虫草保健品中13种核苷类成分的UHPLC-ESI-MS/MS定量分析及评价

目的:对香港和大陆市场上销售的8种常见虫草保健品进行核苷类成分的定量分析及评价。方法:采用冰浴超声提取法与UHPLC-ESI-MS/MS分析法,快速检测虫草保健品中的13种核苷类成分。结果:虫草保健品中被测核苷类成分的含量明显高于天然冬虫夏草药材。这些保健品绝大部分组成为冬虫夏草菌丝体粉,而并非是由天然冬虫夏草经直接粉碎加工而成。结论:通过对13种核苷类成分的含量测定,比较市场上以虫草药材或虫草菌丝体为原料制备的保健品质量,可以反映部分已经上市销售的虫草类保健品在核苷类成分种类及含量之间的差异性。

利用UHPLC-ESI-MS/MS法测定川陈皮与其混伪品中的黄酮类成分

为研究区分川陈皮与其常见混伪品,采用UHPLC-MS/MS对川陈皮与其常见混伪品的黄酮类成分进行分析,并利用基于代谢物信息公共数据库对UHPLC-MS/MS检测的一级谱、二级谱数据进行定性分析,并采用主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)以及聚类分析三种方法对化合物进行分析。依靠数据库共鉴定出228种黄酮类化合物,其中多酚12种、花青素21种、黄酮类132种、黄酮醇36种、黄烷酮20种、异黄酮7种,川陈皮中鉴定出特有化合物15种,混伪品中鉴定出特有化合物16种,通过PCA、OPLS-DA以及聚类分析均可将川陈皮与其混伪品准确地区分开来。结果表明基于UHPLC-ESI-MS/MS技术的代谢组分析方法可有效区分川陈皮与其混伪品,可以作为一种川陈皮与混伪品区分以及差异性评价的有效方法,并为其它中药材品种的真伪鉴别以及质量评控提供参考。

UHPLC-ESI-MS/MS法测定大鼠血浆中的山姜素和小豆蔻明

目的建立测定大鼠血浆中山姜素和小豆蔻明含有量的UHPLC-ESI-MS/MS法,并计算两者的药动学参数。方法血浆分析采用PhenomenexLuna C18色谱柱（150 mm×2.0 mm,3μm）;流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液（20∶80）;体积流量为0.4 m L/min;山姜素和小豆蔻明均采用正离子模式检测。结果标准品在1~1 000 ng/m L范围内线性关系良好,相关系数大于0.995,山姜素和小豆蔻明的最低检出限均为0.05 ng/m L,最低定量限均为0.2ng/m L,样品回收率在88.2%~99.3%之间。大鼠灌胃草豆蔻提取物后,两者的主要药动学参数Cmax分别为（385.633±91.192）和（186.683±69.893）ng/m L,t1/2z分别为（1.578±0.239）和（1.137±0.385）h,AUC（0-t）分别为（911.723±59.208）和（456.043±23.99）ng/m L/h,Vz/F分别为（24.295±6.858）和（35.606±12.887）L/kg。结论山姜素和小豆蔻明在大鼠体内的吸收和消除均比较迅速。

UHPLC-ESI-MS/MS法测定动物源食物提取物中肌肽与鹅肌肽的含量

建立了一种同时测定动物源提取物中肌肽(Carnosine)和鹅肌肽(Anserine)含量的超高效液相色谱-电喷雾串联三重四极杆质谱(UHPLC-ESI-MS/MS)分析方法。采用超高效液相分离系统,借助Inertsil Amide HP色谱柱(2. 1 mm×100 mm,3μm)以0. 1%乙酸水溶液-乙腈为流动相,梯度洗脱分离,利用峰面积外标法定量。经过优化,肌肽和鹅肌肽在1. 95～500μg/L质量浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系,相关系数(r)均大于0. 998。肌肽和鹅肌肽的检出限分别为0. 12、0. 47μg/L。以低浓度低聚肽原料为基质,在低、中、高3个加标浓度下,肌肽的回收率为99. 3%～109%,相对标准偏差(RSD,n=6)为0. 98%～1. 1%;鹅肌肽的回收率为100%～113%,RSD为1. 0%～1. 1%。该法前处理简单、快速,重现性好,准确度高,适用于动物源食物提取物中肌肽和鹅肌肽的同时快速检测。

