基于UPLC-Q-Orbitrap HRMS代谢组学和16S rRNA基因测序探讨骨疏丹补肾机制

目的 整合代谢组学和肠道微生物组学的研究策略探讨骨疏丹(Gushudan, GSD)预防氢化可的松诱导的肾阳虚证(kidney-yang deficiency syndrome, KYDS)大鼠的补肾作用机制。方法 分别采用超高效液相色谱-四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Orbitrap HRMS)的非靶向代谢组学和16S rRNA基因测序分析的肠道微生物组学方法,分析正常对照组、肾阳虚证模型组、骨疏丹给药组和阳性对照组大鼠粪便代谢物谱与肠道菌群组成,采用Pearson相关分析探讨内源性差异代谢物与差异菌群之间的相关性。结果 基于UPLC-Q-Orbitrap HRMS的代谢组学方法在正负离子模式下共发现骨疏丹参与调控肾阳虚症的22种差异代谢物,如色氨酸、鹅去氧胆酸、肌酐和油酸酰胺等,主要涉及氨基酸代谢、胆汁酸代谢、能量代谢和脂质代谢。基于16S rRNA测序分析发现骨疏丹在属水平显著上调普雷沃氏菌(Prevotellaceae)的相对丰度(P<0.05),显著下调颤杆菌(Oscillibacter)的相对丰度(P<0.05)。相关性分析结果表明甘胆酸和鹅去氧胆酸与在属水平显著改变的普雷沃氏菌(Prevotellaceae)显著正相关(P<0.05),而与考拉杆菌(Phascolarctobacterium)显著负相关(P<0.05)。二十二碳六烯酸与毛螺菌(Lachnospiraceae)显著负相关(P<0.05)。结论 骨疏丹通过良性调节内源性代谢和肠道菌群结构发挥补肾作用,为中药通过肠-肾轴治疗疾病提供新的思路和方法。

基于UPLC-Q-Orbitrap HRMS结合网络药理学探讨半夏泻心汤入血成分及治疗脾虚型溃疡性结肠炎的作用机制

研究通过建立脾虚型溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)模型,采用液相芯片对大鼠血清中炎性细胞因子进行高通量检测,同时以HE染色对结肠组织进行炎症分级评分,验证半夏泻心汤(Banxia Xiexin Tang,BXT)对脾虚型UC的药理作用。随后利用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Orbitrap HRMS)对BXT入血成分进行分析,并结合网络药理学,探究BXT治疗脾虚型UC的作用机制。结果显示,UC能够增加大鼠血清中细胞因子白细胞介素-1α(interleukin-1α,IL-1α)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)、白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)、干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)表达水平;BXT可降低血清炎性细胞因子含量,且BXT高剂量组(20 g/kg)下降最明显,无明显炎细胞浸润,表明BXT对脾虚型UC具有一定的治疗作用。大鼠血清中发现入血成分共20个;网络药理学筛选出BXT治疗UC相关靶点87个,涉及炎症反应、炎症反应调节、微生物反应等生物过程,参与了IL-17、脂质与动脉粥样硬化、糖尿病并发症中的AGE-RAGE信号通路、TNF等信号通路。综上可知,BXT治疗脾虚型UC可能与抑制肠道炎症、调节肠道微生物及保护肠道屏障等多个途径相关,从而达到治疗UC效果。

UPLC-Q-Orbitrap HRMS技术分析荔枝叶不同极性部位化学成分及体外降血糖活性比较

采用超高效液相色谱-四级杆-静电场路线阱高分辨质谱法(UPLC-Q-Orbitrap HRMS)解析荔枝叶不同极性部位的化学成分;比较荔枝叶不同极性部位体外降血糖活性的强弱。采用PNPG法(p-Nitrophenyl-α-Dglucopyranoside)、DNS法(3,5-dinitro salicylic acid)考察荔枝叶不同极性部位对α-葡萄糖苷酶、α-淀粉酶活性的抑制作用。化学成分鉴定结果表明荔枝叶不同极性部位中含29个化合物,分别为有机酸类8个,黄酮及其苷类10个,原花青素类3个,含氮类5个,香豆素类1个,糖苷类1个,其他类1个;体外降血糖活性比较考察结果发现,乙酸乙酯萃取相的抑制活性最强,IC_(50)分别为54.50、122.20μg/mL。原儿茶酸、木犀草苷、表儿茶素、山柰酚等成分可能是乙酸乙酯萃取相体外降血糖活性作用的物质基础,这为后续的荔枝叶质量控制研究奠定了前期基础。

