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Effect of TRPV1 combined with lidocaine on cell state and apoptosis of U87-MG glioma cell lines 被引量:7
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作者 Jun Lu You-Ting Ju +3 位作者 Chang Li Fu-Zhou Hua Guo-Hai Xu Yan-Hui Hu 《Asian Pacific Journal of Tropical Medicine》 SCIE CAS 2016年第3期283-287,共5页
Objective:To study the effects of Transient receptor potential cation channel,subfamily V,member 1(TRPV1) combined with lidocaine on status and apoptosis of U87-MG glioma cell line,and explore whether local anesthetic... Objective:To study the effects of Transient receptor potential cation channel,subfamily V,member 1(TRPV1) combined with lidocaine on status and apoptosis of U87-MG glioma cell line,and explore whether local anesthetic produces neurotoxicity by TRPVI.Methods:U87-MG cells were divided into control group,gene silencing group,empty vector group and TRPV gene up-rcgulation group.For cells in each group,flow cytometry was employed to detect the intracellular calcium ion concentration and mitochondrial membrane potential at different lime point from cellular perspective.Cell apoptosis of U87-MG was assayed by flow cytometry and MTT from a holistic perspective.Results:Calcium ion concentration increased along with time.The concentration in TRPV1 gene up-regulation group was significantly higher than those in other groups at each time point(P<0.05).After adding lidocaine.mitochondrial membrane potential in U87-MG significantly increased(P<0.05).This increasing trend in TRPV1 gene up-regulation group was more significant than other groups(P<0.05).while in TRPV1 gene silencing group,the trend significantly decreased(P<0.05).Flow cytometry result and MTT result both showed that cell apoptosis in each group significantly increased after lidocaine was added(P<0.05).This increasing trend in TRPV1 gene up-regulation group was more significant than other groups(P<0.05),while in TRPV1 gene silencing group,the trend significandy decreased(P<0.05).Moreover,apoptosis was more severe along