基于UPLC-ESI-MS/MS技术黑豆种皮的化学成分分析

采用超高效液相色谱-电喷雾-串联质谱(UPLC-ESI-MS/MS)技术对黑豆种皮体积分数70%乙醇提取物中的化合物进行分析。结果表明:黑豆种皮体积分数70%乙醇提取物中32个化合物主要为多酚类,其中,酚酸类化合物的相对含量为13.38%,黄酮类化合物的相对含量为39.59%。儿茶素的相对含量最高(10.15%),反式阿魏酸的相对含量次之(7.86%),二氢黄豆苷元和原花青素B 1的相对含量也较高(分别为5.52%和5.36%)。黑豆种皮中主要的多酚类物质为酚酸类和黄酮类化合物,具有进一步开发利用的价值。

UPLC-ESI-MS/MS法测定替格瑞洛中三环已基膦的含量

含膦物质具有潜在基因毒性,在微量的水平下可直接造成DNA损伤,进而引发癌症,威胁人类健康,因此,需对药物中该类杂质进行严格控制。本研究建立一种方法用于替格瑞洛中的三环己基膦的检测。使三环己基膦与过氧化氢反应衍生成为三环己基氧膦;采用Agilent Poroshell 120 EC-C_(18)色谱柱(100 mm×4.6 mm,2.7μm);流动相为0.1%甲酸-0.1%甲酸甲醇(体积比5∶95);流速为0.5 mL/min,柱温30℃;采用电喷雾离子源正离子扫描,以多反应监测模式采集定量离子对297.2→83对三环己基氧膦进行检测。三环己基氧膦在浓度为1.45~28.90 ng/mL范围内与峰面积呈现良好的线性关系(r=0.9998);定量限为0.14 ng/mL;检测限为0.072 ng/mL;平均加样回收率为99.5%,RSD为5.4%(n=9)。本方法以过氧化氢为氧化剂将三环基膦衍生氧化成为更稳定的三环己基氧膦后采用UPLC-ESI-MS/MS测定,该方法专属性强、灵敏度高、准确度好、分析时间短,可用于替格瑞洛中三环己基膦的检测,有助于提高抗血小板药物替格瑞洛的临床安全性。

基于GC-MS和UPLC-ESI-MS/MS法研究乌药化学成分

目的：研究湖南产乌药化学成分。方法：分别采用气相色谱-质谱（GC-MS）联用法和液相色谱-质谱（UPLC-ESI-MS/MS）对乌药中挥发油和甲醇提取物的化学成分进行分析。在GC-MS中,以HP-5MS毛细管柱（30 m×0.25 mm,0.25μm）为色谱柱,采用程序升温法,EI离子源,扫描质量范围为m/z 35～400 amu;在UPLC-ESI-MS/MS中,以Acquity UPLC BH C18（50 mm×2.1 mm,1.7μm）为色谱柱,采用0.1%甲酸水溶液-乙腈为流动相,梯度洗脱,ESI源,扫描质量范围为m/z 100～1 200。结果：利用GC-MS法共鉴定了乌药中68个挥发性成分,主要为单萜类物质。利用UPLC-ESI-MS/MS法在甲醇提取物中共鉴定出42个化合物,其中24个呋喃倍半萜及其内酯、10个生物碱、6个黄烷醇多酚及其缩合物、1个有机酸和1个甾醇类化合物。结论：系统研究了湖南产乌药中的化学成分,为湖南产乌药的药效物质基础及质量控制研究提供一定的理论依据。

