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骨碎补中的苯丙素类成分及其对UMR106细胞增殖作用的影响 被引量:29
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作者 王新峦 王乃利 +1 位作者 黄文秀 姚新生 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期24-29,共6页
目的研究骨碎补(Drymaria fortunei)中的苯丙素类成分,并讨论它们对大鼠类成骨细胞UMR106增殖的影响。方法采用硅胶、Sephadex LH-20、ODS柱色谱分离骨碎补根茎的活性成分,应用理化方法及1D—NMR、2D-NMR方法确定化学结构,并检测对... 目的研究骨碎补(Drymaria fortunei)中的苯丙素类成分,并讨论它们对大鼠类成骨细胞UMR106增殖的影响。方法采用硅胶、Sephadex LH-20、ODS柱色谱分离骨碎补根茎的活性成分,应用理化方法及1D—NMR、2D-NMR方法确定化学结构,并检测对UMR106细胞增殖的影响。结果从骨碎补体积分数为60%乙醇提取物中的大孔吸附树脂柱色谱的体积分数为30%乙醇洗脱部分,分离得到7个苯丙素类化合物和2个苯甲酸类化合物,分别鉴定为:(E)-4—O-β-D-吡喃葡萄糖基反式咖啡酸(1)、(E)-p-松针酸β-D-吡喃葡萄糖苷(2)、阿魏酸β-D-吡哺葡萄糖苷(3)、反式咖啡酸(4)、p-香豆酸4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(5)、二氢异阿魏酸(6)、二氢咖啡酸(7)、香草酸4-O-β-D-吡哺葡萄糖苷(8)、原儿茶酸(9)。并检测了化合物1~9对UMR106细胞增殖的影响。结论化合物1首次从该种植物中分离得到,化合物2~8首次从该属植物中分离得到。化合物1~4显示了对UMR106细胞的促增殖作用,而其他化合物则没有显示活性。 展开更多
关键词 骨碎补 苯丙素类 苯甲酸类 umr 106细胞
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补肾方药含药血清对UMR106细胞增殖及碱性磷酸酶活性影响 被引量:6
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作者 柴生颋 谢平金 +1 位作者 万雷 韦伟标 《辽宁中医药大学学报》 CAS 2018年第3期17-19,共3页
目的:研究补肾方药含药血清对UMR106细胞增殖及碱性磷酸酶(ALP)活性的影响。方法:将实验动物随机分成空白血清组、低剂量血清组、中剂量血清组、高剂量血清组、阳性对照组,予以分别灌胃制备含药血清。运用CCK8法测定空白血清组、低... 目的:研究补肾方药含药血清对UMR106细胞增殖及碱性磷酸酶(ALP)活性的影响。方法:将实验动物随机分成空白血清组、低剂量血清组、中剂量血清组、高剂量血清组、阳性对照组,予以分别灌胃制备含药血清。运用CCK8法测定空白血清组、低剂量血清组、中剂量血清组、高剂量血清组、阳性对照组对UMR106细胞24、48、72 h增殖情况的影响;并测定UMR106细胞24、48、72 h的ALP活性情况。结果:各组自身比较后,加药干预24、48、72 h后各组细胞吸光度值与ALP活性均有增加,差异有统计学意义(P〈0.05);各组与空白血清组比较,中、高剂量血清组和阳性对照组加药干预24、48、72 h后,细胞吸光度值之间均较低,差异有统计学意义(P〈0.05),而低剂量血清组与空白血清组分别加药干预24、48、72 h的吸光度值比较均无显著差异(P〉0.05)。与空白血清组比较,低、中、高剂量血清组和阳性对照组加药干预24、48、72 h后,细胞ALP活性均较高,差异有统计学意义(P〈0.05),且剂量浓度越高,ALP活性越高。结论:表明补肾方药(骨康方)含药血清有促进UMR106细胞增殖及ALP活性的作用。随着补肾方药(骨康方)浓度的增高,其含药血清促进UMR106细胞增殖作用减弱,但ALP活性随着浓度增高而增高。 展开更多
关键词 补肾方药 骨康方 umr106细胞
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Effects of Pulsed Electric Fields on DNA Synthesis in an Osteoblast-Like Cell Line (UMR-106)
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作者 龙英 刘虹 +2 位作者 关志成 何晓威 蔡国平 《Tsinghua Science and Technology》 SCIE EI CAS 2000年第4期439-442,共4页