基于UPLC-Q-Orbitrap HRMS及GC-MS结合网络药理学和分子对接的彝药黑根抗类风湿性关节炎的药效物质研究

目的:探讨彝药黑根治疗类风湿性关节炎潜在的作用机制以及主要活性成分。方法:运用UPLC-Q-Orbitrap HRMS及GC-MS技术分析黑根的化学成分,利用Swiss Target进行活性成分的靶点筛选和预测,同时在Genecard、OMIM、Dis Ge NET等数据库中筛选类风湿性关节炎相关靶点,利用Cytoscape3.9.0软件构建“活性成分-靶点”网络模型,运用String数据分析平台进行蛋白互作网络分析,并且利用基因富集分析在线工具对核心靶点进行GO富集分析和KEGG通路分析,最后使用分子对接对网络药理学内容进行初步验证。结果:共鉴定出黑根化学成分78个,筛选后活性成分50个,237个潜在作用靶点与类风湿性关节炎相关,包括STAT3、AKT1、EGFR等关键靶点。通路富集分析PI3K-Akt通路、JAK-STAT等信号通路可能是黑根发挥抗类风湿性关节炎的主要途径。通过分子对接技术得出主要活性成分(异绿原酸B、异绿原酸C)与关键靶点有较好结合力。结论:研究初步表明黑根通过多成分、多靶点、多途径治疗类风湿性关节炎的作用,为后续黑根物质基础研究提供了理论依据。

基于UPLC-Q-Orbitrap HRMS技术的炒山楂、焦山楂小鼠血清药物化学比较研究

目的 利用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Orbitrap HRMS)分析技术,鉴定炒山楂、焦山楂组小鼠血清中药物化学的差异。方法 选取2023年12月—2024年2月成都中医药大学药学院共9只KM小鼠作为研究对象,根据随机数字表法分为空白组(n=3),炒山楂组(n=3),焦山楂组(n=3),其中炒山楂组、焦山楂组分别给予3 g/kg的炒山楂、焦山楂浸膏水溶液灌胃。使用Thermo Scientific AccucoreTM C18色谱柱,以0.1%甲酸水溶液(A)和0.1%甲酸乙腈溶液(B)作为流动相,梯度洗脱;质谱采用ESI源,+/-离子模式扫描,扫描模式为Full MS/dd-MS2。利用Compound Discoverer 3.3软件分析数据,根据一级质谱质荷比、二级质谱碎片等信息,鉴定样品化学成分,以及血清中的化学成分;同时利用SIMCA14.1,通过主成分分析法(principal component analysis, PCA)、正交偏最小二乘判别分析法(orthogonal partial least-squares discrimination analysis, OPLS-DA)进行模式识别筛选出其中差异性化学成分,结合统计学知识分析出炒山楂、焦山楂入血后的血液中相关化合物的变化差异。结果 经过对药品醇提物中化学成分的筛选,结合相关文献,在炒山楂、焦山楂中分别鉴定出了34、45个化学成分,包括有机酸类、氨基酸类、三萜类、酰胺类、黄酮类、苯丙素类、及其他类成分等。此外,通过SIMCA软件统计分析,在两组小鼠血清中共鉴定出14个显著差异性成分。结论 炒山楂、焦山楂中化学成分、对应含量差异,可能是两种炮制品功效差异性的影响因素之一。不同给药组小鼠的血清中鉴别出的差异性化学成分,为揭示两种炮制品功效性差异提供了参考依据。