QuEChERS结合UPLC-ESI-MS/MS分析吡蚜酮和异丙威SC在稻田中的残留特征

采用改良Qu ECh ERS法结合超高效液相色谱-电喷雾串联质谱法(UPLC-ESI-MS/MS)建立了吡蚜酮和异丙威在稻田环境中的残留分析方法,并通过田间模拟试验研究了吡蚜酮和异丙威悬浮剂(SC)在稻田中的残留沉积及持留特性。于稻田空白样品中添加吡蚜酮和异丙威至0.001~1 mg·kg-1的浓度进行添加回收率试验,样品采用乙腈提取和盐析净化,UPLC-MS/MS测定,分析结果表明,方法的平均回收率为75.2%~115.9%,相对标准偏差为2.6%~19.1%,两者在田水和植株(土壤)最低检测浓度(LOQ)分别达到0.001 mg·kg-1和0.005 mg·kg-1,说明该方法可用于检测稻田中痕量水平的吡蚜酮和异丙威。田间模拟试验结果表明,吡蚜酮·异丙威SC在稻田环境中的消解动态曲线符合一级动力学方程,吡蚜酮的半衰期为0.7~12.6 d,异丙威的半衰期为0.4~5.2 d,表明两者在环境中均属于易降解化合物。此外,与WG剂型相比,SC剂型的吡蚜酮·异丙威在植株上表现出更高的消解速率,而在土壤中则较低,显示剂型对农药的持留性具有显著影响。

UPLC-ESI-MS/MS法分析藤黄炮制前后化学成分的变化

目的建立超高效液相色谱-电喷雾-串联质谱(UPLC-ESI-MS/MS)法研究藤黄Garcinia hanburyi炮制(高压、豆腐、清水、荷叶制)前后化学成分的变化。方法分析采用Acquity UPLC BEH C8(2.1 mm×100 mm,1.7μm)色谱柱;流动相为乙腈-0.1%甲酸溶液,梯度洗脱;柱温为35℃;体积流量为0.3 m L/min。主成分分析(PCA)和偏最小二乘判别(PLS-DA)法分析炮制前后化学成分的差异。结果炮制前后,藤黄中化学成分的种类没有明显变化。当加热超过2 h,以及豆腐或荷叶炮制后,13种成分的含有量下降,并且gambogenin更为明显。不同炮制方法间存在差异,贡献值依次为gambogenin、莫里林酸、异莫里林酸、R-异藤黄酸、R-30-羟甲基藤黄酸、成分5(未知)、异新藤黄酸、S-30-羟甲基藤黄酸、isogambogenin、S-异藤黄酸、R-藤黄酸、新藤黄酸、S-藤黄酸。结论不同炮制方法和加热时间对藤黄化学成分有一定影响,其含有量的降低可能是该植物炮制后减毒的原因之一。

UPLC-ESI-MS/MS法同时测定胡黄连中4种环烯醚萜

目的建立UPLC-ESI-MS/MS法同时测定胡黄连Picrorrhiza scrophularaeflora Pennell中胡黄连苷Ⅰ、胡黄连苷Ⅱ、胡黄连苷Ⅲ、獐牙菜苷的含有量。方法胡黄连甲醇提取物的分析采用ACTUITY UPLC■ BEH Amide柱(2.1 mm×100 mm, 1.7μm);流动相0.1%甲酸-乙腈;体积流量0.4 mL/min;柱温40℃。采用负离子模式,MRM多反应监测扫描模式。结果胡黄连苷Ⅰ、胡黄连苷Ⅱ、胡黄连苷Ⅲ、獐牙菜苷分别在15.28~305.60 ng/mL(r=0.999 3)、 11.54~230.80 ng/mL(r=0.999 4)、11.20~224.00 ng/mL(r=0.999 5)、10.06~201.20 ng/mL(r=0.997 4)范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为101.62%、101.03%、102.37%、99.41%,RSD分别为1.30%、1.62%、2.45%、0.72%。结论该方法准确稳定,重复性好,可用于胡黄连的质量控制。

