多重PCR技术鉴定番茄Ty-2和Ty-3基因及田间验证

本研究采用多重PCR方法对与抗番茄黄化曲叶病毒病(tomato yellow leafcurl virus,TYLCV)的Ty-2和Ty-3基因紧密连锁的共显性SCAR标记进行扩增筛选,不同基因型(Ty-2/Ty-2,Ty-2/ty-2,ty-2/ty-2,ty-3/ty-3)的材料扩增出不同长度的特异片段,建立了一种快速检测抗TYLCV基因的技术。利用该技术对22份番茄材料进行检测,同时利用普通PCR对上述材料进行检测,两者结果完全吻合。最后用田间自然发病的方法在大田对这些材料抗性进行验证,符合率达86.4%。

抗番茄黄化曲叶病基因Ty-2的SSR新标记

采用集合分离分析法(Bulked segregant analysis,BSA),结合SSR分子标记技术筛选与抗病基因Ty-2连锁的标记。将感病材料TMXA48-4-0与含有Ty-2的抗病材料CLN2777A杂交,获得F2分离群体。利用前人初步定位的结果及构建的番茄SSR遗传图谱,选择11号染色体上TG36与TG393标记之间的SSR标记对构建的抗感池进行筛选分析,结果得到1个与Ty-2紧密连锁的呈共显性的分子标记TES0344,遗传距离为6.7 cM。利用F2分离群体和10份同源材料进一步验证了SSR标记TES0344的可靠性和稳定性,因此该标记可用于今后抗番茄黄化曲叶病毒病育种的辅助选择。

高速激光熔覆铁基TY-2合金组织及力学性能分析

目的通过与激光熔覆进行对比,探究高速激光熔覆铁基TY-2合金的显微组织及力学性能。方法采用高速激光熔覆技术在27SiMn不锈钢基体上制备铁基TY-2合金熔覆层。利用扫描电子显微镜、X射线衍射仪、显微硬度计,对熔覆层的显微组织、物相结构及力学性能进行分析测试,对比研究高速激光熔覆与激光熔覆铁基TY-2合金熔覆层的显微组织和力学性能。结果与激光熔覆层相比,获得的高速激光熔覆层均匀致密,无裂纹,孔隙与夹杂较少,与基体形成良好的冶金结合。激光熔覆层的组织以粗大的柱状晶为主,高速激光熔覆层的组织以尺寸为5~10μm的细小晶粒为主。高速激光熔覆层与原始粉末的物相一致,包含(Fe,Ni)、Cr_(0.19)Fe_(0.7)Ni_(0.11)和Fe-Cr等相。激光熔覆层与原始粉末的物相有所差别,高能量密度导致CaNi_(3)C_(0.5)金属间化合物的生成。高速激光熔覆层的平均硬度为604HV_(0.3),相比激光熔覆层(543HV_(0.3))提高了9.4%。结论高速激光熔覆的总能量较低,为激光熔覆总能量的77.9%,其中高速粒子携带的动能占高速激光熔覆总能量的17.7%。高速激光熔覆可实现低能量下的高效熔覆,熔覆层的组织更加细小,成分更加均匀,硬度更高。

双重PCR技术鉴定番茄Sw-5和Ty-2基因

研究利用双重PCR技术同时鉴定番茄抗斑萎病毒病基因Sw-5和抗番茄黄化曲叶病毒病基因Ty-2,鉴定结果与单引物PCR完全吻合。其中Sw-5的连锁标记在纯合抗病和感病材料中分别扩增出574 bp和464 bp的特异条带,在杂合抗病材料中可同时扩增出以上两条带;Ty-2的连锁标记在纯合抗病和感病材料中分别扩增出900 bp和800 bp的特异条带,在杂合抗病材料中同样扩增出两条带。利用双重PCR方法对17份待检测番茄材料进行鉴定,条带清晰,且辨识度高。该技术极大地提高了Sw-5和Ty-2基因的鉴定效率。