UHPLC-ESI-MS/MS同时测定尿毒康合剂中11种成分的含量

目的建立UHPLC-ESI-MS/MS法同时测定尿毒康合剂中没食子酸、毛蕊异黄酮葡萄糖、芦丁、金丝桃苷、丹酚酸B、大黄酸、黄芪甲苷、隐丹参酮、大黄素、丹参酮I、丹参酮IIA的含量。方法采用InertSustain^(R) C_(18)(3.0 mm×100 mm,3.0μm)色谱柱,甲醇(A)-0.1%甲酸水溶液(B),梯度洗脱,流速0.4 mL·min^(−1),进样量20μL;质谱采用电喷雾离子源(ESI源),正负离子扫描切换,多重反应监测模式进行定量分析。结果尿毒康合剂中11种成分在线性范围内峰面积与质量浓度均呈良好的线性关系,仪器精密度RSD<3.0%,加样回收率为98.44%~103.56%,RSD为2.04%~3.34%。结论本方法高效、稳定、准确、简便,可用于尿毒康合剂中的质量评价与质量控制,并为尿毒康合剂中的临床应用及研究提供依据。

UHPLC-ESI-MS/MS测定复方景川片中6种成分的含量

目的采用UHPLC-ESI-MS/MS同时测定复方景川片中没食子酸、红景天苷、绿原酸、延胡索乙素、阿魏酸、欧当归内酯A的含量。方法采用InertSustain~?C_(18)(3.0 mm×100 mm,3.0μm)色谱柱,乙腈-0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱,流速0.4 mL·min^(-1),进样量10μL;质谱采用电喷雾离子源(ESI源),正负离子扫描切换,多重反应监测模式进行定量分析。结果复方景川片中6种成分的峰面积与质量浓度在一定范围内均呈良好的线性关系,仪器精密度RSD值<2.5%,加样回收率为98.56%～102.04%,RSD为0.97%～2.07%。在所设定的色谱条件下,复方景川片中6个成分(没食子酸、红景天苷、绿原酸、延胡索乙素、阿魏酸、欧当归内酯A)于11 min内完全分离。结论建立的UHPLC-ESI-MS/MS方法快速简便、精密度好、灵敏度高,可用于复方景川片的质量控制。

UHPLC-ESI-MS/MS同时测定心安宁胶囊中的5种药效成分

目的建立UHPLC-ESI-MS/MS同时测定心安宁胶囊中葛根素、二苯乙烯苷、金丝桃苷、槲皮素、齐墩果酸的含量。方法采用InertSustain■C18色谱柱(3.0 mm×100 mm,3.0μm),乙腈-0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱,流速0.4 mL·min^-1,进样量10μL;质谱采用电喷雾离子源(ESI源),负离子扫描模式,多重反应监测模式进行定量分析。结果心安宁胶囊中5种成分在线性范围内峰面积与浓度均呈良好的线性关系,仪器精密度RSD<2.0%,平均加样回收率为99.15%~99.89%,RSD为0.89%~2.21%。在所设定的色谱条件下,心安宁胶囊中葛根素、二苯乙烯苷、金丝桃苷、槲皮素、齐墩果酸5个成分于10 min内完全分离。结论建立的UHPLC-ESI-MS/MS方法快速简便、精密度好、灵敏度高,可用于心安宁胶囊中多种成分的含量测定和质量控制。