基于UPLC-Q-Orbitrap HRMS和网络药理学及分子对接分析助眠汤治疗失眠的潜在机制

目的:基于UPLC-Q-Orbitrap HRMS和网络药理学及分子对接,阐明助眠汤治疗失眠的物质基础及潜在的作用机制。方法:采用UPLC-Q-Orbitrap HRMS技术鉴定助眠汤的化学成分。流动相:0.3%甲酸水溶液(A)-乙腈(B);梯度洗脱:0~7.1 min,8%~16.7%B;7.1~7.7 min,16.7%B;7.7~8.3 min,16.7%~17%B;8.3~9.5 min,17%~18.2%B;9.5~10.1 min,18.2%B;10.1~17.3 min,18.2%~26%B;17.3~24.5 min,26%~55%B;24.5~40 min,55%B。流速:0.3 mL·min^(-1),电喷雾离子源:ESI,正、负离子模式扫描,扫描范围:m/z 50~2200。在此基础上,选择失眠的临床表现和病因作为媒介,利用在线数据库对助眠汤的促进睡眠机制潜在药效物质基础、作用靶点和作用特征进行预测分析。从煎煮后测得的活性成分的作用特点入手,运用网络药理学探究助眠汤治疗失眠的潜在机制。结果:使用UPLC-Q-Orbitrap HRMS分析并鉴定了助眠汤中391种成分,其中有43种成分能于在线数据库中找到其作用的相关靶点。使用相关数据库检索“insomnia”“sleeplessness”关键词,找到失眠相关靶点基因28182个,通过韦恩分析,预测筛选出与助眠汤失眠作用相关靶点92个,经分析,共筛选得到37个关键靶点。助眠汤通过作用于环加氧酶1(PTGS1),环加氧酶2(PTGS2),内皮型一氧化氮合酶(NOS3),DNA拓扑异构酶2(TOP2),β2肾上腺素能受体(ADRB2)等靶点和RAS、Jak-STAT等信号通路发挥对失眠症的治疗作用。结论:助眠汤呈现了多成分、多靶点、多途径治疗失眠的作用特点。

基于UPLC-Q-Orbitrap HRMS技术的真武汤化学成分分析

目的:应用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Orbitrap HRMS)技术,对真武汤中的化学成分进行定性分析。方法:色谱柱为Waters ACQUITY UPLC^(■)HSS C_(18)(150 mm×2.1 mm,1.8μm);以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱;体积流量0.2 mL/min;进样量5μL;柱温30℃。采用电喷雾离子源,正、负离子扫描模式下采集质谱信息,运用Compound Discoverer 3.0软件将未知化合物的一级、二级质谱信息与对照品、参考文献及数据库中的化合物质谱信息进行比对分析。结果:从真武汤中共指认出120个化合物,包括生物碱类、内酯类、单萜苷类、三萜酸类、姜辣素类、有机酸类、倍半萜类、香豆素类、醛类及苷类化合物。其中22个化合物经对照品验证。结论:该方法可快速、准确分析真武汤的化学成分,为真武汤药效物质基础研究提供实验依据。

基于UPLC-Q-Orbitrap HRMS技术的乔林与叶林杜仲叶次生代谢产物比较研究

本文应用超高效液相-四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Orbitrap HRMS)技术,对乔林杜仲叶与叶林杜仲叶进行次生代谢产物分析,并比较其次生代谢产物差异。通过多级离子碎片信息结合mzCloud网络数据库、中药高分辨质谱数据库(OTCML),对照品比对及文献数据库进行准确定性。从乔林杜仲叶与叶林杜仲叶中共鉴定出次生代谢物62种,包括黄酮类9种,苯丙素类9种,环烯醚萜类2种,有机酸类21种,香豆素类5种,其他类成分16种,其中香豆素类成分为首次在杜仲叶中发现的成分。通过主成分分析(PCA)及正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)对各样品数据进行处理,结果乔林杜仲叶与叶林杜仲叶能够很好地区分,根据变量重要性投影(VIP)值>1筛选出两种栽培方式的杜仲叶在相对含量上存在差异的成分有10个,其中独立样本t检验中存在显著差异(P<0.05)的成分有D-(-)-奎尼酸、柠檬酸、4-甲基伞形酮、4,5-二咖啡酰奎宁酸、3′,4′-二羟基苯丙酮。该方法可准确、高效地测定杜仲叶中的化学成分及其相对含量变化,为杜仲叶的品质评价提了供理论依据。