四重PCR技术鉴定番茄Ty-1、Ty-2、Mi和Cf-5基因研究

以番茄为试材,只利用1次PCR反应体系,同时对与番茄黄化曲叶病毒病(Tomatoyellow leaf curl virus)的Ty-1、Ty-2基因、番茄根结线虫病(Root-knot nematode)的Mi基因和番茄叶霉病(Leaf mold)的Cf-5基因紧密连锁的SCAR标记进行了筛选。结果表明:扩增的特异性片段和单引物扩增的片段吻合,即对与Ty-1基因、Ty-2基因、Mi基因和Cf-5基因紧密连锁的片段特异性扩增,所获得的片段大小分别是395、900、750和960bp。经TaqI酶切后所获得的特异性片段大小与前人试验所得大小基本相同,初步证明了四重PCR检测的准确性。该体系可对Ty-1、Ty-2、Mi和Cf-5 4个抗病基因进行同时筛选,在苗期辅助选择。降低了生产成本,节约时间、人力、物力,为分子标记辅助选择育种奠定了基础。

安徽铜陵酸性矿山排水中霉菌TY6-2的生物矿化作用实验研究

从安徽铜陵狮子山矿区采集酸矿水、底泥及尾砂样品,采用YE,Fe,FeT,FeS四种选择性培养基,分离获得原核微生物17株,真核微生物50株.其中一株霉菌TY6-2经鉴定为草酸青霉Penicillium oxalicum.TY6-2在近中性环境中能够吸附铁离子,吸附率高达72%,相同条件下吸附效率显著高于分离到的其他霉菌.对TY6-2与培养液长期相互作用形成的沉淀物进行分析,发现沉淀物主要以三价铁矿物为主.TY6-2活菌生物成矿能力高于灭活处理的死菌,活菌菌体表面有大量矿物颗粒附着,且形态规则.能谱分析表明很可能是黄钠铁钒.研究表明TY6-2的生物吸附和生物成矿特性,对酸矿水的生物修复和铁的回收再利用具有重要价值.

番茄抗黄化曲叶病基因Ty-2的分子标记及种质资源初步鉴定

以抗番茄黄化曲叶病毒病材料‘CLN2498D’为父本,感病材料‘早粉2号’为母本,以其F2代为研究对象,采用AFLP及SSR两种标记方法,筛选与Ty-2基因连锁的标记。通过对256对AFLP引物及30对SSR引物的筛选,共获得5个AFLP标记和2个SSR标记与Ty-2基因连锁,其中标记E02M11距离目标基因5.8cM,另有3个标记距离均在10cM以内。将标记E02M11用于30份番茄材料的种质资源筛选,获得12个含有该标记的番茄材料,为番茄抗黄化曲叶病毒育种工作提供基础。

Eu^(3+)掺杂β-Ga_(2)O_(3)的水热法制备及其光学性能

采用高温水热法合成稀土Eu3+掺杂β-Ga_(2)O_(3)荧光粉,研究不同热退火温度对其发光性能的影响。利用X射线衍射仪对样品的物质结构信息进行表征,样品衍射峰发生小角度偏移,表明Eu^(3+)进入β-Ga_(2)O_(3)晶格中。通过拉曼光谱仪对样品的物质结构和组态进行检测,样品的拉曼峰与β-Ga_(2)O_(3)结构的拉曼峰位置一致,并在800℃达到最大峰值,说明此温度下样品的结晶度最好。使用扫描电子显微镜对样品的表面形貌进行观测,不同热退火温度下荧光粉颗粒分布均匀,表明热退火处理后样品的结晶质量良好。在395 nm波长激发光谱作用下,可以看到2种不同的发射光谱,591 nm处为Eu^(3+)(^(5)D_(0)→^(7)F_(1))跃迁产生的橙光发射,612 nm处为Eu^(3+)(^(5)D_(0)→^(7)F_(2))跃迁产生的红光发射,并以发射红光为主。随着退火温度的不断升高,样品的发射光谱强度先增大后减小,并在800℃下达到最大值,表明热退火温度为800℃时荧光粉样品的发光效果最好。水热法合成工艺简单且成本低廉,合成的样品纯度高。高温热退火处理可通过应力作用减少材料中的缺陷,提高结晶度,从而提升荧光粉的发光性能。

Nb_2O_5掺杂及TiO_2压敏陶瓷埋烧工艺的研究

通过微结构分析、I V特性及复阻抗频谱的测量 ,比较了埋烧和传统的裸烧工艺对于Nb5+ 掺杂的TiO2压敏陶瓷材料的压敏电压和非线性系数的影响 ,结果表明掩埋法烧结可以降低该类陶瓷材料的压敏电压和非线性系数 ;考察了Nb2 O5掺杂的作用 ,表明Nb5+ 固溶于TiO2 中取代Ti4+ 使晶粒半导化 .Nb2 O5掺杂量对TiO2 压敏陶瓷的I V特性和微观结构都会有影响作用 ,适量Nb5+

