CircAGFG1通过miR-375/USP22轴调节食管鳞癌细胞的放射敏感性研究

目的研究环状带有FG重复序列1(CircAGFG1)通过miR-375/泛素特异性蛋白酶22(USP22)轴对食管鳞癌(ESCC)细胞放射敏感性的影响。方法采用实时荧光定量PCR和免疫印迹法检测人ESCC细胞株KYSE150及人ESCC放射性抵抗细胞KYSE150-R中CircAGFG1、miR-375、USP22表达。将体外培养的KYSE150-R细胞随机分为对照组、辐照组、辐照+阴性对照组、辐照+CircAGFG1敲低组、辐照+CircAGFG1敲低+miR-375 inhibitor组,分组转染后,4Gy 6MV-X线辐照后24 h采用实时荧光定量PCR和免疫印迹法检测各组KYSE150-R细胞中CircAGFG1、miR-375、USP22表达;采用CCK-8法和平板集落形成实验检测各组KYSE150-R细胞增殖;采用流式细胞术检测各组KYSE150-R细胞凋亡;采用免疫荧光染色检测各组KYSE150-R细胞凋亡相关蛋白Bax与Bcl-2比值(Bax/Bcl-2)。将各组细胞接种在裸鼠右后肢腋下来构建ESCC移植瘤模型,饲养3周后检测各组裸鼠肿瘤体积及重量。采用双荧光素酶报告基因实验检测KYSE150-R中CircAGFG1对miR-375的靶向调节与miR-375对USP22的靶向调节。结果与KYSE150细胞相比,KYSE150-R细胞中CircAGFG1 mRNA表达、USP22 mRNA与蛋白表达升高(P<0.05),miR-375 mRNA表达降低(P<0.05)。与对照组相比,辐照+CircAGFG1敲低组CircAGFG1 mRNA表达、USP22 mRNA及蛋白表达、细胞增殖率、集落生成率、裸鼠肿瘤体积与肿瘤重量降低(P<0.05),细胞凋亡率、Bax/Bcl-2、miR-375 mRNA表达升高(P<0.05);辐照组、辐照+阴性对照组细胞各指标比较无明显差异(P>0.05)。与辐照组相比,辐照+CircAGFG1敲低组CircAGFG1 mRNA、USP22 mRNA及蛋白表达、细胞增殖率、集落生成率、裸鼠肿瘤体积与肿瘤重量降低(P<0.05),细胞凋亡率、Bax/Bcl-2、miR-375 mRNA表达升高(P<0.05)。与辐照+CircAGFG1敲低组相比,辐照+CircAGFG1敲低+miR-375 inhibitor组USP22 mRNA及蛋白表达、细胞增殖率、集落生成率、裸鼠肿瘤体积与肿瘤重量升高(P<0.05),细胞凋亡率、Bax/Bcl-2、miR-375 mRNA表达降低(P<0.05);辐照+阴性对照组与对照组细胞各指标无明显变化(P>0.05)。CircAGFG1可靶向下调KYSE150-R细胞miR-375表达,而miR-375可靶向下调KYSE150-R细胞USP22表达。结论敲低CircAGFG1可通过上调miR-375来减弱USP22表达,从而增强ESCC细胞的放射敏感性,提升放射性对ESCC细胞的杀伤力,并促使其凋亡。