WTFZ] The study of the bioeffects of electromagnetic fields (EMFs) is an important national task in biological physics. Using EMFs to treat bone diseases involves electrical technology, biology, and medicine. But the... WTFZ] The study of the bioeffects of electromagnetic fields (EMFs) is an important national task in biological physics. Using EMFs to treat bone diseases involves electrical technology, biology, and medicine. But the effects of EMFs are still controversial and the mechanisms are not yet clear. Therefore, more effect is needed to detect the effects at the cellular and molecular levels. This paper investigates the effects of low-energy, low-frequency pulsed capacitively coupled electric fields (PCCEFs) on DNA synthesis in UMR-106 osteoblast-like cells. The equipment can generate 25250Hz frequency, 0300V amplitude and 0.2ms pulse width signal. DNA synthesis is judged by the uptake of 3 H-thymidine ( 3 H-TdR). The results showed that the response of UMR-106 cells to electric field exposure are characterized by: (a) a frequency window for increased DNA synthesis, with a peak near 125Hz; (b) decreased synthesis with increasing electric intensity with repression at 100V/cm and 25Hz.[ 展开更多
关键词 EMFs electric field osteoblast-like cell umr-106 DNA synthesis uptake of 3 H-thymidine 3 H-TdR)
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鹿茸粗提液对大鼠成骨肉瘤细胞增殖的调节作用 被引量:15
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作者 陈晓超 柯李晶 +3 位作者 陈躬瑞 刘树滔 霍玉书 饶平凡 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期74-77,共4页
目的 :观察鹿茸粗提液 (PAE)对大鼠成骨肉瘤细胞系UMR 10 6增殖的影响 ,从而为研究鹿茸强筋健骨的分子机理以及筛选鹿茸防治骨质疏松的生物活性成分提供实验依据。方法 :通过SephacrylS 2 0 0HR凝胶过滤色谱对PAE进行初级分离 ,用MTT法... 目的 :观察鹿茸粗提液 (PAE)对大鼠成骨肉瘤细胞系UMR 10 6增殖的影响 ,从而为研究鹿茸强筋健骨的分子机理以及筛选鹿茸防治骨质疏松的生物活性成分提供实验依据。方法 :通过SephacrylS 2 0 0HR凝胶过滤色谱对PAE进行初级分离 ,用MTT法检测不同分离组分对UMR 10 6细胞增殖的影响。结果 :发现SephacrylS 2 0 0HR凝胶过滤色谱第 2峰P2次组分 ,当其蛋白质浓度高于 0 .972mg·L - 1并低于 97.2mg·L - 1时 ,对UMR 10 6细胞增殖活性的影响表现为抑制 ;若浓度达到 97.2mg·L- 1后则会促进细胞的增殖 ,且增殖效应随蛋白质浓度的增加而明显上升。当样品蛋白质浓度达到 9.72g·L- 1时 ,相应的细胞增殖率为 477.92 % ,接近PAE的增殖水平 (499.62 % )。经SDS PAGE电泳分析第 2峰分子量集中于 59kDa左右。此外 ,发现第 3、第 4和第 5峰对UMR 10 6细胞增殖有显著的抑制作用。结论 :鹿茸蛋白中含有多种双向调控UMR 10 6细胞增殖的生物活性因子 ,既有剂量双向效应 ,也有与分子量相关的不同调控蛋白 。 展开更多