UPLC-ESI-MS/MS检测畜、禽肉中土霉素、四环素、金霉素残留量

目的：建立超高效液相色谱-电喷雾串联四极杆质谱快速测定畜、禽肉中土霉素、四环素、金霉素的方法。方法：采用超高效液相色谱-电喷雾串联四极杆质谱仪,多离子反应监测（MRM）定量法,通过对试样净化预处理、色谱条件、质谱参数等的优化选择和方法回收率、精密度等的验证,建立了同步准确定量测定肉类食品中土霉素、四环素、金霉素的理想方法。结果：土霉素、四环素、金霉素的最低检出限（LOD）分别为0.1、0.1、0.5μg/kg,在5.0-80.0 ng/ml的线性范围内,相关系数r均大于0.99,回收率在82.6%-111%。结论：采用液相色谱-电喷雾串联四极杆质谱仪,可快速测定畜、禽肉样品中土霉素、四环素、金霉素含量,结果准确可靠,重复性好,灵敏度高。

UPLC-ESI-MS/MS法测定发酵液中紫杉醇含量

产紫杉醇菌发酵液经乙酸乙酯萃取后,应用Waters ACQUITY UPLC仪和Waters Quattro Premier三级四极杆质谱仪检测建立了产紫杉醇菌发酵液中紫杉醇含量的快速测定方法。采用Waters zXTerra MS C18色谱柱(2.1 mm×150 mm,5μm),梯度洗脱,流速0.3 mL/min,柱温为30℃;进样量3.0μL。以超高效液相色谱分离、电喷雾离子化串联质谱分析在多反应监测(MRM)模式下进行检测。在10～100μg/mL,紫杉醇对照品的峰面积与浓度线性关系良好,相关系数0.998;方法具有良好的精密度,RSD为0.51%;稳定性试验表明室温下样品在8 h内稳定;具有良好的重现性,RSD为1.6%;平均加样回收率为99.58%,RSD为0.62%。采用MRM模式测定紫杉醇含量不仅可以增加定量准确性,而且专一性强,干扰因素少,还为产紫杉醇微生物的快速筛选提供科学的方法。

UPLC-ESI-MS/MS法同时测定强力定眩胶囊中的7个指标成分

建立了同时测定强力定眩胶囊中天麻素、绿原酸、阿魏酸、蒙花苷、对羟基苯甲醇、松脂醇单葡萄糖苷、松脂醇二葡萄糖苷的超高效液相色谱-电喷雾-三重四级杆质谱法(UPLC-ESI-MS/MS)。采用Thermo Syncronis C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),以0.1%甲酸水溶液-甲醇为流动相进行梯度洗脱,流速0.4 mL·min^-1,柱温35℃;采用电喷雾离子源(ESI)、多反应监测(MRM)模式进行定量分析。结果表明,天麻素、绿原酸、阿魏酸、蒙花苷、对羟基苯甲醇、松脂醇单葡萄糖苷、松脂醇二葡萄糖苷分别在0.0838~20.9673μg·mL^-1、0.2848~71.2174μg·mL^-1、0.0286~7.1615μg·mL^-1、0.2112~52.8701μg·mL^-1、0.0672~16.8124μg·mL^-1、0.0784~19.6124μg·mL^-1、0.0768~19.2342μg·mL^-1范围内与峰面积线性关系良好,相关系数R均大于0.9800,平均加标回收率在98.99%~101.92%之间。该方法简单、准确、灵敏度高,可用于强力定眩胶囊指标成分的测定。