with the increasing concentration of lidocaine(P<0.05).Conclusions:In this study,it was proved that lidocaine could dose-dependently induce the increase of intracellular calcium ion concentration,mitochondrial membrane potential and apoptosis in U87-MG glioma cell line.The up-regulation of TRPV1 enhanced cytotoxicity of lidocaine,which revealed the correlations between mem.Lidocaine might have increased intracellular calcium ion concentration by activating TRPVI gene and induced apoptosis of U87-GM glioma cell line by up-regulating mitochondrial membrane potential. 展开更多
关键词 TRPV1 LIDOCAINE u87-mg GLIOMA cell STATE APOPTOSIS
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U87-MG细胞中沉默NIN1/RPN12结合蛋白1同源物在宫颈癌及癌前病变中表达及其与高危型人乳头瘤病毒DNA负荷量相关性分析
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作者 张义娇 李艳云 陈碧琦 《当代医学》 2023年第15期6-9,共4页
目的探讨U87-MG细胞中沉默NIN1/RPN12结合蛋白1同源物(NOB1)在宫颈癌及癌前病变中表达及其与高危型人乳头瘤病毒(HPV)DNA负荷量相关性。方法选取2019年1月至2021年3月于本院就诊的120例宫颈病变患者作为研究对象,其中72例宫颈上皮内瘤... 目的探讨U87-MG细胞中沉默NIN1/RPN12结合蛋白1同源物(NOB1)在宫颈癌及癌前病变中表达及其与高危型人乳头瘤病毒(HPV)DNA负荷量相关性。方法选取2019年1月至2021年3月于本院就诊的120例宫颈病变患者作为研究对象,其中72例宫颈上皮内瘤病患者作为宫颈上皮内瘤病组,48例宫颈癌患者作为宫颈癌组;另选取同期50例体检的宫颈正常女性作为宫颈正常组。3组均进行NOB1检测及高危型HPV检测,比较3组宫颈组织中NOB1基因阳性表达率、高危型HPV DNA负荷量及阳性率,比较宫颈癌患者不同参数的NOB1基因和高危型HPV表达情况,分析NOB1基因阳性表达与高危型HPV DNA负荷量相关性。结果3组NOB1基因阳性表达率比较差异有统计学意义(P<0.05);宫颈癌组NOB1基因阳性表达率高于宫颈癌上皮内瘤病变组、宫颈正常组,宫颈癌上皮内瘤病变组高于宫颈正常组,差异有统计学意义(P<0.05)。3组高危型HPV DNA负荷量比较差异有统计学意义(P<0.05);宫颈癌组高危型HPV DNA阳性率高于宫颈癌上皮内瘤病变组、宫颈正常组,宫颈癌上皮内瘤病变组高于宫颈正常组,差异有统计学意义(P<0.05)。宫颈癌患者组织学分级、淋巴结转移NOB1基因阳性表达率比较差异有统计学意义(P<0.05);宫颈癌患者不同年龄、组织学类型、肌层浸润、分期的NOB1基因阳性表达率比较差异无统计学意义;宫颈癌患者不同年龄、组织学类型、组织学分级、肌层浸润、分期、淋巴结转移的高危型HPV DNA阳性表达率比较差异无统计学意义。Spearman相关性分析结果显示,宫颈癌患者NOB1表达与高危型HPV DNA负荷量呈正相关(r>0,P<0.05)。结论宫颈癌组织中NOB1基因阳性表达,可增加疾病恶性程度和淋巴结转移风险,与高危型HPV感染密切相关。 展开更多
关键词 宫颈癌 u87-mg细胞中沉默基因 高危型人乳头瘤病毒 相关性
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RNA干扰Fascin1表达抑制胶质瘤细胞U87MG的侵袭、转移能力 被引量:17
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作者 李培栋 王新军 +2 位作者 单峤 吴跃辉 王振 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期764-768,共5页