基于UPLC-Q-Orbitrap HRMS和网络药理学分析五味子治疗非酒精性脂肪肝的物质基础及作用机制

目的:基于超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱法(UPLC-Q-Orbitrap HRMS)、网络药理学方法及分子对接技术探索五味子治疗非酒精脂肪肝的物质基础与作用机制。方法:利用UPLC-Q-Orbitrap HRMS技术鉴定五味子中的化学成分。利用中药系统药理学数据库和分析平台(TCMSP)和SwissTarget Prediction在线平台筛选并预测五味子化学成分的潜在作用靶点;利用GeneCards,CTD,OMIM,Dis-GeNET,GEO数据库收集非酒精脂肪肝疾病的潜在作用靶点。利用String数据库和Cytoscape 3.7.1软件构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络模型;使用R对潜在靶点进行基因本体论(gene ontology,GO)和基因组百科全书通路(kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)富集分析,以预测其可能的信号通路,并通过Cytoscape3.7.1软件建立"药物-关键活性成分-靶点途径"网络。最后,进行分子对接,以初步验证五味子治疗非酒精性脂肪肝的作用机制。结果:共分析鉴定了五味子中的50种化学成分,并以此为基础筛选出246个五味子治疗非酒精脂肪肝的潜在靶点。通过网络拓扑进一步分析,筛选出23个核心成分和30个潜在核心靶点。GO和KEGG富集分析发现五味子通过作用于癌症中的蛋白聚糖、内分泌抵抗、Rap1信号通路、VEGF信号通路、糖尿病并发症中的AGE-RAGE信号通路和雌激素信号通路等信号通路发挥治疗作用。分子对接结果显示,筛选出的排名前5的活性成分槲皮素、山奈酚、五味子甲素、α-亚麻酸和五味子醇乙与排名前4的核心靶点AKT1、HSP90AA1、SRC、MAPK1均具有较好的结合活性,结合自由能均小于-5 kcal/mol,分子对接构象稳定。结论:五味子可能通过作用于脂质代谢、氧化应激、血管新生和炎症相关途径和靶点等改善非酒精脂肪肝的症状,从而发挥作用。

基于UPLC-Q-Orbitrap HRMS技术的制川乌-白芍药对化学成分研究

目的:研究制川乌-白芍配伍前后的成分差异。方法:采用超高效液相色谱-四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Orbitrap HRMS)技术,对制川乌-白芍药对及其单味药定性分析。使用Thermo Scientific AccucoreTMC18色谱柱(100 mm×3 mm, 2.6μm)分离样品,以0.1%甲酸乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相梯度洗脱,通过Mass Range的正、负离子监测模式、全扫描及自动触发二级质谱扫描功能,对制川乌-白芍药对及其各饮片的水煎液快速分析;利用目标化合物的二级碎片离子信息对比mzVault、mzCloud数据库和对照品及相关文献报道的化合物质谱信息。结果:制川乌-白芍药对供试品共检测到184个化合物,其中56个可能为配伍后新生成的化合物,包含生物碱类化合物8个、黄酮类化合物9个、酚酸类化合物15个、苯丙素类化合物8个、其他类化合物16个。结论:该研究发现川乌配伍白芍后可产生新的化合物,为进一步研究制川乌-白芍药对的药效物质提供参考。