贺兰山东麓不同陈酿年份赤霞珠干红葡萄酒中酚类物质对涩感质量的影响

为了探究赤霞珠干红葡萄酒陈酿过程中酚类物质的变化规律及其与涩感质量变化之间的联系。选取宁夏贺兰山东麓同一酒庄10个垂直年份的赤霞珠干红葡萄酒,分析总酚、总单宁、总花色苷含量,利用超高效液相色谱-电喷雾多级质谱(ultra high performance liquid chromatography-electrospray ionization multi-stage mass spectrometry,UHPLC-ESI-MSn)法分析了该系列葡萄酒中的儿茶素、表儿茶素、表棓儿茶素、表儿茶素没食子酸酯、原花青素B1、B2的含量,通过二级质谱分析鉴定了(表)儿茶素三聚体,并对样品涩感质量进行了感官分析。通过相关分析建立酚类物质与涩感质量的相关性。结果表明,随着葡萄酒年份的增加总酚、总单宁和总花色苷的含量呈逐渐减少的趋势。在陈酿过程中葡萄酒的口感呈现干涩下降绒涩上升的趋势。不同质量的涩感强度与总酚及总单宁的含量没有显著的相关性(p> 0. 05)。干涩强度与葡萄酒中儿茶素、表儿茶素、表棓儿茶素及原花青素B1、B2含量显著正相关(p <0. 05)与(表)儿茶素三聚体含量极显著正相关(p <0. 01),绒涩与这些物质没有显著相关性。

固相萃取净化及超高效液相色谱-串联质谱法测定橡胶制品中的13种N-亚硝胺

建立了固相萃取（SPE）净化、超高效液相色谱-串联质谱（UHPLc—MS／MS）测定橡胶制品中13种N-亚硝胺的方法。样品于密闭萃取瓶中于60℃下用甲醇超声萃取30min，C18固相萃取小柱对萃取液进行净化，经C18色谱柱分离，最后用电喷雾正离子（ESI＋）和多重反应监测模式（MRM）对13种N-亚硝胺进行定性、定量测定。实验中对样品前处理、色谱分离条件和质谱检测条件进行了优化。在优化的实验条件下，橡胶样品中添加N-亚硝基二甲胺（NDMA）与N-亚硝基-二乙基胺（NDEA）为500μg／kg、其他组分均为50μg／kg时，各组分的相对标准偏差（RSD，n=7）小于10％；在实际样品中的加标回收率为70．7％-117．0％；方法的检出限（LOD，以10倍标准偏差计）为0．5～500μg／kg。方法可应用于橡胶制品中13种N-亚硝胺的测定。

超高效液相色谱-串联质谱法测定兔血浆中的丝裂霉素C

建立了采用超高效液相色谱-串联质谱测定兔血浆中丝裂霉素C的方法。以兔空白血浆为基质,通过添加标准溶液的方法配制含丝裂霉素C和内标物曲安奈德的样品,选用乙酸乙酯为提取溶剂,液-液萃取法处理血浆样品。采用Hypersil Gold C18分析柱(50 mm×2.1 mm,1.9μm),流动相为甲醇-0.1%甲酸水溶液(90∶10,v/v),等度洗脱,流速0.2 mL/min,柱温35℃,在3 min内实现了快速分离。采用电喷雾正离子(ESI+)模式电离,选择反应监测(SRM)模式检测,以曲安奈德作为内标物进行定量。用于监测的定量离子对分别为丝裂霉素C m/z 335.2→242.2和曲安奈德m/z 435.2→397.3/415.2,用基质匹配标准溶液法进行定量。结果表明:兔血浆中丝裂霉素C的质量浓度在1～1 000μg/L范围内线性关系良好(r=0.997 8,权重系数(weighting):1/x2);血浆中丝裂霉素C的检出限(信噪比为3)为0.2μg/L;其平均回收率为85%～115%;日内及日间的相对标准偏差(RSDs)均小于15%,满足生物样品检测的要求。该方法可用于兔气管外壁给药后的血浆样品中丝裂霉素C的检测。本方法选择性强、灵敏度高、操作简便快速、重现性好,适用于丝裂霉素C药代动力学等方面的研究。