目的:本研究运用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术特异性抑制肌动蛋白结合的细胞骨架蛋白Fascin1的表达,并探讨其对胶质瘤细胞U87 MG的侵袭和转移能力的影响及相关分子机制。方法:将针对Fascin1的小干扰RNA(Fascin1-si RNA)和阴性对... 目的:本研究运用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术特异性抑制肌动蛋白结合的细胞骨架蛋白Fascin1的表达,并探讨其对胶质瘤细胞U87 MG的侵袭和转移能力的影响及相关分子机制。方法:将针对Fascin1的小干扰RNA(Fascin1-si RNA)和阴性对照si RNA(Negative-si RNA)转染至人胶质瘤细胞株U87 MG中。实验分为3组:空白对照组(未转染的细胞)、阴性对照组(转染neg-si RNA的细胞)、实验组(转染Fascin1-si RNA的细胞)。用transwell小室法检测Fascin1对U87MG细胞的侵袭和转移能力的影响,蛋白印迹法(Western blot)检测U87 MG细胞中Fascin1、p AKT及p STAT3等蛋白的表达。通过添加针对PI3K通路的抑制剂LY294002和针对STAT3通路的抑制剂JSI-124,证实了这两条信号通路在胶质瘤细胞U87MG侵袭、转移方面的作用。结果:相比空白对照组和阴性对照组,实验组细胞的转移能力降低了约(49±5.8)%及(46±5.4)%(P<0.05),侵袭能力降低了约(42±4.9)%和(43±4.8)%(P<0.05);且相关的PI3K/AKT及STAT3等信号通路的磷酸化减少;添加相应的信号通路抑制剂后,细胞的侵袭、转移能力显著降低(P<0.05)。结论:RNAi抑制Fascin1表达能够降低胶质瘤细胞U87 MG的侵袭及转移能力,并可抑制PI3K/AKT和STAT3信号激活,在一定程度上可逆转胶质瘤细胞的转移和侵袭等肿瘤特性。 展开更多
关键词 RNA干扰 Fascin1 胶质瘤 u87 mg 侵袭转移
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人U87-MG脑胶质瘤细胞裸鼠原位移植模型的建立 被引量:6
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作者 王艳华 楚建杰 +9 位作者 李子敏 胡娜平 李会会 郑建民 张彩勤 师长宏 杨志福 奚苗苗 文爱东 翁琰 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期735-739,共5页
目的应用不同数量U87-MG细胞接种裸鼠脑内,建立裸鼠脑胶质瘤模型,观察其生长特性。方法采用立体定向技术,分别将3.0×10^(10)·L^(-1)、4.0×10^(10)·L^(-1)、5.0×10^(10)·L^(-1)浓度的人脑胶质瘤细胞U87-M... 目的应用不同数量U87-MG细胞接种裸鼠脑内,建立裸鼠脑胶质瘤模型,观察其生长特性。方法采用立体定向技术,分别将3.0×10^(10)·L^(-1)、4.0×10^(10)·L^(-1)、5.0×10^(10)·L^(-1)浓度的人脑胶质瘤细胞U87-MG单细胞悬液,接种于18只♂裸鼠的右侧尾状核区,每只接种体积为5μL,另取6只裸鼠作为对照,接种同体积Hanks液。观察不同接种量实验鼠的生存状态、成瘤情况及脏器转移灶、带瘤生存期,测量肿瘤的最大径,计算肿瘤体积,将获取的全脑标本制作病理切片,行HE染色和免疫组化检查。结果各接种量的实验组成瘤率均为100%,未见颅外转移病灶,3组裸鼠的平均生存时间分别为(46.50±3.27)d、(38.50±3.28)d、(30.67±3.51)d;病理学检查符合人脑胶质瘤细胞的形态学特征和免疫表型;免疫组化GFAP和S-100蛋白呈阳性表达。结论立体定向脑内定量注射U87-MG细胞制备的人脑胶质瘤裸鼠原位移植模型成瘤率高、颅内生长稳定、颅外远隔部位转移率低,与人脑胶质瘤病理学及形态学特征相似,能为研究胶质瘤的发生、发病机制、生物学特性以及探寻有效的治疗措施提供可靠的动物模型。 展开更多
关键词 脑胶质瘤 原位移植 裸鼠 动物模型 u87-mg细胞 HE染色 免疫组化
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环孢素A增强三氧化二砷诱导的胶质瘤细胞U87-MG自噬性死亡 被引量:8
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作者 张萍 陈菲 +2 位作者 卞维鹏 肖洋炯 覃文新 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期727-730,共4页