关键词 鹿茸粗提液 成骨肉瘤细胞 调节作用 细胞增殖 MTT法
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牛膝提取物对成骨样细胞增殖的作用 被引量:32
5
作者 高晓燕 王大为 +1 位作者 李发美 姜志明 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 2000年第3期210-213,共4页
考察了牛膝 (AchyranthesbidentataBl.)的不同提取部位对成骨样细胞UMR10 6的作用 .通过牛膝的醇提液及醇提液的不同提取部位和UMR10 6成骨样细胞共同体外培养 ,用MTT方法检测了各部位对细胞增殖的作用 ;同时考察了MTT法的实验条件 .结... 考察了牛膝 (AchyranthesbidentataBl.)的不同提取部位对成骨样细胞UMR10 6的作用 .通过牛膝的醇提液及醇提液的不同提取部位和UMR10 6成骨样细胞共同体外培养 ,用MTT方法检测了各部位对细胞增殖的作用 ;同时考察了MTT法的实验条件 .结果表明 :牛膝的醇提液及其石油醚和乙酸乙酯萃取的混和物对细胞具有较强的促进增殖作用 ,而正丁醇层和水层对细胞增殖无影响 ;在MTT法中 ,铺板细胞浓度、检测波长和加入MTT后的孵育时间均影响吸光度值的测定 . 展开更多
关键词 牛膝 成骨样细胞 MTT法 细胞增殖 大鼠
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鹿茸中促大鼠成骨样细胞增殖活性组分的纯化与表征 被引量:10
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作者 林冬云 黄晓南 +4 位作者 柯李晶 陈晓超 叶秀云 霍玉书 饶平凡 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期851-855,共5页
目的:通过鹿血清白蛋白对大鼠成骨样细胞系UMR-106增殖活性和促胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)分泌水平的研究,为阐明鹿茸强筋健骨的作用机理及对骨质疏松的防治提供研究线索。方法:运用SephacrylS-200HR凝胶色谱、POROS20QE阴离子交换色谱... 目的:通过鹿血清白蛋白对大鼠成骨样细胞系UMR-106增殖活性和促胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)分泌水平的研究,为阐明鹿茸强筋健骨的作用机理及对骨质疏松的防治提供研究线索。方法:运用SephacrylS-200HR凝胶色谱、POROS20QE阴离子交换色谱和TSKG3000SW高效液相色谱等分离手段,从冷冻干燥鹿茸粉粗提液中分离纯化得到鹿血清白蛋白。并用MTT法检测其对UMR-106细胞的增殖活性;用平衡饱和竞争放射免疫分析法(RIA)测定其促IGF-Ⅰ分泌水平。结果:经分离纯化得到的鹿血清白蛋白分子质量为56.3kDa,在蛋白含量为0.149μg·mL-1时,其促大鼠成骨样细胞增殖率为241.03%,IGF-Ⅰ分泌量为66.89ng·mL-1。结论:鹿茸中的鹿血清白蛋白在14.9ng·mL-1-14.90μg·mL-1具有显著的促大鼠成骨样细胞增殖和IGF-Ⅰ分泌等活性。 展开更多
关键词 鹿茸 鹿血清白蛋白 分离纯化 umr-106细胞 胰岛素样生长因子Ⅰ
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淫羊藿低糖苷组分对UMR-106细胞及骨质疏松斑马鱼作用的研究 被引量:9
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作者 赵冰洁 章丽 +3 位作者 袁嘉瑞 汪春飞 封亮 贾晓斌 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2016年第19期3441-3446,共6页
目的研究淫羊藿低糖苷组分(LGFEH)对UMR-106细胞和波尼松龙诱导的骨质疏松斑马鱼的作用。方法将不同质量浓度的LGFEH与UMR-106细胞共同培养后,MTT法测定LGFEH对UMR-106细胞增殖的影响,通过测定细胞内外碱性磷酸酶(ALP)活性评价LGFEH对... 目的研究淫羊藿低糖苷组分(LGFEH)对UMR-106细胞和波尼松龙诱导的骨质疏松斑马鱼的作用。方法将不同质量浓度的LGFEH与UMR-106细胞共同培养后,MTT法测定LGFEH对UMR-106细胞增殖的影响,通过测定细胞内外碱性磷酸酶(ALP)活性评价LGFEH对细胞分化的影响。将受精后3 d的斑马鱼幼鱼分为空白培养基组、0.5%DMSO溶媒对照组、泼尼松龙组、依替膦酸二钠组、LGFEH(1、2、4、8、16μg/m L)组。每天换液至受精后9 d,处死,采用茜素红对各组斑马鱼幼鱼骨骼染色,并以显微检测、数码成像方法定量分析骨骼染色区域。结果 LGFEH不仅可以促进成骨样细胞UMR-106细胞的增殖,促进其合成和分泌ALP,而且能够显著增加斑马鱼头部骨骼染色面积(矿化面积)和染色累积吸光度值(骨密度)。结论 LGFEH体内及体外具有较好的抗骨质疏松作用。 展开更多