UPLC-ESI-MS/MS法研究注射用复方荭草在大鼠体内的排泄

目的建立UPLC-ESI-MS/MS法同时测定大鼠尿液、粪便和胆汁中原儿茶酸、异荭草素、野黄芩苷、荭草素、牡荆素、木犀草苷和槲皮苷7种物质的分析方法,并对注射用复方荭草(荭蓼、灯盏细辛等)在大鼠体内的排泄规律进行研究。方法生物样本经甲醇处理,采用Waters Acquity BEH C18色谱柱,乙腈-0.1%甲酸水为流动相,电喷雾离子化,多反应离子监测,分别测定大鼠静脉注射注射用复方荭草后排泄物中7种原形成分。结果 7种成分在大鼠尿液中呈良好线性关系,日内、日间精密度和准确度良好。大鼠静注40 mg/kg注射用复方荭草后,分别有4.98%～22.58%的原形成分在尿液中排出,在粪便及胆汁中各原形药物的浓度均低于最低定量限,同时在各排泄物中可检测出相关的代谢产物。结论该方法特异、快速、灵敏,可用于注射用复方荭草在大鼠体内的排泄研究,该药物在大鼠体内有较广泛的代谢途径,原形药物排出量较少。

食品中苏丹Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ的UPLC-ESI-MS/MS测定研究

目的：建立超高效液相色谱-电喷雾串联四极杆质谱快速测定食品中苏丹Ⅰ、苏丹Ⅱ、苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ的方法。方法：采用超高效液相色谱-电喷雾串联四极杆质谱仪,多离子反应监测（MRM）定量法,通过对试样净化预处理、色谱条件、质谱参数等的优化选择和方法回收率、精密度等的验证,建立了同步准确定量测定食品中苏丹Ⅰ、苏丹Ⅱ、苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ的理想方法。结果：苏丹Ⅰ、苏丹Ⅱ、苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ的最低检出限（LOD）分别为0.1、0.1、0.2、1.0μg/kg,在1.0-100.0 ng/ml的线性范围内,相关系数r均大于0.99,回收率在87.0%-109%。结论：采用液相色谱-电喷雾串联四极杆质谱仪,可快速测定食品样品中痕量的苏丹Ⅰ、苏丹Ⅱ、苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ,结果准确可靠,重复性好,灵敏度高。

基于UPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS技术的复方钩藤降压片化学成分分析

目的 采用液质联用技术对复方钩藤降压片的化学成分进行快速分析与鉴定。方法 应用超高效液相色谱-电喷雾四极杆-飞行时间质谱(UPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS)对复方钩藤降压片中主要的化学成分进行系统分析,采用Agilent Masshunter Qualitative Analysis工作站中的分子特征提取(MFE)功能和中药成分数据库(TCM-DATA),根据正负离子模式质谱扫描提供化合物一级、二级质谱数据的质谱碎片离子信息进行定性分析,同时对复方钩藤降压片中的各类成分进行鉴定,并通过单味药材的比对分析归属其化学成分的中药来源。结果 通过液质分析从复方钩藤片中共鉴定出72个化学成分,其中生物碱类化学成分30个,黄酮及其苷类化学成分10个、单萜类化合物6个,酚酸及其苷类化学成分14个,甾体及有机酸类等化学成分12个。结论采用UPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS技术可对复方钩藤降压片进行快速和系统的化学成分识别,为其质量控制和临床应用提供了理论依据。

UPLC-ESI-MS/MS法测定人参、红参和西洋参中多种皂苷含量

建立了人参、红参和西洋参中32种皂苷的超高效液相色谱-电喷雾-串联四极杆质谱检测方法。电离模式:负离子(ES-);检测方式:多反应监测(MRM);洗脱液:乙腈-水(均含2.5 mmol/L甲酸);洗脱方式:梯度;色谱柱:ACQUITY UPLC BEH C18(2.1 mm×100mm,1.7μm);柱温:45℃。分析用时29min。各皂苷的定量限为0.001~0.013 g/kg,线性校准曲线回归方程的回归系数均在0.995以上。该方法简便、可靠,适合人参、红参、西洋参中多种皂苷的同时快速测定。