UPLC-Q-Orbitrap HRMS技术快速鉴定木芙蓉花化学成分

利用UPLC-Q-Orbitrap HRMS技术对木芙蓉花化学成分进行快速识别与鉴定。色谱分离采用Waters ACQUITY UPLC BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),流动相0.1%甲酸水(A)-乙腈(B)梯度洗脱(0~4 min,95%→90%A;4~10 min,90%→55%A;10~18 min,55%→5%A;18~20 min,5%A),流速0.3 mL/min,柱温25℃;质谱分析采用电喷雾离子源(ESI),正、负离子两种方式采集数据,扫描模式为全扫描/数据依赖二级扫描(Full MS/dd-MS2)。通过高分辨质谱分析、文献信息以及对照品指认,从木芙蓉花中共鉴定出54个化合物,包括黄酮及其苷类成分25个,有机酸类14个,香豆素类成分4个,氨基酸类2个,核苷类2个,生物碱类2个,其他类5个。该方法可快速、高效的对木芙蓉花化学成分进行分离鉴定,33个成分首次在木芙蓉中发现,11个成分首次在木槿属中发现,对木芙蓉花物质基础研究提供了一定的指导意义。

木芙蓉叶乙酸乙酯部位抗氧化与抗炎作用研究及UPLC-Q-Orbitrap HRMS分析

研究木芙蓉叶乙酸乙酯部位的抗氧化与抗炎作用,并对其化学成分进行分析鉴定。采用CCK-8法测定木芙蓉叶不同极性部位对细胞存活率的影响,木芙蓉叶不同极性部位浓度为25~200μg/mL,对HaCaT细胞和RAW 264.7细胞无毒性。利用H 2 O 2诱导HaCaT细胞氧化应激反应,发现木芙蓉叶乙酸乙酯部位能最显著降低细胞内ROS含量(P<0.001);采用LPS诱导RAW 264.7细胞建立炎症模型,通过实时荧光定量PCR检测发现木芙蓉叶乙酸乙酯部位能抑制TNF-α、IL-6、iNOS、COX-2炎症因子的表达,从细胞水平发现木芙蓉叶乙酸乙酯部位具有良好的体外抗氧化和抗炎作用。运用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱技术(UPLC-Q-Orbitrap HRMS)对乙酸乙酯部位的化学成分进行快速的分析,鉴定出28个化学成分:10个黄酮类、9个有机酸类、2个香豆素类、2个酚类、2个核苷类及3个其他类成分,黄酮类成分和有机酸类成分是其中主要化学成分,为其主要的活性物质基础,为进一步研究木芙蓉叶的药效物质基础以及开发利用提供了一定的理论基础。

基于UPLC-Q-Orbitrap HRMS法比较不同炮制方法下山楂化学成分差异

目的:采用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Orbitrap HRMS)技术,鉴定山楂经3种不同炮制方法后的化学成分差异。方法:色谱采用Thermo Scientific Accucore TM C 18色谱柱(100 mm×3 mm,2.6μm),0.1%甲酸-水(A)和0.1%甲酸-乙腈(B)流动相,进行梯度洗脱;质谱采用ESI源,+/-离子模式扫描,扫描模式为Full MS/dd-MS2。利用Compound Discover 3.2软件分析数据,根据一级质谱质荷比、二级质谱碎片等信息,鉴定样品化学成分。结果:在炒山楂、焦山楂、山楂炭中共鉴定了49个化学成分,包括黄酮类、有机酸类、三萜酸类、苯丙素类、及其他类成分等。其中共有9种黄酮类成分、8种有机酸类、3种苯丙素类成分化学成分的含量发生了明显变化,表现为炒山楂>焦山楂>山楂炭。结论:利用UPLC-Q-Orbitrap HRMS法可全面、精确的测定炒山楂、焦山楂、山楂炭中的化学成分差异,进一步为山楂不同方法炮制品功效变化物质基础的确定提供了参考依据。

基于UPLC-Q-Orbitrap HRMS技术分析华佗豆的化学成分

目的研究分析华佗豆的化学成分,为后续的开发和利用奠定基础。方法采用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱联用法(UPLC-Q-Orbitrap HRMS),以正、负离子模式扫描采集数据,色谱条件为Thermo Gold C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.9μm),以0.1%甲酸乙腈(A)-1%甲酸水(含10 mmol乙酸铵)(B)为流动相,流量为0.3 mL/min,进行梯度洗脱。通过分析质谱数据,参考相关文献以及谱库比对,对华佗豆的化学成分进行鉴定。结果共鉴定出华佗豆中的15个化合物,其中小檗碱、烟酰胺、咖啡因、柠檬酸、甘露醇、棉籽糖、乳果糖、羽扇豆醇、6,7-dehydro-11-hydroxy-12,13-epoxyterpendole A为首次从该植物中推测鉴定出来。结论建立的方法快速分析鉴别了华佗豆的化学成分,为华佗豆的质量控制提供科学依据。