关键词 淫羊藿 低糖苷组分 骨质疏松 umr-106细胞 斑马鱼 淫羊藿苷A 宝藿苷I
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苍术挥发油对成骨样细胞增殖的作用 被引量:8
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作者 殷俊芳 黄宝康 +1 位作者 吴锦忠 秦路平 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期1318-1319,共2页
目的研究苍术挥发油对成骨样细胞UMR-106的增殖作用。方法苍术挥发油和UMR-106成骨样细胞体外共同培养,用MTT法检测细胞增殖。结果挥发油在0.001 mg/ml培养48h具有最强的促进细胞增殖作用。结论苍术挥发油中可能含有促进成骨细胞增殖的... 目的研究苍术挥发油对成骨样细胞UMR-106的增殖作用。方法苍术挥发油和UMR-106成骨样细胞体外共同培养,用MTT法检测细胞增殖。结果挥发油在0.001 mg/ml培养48h具有最强的促进细胞增殖作用。结论苍术挥发油中可能含有促进成骨细胞增殖的活性成分。 展开更多
关键词 苍术挥发油 增殖作用 成骨样细胞umr-106 MTT法
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电磁刺激对成骨样细胞UMR-106 DNA合成的作用 被引量:9
9
作者 龙英 关志成 +1 位作者 蔡国平 刘虹 《清华大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2000年第3期15-19,共5页
为了从细胞水平研究低频电磁场影响成骨样细胞增殖的有效物理参数 ,并为其作用机制的解释提供依据 ,论文就几种类型电磁场对成骨样细胞 UMR- 10 6DNA合成的作用进行了一系列实验 ,通过 3 H-脱氧胸苷掺入检测 DNA合成的改变 ,发现特定频... 为了从细胞水平研究低频电磁场影响成骨样细胞增殖的有效物理参数 ,并为其作用机制的解释提供依据 ,论文就几种类型电磁场对成骨样细胞 UMR- 10 6DNA合成的作用进行了一系列实验 ,通过 3 H-脱氧胸苷掺入检测 DNA合成的改变 ,发现特定频率、场强 (或磁感应强度 )组合的电磁场 (脉宽 0 .2 m s,10 V/cm,12 5 Hz附近的脉冲电场 ;1V/cm,10 Hz附近的交变电场 ;0 .5 m T,5 Hz附近的交变磁场 )能促进细胞 DNA合成水平显著提高 ,表明刺激骨细胞生长的电磁场无需复杂的波形。场强对 DNA合成有重要作用 ,只有在合适的场强范围内 ,一定频率的电磁场对细胞才有刺激作用。交变磁场所诱导的电场很微弱 ,表明磁场不只是通过诱导电场发挥作用的 ,研究磁场对细胞的作用应考虑包括磁场直接作用等全部可能的机制。 展开更多
关键词 电磁场 成骨样细胞 umr-106 DNA合成 生物效应
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逍遥丸含药血清依赖雌激素受体促进鼠成骨细胞增殖作用的研究 被引量:5
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作者 雷霞 迟英娇 +2 位作者 赵冬梅 张宁 刘海洋 《中医药信息》 2014年第6期107-109,共3页
目的:采用中药血清药理学的方法,制备逍遥丸含药血清(XCS),体外培养鼠成骨细胞株UMR-106,观察XCS对成骨细胞增殖影响及其是否与雌激素受体相关,以便为开展更广泛的临床实验提供理论基础。方法:选择Wistar大鼠30只,以2.7g/(kg·d)剂... 目的:采用中药血清药理学的方法,制备逍遥丸含药血清(XCS),体外培养鼠成骨细胞株UMR-106,观察XCS对成骨细胞增殖影响及其是否与雌激素受体相关,以便为开展更广泛的临床实验提供理论基础。方法:选择Wistar大鼠30只,以2.7g/(kg·d)剂量灌胃逍遥丸,连续3周,第22日取动物血离心,将XCS冻存备用;体外培养UMR-106细胞,将细胞分为空白组、空白血清组、妊马雌酮(conjugated estrogens)含药血清组、XCS(20%,10%,5%,2.5%,1.25%,0.625%)不同浓度组,MTT法检测细胞增殖率,同时观察雌激素受体拮抗剂(ICI 182780)与细胞共孵育后细胞增殖能力。结果:与空白血清组相比,妊马雌酮含药血清和XCS(20%,10%,5%,2.5%)对UMR-106细胞的增殖有明显促进作用(P<0.05),最大增殖率达到(10.67±2.34)%;但在ICI 182780干预下,妊马雌酮含药血清和各浓度XCS对细胞增殖率无明显影响。结论:XCS对UMR-106细胞的增殖有明显促进作用,此作用需依赖雌激素受体才能发挥。 展开更多