丝裂霉素C-聚乳酸凝胶兔气管外壁给药后体内释放量的测定

目的将丝裂霉素C(MMC)与聚乳酸(PLA)制成凝胶制剂固定在兔气管外壁给药,并建立超高效液相色谱-串联质谱法(UHPLC-MS/MS)测定兔体内释放丝裂霉素C的含量。方法新西兰大白兔30只,气管处外科手术形成瘢痕组织,将0.2 ml载有不同剂量(0.05、0.1、0.2、0.4和0.6mg)的聚乳酸凝胶与明胶海绵的混匀后置于损伤后的气管外壁,固定后缝合手术切口。兔血浆经乙酸乙酯提取后,采用UHPLC-MS/MS法测定MMC血浆药物浓度。结果兔血浆中丝裂霉素C的质量浓度在1～1 000μg·L-1范围内线性良好(r=0.9977,权重W:1/x2);血浆中丝裂霉素C的检出限(信噪比为3)为0.2μg·L-1;其平均回收率在85%～115%之间;日内及日间的相对标准偏差(RSDs)均小于15%,满足生物样品分析要求。兔气管外壁给药后,血浆中MMC释放量少,血药浓度极低,此为选择UHPLC-MS/MS的主要依据。结论该方法简便快捷、灵敏度高、重现性好,适用于丝裂霉素C的体内大批量样品定量分析及药代动力学等方面的研究。MMC-PLA凝胶局部用药后吸收量极少,说明此凝胶剂对全身影响不大。

基于UHPLC-ESI-QQQ-MS/MS技术对复方景川片中多药效成分的质量控制研究

目的:探讨分析复方景川片多药效成分质量控制的有效方法。方法:采用基于UHPLC-ESI-QQQ-MS/MS技术的方法对复方景川片进行梯度洗脱,采用正负离子多反应监测模式对药物成分的特定离子进行监测,测定复方景川片中的药物成分含量。结果:UHPLC-ESI-QQQ-MS/MS技术用于复方景川片中的药物成分进行分析在15 min内即可得出结果,药物中的峰面积与质量浓度有良好的线性关系。结论:采用UHPLC-ESI-QQQ-MS/MS技术可快速的对景川片中的药物成分进行分析,对质量的控制有一定的帮助。

基于UHPLC-ESI-QqQ-MS/MS技术的中药复方新天泰1号多类别多成分质量控制方法研究

目的建立同时快速测定新天泰1号制剂中19种药效成分(人参皂苷Rg1、Rb1、Rd,小檗碱、表小檗碱、药根碱、巴马汀、非洲防己碱、黄连碱、吴茱萸碱、吴茱萸次碱、去氢吴茱萸碱、柠檬苦素、金丝桃苷、姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素、松果菊苷、毛蕊花糖苷)的超高效液相色谱-电喷雾三重四极杆质谱(UHPLC-ESI-Qq Q-MS/MS)新方法,为产品提供全面高效的质量控制方法。方法采用Agilent 1290II高效液相色谱系统,Agilent Zorbax Eclipse Plus C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,3.5μm),乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱;采用正负离子多反应监测模式对各成分特定离子对进行监测,测定新天泰1号样品中19种活性成分含量。结果在15 min内完成19种活性成分的准确测定,极大地提高了分析效率;19种活性成分在线性范围内线性关系良好(r2>0.999 0);19种活性成分人参皂苷Rg1、Rb1、Rd及小檗碱、表小檗碱、药根碱、巴马汀、非洲防己碱、黄连碱、吴茱萸碱、吴茱萸次碱、去氢吴茱萸碱、柠檬苦素、金丝桃苷、姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素、松果菊苷、毛蕊花糖苷的回收率分别为94.80%、96.78%、95.59%、96.88%、97.74%、100.08%、96.27%、100.25%、98.32%、97.16%、95.60%、95.28%、96.81%、95.22%、96.85%、95.31%、93.86%、94.79%、95.20%;19种成分在3批样品中的定量测定结果分别为2.28~2.49 mg/g、0.82~0.90 mg/g、1.22~1.32 mg/g、14.44~15.50 mg/g、3.71~3.99 mg/g、3.26~3.49 mg/g、3.09~3.33 mg/g、4.39~4.72 mg/g、4.56~4.92 mg/g、0.52~0.57 mg/g、0.30~0.33 mg/g、4.46~4.76 mg/g、3.02~3.24 mg/g、2.59~2.76 mg/g、6.03~6.38 mg/g、1.47~1.58 mg/g、1.90~2.08 mg/g、3.40~3.88 mg/g、1.53~1.74 mg/g。结论 UHPLC-ESI-MS/MS多反应监测法可同时快速对新天泰1号中多种不同类型的活性成分进行监测,该方法快速,灵敏度高,重复性好,可用于本品质量控制,亦为中药质量研究提供参考和借鉴。