UPLC-ESI-MS/MS法快速测定苦碟子注射液中4种黄酮类成分的含量

目的:采用超高效液相色谱串联质谱法快速测定苦碟子注射液中木犀草素、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷、芹菜素、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷4种黄酮成分的含量。方法:采用Waters ACQUITY BEH C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm),流动相为乙腈-水系统梯度洗脱,流速为0.4 m L·min-1,柱温为40℃;在ESI负离子模式下,采用多反应离子监测(MRM)扫描方式进行检测。结果:苦碟子注射液中4种成分在3 min内完全分离,线性范围内呈良好的线性关系(r>0.999 5),加样回收率分别为97.64%、97.42%、101.24%、98.63%,RSD值分别为1.45%、1.93%、2.90%、1.62%。结论:该方法简便、准确、灵敏度高,可用于苦碟子注射液中4种黄酮成分的含量测定。

基于UPLC-ESI-MS-MS与FTIR技术的一清胶囊化学成分分析及体外抗炎活性

目的:采用超高效液相色谱-电喷雾离子化串联质谱联用(UPLC-ESI-MS-MS)及傅里叶变换红外光谱(FTIR)技术对一清胶囊化学成分进行分析,并初步探讨其体外抗炎活性。方法:采用ESI离子源,正离子扫描模式下采集数据,并对一级质谱、二级质谱信息进行分析;采用FTIR技术测定10批次一清胶囊光谱图,并进行主成分聚类分析,比较不同批号样品的差异;采用脂多糖(LPS)诱导的RAW 264.7小鼠巨噬细胞模型,观察一清胶囊对巨噬细胞释放NO的影响。结果:根据一级质谱、二级质谱信息及相关文献共推测了12个化合物;FTIR主成分聚类分析表明批号为120703的样品与其他批次样品存在明显差异;体外抗炎实验表明一清胶囊在1～100μmol/L范围内能显著降低细胞上清液中NO的含量,且呈一定的剂量依赖性。结论:UPLC-ESI-MS-MS与FTIR技术为一清胶囊的质量控制提供了快速、简便、有效的手段;一清胶囊具有一定的体外抗炎活性。

UPLC-ESI-MS/MS检测废水中11种全氟化合物

建立了固相萃取、超高效液相色谱-电喷雾串联三重四极杆质谱（UPLC-ESI-MS/MS）同时测定废水中11种全氟化合物监测方法.结果表明,11种全氟化合物在0.10～150 μg/L浓度范围内线性关系良好,方法检出限为0.1～0.4 ng/L,加标回收率为66.8％～108.1％,相对标准偏差RSD＜20％.

UPLC-ESI-MS/MS法测定苗药隔山消中8个成分含量

目的建立超高效液相色谱-电喷雾电离-串联质谱法(UPLC-ESI-MS/MS)检测隔山消中告达亭、松脂素、白首乌二苯酮、阿魏酸、没食子酸、东莨菪内酯、丁香酸及绿原酸8个成分含量的标准。方法选取13批不同产地隔山消,采用UPLC-ESI-MS/MS法,以ACQUITY UPLC BEH C 18(2.1 mm×100 mm,1.7μm)为色谱柱,0.1%甲酸水溶液-0.1%甲酸乙腈溶液为流动相、梯度洗脱、流速0.35 mL/min、柱温40℃,采用电喷雾离子源(ESI)和多反应离子监测(MRM)模式检测其中告达亭、松脂素、白首乌二苯酮、阿魏酸、没食子酸、东莨菪内酯、丁香酸及绿原酸的含量。结果告达亭、松脂素、白首乌二苯酮、阿魏酸、没食子酸、东莨菪内酯、丁香酸及绿原酸的质量浓度分别于1.860~119.048μg/L、148.950~4766.400μg/L、186.012~47619.045μg/L、5.813~11904.760μg/L、2.325~148.809μg/L、3.720~952.380μg/L、37.202~4761.900μg/L及3.720~1904.760μg/L范围内与峰面积呈良好线性关系,r>0.9990,平均加样回收率范围95.247%~102.432%;13批样品中告达亭、松脂素、白首乌二苯酮、阿魏酸、没食子酸、东莨菪内酯、丁香酸及绿原酸的含量测定结果分别为0.443~2.958μg/g、6.794~22.436μg/g、33.584~649.745μg/g、1.828~55.290μg/g、0.102~0.304μg/g、0.525~5.213μg/g、2.052~7.757μg/g及8.042~31.608μg/g;不同批次各成分的含量差异较大,其中白首乌二苯酮含量最高,松脂素、阿魏酸和绿原酸的含量相对较高,其余成分含量较低。结论UPLC-ESI-MS/MS法可作为隔山消药材质量控制的检测方法。