目的:探讨环孢素A(cyclosporine A,CsA)联合三氧化二砷(arsenic trioxide,ATO)对脑胶质瘤细胞U87-MG自噬性死亡的影响。方法:CsA联合ATO作用U87-MG细胞后,应用MTT法检测细胞的存活率及ATO半数抑制浓度(half inhibition concentration,IC... 目的:探讨环孢素A(cyclosporine A,CsA)联合三氧化二砷(arsenic trioxide,ATO)对脑胶质瘤细胞U87-MG自噬性死亡的影响。方法:CsA联合ATO作用U87-MG细胞后,应用MTT法检测细胞的存活率及ATO半数抑制浓度(half inhibition concentration,IC50),FCM法检测细胞周期的改变,荧光显微镜下观察及FCM法定量分析经吖啶橙(acridine orange,AO)活体染色后细胞质内酸性自噬泡(acidic vesicular organelles,AVO)的形成情况;Western印迹法检测细胞自噬相关蛋白Beclin-1和自噬标志蛋白LC3-Ⅱ的表达水平。结果:小剂量CsA(2μmol/L)联合ATO可明显抑制U87-MG细胞的生长,CsA可增加ATO诱导的细胞自噬性死亡,使ATO的IC50值由单独作用时的4.28μmol/L降低至联合作用时的1.28μmol/L;与对照组相比,CsA联合ATO作用后G2/M期细胞明显减少(P<0.05);AO活体染色可见,CsA联合ATO作用可显著增加细胞内的AVO形成,与CsA、ATO单独作用组相比差异有统计学意义(P<0.01);Western印迹可见CsA联合ATO作用后细胞内Beclin-1和LC3-Ⅱ蛋白的表达明显上调,与对照组和单独作用组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:CsA可以增强ATO诱导的恶性脑胶质瘤细胞U87-MG的自噬性死亡,为恶性脑胶质瘤的治疗提供新的方向。 展开更多
关键词 神经胶质瘤 自噬 三氧化二砷 环孢素A 细胞 u87-mg
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神经调节因子Neuregulin-1(Nrg1)调节U87-MG细胞的黏附分子L1表达及促迁移作用 被引量:2
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作者 赵炜疆 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2013年第7期829-833,共5页
目的研究神经调节因子Neuregulin-1(Nrg1)对人胶质母细胞瘤U87-MG细胞中细胞黏附分子L1表达及细胞迁移的影响。方法给予U87-MG细胞重组Nrg1α(rNrg1α,2.5 nmol/L)24和48 h,RT-PCR观察L1 mRNA表达;给予细胞rNrg1α或rNrg1β(2.5 nmol/L)... 目的研究神经调节因子Neuregulin-1(Nrg1)对人胶质母细胞瘤U87-MG细胞中细胞黏附分子L1表达及细胞迁移的影响。方法给予U87-MG细胞重组Nrg1α(rNrg1α,2.5 nmol/L)24和48 h,RT-PCR观察L1 mRNA表达;给予细胞rNrg1α或rNrg1β(2.5 nmol/L)48 h,Western blot检测L1蛋白水平。用Nrg1 siRNA处理细胞,Western blot观察L1蛋白水平,用细胞划伤实验观察细胞迁移。结果 Nrg1α可促进L1 mRNA表达;与0 nmol/L组相比,Nrg1α及Nrg1β(2.5 nmol/L)均可显著增加L1蛋白水平(P<0.01,P<0.05)。与对照siRNA相比,Nrg1 siRNA明显降低Nrg1表达,并伴有L1表达下降。Nrg1 siRNA处理细胞划伤16 h,划伤边缘细胞Nrg1α、Nrg1β及L1荧光信号降低,细胞迁移减弱。结论 Nrg1可调节U87-MG细胞L1表达,其参与细胞迁移可能与提高L1表达有关。 展开更多
关键词 神经调节因子 细胞黏附分子L1 u87-mg细胞系 细胞迁移
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蛋白酶体抑制剂MG-132对体外人U87胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响 被引量:2
7
作者 范军强 赵勇刚 +1 位作者 范波 李涛 《河南科技大学学报(医学版)》 2009年第3期161-163,共3页