去泛素化酶USP22在多囊卵巢综合征发病过程中的作用研究

目的 探索去泛素化酶USP22在多囊卵巢综合征(PCOS)发病过程中的作用及机制。方法 利用脱氢表雄酮(DHEA)诱导建立小鼠PCOS模型,免疫组化及Western blot检测USP22在PCOS模型小鼠及对照小鼠卵巢组织中的表达变化;在卵巢颗粒细胞系(KGN)细胞中加入500 nmol/L双氢睾酮(DHT)模拟PCOS颗粒细胞中的高雄状态,并构建靶向USP22的siRNA,敲低KGN细胞中USP22的表达,对照组加入空白siRNA,CCK-8检测各组细胞的增殖变化,RT-PCR检测细胞周期相关分子的mRNA表达水平,Western blot检测细胞周期相关蛋白及信号通路相关蛋白表达情况。结果 USP22蛋白主要定位于卵巢颗粒细胞的细胞核,且在PCOS小鼠卵巢组织中USP22表达显著低于正常小鼠(P<0.05)。细胞实验结果表明:敲低USP22后,KGN细胞的增殖能力显著下降(P<0.05),RT-PCR及Western Blot结果显示细胞周期相关蛋白Cyclin B1、Cyclin D1、Cyclin E1的mRNA及蛋白表达水平均显著下降(P<0.05);而在KGN细胞中敲低USP22的同时加入DHT,KGN细胞增殖能力及相关分子表达下降更为显著(P<0.05);另外,敲低USP22后,KGN细胞中信号通路相关蛋白p-PI3K和p-AKT的表达水平显著下降(P<0.05)。结论 去泛素化酶USP22可通过PI3K/AKT信号通路调控KGN细胞的增殖,从而影响PCOS的发病。

miR-365靶向调控USP22促进大肠癌细胞组蛋白修饰和EMT

目的探讨miR-365对大肠癌细胞组蛋白修饰和上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响及其机制。方法采用反转录-聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)检测大肠癌细胞株(高转移细胞系HCT-116、LoVo和中低转移细胞系SW480)中miR-365 mRNA表达量。通过转染miRNA模拟物、抑制物构建miR-365过表达和敲低模型,SW480细胞分为miR-365模拟物组、miR-365抑制物组和NC组;采用RT-PCR检测miR-365和特异性泛素肽酶22(ubiquitin-specific peptidase 22,USP22)mRNA表达水平;采用双荧光素酶报告基因检测miR-365与USP22的相互作用;Western blot法检测Vimentin、N-cadherin、E-cadherin蛋白表达水平;采用斑点杂交法检测H2A和H2B蛋白泛素化修饰;采用Transwell法检测各组细胞迁移情况,细胞划痕实验检测细胞转移能力。结果HCT-116和LoVo细胞系的miR-365 mRNA表达量显著低于SW480细胞系(P<0.05)。与NC组比较,miR-365抑制物组miR-365 mRNA的表达显著降低,而miR-365模拟物组则升高(P<0.05)。双荧光素酶报告基因检测结果显示,转染后miR-NC+USP22-wt组荧光素酶活性明显高于miR-365+USP22-wt组(P<0.05);而miR-365+USP22-mut组和miR-NC+USP22-mut组比较差异无统计学意义(P>0.05)。RT-PCR法检测结果显示,与NC组比较,miR-365抑制物组SW480细胞中USP22 mRNA的表达量显著升高,而miR-365模拟物组则降低(P<0.05)。斑点杂交法结果显示,与NC组比较,miR-365抑制物组H2AK119ub表达量显著升高,而miR-365模拟物组则降低(P<0.05);与NC组比较,miR-365抑制物组H2BK120ub表达量显著升高,而miR-365模拟物组则降低(P<0.05)。Western blot结果显示,与NC组比较,miR-365抑制物组SW480细胞中N-cadherin蛋白表达量显著降低,而miR-365模拟物组则升高(P<0.05);与NC组比较,miR-365抑制物组SW480细胞中Vimentin、E-cadherin蛋白表达量显著升高,而miR-365模拟物组则降低(P<0.05)。细胞划痕实验结果显示,与NC组和miR-365模拟物组比较,miR-365抑制物组愈合率明显升高(P<0.05);视野下miR-365抑制物组SW480细胞穿模数量明显高于NC组和miR-365模拟物组(P<0.05)。结论miR-365可通过靶向调控USP22的表达,继而调节组蛋白泛素化修饰,诱导上皮-间质转化的发生,最终引起大肠癌细胞转移。

