UTP23基因在上皮性卵巢癌紫杉醇耐药细胞中的表达及对紫杉醇化疗耐药的影响

目的:探讨UTP23基因在上皮性卵巢癌紫杉醇耐药细胞中的表达及对紫杉醇化疗耐药的影响。方法:采用逆转录聚合酶链式反应(RTPCR)和蛋白免疫印迹(Western blot)法检测上皮性卵巢癌紫杉醇耐药细胞中UTP23、P-糖蛋白(Pgp)、多药耐药基因(MDR1)的mRNA表达水平,使用特异性UTP23-siRNA转染上皮性卵巢癌紫杉醇耐药细胞,使用RT-PCR和Western blot法检测转染后UTP23、P-gp、MDR1基因的表达,使用MTT法检测UTP23-siRNA对上皮性卵巢癌紫杉醇耐药细胞生长的影响及耐药性。结果:耐药组UTP23基因mRNA表达水平明显低于敏感组(P<0.05),耐药组P-gp、MDR1基因mRNA表达水平明显高于敏感组(P<0.05);转染组与未转染组、阴性对照组相比较,UTP23 mRNA水平明显升高(P<0.05),未转染组与阴性对照组相比较,UTP23 mRNA水平和蛋白水平差异无统计学意义(P>0.05);转染组与未转染组、阴性对照组相比较,P-gp、MDR1 mRNA表达水平明显下降,差异有统计学意义(P<0.05),未转染组与阴性对照组相比较,P-gp、MDR1 mRNA表达水平无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05);紫杉醇对UTP23-siRNA转染后上皮性卵巢癌耐药细胞的IC50浓度明显高于未转染组和阴性对照组(P<0.05)。结论:UTP23基因在上皮性卵巢癌紫杉醇耐药细胞中低表达,其可能通过间接调控MDR1及P-gp的表达而参与上皮性卵巢癌紫杉醇细胞对紫杉醇的耐药。

UTP23基因在A2780/Taxol细胞中表达及对紫杉醇化疗耐药的影响

目的探讨上皮性卵巢癌紫杉醇耐药细胞(A2780/Taxol)中UTP23基因表达水平及其对紫杉醇化疗耐药的影响。方法利用Real-Time PCR与Western blot分别从基因与蛋白表达水平检测A2780/Taxol细胞中UTP23的表达水平,通过脂质体在A2780/Taxol细胞中特异性瞬时过表达UTP23基因,利用MTT细胞增殖法观察过表达UTP23基因对A2780/Taxol细胞药物敏感性的影响;通过Real-Time PCR检测A2780/Taxol细胞过表达UTP23后抗凋亡基因Bcl-2蛋白表达水平。结果 A2780/Taxol中UTP23的m RNA表达水平降低,约为A2780细胞的50%,UTP23蛋白表达水平下降,约为A2780细胞的48%(P<0.01);相对于阴性转染组,UTP23基因过表达可显著提高A2780/Taxol细胞中UTP23基因表达水平(P<0.05);相对于阴性转染组,UTP23基因过表达A2780/Taxol细胞对紫杉醇的敏感性显著提高(P<0.01);与阴性转染组相比,过表达UTP23基因后A2780/Taxol细胞Bcl-2基因表达水平显著下降(P<0.05)。结论 UTP23基因在A2780/Taxol细胞中低表达,可能通过促进Bcl-2基因表达,从而参与A2780/Taxol细胞的耐药作用。