Ubiquitin基因介导下的PRRSV GP5基因免疫特性研究

目的:探讨泛素基因对GP5基因免疫的影响。泛素-蛋白酶体途径是一种高效蛋白降解途径,主要负责真核细胞内蛋白选择性降解。方法:本研究将ORF5 DNA片段克隆到含泛素(Ub)基因的表达载体pCMV-Ub和pCMV载体,构建成重组质粒pCMV-Ub-GP5和pCMV-GP5。两种质粒DNA肌肉注射免疫BALb/c小鼠后,分别检测体液免疫反应和细胞免疫反应,比较GP5单基因和Ub-GP5融合基因DNA免疫所诱生免疫应答的强度。结果:二者均可诱生PRRSV ELJSA抗体和中和抗体,其抗体水平无明显差别,但Ub-GP5融合基因诱生的淋巴细胞反应和CTL反应明显高于GP5基因。结论:泛素基因可以促进GP5诱生细胞免疫反应。

大鼠酒精性脂肪肝中Fbw7的表达

目的分析大鼠酒精性脂肪肝Fbw7 mRNA及蛋白的表达量,研究其在酒精性脂肪肝发病机制中的作用。方法利用酒精灌胃的方法建立大鼠酒精性脂肪肝模型,于12周末处死大鼠。肝脏石蜡切片HE染色观察病理学改变,采用荧光定量PCR及Western blot方法测定大鼠肝组织Fbw7 mRNA含量及蛋白表达量。结果光镜下,模型组肝脏出现明显脂肪病变,肝组织中甘油三酯含量明显高于正常对照组(P<0.01),Fbw7 mRNA及蛋白水平亦降低(P<0.01),并与甘油三酯含量呈负相关。结论大鼠酒精性肝病时,Fbw7 mRNA及蛋白表达下降,可能在酒精性脂肪肝发病机制中发挥重要作用。

泛素-蛋白酶体系统在心血管疾病中的研究进展

泛素-蛋白酶体系统(UPS)是真核细胞中蛋白质代谢和蛋白质质量控制重要系统,泛素分子主要通过泛素活化酶、泛素偶联酶、泛素结合酶以及泛素-蛋白连接酶与靶蛋白结合形成多泛素链,从而将底物蛋白泛素化并降解。在心肌细胞肥大和血管平滑肌细胞增殖中通过调节蛋白质合成而控制细胞生长的机制已经被广泛研究,但内源性蛋白在心血管系统中的降解受到的关注较少。UPS负责70%~90%内源性蛋白质的降解,其在多种血管病变的病理生理学过程如氧化应激、炎症、泡沫细胞形成以及动脉粥样硬化的过程起着核心作用,并通过靶向降解信号和结构蛋白影响心脏细胞的结构和功能,参与了心肌病和心力衰竭的发生。