Identification and Analysis of Chemical Components in Zhideke Granules by UPLC-Q-Orbitrap HRMS

[Objectives]To identify and analyze chemical components in Zhideke Granules by ultra performance liquid chromatography-quadrupole/electrostatic field orbitrap high resolution mass spectrometry(UPLC-Q-Orbitrap HRMS).[Methods]Zhideke Granules were isolated on a Thermo Hypersil Gold C18 column(2.1 mm×100 mm,1.9μm).The mobile phase was 0.1%formic acid acetonitrile and 0.1%formic acid aqueous solution(containing 10 mmol ammonium acetate)with gradient elution.Chemical components in Zhideke Granules were rapidly isolated and identified by HRMS in the positive and negative ion mode with full scan data-dependent two stage threshold-triggered mass modes(Full MS/dd-MS2).[Results]The secondary fragment ion information of the target compound was selected and compared with the compound reported in the databases and related literatures for further confirmation.In total,30 chemical compounds were identified,including 12 flavonoids and glycosides,9 organic acids,3 nitrogen-containing compounds,and 6 other components.[Conclusions]In this study,the UPLC-Q-Orbitrap HRMS was used for the first time to analyze the chemical components in Zhideke Granules.It is intended to provide a reference for the quality evaluation and further study of pharmacodynamic materials of Zhideke Granules.

基于UPLC-Q-Orbitrap HRMS技术的白毛银露梅化学成分研究

目的:应用超高效液相色谱-四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Orbitrap HRMS)技术鉴定白毛银露梅中的主要化学成分。方法:采用AccucoreaQ RP18(2.1 mm×150 mm, 2.6μm)色谱柱,以甲醇-0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速0.3 mL/min,柱温25℃。质谱条件采用高效电喷雾离子源(HESI),在负离子模式下,一级全扫描/数据依赖型二级质谱扫描模式检测,分析鉴定白毛银露梅中的主要化学成分。结果:结合高分辨质谱提供的一级准分子离子峰和二级碎片信息,参照相关文献,以及对照品比对,共鉴定出36个化学成分,包括19个黄酮类成分、9个有机酸类成分、6个儿茶素类成分和2个香豆素类成分,均为首次报道,其中5个成分经对照品进行了验证。结论:该方法可快速分析鉴定白毛银露梅中的化学成分,为合理开发其药用及食用价值提供科学依据。

基于UPLC-Q-Orbitrap HRMS的锦灯笼化学成分分析

目的:利用UPLC-Q-Exactive四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱仪联用技术,对锦灯笼中的化学成分快速识别和鉴定。方法:采用Thermo Scientific Accucore^(TM)C_(18)色谱柱(100 mm×3 mm,2.6μm),以0.1%甲酸水(A)-0.1%甲酸乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱,流速0.3 mL/min,柱温30℃。高分辨质谱采用电喷雾离子源(ESI),正负离子模式进行扫描,扫描方式为全扫描/数据依赖二级扫描(Full MS/dd-MS^(2))。结果:共鉴定出41个化学成分,包括酸浆苦味素类10个、黄酮类10个、有机酸类9个、氨基酸类6个、蒽醌类2个、香豆素类2个、核苷类2个。另外,对锦灯笼中的蔗糖脂肪酸酯类成分的裂解规律进行归纳总结,研究发现12组具备不同分子式的蔗糖脂肪酸酯类成分,且该类成分在锦灯笼中均为首次发现。结论:该方法可快速分析鉴定锦灯笼中的化学成分,为进一步研究锦灯笼的全面质量控制方法、药效物质基础以及合理开发其药用价值提供科学依据。