非小细胞肺癌中TNC、USP22和Ki-67的表达及临床意义

目的探讨非小细胞肺癌中TNC、USP22和Ki-67的表达及与临床病理特征的关系。方法采用RT-PCR和免疫组化SP法联合检测46例非小细胞肺癌组织和癌旁正常组织中TNC、USP22和Ki-67的表达。结果TNC蛋白主要表达于非小细胞肺癌巢周围细胞外基质、基膜,且与非小细胞肺癌淋巴结转移、分化程度和临床分期相关(P<0.05);USP22和Ki-67蛋白主要表达于非小细胞肺癌细胞胞核,且与非小细胞肺癌淋巴结转移、分化程度和临床分期呈正相关(P<0.05)。非小细胞肺癌中TNC、USP22和Ki-67 mRNA表达均增强(P<0.01)。结论TNC可抑制非小细胞肺癌的浸润、转移,USP22和Ki-67可作为非小细胞肺癌患者预后指标,联合检测TNC、USP22和Ki-67的表达,可为临床治疗非小细胞肺癌及预后判断等提供参考。

USP22、MTA1及Ki-67蛋白在食管鳞癌中的表达及相关性

目的:探讨泛素特异性肽酶22(ubiquitin specific peptidase 22,USP22),转移相关基因1(metastasis associated gene 1,MTA1)及细胞增殖核抗原(nuclear associated antigen,Ki-67)在人食管鳞癌组织中的表达、与肿瘤生物学行为的关系以及他们三者之间的相关性.方法:采用免疫组织化学的方法检测USP22、MTA1及Ki-67在人食管鳞癌组织、癌旁组织及正常组织的表达,探讨上述三者在不同组织中表达的特点及他们相互之间的相关性.结果:(1)USP22的阳性表达率:食管鳞癌组织68.18%,癌旁组织36.36%,正常组织15.91%,两两组间比较,均P<0.05,差异均具有统计学意义;USP22蛋白的阳性表达率与肿瘤浸润深度及组织学分级有显著的关系,而与淋巴结转移、年龄、性别无关;(2)MTA1的阳性表达率:食管鳞癌组织61.36%,癌旁组织31.82%,正常组织6.82%,两两组间比较,均P<0.05,差异均具有统计学意义;MTA1蛋白的阳性表达率与淋巴结转移、肿瘤浸润深度及组织学分级有显著的关系,而与年龄、性别无关;(3)Ki-67的阳性表达率:食管鳞癌组织70.45%,癌旁组织43.18%,正常组织11.36%,两两组间比较,均P<0.05,差异均具有统计学意义;Ki-67蛋白的阳性表达率与淋巴结转移、肿瘤浸润深度及组织学分级有显著的关系,而与年龄、性别无关;(4)USP22蛋白的表达与MTA1蛋白的表达呈正相关;USP22蛋白的表达与Ki-67蛋白的表达呈正相关;MTA1蛋白的表达与Ki-67蛋白的表达无相关性.结论:USP22、MTA1及Ki-67参与食管癌的发生发展、浸润转移,三者联合检测将有助于食管癌的诊断,可更准确地判断食管癌的生物学行为,并有望成为食管癌基因治疗的新靶点.

USP22和PTEN在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的探讨USP22在非小细胞肺癌(NSCLC)中的活化状态并分析其可能的靶因子PTEN影响NSCLC的发生。方法收集200例NSCLC患者的蜡块,免疫组化法检测USP22和PTEN的表达;临床相关指标通过统计学分析其表达的临床意义。结果 200例NSCLC中USP22和PTEN的阳性表达率分别为66.5%和42.5%,USP22与PTEN的表达呈负相关(r=-0.365,P<0.0001)。USP22高表达同时PTEN低表达时,与病理类型(P=0.002)、p N分期(P=0.014)和AJCC临床分期(P=0.01)以及总生存期(P<0.0001)和无病生存期(P<0.0001)密切相关。并且,多变量Cox比例风险模型分析提示,年龄(P=0.006),分化程度(P=0.006),AJCC临床分期(P=0.004),USP22高表达同时PTEN低表达组(P<0.0001)是患者总生存期(OS)的独立预后指标;同时,年龄(P=0.030),病理类型(P=0.041),分化程度(P=0.041),AJCC临床分期(P=0.002),USP22高表达同时PTEN低表达组(P<0.0001)是患者无病生存期(DFS)的独立预后指标。结论 USP22-PTEN的表达模型有望成为NSCLC诊断、分期、预后的分子表型。

