miR-365靶向调控USP22促进大肠癌细胞组蛋白修饰和EMT

目的探讨miR-365对大肠癌细胞组蛋白修饰和上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响及其机制。方法采用反转录-聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)检测大肠癌细胞株(高转移细胞系HCT-116、LoVo和中低转移细胞系SW480)中miR-365 mRNA表达量。通过转染miRNA模拟物、抑制物构建miR-365过表达和敲低模型,SW480细胞分为miR-365模拟物组、miR-365抑制物组和NC组;采用RT-PCR检测miR-365和特异性泛素肽酶22(ubiquitin-specific peptidase 22,USP22)mRNA表达水平;采用双荧光素酶报告基因检测miR-365与USP22的相互作用;Western blot法检测Vimentin、N-cadherin、E-cadherin蛋白表达水平;采用斑点杂交法检测H2A和H2B蛋白泛素化修饰;采用Transwell法检测各组细胞迁移情况,细胞划痕实验检测细胞转移能力。结果HCT-116和LoVo细胞系的miR-365 mRNA表达量显著低于SW480细胞系(P<0.05)。与NC组比较,miR-365抑制物组miR-365 mRNA的表达显著降低,而miR-365模拟物组则升高(P<0.05)。双荧光素酶报告基因检测结果显示,转染后miR-NC+USP22-wt组荧光素酶活性明显高于miR-365+USP22-wt组(P<0.05);而miR-365+USP22-mut组和miR-NC+USP22-mut组比较差异无统计学意义(P>0.05)。RT-PCR法检测结果显示,与NC组比较,miR-365抑制物组SW480细胞中USP22 mRNA的表达量显著升高,而miR-365模拟物组则降低(P<0.05)。斑点杂交法结果显示,与NC组比较,miR-365抑制物组H2AK119ub表达量显著升高,而miR-365模拟物组则降低(P<0.05);与NC组比较,miR-365抑制物组H2BK120ub表达量显著升高,而miR-365模拟物组则降低(P<0.05)。Western blot结果显示,与NC组比较,miR-365抑制物组SW480细胞中N-cadherin蛋白表达量显著降低,而miR-365模拟物组则升高(P<0.05);与NC组比较,miR-365抑制物组SW480细胞中Vimentin、E-cadherin蛋白表达量显著升高,而miR-365模拟物组则降低(P<0.05)。细胞划痕实验结果显示,与NC组和miR-365模拟物组比较,miR-365抑制物组愈合率明显升高(P<0.05);视野下miR-365抑制物组SW480细胞穿模数量明显高于NC组和miR-365模拟物组(P<0.05)。结论miR-365可通过靶向调控USP22的表达,继而调节组蛋白泛素化修饰,诱导上皮-间质转化的发生,最终引起大肠癌细胞转移。

非小细胞肺癌中TNC、USP22和Ki-67的表达及临床意义

目的探讨非小细胞肺癌中TNC、USP22和Ki-67的表达及与临床病理特征的关系。方法采用RT-PCR和免疫组化SP法联合检测46例非小细胞肺癌组织和癌旁正常组织中TNC、USP22和Ki-67的表达。结果TNC蛋白主要表达于非小细胞肺癌巢周围细胞外基质、基膜,且与非小细胞肺癌淋巴结转移、分化程度和临床分期相关(P<0.05);USP22和Ki-67蛋白主要表达于非小细胞肺癌细胞胞核,且与非小细胞肺癌淋巴结转移、分化程度和临床分期呈正相关(P<0.05)。非小细胞肺癌中TNC、USP22和Ki-67 mRNA表达均增强(P<0.01)。结论TNC可抑制非小细胞肺癌的浸润、转移,USP22和Ki-67可作为非小细胞肺癌患者预后指标,联合检测TNC、USP22和Ki-67的表达,可为临床治疗非小细胞肺癌及预后判断等提供参考。