UPLC-Q-Orbitrap HRMS测定白酒接触塑料制品中21种双酚类及其衍生物

建立了超高效液相色谱/四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱法(UPLC-Q-Orbitrap HRMS)测定白酒接触塑料制品中21种双酚类及其衍生物的筛查定量方法。迁移后模拟液用甲醇稀释10倍,采用C18色谱柱,以甲醇-5 mmol/L乙酸铵水溶液为流动相进行梯度洗脱,21种目标物在质量浓度范围2.5~500.0μg/L范围内线性良好,R2大于0.9965,方法定量限为6.0~36.3μg/L,回收率为82.3%~106.4%,RSD为0.7%~5.2%之间。该方法种类覆盖广,灵敏度高,准确性好,应用于实际样品检测时重复性良好,可为白酒生产过程中此类化合物的风险监测提供技术支撑。

基于UPLC-Q-Orbitrap HRMS的痂状炭角菌子实体化学成分分析

痂状炭角菌(Xylaria sp.L1)是一种高价值药用真菌,属于炭角菌科,它生长在野外废弃的白蚁巢穴周围。文章应用超高效液相色谱(ultra-high performance liquid chromatography,UPLC)-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(quadrupole-orbitrap high-resolution mass spectrometry,Q-Orbitrap HRMS)技术对痂状炭角菌子实体80%甲醇提取物的化学成分进行定性分析。采用Welch RP-C18柱色谱(150 mm×2.1 mm,1.8μm),以0.1%甲酸水溶液和0.1%甲酸乙腈为流动相进行梯度洗脱;高分辨质谱分析采用电喷雾离子源(electrospray ionization source,ESI),在正、负离子模式下扫描采集数据;从痂状炭角菌子实体中共检测到41种化合物,包含6种萜类化合物、4种苯丙素类化合物、14种生物碱类化合物、10种长链不饱和脂肪酸类化合物、7种甾体类化合物,其中有18种化合物为痂状炭角菌子实体中首次发现。该研究对痂状炭角菌子实体化学成分进行较全面地分析,为该真菌的深入研究奠定基础。

UPLC-Q-Orbitrap HRMS结合HS-SPME-GC-MS技术的荆肤止痒颗粒化学成分分析

目的:利用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Orbitrap HRMS)和顶空-固相微萃取气质联用(HS-SPME-GC-MS)技术分析荆肤止痒颗粒的醇溶性及挥发性化学成分,解析化合物裂解规律,揭示制剂中的成分归属,完善中药制剂的质量标准。方法:UPLC-Q-Orbitrap HRMS采用Thermo Scientific Accucore^(TM)C_(18)(3 mm×100 mm,2.6μm)色谱柱,以0.1%甲酸水溶液(A)-甲醇(B)为流动相进行梯度洗脱,正、负离子模式下采集数据。根据精准质荷比和二级碎片离子信息,结合文献数据库对荆肤止痒颗粒的醇溶性成分进行鉴定。采用HS-SPME-GC-MS鉴定荆肤止痒颗粒中的挥发性成分,将色谱峰信息与标准数据库进行检索对比,对荆肤止痒颗粒的挥发性成分进行快速鉴定。结果:从荆肤止痒颗粒中共鉴定出162个化合物,其中从UPLC-Q-Orbitrap HRMS结果中鉴定出129个醇溶性化合物,包括黄酮类35个、香豆素类10个、生物碱类3个、有机酸类39个、氨基酸类12个、酰胺类6个、核苷类6个和其他类18个;从HS-SPME-GC-MS结果中鉴定出33个挥发性化合物,包括烃类7个、醛类12个、酮类3个、酯类3个、有机酸类4个、醇类2个和杂环2个。结论:建立了荆肤止痒颗粒的UPLC-Q-Orbitrap HRMS和HS-SPME-GC-MS分析方法,为阐明该复方制剂的药效物质基础提供了依据,可为进一步完善质量标准、优化工艺、稳定药效提供参考。