关键词 逍遥丸含药血清 umr-106细胞 细胞增殖
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小檗胺对大鼠骨肉瘤UMR-106细胞凋亡的影响 被引量:1
11
作者 王巨存 胡永成 +1 位作者 潘振华 胡人杰 《中国医院药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第21期1719-1722,共4页
目的:探讨小檗胺体外对大鼠骨肉瘤UMR-106细胞增殖和凋亡的作用及机制。方法:用不同浓度的小檗胺(0,2,4,8,16,32mg.L-1)分别处理UMR-106细胞,作用时间分别为24,48,72h,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测小檗胺对UMR-106细胞增殖的抑制... 目的:探讨小檗胺体外对大鼠骨肉瘤UMR-106细胞增殖和凋亡的作用及机制。方法:用不同浓度的小檗胺(0,2,4,8,16,32mg.L-1)分别处理UMR-106细胞,作用时间分别为24,48,72h,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测小檗胺对UMR-106细胞增殖的抑制作用。用不同浓度的小檗胺(0,4,8,16mg.L-1)分别处理UMR-106细胞24h后,采用流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率(Annexin/PI染色),采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞内Bcl-2、Bax水平,采用分光光度法检测caspase-3的活性。结果:小檗胺对UMR-106细胞的作用呈时间-剂量依赖性,孵育72h、32mg.L-1的小檗胺对UMR-106细胞的作用最强,抑制率接近90%;24,48,72h的IC50分别为24.69、8.03和3.54mg.L-1。空白对照组和小檗胺处理组细胞凋亡率分别为(1.64±0.29)%,(3.58±0.31)%,(6.3±0.5)%和(11.3±1.1)%。同时,小檗胺可以诱导细胞坏死;此外,小檗胺剂量依赖性地降低Bcl-2,增高Bax,降低Bcl-2/Bax比值,并增强caspase-3的活性。结论:小檗胺体外能抑制UMR-106细胞增殖并诱导细胞凋亡或坏死,其诱导凋亡的机制可能与降低Bcl-2/Bax比值,增强caspase-3的活性有关。 展开更多
关键词 小檗胺 umr-106细胞株 骨肉瘤 细胞增殖 细胞凋亡 坏死
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Fe3O4-As2O3-PLA复合体联合热疗对骨肉瘤治疗的细胞学研究 被引量:1
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作者 宋凯镔 王文波 《实用肿瘤学杂志》 CAS 2012年第5期438-442,共5页
目的研究磁性三氧化砷一聚乳酸纳米粒子(Fe3O4-As2O3-PLA)复合体联合磁流体热疗对骨肉瘤细胞株UMR-106的生长的影响。方法磁性三氧化砷-聚乳酸纳米粒子复合体的制备,透射电镜及荧光光度计对其形态及载药量进行观察,高频交变磁场中... 目的研究磁性三氧化砷一聚乳酸纳米粒子(Fe3O4-As2O3-PLA)复合体联合磁流体热疗对骨肉瘤细胞株UMR-106的生长的影响。方法磁性三氧化砷-聚乳酸纳米粒子复合体的制备,透射电镜及荧光光度计对其形态及载药量进行观察,高频交变磁场中对其进行体外升温实验,骨肉瘤细胞的培养,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测磁性三氧化砷-聚乳酸纳米粒子复合体联合磁流体热疗对骨肉瘤细胞株UMR-106生长的影响,流式细胞仪(FCM)检测凋亡细胞。结果所制备的磁性三氧化砷-聚乳酸纳米粒子复合体比较均匀,粒径在60~70nm,载药量约为10.3%,在输出电流I=300A的高频交变磁场中具有升温能力,且能达到肿瘤治疗的有效温度(41℃~46℃),磁性三氧化砷-聚乳酸纳米粒子复合体联合磁性热疗能抑制骨肉瘤细胞株UMR-106的生长,促进其调亡,且较单纯的As2O3液组及单纯的Fe3O4磁性纳米粒子热疗组的治疗效果明显。结论Fe3O4-As2O3-PLA复合体联合磁性热疗可同时发挥As2O3的细胞毒性作用和磁感应加热的联合定向治疗作用,效果优于单纯的As2O3液组及单纯的Fe3O4磁性纳米粒子热疗组,为临床治疗骨肉瘤提供新的治疗方法。 展开更多