目的探讨蛋白酶体抑制剂MG-132对体外人U87胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法分别以不同浓度(0、2.5、5、10和20μmol/L)的MG-132培养U87胶质瘤细胞,通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同培养时间(12、24、48、72 h)对U87胶质瘤细... 目的探讨蛋白酶体抑制剂MG-132对体外人U87胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法分别以不同浓度(0、2.5、5、10和20μmol/L)的MG-132培养U87胶质瘤细胞,通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同培养时间(12、24、48、72 h)对U87胶质瘤细胞增殖的影响,流式细胞仪分析MG-132对U87胶质瘤细胞凋亡的影响,HE染色观察细胞形态学变化。结果通过与正常对照组比较,2.5-20μmol/L浓度的MG-132在12、24、48及72 h均可抑制U87细胞增殖并诱导其凋亡,并在一定范围内呈时间和剂量依赖性;各亚组与对照组差异具有统计学意义(P〈0.05);形态学检查呈现凋亡细胞的特征。结论MG-132可抑制U87胶质瘤细胞增殖并诱导其凋亡,在一定范围内呈时间和剂量依赖性。 展开更多
关键词 蛋白酶体抑制剂mg-132 u87胶质瘤细胞 细胞凋亡
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哇巴因调控Akt/mTOR信号通路诱导U87-MG细胞死亡的机制研究 被引量:1
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作者 杨小飒 李培炎 +4 位作者 李杰 衣泰龙 徐忠伟 涂悦 程世翔 《中国医药导报》 CAS 2017年第3期4-7,共4页
目的探讨哇巴因(ouabain)对人胶质瘤U87-MG细胞死亡的影响及具体机制。方法将培养的U87-MG细胞随机分为正常对照(Control)组和ouabain组,分别加入常规培养基和不同浓度ouabain(0.05、0.5、2.5、25μmol/L)干预24 h,光学显微镜观察ouabai... 目的探讨哇巴因(ouabain)对人胶质瘤U87-MG细胞死亡的影响及具体机制。方法将培养的U87-MG细胞随机分为正常对照(Control)组和ouabain组,分别加入常规培养基和不同浓度ouabain(0.05、0.5、2.5、25μmol/L)干预24 h,光学显微镜观察ouabain干预后24 h细胞的形态改变,MTT实验检测细胞活力,免疫印迹法(Western blot)检测Akt、p-Akt、m TOR和p-m TOR的表达变化。结果与Control组比较,ouabain显著降低U87-MG细胞活力(均P<0.01),且呈现浓度依赖性;高浓度ouabain(2.5、25μmol/L)与Control组相比能够降低U87-MG细胞中p-Akt、m TOR和p-m TOR的表达(均P<0.01)。结论高浓度ouabain可能通过抑制胞内Akt/m TOR信号通路,降低肿瘤细胞活力并最终引起细胞死亡。 展开更多
关键词 哇巴因 胶质瘤 人胶质瘤u87-mg细胞 Akt/mTOR信号通路
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哇巴因对人胶质瘤U87-MG细胞增殖及HIF-1α表达的影响 被引量:1
9
作者 杨小飒 刘冬莹 +3 位作者 李杰 衣泰龙 涂悦 程世翔 《遵义医学院学报》 2017年第1期64-67,共4页
目的探索哇巴因(Ouabain)对人胶质瘤U87-MG细胞增殖和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的影响。方法Ouabain(0.05、0.5、2.5、25μmol/L)作用于U87-MG细胞24 h,MTT法检测吸光度值和细胞活力,Western Blot检测HIF-1α表达量。结果不同浓度O... 目的探索哇巴因(Ouabain)对人胶质瘤U87-MG细胞增殖和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的影响。方法Ouabain(0.05、0.5、2.5、25μmol/L)作用于U87-MG细胞24 h,MTT法检测吸光度值和细胞活力,Western Blot检测HIF-1α表达量。结果不同浓度Ouabain干预24 h后U87-MG细胞吸光度值(OD_(490))与Control组相比,均明显降低(P均<0.01),细胞活力显著下降(P<0.01);与Control组比较,0.05μmol/L Ouabain组HIF-1α蛋白表达量上升(1.27±0.05vs.1.00±0.05,P<0.05),当Ouabain浓度升高至2.5、25μmol/L,HIF-1α表达显著降低(0.28±0.04,0.20±0.03 vs.1.00±0.05,P均<0.01)。结论较高浓度Ouabain可通过抑制HIF-1α表达,促进人胶质瘤U87-MG细胞凋亡。 展开更多