RNA干扰沉默USP22基因对人鼻咽癌裸鼠移植瘤生长的影响

目的探讨USP22基因表达沉默对人鼻咽癌裸鼠移植瘤生长的影响。方法将9只BALB/C祼鼠随机分为阴性对照组、CNE-2空载体细胞株组(Scrambled组)、USP22表达下调稳定细胞株组(sh-USP22组),每组3只裸鼠。绘制各组肿瘤生长曲线;移植瘤中USP22 m RNA及蛋白的表达情况通过RT-PCR、免疫组织化学法检测。结果 sh-USP22组肿瘤重量[(0.54±0.07)g]明显小于阴性对照组[(1.58±0.24)g]和Scrambled组[(1.46±0.23)g],差异均有统计学意义(均P<0.05);RT-PCR结果表明,以阴性对照组表达量为参照(1),sh-USP22组肿瘤组织中USP22m RNA相对表达量(0.14±0.09)低于阴性对照组和Scrambled组(0.92±0.11),差异均有统计学意义(均P<0.05);而阴性对照组和Scrambled组(0.92±0.11)比较,差异无统计学意义(P>0.05);免疫组化结果表明,sh-USP22组肿瘤组织中USP22阳性细胞所占比率[(12.45±1.16)%]明显低于阴性对照组[(97.25±1.94)%]和Scrambled组[(91.28±2.75)%],差异均有统计学意义(均P<0.05);阴性对照组[(97.25±1.94)%]和Scrambled组[(91.28±2.75)%]比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论慢病毒载体sh-USP22能有效抑制USP22基因表达,并有效抑制CNE-2细胞的裸鼠成瘤能力,USP22有望成为鼻咽癌基因治疗新靶点。

原癌基因USP22启动子的克隆及转录活性分析

目的克隆原癌基因USP22部分启动子序列,探讨其转录活性。方法应用cDNA5′末端快速扩增(5′RACE)方法定位USP22基因转录起始点;在此基础上针对其5′端非编码区处包括转录起始点在内的-2828^+52片段进行PCR扩增,产物克隆入荧光素酶表达载体pGL3-Basic。重组质粒与内参质粒pRL-TK共转染HepG2与Hela细胞,双荧光素酶活性检测确定其转录活性。结果成功确定USP22基因转录起始位点,酶切及测序结果证实USP22基因5′端非编码区2880bp序列正确插入到荧光素酶报告基因载体pGL3-Basic。重组质粒pGL3-USP22promoter转染HepG2细胞和Hela细胞后,检测到荧光素酶的高表达(P<0.05)。结论成功构建具有转录活性的USP22启动子片段,为进一步研究USP22表达调控机制奠定基础。

活化转录因子ATF1、ATF2对USP22基因启动子活性的调节

目的克隆人活化转录因子ATF1基因和ATF2基因蛋白编码序列,分别构建真核细胞表达载体,进而研究高表达ATF1和ATF2对泛素水解酶22(ubiquitin-specific processing enzyme 22,USP22)基因启动子转录活性的影响。方法 RT-PCR扩增ATF1基因和ATF2基因蛋白编码序列,分别与pVAX1真核表达载体连接;测序、酶切鉴定重组载体;Western Blot检测外源性ATF1和ATF2在靶细胞Hela细胞中的表达;pVAX1-ATF1、pVAX1-ATF2分别与含野生型USP22启动子的萤光素酶报告质粒或其CREB位点突变体质粒共转染,双萤光素酶报告系统检测萤光素酶活性的表达。结果重组质粒pVAX1-ATF1、pVAX1-ATF2构建成功,外源性ATF1、ATF2在Hela细胞内有效表达;转染pVAX-ATF1促进USP22启动子活性升高(83%±11%),转染pVAX-ATF2促进USP22启动子活性升高约(52%±8%);而突变CREB位点均可导致上升作用的消失。结论成功构建了ATF1、ATF2真核表达质粒,高表达外源性ATF1和ATF2均可通过CREB位点激活USP22启动子的转录活性。