关键词 磁性三氧化砷-聚乳酸纳米粒子复合体 交变磁场 骨肉瘤细胞株 细胞凋亡
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低强度超声联合5-氨基酮戊酸对大鼠骨肉瘤UMR-106细胞的杀伤机制研究 被引量:1
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作者 王建华 焦晓辉 +1 位作者 胡挣 李永宁 《大连医科大学学报》 CAS 2014年第3期216-220,共5页
目的研究低强度超声结合5-氨基酮戊酸(5-ALA)对大鼠骨肉瘤UMR-106细胞的杀伤机制。方法将处于对数生长期的大鼠骨肉瘤UMR-106细胞分成对照组、5-ALA组、超声组和超声+5-氨基酮戊酸组(SDT组)。流式细胞仪检测细胞凋亡率,活性氧(ROS)的产... 目的研究低强度超声结合5-氨基酮戊酸(5-ALA)对大鼠骨肉瘤UMR-106细胞的杀伤机制。方法将处于对数生长期的大鼠骨肉瘤UMR-106细胞分成对照组、5-ALA组、超声组和超声+5-氨基酮戊酸组(SDT组)。流式细胞仪检测细胞凋亡率,活性氧(ROS)的产生,线粒体膜电位(MMP)的改变;荧光显微镜观察33342染色细胞核的形态改变;透射电镜观察超微结构改变。结果当超声频率为1.0 MHz,声强2.0 W/cm2,5-ALA浓度2 mmol/L,SDT组与对照组、超声组及5-ALA组比较,其凋亡率(32.2±1.4)%,明显增高(P<0.05)。同时伴有ROS(34.4±2.4)%的产生和MMP(42.2±2.6)%的降低。通过33342染色荧光显微镜观察到超声联合5-ALA组的细胞核发生浓缩和碎裂。透射电镜观察到细胞膜、线粒体、高尔基体等细胞器改变及凋亡小体的形成。结论低强度超声联合5-ALA对UMR-106细胞的杀伤作用明显,细胞以凋亡为主,其线粒体途径对UMR-106细胞凋亡起着重要作用。 展开更多
关键词 umr-106细胞 声动力 5-氨基酮戊酸 凋亡
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氟化钠对大鼠成骨肉瘤细胞增殖活性及碱性磷酸酶活力和骨钙素mRNA表达的影响 被引量:5
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作者 王楠兰 敖全 +4 位作者 雷露 曾贝贝 吴彦秋 张华 韦艳 《环境与健康杂志》 CAS 北大核心 2016年第9期773-776,共4页
目的 探讨氟化钠(Na F)对成骨样细胞大鼠骨肉瘤(UMR-106)细胞增殖活性及主要成骨活性标志物碱性磷酸酶(ALP)活力和骨钙素(BGP)m RNA表达的影响。方法 将处于对数生长期的UMR-106细胞分别暴露于含终浓度为0(对照)、5×10、... 目的 探讨氟化钠(Na F)对成骨样细胞大鼠骨肉瘤(UMR-106)细胞增殖活性及主要成骨活性标志物碱性磷酸酶(ALP)活力和骨钙素(BGP)m RNA表达的影响。方法 将处于对数生长期的UMR-106细胞分别暴露于含终浓度为0(对照)、5×10、102、5×102、1×103、5×103、1×104、2×104、4×104、8×104μmol/L Na F的DMEM培养液中孵育24、48 h,采用CCK-8检测细胞活性。将处于对数生长期的UMR-106细胞分别暴露于含终浓度为0(对照)、1×103、2×103、4×103μmol/L Na F的DMEM培养液(不含FBS)继续培养12、24、48 h,测定细胞培养液和细胞ALP的活力及细胞中BGP m RNA的表达水平。结果 与对照组比较,1×103~8×104μmol/L Na F染毒24 h和5×10~8×104μmol/L Na F染毒48 h时大鼠UMR-106细胞的存活率均较低,差异有统计学意义(P〈0.05)。5×10、1×103、5×103、1×104、2×104μmol/L Na F染毒48 h时大鼠UMR-106细胞的存活率均低于染毒24 h时,差异有统计学意义(P〈0.05)。各浓度Na F染毒组UMR-106细胞培养液和细胞中ALP活力均较对照组高,除1×103μmol/L Na F染毒24 h的细胞培养液和1×103μmol/L Na F染毒48 h的细胞内ALP活力外,差异有统计学意义(P〈0.05)。随着Na F染毒浓度的升高,UMR-106细胞培养液和细胞中ALP活力均呈上升趋势;随着Na F染毒时间的延长,细胞培养液中ALP的活力呈上升趋势,而细胞中ALP的活力呈先升高后下降的趋势。2×103、4×103μmol/L Na F染毒组UMR-106细胞的BGP m RNA表达水平均较对照组高,差异有统计学意义(P〈0.05)。随着Na F染毒浓度的升高,UMR-106细胞BGP m RNA的表达水平呈上升趋势;随着Na F染毒时间的延长,UMR-106细胞BGP m RNA的表达水平呈下降趋势。结论 在本实验浓度下,Na F对UMR-106细胞的增殖呈抑制作用,但可促进其成骨活性标志物ALP活力及BGP m RNA的表达。 展开更多