关键词 哇巴因 人胶质瘤u87-mg细胞 缺氧诱导因子-1Α 凋亡
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数字全息显微镜观察哇巴因对人胶质瘤U87-MG细胞的影响
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作者 杨小飒 余东堃 +4 位作者 衣泰龙 徐忠伟 李杰 涂悦 程世翔 《肿瘤药学》 CAS 2017年第1期12-16,共5页
目的应用数字全息显微镜观察哇巴因(ouabain)对人胶质瘤U87-MG细胞的影响。方法不同浓度ouabain(0.05、0.5、2.5、25μM)干预U87-MG细胞,24 h后使用光学显微镜观察细胞形态学改变,MTT法检测细胞活力,数字全息显微镜观察ouabain作用后细... 目的应用数字全息显微镜观察哇巴因(ouabain)对人胶质瘤U87-MG细胞的影响。方法不同浓度ouabain(0.05、0.5、2.5、25μM)干预U87-MG细胞,24 h后使用光学显微镜观察细胞形态学改变,MTT法检测细胞活力,数字全息显微镜观察ouabain作用后细胞的动态变化和运动能力改变。结果与Control组比较,ouabain明显减低细胞活力[0.05μM(75.92±3.21)%,0.5μM(49.61±3.95)%,2.5μM(42.74±3.21)%,25μM(32.86±2.00)%vs.Control(100±0.01)%;P<0.01],减少细胞数量[0.05μM(170.7±4.7),0.5μM(162.3±4.4),2.5μM(142.0±2.6),25μM(110.3±1.2)vs.Control(193.7±2.6);P<0.05或P<0.01],并降低细胞运动能力[0.05μM(809.0±19.8)μm,0.5μM(626.9±23.5)μm,2.5μM(476.7±22.9)μm,25μM(386.5±19.6)μm vs.Control(959.7±18.9)μm;P<0.01],且呈浓度依赖性。结论 ouabain可抑制人胶质瘤U87-MG细胞的生长、降低肿瘤细胞运动能力并最终引起细胞死亡,数字全息显微镜可起到良好的评价作用。 展开更多
关键词 数字全息显微镜 哇巴因 人胶质瘤u87-mg细胞 运动能力
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红景天苷对胶质瘤U87-MG细胞增殖和侵袭能力的影响
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作者 黄平 蒋锦杏 +1 位作者 徐璇 陈丽 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2017年第6期64-67,共4页
目的观察红景天苷对胶质瘤U87-MG细胞增殖和侵袭能力的影响,探讨其诱导U87-MG细胞凋亡机制。方法不同浓度红景天苷和喜树碱加入U87-MG细胞中,作用24 h后,MTT法测定U87-MG细胞增殖,流式细胞术检测U87-MG细胞凋亡率,Transwell法检测U87-M... 目的观察红景天苷对胶质瘤U87-MG细胞增殖和侵袭能力的影响,探讨其诱导U87-MG细胞凋亡机制。方法不同浓度红景天苷和喜树碱加入U87-MG细胞中,作用24 h后,MTT法测定U87-MG细胞增殖,流式细胞术检测U87-MG细胞凋亡率,Transwell法检测U87-MG细胞侵袭能力,间接荧光标记法测定细胞内活性氧(ROS)水平,Western blot检测U87-MG细胞Caspase-3、Bcl-2、Bax、E-cadherin、N-cadherin和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达。结果与空白对照组比较,各给药组U87-MG细胞生长抑制作用明显,10、50、100μg/m L红景天苷作用U87-MG细胞后,细胞侵袭能力显著下降,10、50、100μg/m L红景天苷作用U87-MG细胞48 h后均能诱导U87-MG细胞凋亡;ROS水平与红景天苷浓度呈正相关;10、50、100μg/m L红景天苷上调Caspase-3、Bax和E-cadherin的表达,下调Bcl-2和N-cadherin和MMP-9的表达。结论红景天苷可诱导U87-MG细胞凋亡、抑制U87-MG细胞的侵袭能力。 展开更多