地西他滨联合CAG方案治疗复发急性髓细胞白血病患者的疗效及对miR-34b、USP22表达的影响

目的探讨地西他滨联合CAG方案治疗复发急性髓细胞白血病(AML)患者的疗效及对microRNA-34b(miR-34b)、特异性泛素蛋白酶22(USP22)表达的影响。方法将30例复发AML患者按照随机数字表法分为治疗组和对照组,各15例,分别采用地西他滨联合CAG方案、CAG方案。比较两组的总缓解率(ORR)、miR-34b和USP22的表达,随访观察两组患者的生存率,采用Kaplan-Meier法分析中位总生存(OS)期,分析miR-34b和USP22的表达与预后的相关性。结果治疗组ORR显著高于对照组(66.67%vs.26.67%,P<0.05)。治疗组化疗后miR-34b蛋白表达升高,USP22蛋白表达降低,且与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。随访24~36个月,治疗组和对照组生存率分别为53.3%、33.3%(P>0.05)。治疗组中位OS期为9.53个月(95%CI:7.94~11.11),显著高于对照组6.57个月(95%CI:5.21~7.92)(P<0.05)。与存活组比较,死亡组化疗后miR-34b蛋白表达明显降低,USP22蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论地西他滨联合CAG方案治疗复发AML患者,可能通过调控miR-34b及其下游靶基因USP22的表达,有效提高缓解率,延长生存期,改善预后。

微小RNA-101通过USP22抑制人肝癌MHCC97H细胞的上皮-间质转化功能

目的研究微小核糖核酸(miR)-101对人肝细胞癌(肝癌)MHCC97H细胞的上皮-间质转化功能的影响及其相关机制。方法 MHCC97H肝癌细胞株分别转染miR-101 mimics和negative control mimic,分别作为M101组、NCM组,并设立未转染对照(control)组,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测各组细胞miR-101含量。Transwell实验检测3组细胞迁移能力和侵袭能力。Western-blot法检测3组细胞vimentin、α-catenin、E-cadherin和USP22表达水平。双荧光素酶实验检测miR-101与USP22的关系。结果 M101组miR-101的表达水平明显上调,表达水平约为control组的761倍(P<0.05)。M101组迁移细胞数量明显低于control组的[(15.7±1.6)个比(94.1±1.8)个,P<0.05]。M101组侵袭细胞数量明显低于control组的[(9.1±0.4)个比(51.6±0.9)个,P<0.05]。M101组细胞vimentin蛋白表达量明显降低,α-catenin及E-cadherin蛋白表达量明显升高,USP22蛋白表达量明显降低。双荧光素酶检验结果显示USP22为miR-101的下游靶基因。结论 miR-101可能通过降低下游靶基因USP22水平影响EMT相关蛋白表达,抑制MHCC97H肝癌细胞的上皮-间质转化功能。

USP22在胃癌中的表达及其临床意义

目的检测USP22在胃癌组织中的表达,并探讨其与胃癌患者临床病理特征及预后的相关性。方法收集125例胃癌患者的存档蜡块,应用免疫组化染色法检测USP22在正常胃黏膜组织及胃癌组织中的表达,并采用SPSS 13.0软件对结果进行统计学分析。结果 USP22在胃癌组织的阳性表达率高于正常组织;USP22的表达与患者的年龄、性别、肿瘤大小无相关性,而与肿瘤分化程度、浸润深度、有无淋巴结转移、有无远处转移以及AJCC临床分期相关(P<0.05);USP22阴性表达的患者5年生存率明显高于阳性表达组(P<0.05)。结论 USP22在胃癌的发生、发展过程中起到了一定作用,USP22蛋白高表达的胃癌患者预后差。