苯-噻吩低聚物电子结构及载流子传输性质的理论研究

采用密度泛函理论(DFT)的B3LYP/6-31G(d)方法对以低聚噻吩为端基、苯并二噻吩(TPT)和并三噻吩(TTT)为共轭桥、炔键为连接臂的20个模型化合物进行了计算研究.在优化中性与离子态几何构型基础上,获得了前线轨道能级、电离能(IPs)、电子亲和势(EAs)、空穴/电子重组能(λh/λe)、载流子迁移率(μh/μe)及吸收光谱等信息.结果表明,炔键的引入及端基低聚噻吩的增加对LUMO能级的调控作用较为显著,而共轭桥的类型对HOMO能级影响较大;合理选择端基、共轭桥和连接臂等结构单元可对该类材料吸光波段及强度进行有效调节.一维电荷传输模型结果表明,所设计的化合物均是潜在的双极性有机半导体材料,其中2,7-二([2,2':5',2''-三噻吩]-5-基)苯并[1,2-b:6,5-b']二噻吩(A3)和2,7-二(二噻吩并[3,2-b:2',3'-d]噻吩-2-基乙炔基)苯并[1,2-b:6,5-b']二噻吩(a-3)具有较高的电子迁移率,值得进一步的实验探索研究.

帕妥珠单抗靶向治疗对人表皮生长因子受体2阳性晚期乳腺癌患者生活质量及预后的影响

目的:探讨帕妥珠单抗靶向治疗对人表皮生长因子受体2(HER-2)阳性晚期乳腺癌患者生活质量及预后的影响。方法:选择2016年1月-2017年12月期间河南省省立医院收治的HER-2阳性晚期乳腺癌患者84例,采用随机数字表法分为两组,各42例。对照组行常规治疗,观察组加用帕妥珠单抗治疗。比较两组生活质量、预后及毒副反应。结果:两组治疗后生活质量评分均升高,且观察组高于对照组,观察组总生存期(23.76±1.41)个月、肿瘤无进展生存期(16.45±1.26)个月,长于对照组(20.39±1.38)个月、(12.63±1.17)个月,观察组毒副反应发生率(4.76%)低于对照组(21.43%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:HER-2阳性晚期乳腺癌患者采用帕妥珠单抗靶向治疗效果较好,利于延长患者生存时间,减少治疗过程中的毒副反应,从而提高生活质量,改善预后。

番茄Ty-2、Ty-3和I-2基因多重PCR鉴定技术

本研究利用分别与抗番茄黄化曲叶病毒病(tomato yellow leaf curl virus disease,TYLCVD)基因Ty-2、Ty-3紧密连锁的共显性分子标记T0302、P6-25,与抗番茄枯萎病(Fusarium vascular wilt)基因I-2紧密连锁的显性标记Z1063,建立了能同时鉴定番茄Ty-2、Ty-3和I-2基因的多重PCR技术。利用该技术对24份番茄材料进行基因型鉴定,其结果与田间接种鉴定结果吻合率达91.7%。该体系简易快捷、无需酶切,只需一次PCR即可完成鉴定工作,不失为番茄多基因聚合育种、抗性资源鉴定的有效工具。

番茄Ty-3、I-2和Mi基因多重PCR体系的建立与应用

本研究利用已知基因型的番茄材料,筛选出抗番茄黄化曲叶病Ty-3基因紧密连锁的分子标记SCAR1、抗枯萎病I-2基因紧密连锁的分子标记SCAR2和抗根结线虫病Mi基因紧密连锁的分子标记SCAR3,并应用这3个分子标记建立能同时鉴定Ty-3、I-2和Mi基因的多重PCR体系。经多次验证,扩增的特异性片段与单引物扩增片段一致,其结果准确可靠,可用于同时对3个抗病基因的鉴定。利用该体系对300份番茄材料进行种质资源筛选,结果表明分子检测结果与接种鉴定结果几乎吻合。本研究建立的多重PCR方法简易、高效、快速,为番茄抗病材料的筛选、分子标记辅助聚合育种工作奠定了基础。