关键词 红景天苷 胶质瘤u87-mg细胞 细胞增殖 活性氧 CASPASE-3 基质金属蛋白酶-9
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上调miR-124-3p表达增加U-87 MG人胶质母细胞瘤细胞的放疗敏感性
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作者 麦麦提依明·托合提 张诚 +5 位作者 黄啸元 高峰 帕热哈提江·依孜木阿卜杜喀迪尔·牙森 董军 杨小朋 吴永刚 《中国临床神经外科杂志》 2024年第7期422-426,共5页
目的探讨miR-124-3p表达水平对U-87 MG人胶质母细胞瘤细胞(U87细胞)放疗敏感性的影响。方法体外培养U87细胞,利用脂质体载体转染技术转染hsa-miR-124-3p mimics或hsa-miR-124-3p inhibitor质粒调控miR-124-3p表达;转染24 h后,取生长状... 目的探讨miR-124-3p表达水平对U-87 MG人胶质母细胞瘤细胞(U87细胞)放疗敏感性的影响。方法体外培养U87细胞,利用脂质体载体转染技术转染hsa-miR-124-3p mimics或hsa-miR-124-3p inhibitor质粒调控miR-124-3p表达;转染24 h后,取生长状态良好的U87细胞,在室温下用西门子Primus-M型直线加速器进行照射(16 Gy)模拟放疗;实时荧光定量PCR检测细胞miR-124-3p表达水平,CCK-8法检测细胞增殖能力。结果转染hsa-miR-124-3p mimics质粒后,细胞miR-124-3p表达水平明显上调(P<0.05);转染hsa-miR-124-3p inhibitoR质粒后,细胞miR-124-3p表达水平明显下调(P<0.05)。上调miR124-3p表达,U87细胞增殖活性明显降低(P<0.05);下调miR-124-3p表达,U-87细胞增殖活性明显增高(P<0.05)。上调miR124-3p表达联合放疗,U87细胞增殖活性进一步明显降低(P<0.05);下调miR-124-3p表达联合放疗,U87细胞增殖活性明显降低,但仍明显高于未给予任何处理的U87细胞的增殖活性(P<0.05)。结论上调miR-124-3p表达明显抑制U87细胞的增殖活性,并且显著增加U87细胞的放疗敏感性。 展开更多
关键词 胶质母细胞瘤 u87 mg细胞 miR-124-3p 细胞增殖 放疗敏感性
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齐墩果酸通过MAPK/ERK信号传导通路对U87MG细胞增殖及凋亡的体外实验研究 被引量:1
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作者 郭国财 刘佳 +2 位作者 薄勇力 兰小磊 姚维成 《中华神经外科杂志》 CSCD 北大核心 2013年第5期478-483,共6页
目的探讨齐墩果酸(OA)对神经胶质母细胞瘤U87MG细胞增殖及细胞凋亡的影响。方法以U87MG细胞为研究对象,使用25、50、80、100、150和200μg/ml的OA处理24、48和72h后,采用MTF实验检测OA对体外培养U87MG细胞增殖抑制作用,计算其抑... 目的探讨齐墩果酸(OA)对神经胶质母细胞瘤U87MG细胞增殖及细胞凋亡的影响。方法以U87MG细胞为研究对象,使用25、50、80、100、150和200μg/ml的OA处理24、48和72h后,采用MTF实验检测OA对体外培养U87MG细胞增殖抑制作用,计算其抑制率;采用划痕法检测OA对U87MG细胞迁移能力的影响;用流式细胞仪分析OA对U87MG细胞周期与凋亡的影响;通过Westernblot检测OA对MAPK/ERK信号传导通路活性的影响。结果50μg/ml以上浓度的OA处理48h后,U87MG细胞的形态发生不同程度的变化,大量细胞脱落。150μg/ml和200μg/ml的OA处理U87MG细胞72h后,生长抑制率可达100%,与对照组相比差异有统计学意义(P〈0.01)。25μg/ml的OA处理48h后,迁移至划痕区的细胞数量相比于对照组明显减少。经50μg/mlOA作用48h后,处于G0/G0期的细胞从64.23%上升至75.03%,说明发生G0/G1期阻滞。同一浓度下,细胞凋亡率达到18.77%。U87MG细胞中MEK和ERK蛋白的磷酸化水平受到明显的抑制。结论OA可显著抑制U87MG细胞的生长增殖,呈一定的量效关系;OA可明显抑制U87MG细胞的迁移,并能抑制MAPK/ERK信号传导通路的激活。OA通过抑制MAPK/ERK信号传导通路的激活,可以抑制神经胶质母细胞瘤细胞的增殖生长。 展开更多