咪达唑仑下调USP22抑制结肠癌SW480细胞增殖

目的探讨咪达唑仑(midazolam)抑制人结肠癌SW480细胞增殖的可能机制。方法不同浓度咪达唑仑处理SW480细胞后,甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)及BrdU掺入比色法检测细胞活性和增殖情况,Western blot及RT-PCR检测USP22蛋白及mRNA表达;构建USP22干扰稳定细胞株,沉默USP22表达,Western blot检测USP22及细胞周期相关蛋白的表达水平。结果咪达唑仑呈时间和剂量依赖性抑制SW480细胞增殖。咪达唑仑浓度依赖性抑制USP22表达。si-USP-22能有效干扰USP-22蛋白及mRNA水平的表达,达到沉默USP-22的效果。干扰USP22后,肿瘤细胞增殖受抑制,CDK抑制蛋白P21及P27表达上调,干扰USP22可能通过CDKI/RB通路介导SW480细胞增殖抑制。结论咪达唑仑抑制人结肠癌SW480细胞增殖,可能机制为其下调USP22,通过CDKI/RB通路介导SW480细胞增殖抑制。

ERK通路对PHA诱导人外周血单个核细胞中USP22基因表达的影响

目的探讨细胞外信号调节激酶(ERK)对植物血凝素(PHA)诱导人外周血单个核细胞USP22基因表达的调控作用。方法不同浓度PHA刺激人外周血淋巴细胞,Western blot检测ERK1/2的磷酸化水平及USP22蛋白表达;ERK1/2磷酸化抑制剂PD98059预处理细胞,Western blot和RT-PCR分别检测PHA诱导的USP22蛋白及mRNA的表达。结果 Western blot显示受PHA刺激后,人外周血单个核细胞USP22和P-ERK1/2蛋白的表达水平均高于对照组;而p-ERK1/2抑制剂阻断ERK磷酸化水平,进而下调USP22蛋白及mRNA表达水平。结论 ERK1/2信号通路参与PHA对人外周血单个核细胞USP22基因的转录激活。

鼻咽癌组织中USP22的表达及其与临床预后的关系

目的探讨泛素特异性肽酶22(USP22)在鼻咽癌组织中的表达及其与临床病理因素和预后的关系。方法采用免疫组织化学法检测USP22蛋白在60例鼻咽癌组织和20例鼻咽黏膜慢性炎组织中的表达,并分析其在鼻咽癌组织中的表达与临床病理因素和预后的相关性。结果 USP22在鼻咽癌中的阳性表达率明显高于鼻咽黏膜慢性炎组织,差异有统计学意义(P<0.05);USP22的阳性表达率与淋巴结转移有显著的关系(P<0.05),而与患者性别、年龄、病理组织分型等临床病理特征无明显相关性(P>0.05);USP22阳性表达患者的3年生存期和3年无进展生存期较USP22阴性表达患者短。结论 USP22在鼻咽癌组织中的表达上调,且与淋巴结转移有相关性。USP22阳性表达的鼻咽癌患者预后较阴性表达者差。检测USP22蛋白的表达有助于鼻咽癌的病理诊断与鉴别诊断和预后判断,USP22有望成为鼻咽癌的治疗靶点。

USP22 ShRNA慢病毒载体的构建及鉴定

目的构建并鉴定USP22基因Sh RNA慢病毒载体,为进一步研究USP22基因在鼻咽癌中的作用机制奠定基础。方法针对USP22基因的编码序列设计并合成2条特异性干扰序列,序列两端含有限制性内切酶位点HpaⅠ和XhoⅠ。寡核苷酸链退火生成寡核苷酸双链,5′端磷酸化后将含有酶切位点的寡核苷酸双链克隆到p LL3.7慢病毒表达载体。连接产物经转化、培养,提取其质粒,提取出来的质粒经HpaⅠ和XhoⅠ酶切电泳鉴定,鉴定正确的质粒进行测序。构建成功的慢病毒表达载体p LL-USP22-sh RNA与包装载体质粒混匀共转染于293T细胞。通过荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白(GFP)情况,对病毒滴度和感染效率进行检测。结果成功构建慢病毒表达载体p LL-USP22-sh RNA。与包装载体质粒共转染293T细胞后测定慢病毒滴度为4×107 TU/ml。结论本实验应用相关技术成功构建USP22 Sh RNA慢病毒载体,为进一步研究USP22基因的生物学功能奠定了基础。