基于代谢组学的广陈皮治疗脾虚痰湿证大鼠模型的研究

该研究采用代谢组学方法分析广陈皮对脾虚痰湿证内源性代谢产物的影响,并探究广陈皮治疗脾虚痰湿证的相关作用机制。采用多因素造模法建立脾虚痰湿证大鼠模型。通过观察大鼠肝组织病理变化,并测定血浆中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)等病理生化指标含量,初步评价广陈皮对脾虚痰湿证模型大鼠的干预作用。采用免疫组化技术检测大鼠肾AQP2、结肠AQP3、颌下腺AQP5的表达,评估陈皮对脾虚痰湿证大鼠的水通道蛋白表达作用。进一步采用UHPLC-ESI-MS/MS技术对大鼠血浆样本进行代谢轮廓分析,应用主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘-判别分析(OPLS-DA)等多种方法进行模式识别,结合t检验和变量投影重要性(VIP)筛选差异代谢物,并基于MetaboAna-lyst 5.0进行通路分析。实验表明广陈皮可改善脾虚痰湿证大鼠肝组织病理变化,升高大鼠血浆中HDL-C水平,并降低TG、TC、LDL-C水平,增强对脾虚痰湿证大鼠肾AQP2、结肠AQP3以及颌下腺AQP5的表达。此外,UHPLC-ESI-MS/MS共筛选出脾虚痰湿证差异代谢物87个(其中39个代谢物水平明显上调升高,48个代谢物水平显著下降),差异最大的代谢物依次为甘氨酸、L-异亮氨酸、N-乙酰-L-酪氨酸、黄嘌呤、次黄嘌呤、葫芦巴碱等。差异代谢物主要富集于类固醇激素生物合成、亚油酸代谢、嘌呤代谢等通路。该研究采用代谢组学方法能区分并揭示脾虚痰湿证的特征性代谢模式,OPLS-DA判别模型的初步构建为脾虚痰湿证的中医证候辨识提供了客观辨证依据,为从小分子层面及整体水平探究中医证候的生物学基础提供思路与方法。

UHPLC-DAD-ESI-MS/MS法分析紫山药块根和茎叶中酚类物质

本文采用微波辅助法,以80%甲醇作为溶剂提取经冻干后紫山药块根和地上茎叶中的多酚类物质,提取物经超高效液相色谱分离、电喷雾串联三重四级杆质谱正和负离子方式检测分析。根据液相保留时间、紫外吸收、相对分子质量和二级碎片离子等信息,结果表明,紫山药块根和茎叶中酚类物质主要为酚酸、花色苷及黄酮类化合物。分析得到的29种酚类化合物中,5-O-咖啡酰奎宁酸、阿魏酰奎宁酸(tR:12.289)、迷迭香酸、芦丁和槲皮素为块根和茎叶共有组分,块根中另含有芥子酸、芥子酸葡萄糖苷、丁香酸衍生物、香豆酸衍生物、阿魏酸衍生物、芥子酸二葡萄糖苷和花色苷等11种酚类物质。茎叶中除5种共有组分,还含有咖啡酸、咖啡酰奎宁酸甲酯、咖啡酰莽草酸、对香豆酰奎宁酸、香豆酰奎宁酸甲酯、山奈酚-3-O-芦丁糖苷与迷迭香酸甲酯等13种酚类化合物。

UHPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS对紫花地丁中化学成分的快速表征

目的:采用超高效液相色谱-电喷雾飞行时间串联质谱法(UHPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS)对紫花地丁水提取物的主要化学成分进行分析鉴定。方法:采用Welch C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),以0.1%甲酸水(A)-乙腈(B)为流动相梯度洗脱,流速0.35 m L·min^(-1),质谱采用电喷雾(ESI)离子源,在正负离子模式下采集数据,运行时间为30 min。结果:通过二级高分辨质谱分析结合对照品数据及相关文献,共鉴定32个化合物,包含香豆素、黄酮及有机酸类成分。结论:该研究利用UHPLC的高效分离能力和MS的高灵敏度检测优势,建立的分析方法,为控制紫花地丁药材质量、临床疗效及阐释其作用机制提供了科学依据。

磷酸西他列汀在大鼠体内的药代动力学研究

目的:建立超高效液相色谱-电喷雾离子源-串联三重四极杆质谱(UHPLC-ESI-MS/MS)方法测定大鼠血浆中磷酸西他列汀的含量,研究磷酸西他列汀经尾静脉单次给药后在SD大鼠体内的药代动力学过程。方法:18只SD大鼠分为3组,分别单次给予9,3,1 mg.kg-1磷酸西他列汀,按照不同时间点于眼后静脉丛采血。液质联用法测定血药浓度。质谱采用正离子和选择反应监测(SRM)模式,用于定量分析的离子分别为磷酸西他列汀m/z 408.0→235.0和内标氟西汀m/z 310.0→148.0。根据非房室统计矩模型用WinNolin软件进行曲线拟合并计算药代动力学参数。结果:大鼠分别尾静脉单次注射高、中、低剂量(93,和1 mg.kg-1)药物后,血药浓度-时间曲线下面积(AUCINF)分别为(5 154.82±637.37)(,1 729.30±290.76)和(589.39±66.92)h.ng.mL-1,剂量之比为9∶3∶1,对应的AUC比值为8.75∶2.93∶1,与给药剂量呈线性正相关性;统计结果表明3个剂量组的AUC有显著性差异t,1/2,Vz,CL,MRTlast与给药剂量无关。结论:所建立的UHPLC-MS/MS测定方法准确可靠,简便灵敏,可用于磷酸西他列汀药代动力学和生物等效性研究,同时也为临床研究提供参考。在本试验的剂量范围内(1～9 mg.kg-1),磷酸西他列汀在SD大鼠体内符合线性药代动力学特征。

超高效液相色谱-串联质谱法测定亚硫酸氢钠穿心莲内酯在大鼠肝微粒体中的含量

目的:建立超高效液相色谱-串联质谱法测定大鼠肝微粒体中亚硫酸氢钠穿心莲内酯。方法:以肝微粒体孵育液为基质,通过添加标准溶液的方法配制含亚硫酸氢钠穿心莲内酯和内标物大豆苷元的样品,选用甲醇为沉淀剂,经离心除去肝微粒体孵育液中的蛋白质,上清液用于目标物的检测。采用Thermo Hypersil Gold C18分析柱(50 mm×2.1 mm,1.9μm),预柱:Phenomenex Security Guard C18(4 mm×3.0 mm),以甲醇-水溶液为流动相,梯度洗脱,流速:0.2 mL.min-1,柱温:35℃,整个分析时间为6 min。采用电喷雾负离子(ESI-)模式电离,选择反应监测(SRM)模式检测,以大豆苷元作为内标物质进行定量。用于监测的离子分别为亚硫酸氢钠穿心莲内酯m/z 413.2→287.2/331.2和大豆苷元m/z 253.1→132.2,用基质匹配标准溶液法进行定量。结果:肝微粒体孵育液中亚硫酸氢钠穿心莲内酯的质量浓度在0.05～50μmol.L-1范围内线性良好(r=0.9977,权重系数W:1/x2);孵育液中亚硫酸氢钠穿心莲内酯的检出限(信噪比为3)为0.02μmol.L-1;其平均回收率在85%～115%之间;日内及日间的相对标准偏差(RSD)均小于15%,满足生物样品检测的要求。结论:将该方法用于肝微粒体孵育液中亚硫酸氢钠穿心莲内酯的检测。该方法选择性强、灵敏度高、操作简便快速、重现性好,适用于亚硫酸氢钠穿心莲内酯体外代谢动力学等方面的研究。