基于UPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS技术分析藏药粗壮秦艽的化学成分

目的用超高效液相色谱-电喷雾/四级杆飞行时间串联质谱联用(UPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS)技术对粗壮秦艽的主要化学成分进行定性分析。方法色谱条件为ACQUITY UPLC BEH C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),以1 mL·L^(-1)甲酸(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱,流速为0.4 mL·min^(-1),柱温为40℃,进样量为1μL,质谱用电喷雾(ESI)离子源,在正、负离子模式下采集数据。结果通过分析二级高分辨质谱结合对照品数据及相关文献,共鉴定出39个化合物,包括环烯醚萜类21个、三萜类9个、黄酮类3个和其他类成分6个。结论基于UPLC的高效分离能力和MS的高灵敏检测优势,用UPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS技术可快速分析粗壮秦艽中的化学成分,为粗壮秦艽化学成分的提取、分离及其药效物质基础研究提供科学依据。

UPLC-ESI-MS/MS测定大鼠血浆降血压肽的方法学研究

建立了超高效液相色谱-电喷雾串联质谱(UPLC-ESI MS/MS)法测定大鼠血浆中的重组降血压肽VLPVPR的方法.大鼠血浆样品经甲醇沉淀蛋白处理后,经Thermo Hypersil GOLD C18柱(100 mm×2.1 mm,1.9μm)分离,流动相为10 mmol·L乙酸铵水溶液-乙腈.梯度洗脱流程为:0~4 min乙腈(vol%)10%~90%;4~4.5 min乙腈90%~10%,4.5~6.5 min乙腈保持10%,流速:0.2 mL·min^(-1).质谱条件采用ESI离子源,检测方式为正离子电离,选择性离子检测(MRM).VLPVPR和内标VLPVPR-R位C,N双标的选择性检测离子分别为m/z 680.4→255.2和m/z 690.6→264.2.VLPVPR浓度在0.1~100 ng·mL^(-1)范围内线性良好;定量下限为0.1 ng·mL^(-1);日内、日间RSD均小于15%;低、中、高3个浓度下的提取回收率分别为(101±7.4)%;(99±4.2)%;(100±3.3)%.该方法专属性强,灵敏度高,血浆中内源物对测定无干扰,适用于复杂生物基质中VLPVPR的检测,可用于VLPVPR药代动力学方面的研究.

UPLC-ESI-MS/MS法同时测定玉叶金花清热片中14种成分的含量

目的建立UPLC-ESI-MS/MS法同时测定玉叶金花清热片中牛磺酸、京尼平苷酸、绿原酸、哈巴苷、山栀苷甲酯、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、栀子苷、玉叶金花苷酸甲酯、β-蜕皮甾酮、穿心莲内酯、哈巴俄苷、脱水穿心莲内酯、胆红素、胆酸的含量。方法采用安捷伦ZORBAX SB C18柱(3.0 mm×50 mm,1.8μm),流动相为甲醇-0.1%乙酸(含0.02 mol·L^-1乙酸铵)溶液,梯度洗脱,体积流量0.3 mL·min^-1;质谱采用ESI正、负离子同时采集,多反应监测(MRM)模式扫描。结果14种成分在相应线性范围内与测定值线性关系良好(r>0.9985),平均加样回收率94.5%~101.5%(RSD<3.0%)。结论该方法简便、灵敏、高效,可用于玉叶金花清热片的质量控制。