去泛素化酶USP22与肿瘤关系的研究进展

去泛素化酶USP22为人类基因组编码的50多种特异性蛋白酶之一,属去泛素化酶的亚家族,是一种重要的去泛素化酶。USP22通过特异性识别靶蛋白,使靶蛋白去泛素化并阻止其降解。研究表明,USP22可通过多种途径影响肿瘤的发生及发展,如细胞的凋亡和自噬、肿瘤信号通路、细胞周期的调节和DNA损伤修复等,而且抑制USP22表达可影响细胞的增殖、成瘤和浸润。该文就USP22与肿瘤发生及发展的关系作一综述。

鼻咽癌组织中USP22和C-myc的表达及临床意义

目的探讨泛素特异性肽酶22(ubiquitin specific peptidase 22,USP22)和C-myc基因在鼻咽癌组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学法检测USP22和C-myc在82例鼻咽癌组织和20例鼻咽黏膜炎症组织中的表达,并分析二者在鼻咽癌组织中的表达与临床病理因素和预后的相关性。结果 1)USP22和C-myc在鼻咽癌组织中的阳性表达率均高于鼻咽黏膜炎组织,差异具有统计学意义(P <0.05);2)USP22和C-myc在鼻咽癌组织中的阳性表达率与有无淋巴结转移有关(P <0.05),但与病理组织分类、患者的性别和年龄等临床病理因素无关;3)USP22和C-myc在鼻咽癌组织中的表达存在正相关(P <0.05);4)USP22阳性表达患者的3年生存期(OS)和3年无进展生存期(PFS)较USP22阴性表达患者短。结论 1)USP22和C-myc在鼻咽癌组织中的表达上调,且与淋巴结转移有相关性,两者具有协同作用;2)USP22阳性表达的鼻咽癌患者预后较阴性表达者差;3)联合检测USP22和C-myc的表达有助于鼻咽癌的病理鉴别诊断和预后判断,USP22基因有望成为鼻咽癌的治疗靶点。

泛素水解酶USP22在人咽鳞癌中的表达及意义

目的探讨泛素水解酶USP22在人咽鳞癌中的表达及其作用。方法收集咽鳞癌及癌旁正常组织,Western blot及PCR检测USP22蛋白及mRNA水平;培养咽鳞癌细胞系(SAS、CAL-33、FaDu、HSC-4、UTSCC-5和UTSCC-8),WB及PCR检测USP22蛋白及mRNA水平;构建慢病毒小分子干扰USP22载体并筛选稳定细胞株,甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)及BrdU掺入比色法检测细胞增殖情况,WB检测细胞周期相关蛋白的表达水平。结果泛素水解酶USP22在癌鳞癌组织中表达上调;USP22在咽鳞癌细胞系FaDu中表达明显上调;慢病毒载体介导干扰USP22后,FaDu细胞P21及P27表达增加,p-Rb水平下调,FaDu细胞增殖被抑制。结论 USP22在人咽鳞癌中的表达上调,敲除USP22抑制FaDu细胞增殖。

USP22和Akt在胃癌中的表达及临床意义

目的检测USP22与Akt在胃癌组织中的表达,并探讨二者在胃癌组织中表达的相关性及二者共表达与胃癌患者临床病理特征及预后的关系。方法收集125例胃癌患者的存档蜡块,应用免疫组化染色法检测USP22与Akt在胃癌组织中的表达。结果 USP22与Akt在胃癌组织中的表达呈正相关(P<0.05);USP22与Akt共表达与患者的性别、年龄、肿瘤大小无相关性,而与肿瘤分化程度、浸润深度、有无淋巴结转移、有无远处转移以及AJCC临床分期相关(P<0.05);USP22与Akt非共表达组患者5年生存率明显高于共表达组(P<0.05)。结论 USP22可能为Akt的上游基因,通过激活Akt通路来促进胃癌的进展。