USP22、MTA1及Ki-67蛋白在食管鳞癌中的表达及相关性

目的:探讨泛素特异性肽酶22(ubiquitin specific peptidase 22,USP22),转移相关基因1(metastasis associated gene 1,MTA1)及细胞增殖核抗原(nuclear associated antigen,Ki-67)在人食管鳞癌组织中的表达、与肿瘤生物学行为的关系以及他们三者之间的相关性.方法:采用免疫组织化学的方法检测USP22、MTA1及Ki-67在人食管鳞癌组织、癌旁组织及正常组织的表达,探讨上述三者在不同组织中表达的特点及他们相互之间的相关性.结果:(1)USP22的阳性表达率:食管鳞癌组织68.18%,癌旁组织36.36%,正常组织15.91%,两两组间比较,均P<0.05,差异均具有统计学意义;USP22蛋白的阳性表达率与肿瘤浸润深度及组织学分级有显著的关系,而与淋巴结转移、年龄、性别无关;(2)MTA1的阳性表达率:食管鳞癌组织61.36%,癌旁组织31.82%,正常组织6.82%,两两组间比较,均P<0.05,差异均具有统计学意义;MTA1蛋白的阳性表达率与淋巴结转移、肿瘤浸润深度及组织学分级有显著的关系,而与年龄、性别无关;(3)Ki-67的阳性表达率:食管鳞癌组织70.45%,癌旁组织43.18%,正常组织11.36%,两两组间比较,均P<0.05,差异均具有统计学意义;Ki-67蛋白的阳性表达率与淋巴结转移、肿瘤浸润深度及组织学分级有显著的关系,而与年龄、性别无关;(4)USP22蛋白的表达与MTA1蛋白的表达呈正相关;USP22蛋白的表达与Ki-67蛋白的表达呈正相关;MTA1蛋白的表达与Ki-67蛋白的表达无相关性.结论:USP22、MTA1及Ki-67参与食管癌的发生发展、浸润转移,三者联合检测将有助于食管癌的诊断,可更准确地判断食管癌的生物学行为,并有望成为食管癌基因治疗的新靶点.

USP22和PTEN在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的探讨USP22在非小细胞肺癌(NSCLC)中的活化状态并分析其可能的靶因子PTEN影响NSCLC的发生。方法收集200例NSCLC患者的蜡块,免疫组化法检测USP22和PTEN的表达;临床相关指标通过统计学分析其表达的临床意义。结果 200例NSCLC中USP22和PTEN的阳性表达率分别为66.5%和42.5%,USP22与PTEN的表达呈负相关(r=-0.365,P<0.0001)。USP22高表达同时PTEN低表达时,与病理类型(P=0.002)、p N分期(P=0.014)和AJCC临床分期(P=0.01)以及总生存期(P<0.0001)和无病生存期(P<0.0001)密切相关。并且,多变量Cox比例风险模型分析提示,年龄(P=0.006),分化程度(P=0.006),AJCC临床分期(P=0.004),USP22高表达同时PTEN低表达组(P<0.0001)是患者总生存期(OS)的独立预后指标;同时,年龄(P=0.030),病理类型(P=0.041),分化程度(P=0.041),AJCC临床分期(P=0.002),USP22高表达同时PTEN低表达组(P<0.0001)是患者无病生存期(DFS)的独立预后指标。结论 USP22-PTEN的表达模型有望成为NSCLC诊断、分期、预后的分子表型。

RNA干扰沉默USP22基因对人鼻咽癌裸鼠移植瘤生长的影响

目的探讨USP22基因表达沉默对人鼻咽癌裸鼠移植瘤生长的影响。方法将9只BALB/C祼鼠随机分为阴性对照组、CNE-2空载体细胞株组(Scrambled组)、USP22表达下调稳定细胞株组(sh-USP22组),每组3只裸鼠。绘制各组肿瘤生长曲线;移植瘤中USP22 m RNA及蛋白的表达情况通过RT-PCR、免疫组织化学法检测。结果 sh-USP22组肿瘤重量[(0.54±0.07)g]明显小于阴性对照组[(1.58±0.24)g]和Scrambled组[(1.46±0.23)g],差异均有统计学意义(均P<0.05);RT-PCR结果表明,以阴性对照组表达量为参照(1),sh-USP22组肿瘤组织中USP22m RNA相对表达量(0.14±0.09)低于阴性对照组和Scrambled组(0.92±0.11),差异均有统计学意义(均P<0.05);而阴性对照组和Scrambled组(0.92±0.11)比较,差异无统计学意义(P>0.05);免疫组化结果表明,sh-USP22组肿瘤组织中USP22阳性细胞所占比率[(12.45±1.16)%]明显低于阴性对照组[(97.25±1.94)%]和Scrambled组[(91.28±2.75)%],差异均有统计学意义(均P<0.05);阴性对照组[(97.25±1.94)%]和Scrambled组[(91.28±2.75)%]比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论慢病毒载体sh-USP22能有效抑制USP22基因表达,并有效抑制CNE-2细胞的裸鼠成瘤能力,USP22有望成为鼻咽癌基因治疗新靶点。