超高效液相色谱-串联质谱法测定Beagle犬血浆中抗癌新药CC1007

目的：建立超高效液相色谱-串联质谱法（UHPLC-MS/MS）测定Beagle犬血浆中抗癌新药CC1007。方法：以甲醇为沉淀剂处理犬血浆样品。采用Phenomenex Synergi 4μ Polar-RP 80A分析柱（50 mm×2.00 mm，4 μm），预柱为Phenomenex Security Guard C18 Cartridges Polar-RP（4 mm×3.0 mm），以甲醇-0.1 %甲酸水溶液为流动相，梯度洗脱（0～0.5 min，30%A;0.5～1 min，30%A→90%A，保持3 min;4.1～5 min，30%A），流速0.2 mL·min-1，柱温40℃，5 min内实现快速分离。采用电喷雾负离子（ESI^-）模式电离，选择反应监测（SRM）模式检测，以P1作为内标物质进行定量。用于监测的离子分别为CC1007 m/z 402.0→384.0/213.2和P1 m/z 312.0→170.1/95.3。结果：犬血浆中CC1007的质量浓度在1～1000 μg·L^-1范围内线性良好（r=0.9974，权重系数W=1/X2）;血浆中CC1007的检出限（信噪比为3）为0.2 μg·L^-1;其平均回收率在85%～115%之间;日内及日间的RSD均小于15%，满足生物样品检测的要求。结论：该方法可用于犬口服灌胃、静脉与阴道给药后的血浆样品中CC1007的检测。该方法选择性强、灵敏度高、操作简便快速、重复性好，适用于CC1007药代动力学等方面的研究。

小儿风叶咳喘平合剂3个成分在大鼠体内的药代动力学研究

目的:对小儿风叶咳喘平合剂中3个主要药效成分在大鼠体内的代谢产物以及药代动力学进行研究。方法:基于超高效液相色谱-电喷雾飞行时间质谱(UHPLC-ESI TOF MS)方法,采用ACQUITY UPLC?HSS T3色谱柱(100 mm×2.1 mm, 1.8μm),以0.1%甲酸水和乙腈为流动相进行梯度洗脱,流速为0.3 mL·min^(-1),质谱采用电喷雾离子源(ESI),以正负离子模式采集多级质谱碎片信息,对大鼠灌胃小儿风叶咳喘平合剂后的血清、胆汁、尿液和粪便进行分析,结合离子碎片进行代谢产物鉴定分析;同时采用超高效液相色谱串联质谱(UHPLC-MS/MS)的技术进行药代动力学研究。以格列齐特为内标物,采用ACQUITY UPLCⓇ BEH C_(18)色谱柱(50 mm×2.1 mm, 1.7μm),以0.1%甲酸水和乙腈为流动相进行梯度洗脱。血浆样品采用甲醇沉淀蛋白,采用ESI及多反应监测(MRM),选择监测离子(麻黄碱m/z 166.2→148.1、甘草次酸m/z 471.2→453.2、对香豆酸m/z 162.9→119.1、内标m/z 322→170)。小儿风叶咳喘平合剂分别按2、5、10 mL·kg^(-1)灌胃,测定其中3个成分的质量浓度,并用DAS 3.1软件计算药代动力学参数。结果:共鉴定出3个原型及10个代谢产物[Ⅰ相(去甲基化、氧化)代谢、Ⅱ相(甲基化、硫酸酯化、葡萄糖醛酸苷化结合)代谢];3个成分在血浆中无干扰,专属性符合要求;规定范围内线性关系良好(r均>0.995 0);提取回收率和基质效应在接收范围之内;常温、进样器、冻融稳定性均符合要求;3个成分均符合二室模型。结论:采用UHPLC-ESI-TOF的方法鉴定了小儿风叶咳喘平合剂中3个主要药效成分的代谢产物,同时采用UHPLC-MS/MS的技术对3个成分在大鼠体内的血药浓度进行检测,并计算药代动力学参数,为进一步了解小儿风叶咳喘平合剂体内过程,探索功效物质基础提供理论依据。