涛 张沂平 李凯 朱允中 周清华 侯梅 管忠震 李维廉 庄武 王东林 梁后杰 秦凤展 卢辉山 刘晓晴 孙红 张燕军 王杰军 罗素霞 杨瑞合 涂远荣 王秀问 宋恕平 周静敏 游丽芬 王竞 姚晨 《中国肺癌杂志》 CAS 2005年第4期283-290,共8页
背景与目的EndostarTM(YH-16)是中国烟台麦得津生物工程股份有限公司开发的新型重组人血管内皮抑素(rh-endostatin),临床前研究结果显示该药能抑制血管内皮细胞增殖、血管生成和肿瘤生长.Ⅰ、Ⅱ期临床结果证明该药单药临床应用安全有效... 背景与目的EndostarTM(YH-16)是中国烟台麦得津生物工程股份有限公司开发的新型重组人血管内皮抑素(rh-endostatin),临床前研究结果显示该药能抑制血管内皮细胞增殖、血管生成和肿瘤生长.Ⅰ、Ⅱ期临床结果证明该药单药临床应用安全有效.本研究的目的是评价YH-16联合长春瑞滨和顺铂(NP)治疗晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的疗效和安全性.方法2003年4月~2004年6月,493例一般状况评分为0~2,经病理和细胞学确诊的Ⅲ/Ⅳ期NSCLC患者进入NP联合YH-16与NP联合安慰剂的随机、双盲、对照、多中心临床研究.研究的终点目标是有效率(RR)、临床受益率(CBR)、肿瘤进展时间(TTP)、生活质量(QOL)以及安全性.结果486例可评价疗效的患者中,试验组和对照组的总RR分别为35.4%和19.5%(P=0.0003),总CBR分别为73.3%和64.0%(P=0.035),总的中位TTP分别为6.3个月和3.6个月(P=0.0000).对初治患者,试验组和对照组的RR分别为40.0%和23.9%(P=0.003),CBR分别为76.5%和65.0%(P=0.023),中位TTP分别为6.6个月和3.7个月(P=0.0000);对复治患者,试验组和对照组的RR分别为23.9%和8.5%(P=0.034),CBR分别为65.2%和61.7%(P=0.68),中位TTP分别为5.7个月和3.2个月(P=0.0002).试验组的临床症状缓解率较对照组略高,但无统计学差异(P>0.05).试验组与对照组疗后QOL评分比较有明显提高(P=0.0155).试验组与对照组在血液学及非血液学毒性方面,中、重度不良反应的发生率均无统计学差异.结论YH-16与NP方案联合,能明显提高晚期NSCLC的RR及中位TTP,且安全性较好,具有较好的临床应用前景. 展开更多
关键词 重组人血管内皮抑素 NP方案 随机双盲对照 晚期和复发非小细胞肺癌 Ⅲ期临床研究
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乳腺癌易感基因1在DNA损伤修复中作用的研究进展 被引量:12
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作者 赵锡鹏 张凤梅 凤志慧 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期606-611,共6页
乳腺癌易感基因1(BRCA1)基因突变与乳腺癌的发生密切相关。目前研究表明,BRCA1作为调节者参与了DNA损伤修复过程。DNA损伤的最严重的形式是双链断裂,BRCA1通过调控同源重组(HR)在修复双链断裂中发挥关键作用。本文从BRCA1主要功能区与H... 乳腺癌易感基因1(BRCA1)基因突变与乳腺癌的发生密切相关。目前研究表明,BRCA1作为调节者参与了DNA损伤修复过程。DNA损伤的最严重的形式是双链断裂,BRCA1通过调控同源重组(HR)在修复双链断裂中发挥关键作用。本文从BRCA1主要功能区与HR的关系、主要功能区基因突变对修复双链断裂的影响、BRCA1与BRCA2,Rad51和CtIP复合物等蛋白之间的相互作用和蛋白的磷酸化等方面,对BRCA1调控HR的分子机制、BRCA1介导的修复机制缺失在合成致死性中的作用、及BRCA1缺失后细胞对不同DNA损伤制剂敏感性发生的变化等内容进行了系统的综述。 展开更多
关键词 乳腺癌易感基因1 DNA损伤 DNA修复 DNA断裂 双链 重组 遗传
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DNA双链断裂损伤修复系统研究进展 被引量:13
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作者 黄敏 缪泽鸿 丁健 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期295-300,共6页
多种内源或外源因素都能造成细胞基因组DNA损伤,细胞内建立了复杂的修复系统来应对不同形式的损伤。其中DNA双链断裂(DNA double-strand breaks,DSBs)作为最严重的损伤形式,主要激活同源重组修复(Homologous recombination repair)和非... 多种内源或外源因素都能造成细胞基因组DNA损伤,细胞内建立了复杂的修复系统来应对不同形式的损伤。其中DNA双链断裂(DNA double-strand breaks,DSBs)作为最严重的损伤形式,主要激活同源重组修复(Homologous recombination repair)和非同源末端连接(Non-homologous end joining)通路。这两条通路都是由多个修复元件参与、经过多步反应的复杂过程。两者各具特点、协同作用,共同维护细胞基因组的稳定性。对其分子机制的阐明为肿瘤放化疗的辅助治疗提供了潜在的作用靶点。 展开更多
关键词 DNA双链断裂 修复通路 同源重组修复 非同源末端连接
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猪流行性腹泻病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立 被引量:4
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作者 张清真 陶洁 +3 位作者 殷秀辰 熊年年 李星 刘惠莉 《上海农业学报》 CSCD 2017年第1期134-137,共4页
以乳化灭活的猪流行性腹泻病毒(PEDV)作为抗原,免疫大白兔,制备兔抗PEDV高免血清,纯化抗PEDV IgG并进行生物素标记。以体外表达的PEDV S蛋白作为抗原,商品化的PEDV单克隆抗体作为捕获抗体,生物素标记的IgG作为检测抗体,建立了检测PEDV... 以乳化灭活的猪流行性腹泻病毒(PEDV)作为抗原,免疫大白兔,制备兔抗PEDV高免血清,纯化抗PEDV IgG并进行生物素标记。以体外表达的PEDV S蛋白作为抗原,商品化的PEDV单克隆抗体作为捕获抗体,生物素标记的IgG作为检测抗体,建立了检测PEDV的生物素-亲和素系统的双抗夹心ELISA方法。结果表明:该方法最低检测限量为20 ng/μL,且稳定性和特异性较好。对25份临床猪腹泻样品进行检测,3份检出PEDV阳性,与RT-PCR法的符合率为100%。本研究为PEDV临床检测提供了新方法,也为猪腹泻病原的多重检测技术研究奠定了基础。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒检测 重组S蛋白 双抗体夹心ELISA
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