原癌基因USP22启动子的克隆及转录活性分析

目的克隆原癌基因USP22部分启动子序列,探讨其转录活性。方法应用cDNA5′末端快速扩增(5′RACE)方法定位USP22基因转录起始点;在此基础上针对其5′端非编码区处包括转录起始点在内的-2828^+52片段进行PCR扩增,产物克隆入荧光素酶表达载体pGL3-Basic。重组质粒与内参质粒pRL-TK共转染HepG2与Hela细胞,双荧光素酶活性检测确定其转录活性。结果成功确定USP22基因转录起始位点,酶切及测序结果证实USP22基因5′端非编码区2880bp序列正确插入到荧光素酶报告基因载体pGL3-Basic。重组质粒pGL3-USP22promoter转染HepG2细胞和Hela细胞后,检测到荧光素酶的高表达(P<0.05)。结论成功构建具有转录活性的USP22启动子片段,为进一步研究USP22表达调控机制奠定基础。

活化转录因子ATF1、ATF2对USP22基因启动子活性的调节

目的克隆人活化转录因子ATF1基因和ATF2基因蛋白编码序列,分别构建真核细胞表达载体,进而研究高表达ATF1和ATF2对泛素水解酶22(ubiquitin-specific processing enzyme 22,USP22)基因启动子转录活性的影响。方法 RT-PCR扩增ATF1基因和ATF2基因蛋白编码序列,分别与pVAX1真核表达载体连接;测序、酶切鉴定重组载体;Western Blot检测外源性ATF1和ATF2在靶细胞Hela细胞中的表达;pVAX1-ATF1、pVAX1-ATF2分别与含野生型USP22启动子的萤光素酶报告质粒或其CREB位点突变体质粒共转染,双萤光素酶报告系统检测萤光素酶活性的表达。结果重组质粒pVAX1-ATF1、pVAX1-ATF2构建成功,外源性ATF1、ATF2在Hela细胞内有效表达;转染pVAX-ATF1促进USP22启动子活性升高(83%±11%),转染pVAX-ATF2促进USP22启动子活性升高约(52%±8%);而突变CREB位点均可导致上升作用的消失。结论成功构建了ATF1、ATF2真核表达质粒,高表达外源性ATF1和ATF2均可通过CREB位点激活USP22启动子的转录活性。

地西他滨联合CAG方案治疗复发急性髓细胞白血病患者的疗效及对miR-34b、USP22表达的影响

目的探讨地西他滨联合CAG方案治疗复发急性髓细胞白血病(AML)患者的疗效及对microRNA-34b(miR-34b)、特异性泛素蛋白酶22(USP22)表达的影响。方法将30例复发AML患者按照随机数字表法分为治疗组和对照组,各15例,分别采用地西他滨联合CAG方案、CAG方案。比较两组的总缓解率(ORR)、miR-34b和USP22的表达,随访观察两组患者的生存率,采用Kaplan-Meier法分析中位总生存(OS)期,分析miR-34b和USP22的表达与预后的相关性。结果治疗组ORR显著高于对照组(66.67%vs.26.67%,P<0.05)。治疗组化疗后miR-34b蛋白表达升高,USP22蛋白表达降低,且与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。随访24~36个月,治疗组和对照组生存率分别为53.3%、33.3%(P>0.05)。治疗组中位OS期为9.53个月(95%CI:7.94~11.11),显著高于对照组6.57个月(95%CI:5.21~7.92)(P<0.05)。与存活组比较,死亡组化疗后miR-34b蛋白表达明显降低,USP22蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论地西他滨联合CAG方案治疗复发AML患者,可能通过调控miR-34b及其下游靶基因USP22的表达,有效提高缓解率,延长生存期,改善预后。

咪达唑仑下调USP22抑制结肠癌SW480细胞增殖

目的探讨咪达唑仑(midazolam)抑制人结肠癌SW480细胞增殖的可能机制。方法不同浓度咪达唑仑处理SW480细胞后,甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)及BrdU掺入比色法检测细胞活性和增殖情况,Western blot及RT-PCR检测USP22蛋白及mRNA表达;构建USP22干扰稳定细胞株,沉默USP22表达,Western blot检测USP22及细胞周期相关蛋白的表达水平。结果咪达唑仑呈时间和剂量依赖性抑制SW480细胞增殖。咪达唑仑浓度依赖性抑制USP22表达。si-USP-22能有效干扰USP-22蛋白及mRNA水平的表达,达到沉默USP-22的效果。干扰USP22后,肿瘤细胞增殖受抑制,CDK抑制蛋白P21及P27表达上调,干扰USP22可能通过CDKI/RB通路介导SW480细胞增殖抑制。结论咪达唑仑抑制人结肠癌SW480细胞增殖,可能机制为其下调USP22,通过CDKI/RB通路介导SW480细胞增殖抑制。