关键词 氟化钠 成骨肉瘤细胞 增殖活性 碱性磷酸酶 骨钙素
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鹿茸冻干粉的酶解及其酶解产物性质的研究 被引量:3
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作者 郑帆 李仁宽 +2 位作者 王辉林 庄君明 叶秀云 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第19期2628-2633,共6页
目的:通过研究鹿茸冻干粉酶解产物的促成骨细胞增殖活性,抗氧化性以及血管紧张素转化酶I(angiotensin Iconverting enzyme,ACE,EC3.4.15.1)抑制活性,为阐明鹿茸强筋健骨的机制以及揭示鹿茸体内生理功能发挥的机制提供研究线索。方法:采... 目的:通过研究鹿茸冻干粉酶解产物的促成骨细胞增殖活性,抗氧化性以及血管紧张素转化酶I(angiotensin Iconverting enzyme,ACE,EC3.4.15.1)抑制活性,为阐明鹿茸强筋健骨的机制以及揭示鹿茸体内生理功能发挥的机制提供研究线索。方法:采用体内常见的消化酶胃蛋白酶和胰蛋白酶分别和同时对鹿茸冻干粉进行酶解,确定酶解完全的条件,收集相对分子质量小于1万的多肽混合物,对其抗氧化性,ACE抑制活性以及促成骨细胞增殖活性进行研究。结果:鹿茸冻干粉的不同酶解产物对羟自由基的清除效果非常明显,其IC50均低1g·L-1,远低于维生素C的5.5g·L-1,同时胃蛋白酶和双酶酶解产物对ACE抑制效果极佳,胰蛋白酶酶解产物对大鼠成骨细胞(UMR-106细胞)的促增殖作用达73.43%。结论:本实验进一步验证了鹿茸强筋健骨以及强身抗老等传统功效,对于ACE抑制活性的试探性研究也表明鹿茸酶解产物具有潜在的高血压防治功能;本实验结果也为进一步分离提取鹿茸酶解产物中的抗氧化性多肽,ACE抑制活性肽以及促成骨细胞活性肽提供强有力的依据。 展开更多
关键词 鹿茸 酶解 成骨细胞 ACE抑制活性 抗氧化性
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microRNA-96-5p对染氟成骨肉瘤细胞c-Jun氨基末端激酶通路的影响 被引量:1
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作者 陈宣好 杨璐珲 +3 位作者 代佑罡 吴彦秋 王楠兰 韦艳 《环境与健康杂志》 CAS 北大核心 2018年第10期857-862,共6页
目的探讨miR-96-5p对染氟大鼠成骨肉瘤(UMR-106)细胞c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)通路的影响。方法将处于对数生长期的UMR-106细胞分别转染mi R-96-5p反义寡核苷酸(anti-miRNA oligonucleotide,AMO)、过表达质粒以... 目的探讨miR-96-5p对染氟大鼠成骨肉瘤(UMR-106)细胞c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)通路的影响。方法将处于对数生长期的UMR-106细胞分别转染mi R-96-5p反义寡核苷酸(anti-miRNA oligonucleotide,AMO)、过表达质粒以达到抑制和过表达作用,再以0(对照)、2 000μmol/L NaF对细胞进行染毒,培养24 h后通过实时荧光定量PCR检测miR-96-5p及JNK通路上各因子基因的变化;培养48 h后,采用蛋白免疫印迹法检测JNK通路上各因子蛋白的变化。结果与无氟对照组相比,氟染毒组UMR-106细胞mi R-96-5p、天冬氨酸蛋白水解酶3(cysteinyl aspartate specific proteinase 3,caspase-3)mRNA表达水平升高(P<0.05),cAMP直接活化交换蛋白(exchange protein directly activated by cAMP,Epac)mRNA表达水平下降,差异均有统计学意义(P<0.05);转染mi R-96-5p质粒后,与质粒对照组相比,质粒+NaF组UMR-106细胞miR-96-5p mRNA表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05);转染AMO后,与AMO对照组相比,AMO+NaF组UMR-106细胞mi R-96-5p mRNA表达水平升高,Epac和caspase-3 mRNA表达水平下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。