关键词 神经胶质母细胞瘤 齐墩果酸 MAPK ERK信号通路 细胞凋亡 u87 mg细胞
原文传递
染料木素衍生物对U87-MG细胞凋亡机制的研究 被引量:2
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作者 李红侠 吴超 +2 位作者 王文婷 徐礼生 单玲玲 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期986-993,共8页
目的:研究染料木素衍生物(Ged)对U87-MG细胞的凋亡机制。方法:实验分为对照组,染料木素衍生物组(10、20、40μmol·L^(-1));以MTT法检测细胞体外抗增殖活性,流式细胞仪检测细胞的凋亡状况,荧光定量PCR仪检测细胞内Bax mRNA、Bcl-2 m... 目的:研究染料木素衍生物(Ged)对U87-MG细胞的凋亡机制。方法:实验分为对照组,染料木素衍生物组(10、20、40μmol·L^(-1));以MTT法检测细胞体外抗增殖活性,流式细胞仪检测细胞的凋亡状况,荧光定量PCR仪检测细胞内Bax mRNA、Bcl-2 mRNA、Caspase-3 mRNA水平,激光共聚焦检测线粒体膜电位变化和活性氧含量,酶标仪检测Caspase-3酶的活性。结果:随染料木素衍生物浓度的增加,对U87-MG细胞的抑制性增强,细胞的凋亡量成浓度依赖性,IC50为20.23μmol·L^(-1);荧光定量PCR结果显示,Bax mRNA、Bcl-2 mRNA、Cyt c、Caspase-3 mRNA的基因表达水平显著增加(P<0.05);当浓度为20μmol·L^(-1)时,线粒体膜电位降低显著;随着细胞的凋亡,活性氧的生成也与药物浓度呈依赖性;Caspase-3酶的活性在药物浓度为40μmol·L^(-1)时,达到极显著水平(P<0.01)。结论:染料木素衍生物(Ged)能抑制U87-MG细胞的增殖,增强活性氧的簇产生、线粒体膜电位下降,随细胞凋亡量的增加,Caspase-3酶的活性增强,染料木素衍生物具有较强的抗癌活性。 展开更多
关键词 染料木素 衍生物 细胞凋亡 u87-mg细胞 机制
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CREB3通过下调FAK磷酸化水平抑制胶质瘤细胞增殖及侵袭转移的体外实验研究
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作者 张懿炜 胡亚欣 +4 位作者 出良钊 严昭 曾茜 蒲茜 刘健 《中华临床医师杂志(电子版)》 CAS 北大核心 2023年第2期202-209,共8页
目的研究环磷酸腺苷反应原件结合蛋白3(CREB3)基因与胶质瘤患者的生存预后相关性,以及其在胶质瘤细胞增殖及侵袭转移等恶性生物学行为中的功能作用及发生机制,为寻找有效的胶质瘤分子治疗靶点提供理论依据。方法CREB3的mRNA表达水平及... 目的研究环磷酸腺苷反应原件结合蛋白3(CREB3)基因与胶质瘤患者的生存预后相关性,以及其在胶质瘤细胞增殖及侵袭转移等恶性生物学行为中的功能作用及发生机制,为寻找有效的胶质瘤分子治疗靶点提供理论依据。方法CREB3的mRNA表达水平及其存活率来自中国胶质瘤基因组图谱(CGGA)数据库。免疫组化(IHC)验证在不同级别的人脑胶质瘤组织中CREB3和磷酸化部黏着斑激酶397位点(p-FAK397)蛋白的表达情况。慢病毒构建U87、U251的CREB3的敲低模型。利用蛋白质印记技术(WB)验证p-FAK和其通路上相关蛋白以及相关凋亡蛋白的表达情况。使用细胞增殖实验(CCK-8)计算细胞在450 nm出的光密度(OD)及平板克隆实验验证敲低慢病毒敲低CREB3后细胞的增殖能力,利用细胞划痕,Transwell实验验证敲低细胞系的迁移和侵袭的能力。结果根据CGGA数据库,发现CREB3在高级别胶质瘤中表达上调,提示预后不良(P<0.05)。IHC表明随着胶质瘤级别的增高CREB3表达随之增加,而p-FAK(397)则在Ⅳ级胶质瘤中明显表达。构建慢病毒敲低CREB3的U87、U251细胞系通过WB表明可以使p-FAK(397)的表达下降,促凋亡蛋白(BAX)表达增加,抗凋亡蛋白(Bcl-2)表达减少(P<0.05),并且可以在体外抑制胶质瘤的增殖、迁移和侵袭(P<0.05)。结论CREB3在高级别胶质瘤组织中表达增高,且与患者生存预后密切相关。敲低CREB3下调胶质瘤细胞中FAK的磷酸化水平,进而介导胶质瘤细胞的增殖及侵袭迁移能力变弱。 展开更多
关键词 胶质瘤 u87-mg U251 细胞侵袭 细胞迁徙 细胞增殖
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