ERK通路对PHA诱导人外周血单个核细胞中USP22基因表达的影响

目的探讨细胞外信号调节激酶(ERK)对植物血凝素(PHA)诱导人外周血单个核细胞USP22基因表达的调控作用。方法不同浓度PHA刺激人外周血淋巴细胞,Western blot检测ERK1/2的磷酸化水平及USP22蛋白表达;ERK1/2磷酸化抑制剂PD98059预处理细胞,Western blot和RT-PCR分别检测PHA诱导的USP22蛋白及mRNA的表达。结果 Western blot显示受PHA刺激后,人外周血单个核细胞USP22和P-ERK1/2蛋白的表达水平均高于对照组;而p-ERK1/2抑制剂阻断ERK磷酸化水平,进而下调USP22蛋白及mRNA表达水平。结论 ERK1/2信号通路参与PHA对人外周血单个核细胞USP22基因的转录激活。

鼻咽癌组织中USP22的表达及其与临床预后的关系

目的探讨泛素特异性肽酶22(USP22)在鼻咽癌组织中的表达及其与临床病理因素和预后的关系。方法采用免疫组织化学法检测USP22蛋白在60例鼻咽癌组织和20例鼻咽黏膜慢性炎组织中的表达,并分析其在鼻咽癌组织中的表达与临床病理因素和预后的相关性。结果 USP22在鼻咽癌中的阳性表达率明显高于鼻咽黏膜慢性炎组织,差异有统计学意义(P<0.05);USP22的阳性表达率与淋巴结转移有显著的关系(P<0.05),而与患者性别、年龄、病理组织分型等临床病理特征无明显相关性(P>0.05);USP22阳性表达患者的3年生存期和3年无进展生存期较USP22阴性表达患者短。结论 USP22在鼻咽癌组织中的表达上调,且与淋巴结转移有相关性。USP22阳性表达的鼻咽癌患者预后较阴性表达者差。检测USP22蛋白的表达有助于鼻咽癌的病理诊断与鉴别诊断和预后判断,USP22有望成为鼻咽癌的治疗靶点。

USP22 ShRNA慢病毒载体的构建及鉴定

目的构建并鉴定USP22基因Sh RNA慢病毒载体,为进一步研究USP22基因在鼻咽癌中的作用机制奠定基础。方法针对USP22基因的编码序列设计并合成2条特异性干扰序列,序列两端含有限制性内切酶位点HpaⅠ和XhoⅠ。寡核苷酸链退火生成寡核苷酸双链,5′端磷酸化后将含有酶切位点的寡核苷酸双链克隆到p LL3.7慢病毒表达载体。连接产物经转化、培养,提取其质粒,提取出来的质粒经HpaⅠ和XhoⅠ酶切电泳鉴定,鉴定正确的质粒进行测序。构建成功的慢病毒表达载体p LL-USP22-sh RNA与包装载体质粒混匀共转染于293T细胞。通过荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白(GFP)情况,对病毒滴度和感染效率进行检测。结果成功构建慢病毒表达载体p LL-USP22-sh RNA。与包装载体质粒共转染293T细胞后测定慢病毒滴度为4×107 TU/ml。结论本实验应用相关技术成功构建USP22 Sh RNA慢病毒载体,为进一步研究USP22基因的生物学功能奠定了基础。

去泛素化酶USP22与肿瘤关系的研究进展

去泛素化酶USP22为人类基因组编码的50多种特异性蛋白酶之一,属去泛素化酶的亚家族,是一种重要的去泛素化酶。USP22通过特异性识别靶蛋白,使靶蛋白去泛素化并阻止其降解。研究表明,USP22可通过多种途径影响肿瘤的发生及发展,如细胞的凋亡和自噬、肿瘤信号通路、细胞周期的调节和DNA损伤修复等,而且抑制USP22表达可影响细胞的增殖、成瘤和浸润。该文就USP22与肿瘤发生及发展的关系作一综述。