与无氟对照组相比,氟染毒组UMR-106细胞腺苷酸环化酶6(Adenylate Cyclase 6,AC6)、Epac、p-JNK蛋白表达水平均下降,差异均有统计学意义(P<0.05);与质粒对照组相比,质粒+NaF组UMR-106细胞AC6、Epac、天冬氨酸蛋白水解酶9(cysteinyl aspartate specific proteinase 9,caspase-9)蛋白表达水平均下降,而p-JNK、磷酸化Jun癌基因(Jun oncogene,c-Jun)、细胞色素C(cytochrome C,cyt C)和非活化caspase-3蛋白表达水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05);转染AMO后,与AMO对照组相比,AMO+NaF组UMR-106细胞AC6、Epac、caspase-9、p-JNK蛋白表达均下降,p-c-Jun、cyt C和非活化caspase-3蛋白表达升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 mi R-96-5p可能促进染氟UMR-106细胞JNK通路磷酸化,从而介导细胞凋亡。 展开更多
关键词 氟化钠 成骨肉瘤细胞 microRNA-96-5p c-Jun氨基末端激酶通路
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microRNA-23a对氟暴露大鼠成骨肉瘤细胞成骨活性的影响及靶基因验证 被引量:3
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作者 杨璐珲 陈宣好 +2 位作者 卢明丽 王楠兰 韦艳 《环境与健康杂志》 CAS 北大核心 2019年第9期753-758,共6页
目的探讨miR-23a对染氟大鼠成骨肉瘤(UMR-106)细胞成骨活性的影响并验证其靶基因。方法体外培养UMR-106细胞,分别转染miR-23a的激动剂(mimics)和抑制剂(inhibitor),再以0、80μmol/L NaF对细胞进行染毒,培养24 h后利用实时荧光定量PCR(q... 目的探讨miR-23a对染氟大鼠成骨肉瘤(UMR-106)细胞成骨活性的影响并验证其靶基因。方法体外培养UMR-106细胞,分别转染miR-23a的激动剂(mimics)和抑制剂(inhibitor),再以0、80μmol/L NaF对细胞进行染毒,培养24 h后利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-23a、Ⅰ型胶原(COL1)、骨桥蛋白(OPN)、Runt相关转录因子2(Runx2)mRNA的表达水平;培养96 h后利用免疫蛋白印记法(Western blot)检测COL1、OPN、Runx2蛋白的表达水平;体外培养人胚胎肾细胞(293T),利用双荧光素酶报告基因法验证miR-23a可能的靶基因。结果与空白对照组相比,NaF组UMR-106细胞miR-23a、COL1、OPN、Runx2 mRNA表达水平明显升高(P<0.05);与激动剂对照组比较,过表达组miR-23a mRNA表达水平明显上升、COL1 mRNA表达明显降低(P<0.05),Runx2、OPN mRNA表达变化不显著(P>0.05);与抑制剂对照组相比,抑制组miR-23a、COL1、OPN、Runx2 mRNA表达明显降低(P<0.05)。与激动剂对照组比较,过表达组Runx2、OPN蛋白表达水平明显升高(P<0.05),COL1蛋白表达水平变化不显著(P>0.05);与抑制剂对照组相比,抑制组COL1、OPN、Runx2蛋白表达水平均明显降低(P<0.05)。与过表达组比较,过表达+NaF组OPN mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.05),COL1、Runx2变化不显著;与抑制组比较,抑制+NaF组COL1、OPN、Runx2 mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。过表达miR-23a后的293T细胞中双特异性磷酸酶5(DUSP5 mRNA)和蛋白表达水平均明显降低(P<0.05),抑制mi R-23a后DUSP5表达水平均明显升高(P<0.05);双荧光素酶报告确定DUSP5为miR-23a的靶基因。结论miR-23a能促进染氟UMR-106细胞中成骨活性基因的表达;DUSP5是miR-23a的靶基因。 展开更多
关键词 氟化物 大鼠成骨肉瘤细胞(umr-106) miR-23a 成骨活性 双特异性磷酸酶5
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