番茄种质资源黄化曲叶病毒病抗性的鉴定与评价

鉴于目前商业番茄品种黄化曲叶病毒病抗性难以甄别,对86份番茄种质的番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)抗性基因进行PCR检测并进行田间抗病性鉴定。结果表明,目前抗TYLCV番茄种质抗性基因主要是Ty-1/ty-1和Ty-1/ty-1+Ty-3a/ty-3,2种类型抗病种质(19份、23份)分别占总抗病种质(61份)的31.15%和37.70%。在仅含有Ty-1基因的25个番茄种质中,有80.00%田间表现抗病,而同时含有Ty-1和Ty-3a 2个基因的26个番茄种质中,田间抗病率达100%,说明抗性基因具有累加效应。通过抗性基因PCR方式进行抗病检测,准确率达到81.40%。同时推荐了M-17号、达丽等25份抗TYLCV番茄优良品种。

川芎嗪对实验性高脂血症家兔的抗脂质过氧化及升高动脉壁前列环素作用

采用RIA法监测动脉壁PGI_2含量及血小板TXA_2含量变化,以评定TMP对血管内皮细胞的保护作用;用荧光微量法测定心肌组织中褐脂质含量及血浆过氧化脂质(LPO)含量,以评定TMP的抗脂质过氧化作用;用荧光偏振法测定红细胞膜流动性及膜组份胆固醇/磷脂比值,评定TMP对由自由基引起的细胞膜功能和膜结构损伤的保护作用。实验结果证明,TMP具显著的保护血管内膜及抗脂质过氧化作用。

采用LabVIEW组态软件的调压铸造计算机控制系统设计

在分析国内外现有铸造工艺和调压铸造工艺流程的基础上,设计了一种TY-2型调压铸造自动控制系统,并给出了该调压铸造自动控制系统的设计方案,包括计算机控制系统、上位机硬件结构和上位机软件设计。采用LabVIEW工控组态软件对上位机程序进行了具体实现,具有压力传感器标定程序、串行通讯程序、铸造流程显示程序和故障报警程序等功能。实例应用结果表明,基于LabVIEW的调压铸造计算机控制系统具有友好的人机交互界面、操作过程简单、报警设置合理等优点。

苯甲酰类化合物构效关系的模式识别研究

用ＣＮＤＯ／２量化方法计算了３５个苯甲酰类化合物的量化指数，并应用模式识别方法研究了该类化合物的结构对治疗患Ｌ１２１０肿瘤小鼠药效的影响，得到满意的分类图。结果表明化合物的抗癌活性的主要影响因素为ＣＱＳ、ＥＬＵＭＯ、ＥＳＨＥＰ和π，药物的抗癌活性主要是通过抑制核苷酸还原酶所致，而且化合物在体内到达受体的过程和难易程度对药效的影响较大。

番茄5个抗病基因KASP分型技术体系的建立与应用

竞争性等位基因特异性PCR(Kompetitive allele specific PCR,KASP)是一种基于单核酸多态性(Single nucleotide polymorphism,SNP)的新型基因分型技术,建立高效、经济的番茄抗病基因的KASP分型技术对促进抗病品种的选育具有重要意义。本研究中设计了抗番茄黄花曲叶病毒(tomato yellow leaf curl virus,TYLCV)病基因Ty-1和抗根结线虫(root-knot nematode,RKN)基因Mi-1的KASP引物,结合已报道的抗番茄花叶病毒(tomato mosaic virus,ToMV)病基因Tm-2^(2)、抗番茄斑萎病毒(tomato spotted wilt virus,TSWV)病基因Sw-5和抗镰刀菌颈腐根腐(fusarium crown and root rot,FCRR)病基因Frl的KASP引物,进行了番茄抗病基因KASP分型检测技术研究。利用不同基因型的番茄抗病种质,对影响KASP的反应体积、DNA模板浓度、引物浓度及反应循环数等进行了优化,建立了最优番茄抗病基因的KASP分型检测技术体系。研究结果显示,优化的KASP体系与Ty-1、Mi-1、Tm-2^(2)、Sw-5和Frl基因的PCR分子标记检测结果相一致。所用的KASP反应体系不但能节省试剂,且具有高准确性和强稳定性的优点,因此其可以广泛应用于番茄抗病基因的鉴定、遗传多样性和基因定位等研究,为番茄种质资源分子标记辅助的抗病性鉴定、抗原的快速筛选及利用提供技术支持和理论依据。