鼻咽癌组织中USP22和C-myc的表达及临床意义

目的探讨泛素特异性肽酶22(ubiquitin specific peptidase 22,USP22)和C-myc基因在鼻咽癌组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学法检测USP22和C-myc在82例鼻咽癌组织和20例鼻咽黏膜炎症组织中的表达,并分析二者在鼻咽癌组织中的表达与临床病理因素和预后的相关性。结果 1)USP22和C-myc在鼻咽癌组织中的阳性表达率均高于鼻咽黏膜炎组织,差异具有统计学意义(P <0.05);2)USP22和C-myc在鼻咽癌组织中的阳性表达率与有无淋巴结转移有关(P <0.05),但与病理组织分类、患者的性别和年龄等临床病理因素无关;3)USP22和C-myc在鼻咽癌组织中的表达存在正相关(P <0.05);4)USP22阳性表达患者的3年生存期(OS)和3年无进展生存期(PFS)较USP22阴性表达患者短。结论 1)USP22和C-myc在鼻咽癌组织中的表达上调,且与淋巴结转移有相关性,两者具有协同作用;2)USP22阳性表达的鼻咽癌患者预后较阴性表达者差;3)联合检测USP22和C-myc的表达有助于鼻咽癌的病理鉴别诊断和预后判断,USP22基因有望成为鼻咽癌的治疗靶点。

泛素水解酶USP22在人咽鳞癌中的表达及意义

目的探讨泛素水解酶USP22在人咽鳞癌中的表达及其作用。方法收集咽鳞癌及癌旁正常组织,Western blot及PCR检测USP22蛋白及mRNA水平;培养咽鳞癌细胞系(SAS、CAL-33、FaDu、HSC-4、UTSCC-5和UTSCC-8),WB及PCR检测USP22蛋白及mRNA水平;构建慢病毒小分子干扰USP22载体并筛选稳定细胞株,甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)及BrdU掺入比色法检测细胞增殖情况,WB检测细胞周期相关蛋白的表达水平。结果泛素水解酶USP22在癌鳞癌组织中表达上调;USP22在咽鳞癌细胞系FaDu中表达明显上调;慢病毒载体介导干扰USP22后,FaDu细胞P21及P27表达增加,p-Rb水平下调,FaDu细胞增殖被抑制。结论 USP22在人咽鳞癌中的表达上调,敲除USP22抑制FaDu细胞增殖。

miR-30a-5p调控USP22对MPP^(+)诱导的SK-N-SH细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨miR-30a-5p对1甲基4苯基吡啶(MPP^(+))诱导的人神经母细胞瘤(SK-N-SH)细胞增殖和凋亡的影响及作用机制。方法体外培养SK-N-SH细胞,分为对照组(NC组)、MPP^(+)组(1 mmol/L MPP^(+)作用细胞24 h)、MPP^(+)+miR-30a-5p组(1 mmol/L MPP^(+)作用转染miR-30a-5p模拟物的细胞24 h)、MPP^(+)+miR NC组(1 mmol/L MPP^(+)作用转染模拟物阴性对照序列的细胞24 h)、MPP^(+)+siUSP22组(1 mmol/L MPP^(+)作用转染USP22小干扰RNA的细胞24 h)、MPP^(+)+si-NC组(1 mmol/L MPP^(+)作用转染乱序无意义阴性序列的细胞24 h)、MPP^(+)+miR-30a-5p+pcDNA USP22组(1 mmol/L MPP^(+)作用共转染miR-30a-5p模拟物与USP22过表达载体的细胞24 h)和MPP^(+)+miR-30a-5p+pcDNA NC组(1 mmol/L MPP^(+)作用共转染miR-30a-5p模拟物与空载体的细胞24 h),实时荧光定量PCR(RTqPCR)检测各组细胞中miR-30a-5p和USP22 mRNA表达水平,蛋白印迹(Western Blot)法检测各组细胞中USP22蛋白表达水平,细胞计数试剂盒8(CCK8)检测各组细胞存活率,流式细胞仪检测组各组细胞凋亡率,Western Blot检测各组细胞中细胞周期蛋白D1(CyclinD1)和活化的半胱天冬酶-3(Cleaved caspase-3)蛋白表达水平。双荧光素酶报告基因实验验证miR-30a-5p与USP22靶向调控关系。结果与NC组比较,MPP^(+)组细胞中miR30a 5p表达水平显著降低(P<0.05),USP22的mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.05),细胞存活率和CyclinD1蛋白表达水平显著降低(P<0.05),细胞凋亡率和Cleaved caspase-3蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。与MPP^(+)+miRNC组比较,MPP^(+)+miR-30a-5p组细胞存活率和CyclinD1蛋白表达水平显著升高(P<0.05),细胞凋亡率和Cleaved caspase-3蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。与MPP^(+)+siNC组比较,MPP^(+)+siUSP22组细胞存活率和CyclinD1蛋白表达水平显著升高(P<0.05),细胞凋亡率和Cleaved caspase-3蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。与MPP^(+)+miR-30a-5p+pcDNA NC组比较,MPP^(+)+miR 30a5p+pcDNA USP22组细胞存活率和CyclinD1蛋白表达水平显著降低(P<0.05),细胞凋亡率和Cleaved caspase-3蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。miR-30a-5p在SK-N-SH细胞中靶向负调控USP22表达。结论上调miR-30a-5p表达可促进MPP^(+)诱导的SK-N-SH细胞增殖,并抑制细胞凋亡,其作用机制与下调细胞中USP22表达有关。

usp22和ki67在大肠癌组织中的表达及其临床意义

目的检测usp22和ki67在大肠癌组织中的表达,探讨其与大肠癌发展的关系以及两者的相关性。方法采用免疫组织化学法检测usp22和ki67在大肠癌和正常肠组织中的表达。结果在大肠癌中,usp22的阳性表达率以及染色强度均随组织分化程度的降低而呈现出上升趋势(P<0.05)。ki67的阳性表达率随分化程度的降低而呈现出上升趋势(P<0.05)。usp22与ki67的表达呈现正相关性。结论在大肠癌组织中usp22的高表达与ki67的表达升高显示二者存在正相关,对大肠癌的发生发展起一定促进作用。

USP22和Nanog在结肠癌组织中的表达及临床意义

目的:研究USP22和Nanog在结肠癌组织中的表达及其与临床病理因素的关系.方法:采用免疫组织化学法检测USP22和Nanog在80例结肠癌组织,35例结肠腺瘤组织及40例癌旁正常结肠组织中的表达.结果:USP22在结肠癌中的阳性表达率明显高于结肠腺瘤和正常结直肠黏膜组织(P<0.05),但结肠腺瘤和癌旁正常组织的阳性表达率差异无统计学意义(P>0.05),Nanog在癌旁正常组织,结肠腺瘤和结肠腺癌中的阳性表达率差异均有统计学意义(P<0.05).USP22和Nanog的表达与Dukes分期,组织学分级,淋巴结转移以及浸润深度均有关(P<0.05);USP22和Nanog在结肠癌组织中的表达呈正相关(r=0.509,P<0.01).结论:USP22和Nanog的表达与结肠癌的发生发展有关,二者在结肠癌的细胞增殖、浸润和转移中有协同作用.他们有望成为结肠癌的早期诊断指标和治疗靶点.

口腔鳞状细胞癌组织中USP22的表达及其意义

目的:检测USP22在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)组织中的表达,并探讨其与OSCC的发生、发展及预后的相关性。方法:应用免疫组化染色法检测USP22在正常口腔黏膜、OSCC组织及转移淋巴结组织中的表达,并采用SPSS17.0软件对结果进行统计学分析。结果:USP22在OSCC组织中的阳性率和染色强度随组织分化程度的降低而呈增高趋势(P<0.05),USP22在转移的淋巴结组织中的表达较OSCC组织更为明显(P<0.05),OSCC病人术后5年生存率随着USP22表达的升高而降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:USP22在OSCC的发生、发展及转移起到一定作用。USP22蛋白的高表达提示病人有一个差的预后。

USP22 siRNA通过TIMP-2抑制人结肠癌细胞系SW480侵袭

目的探讨泛素特异性蛋白酶22(USP22)调控基质金属蛋白酶组织抑制物-2(TIMP-2)对人结肠癌细胞侵袭的影响。方法 Western blot检测USP22在不同结肠癌细胞系的表达,选定高表达USP22的SW480细胞用于后续实验;将SW480细胞分为对照组(NC siRNA)和转染组;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测对照组及转染组Hif-1α、Hif-1β、cdc42、RhoA、Smad7、TIMP-1和TIMP-2 mRNA表达;RT-qPCR和Western blot检测对照组及2种转染组中USP22及TIMP-2蛋白的表达;Transwell小室法检测细胞的侵袭能力。结果 USP22在SW480细胞中表达量较高(P<0.05);与对照组相比敲低USP22基因后,TIMP-2表达及SW480细胞侵袭能力均下降(P<0.05);敲低TIMP-2基因后,USP22表达无明显变化,SW480细胞侵袭能力下降(P<0.05)。结论 USP22可能通过调控TIMP-2的表达抑制人结肠癌细胞的侵袭与转移。