硫化氢急性中毒大鼠肺组织细胞因子和核因子κB的改变及乌司他丁的影响

目的探讨硫化氢（H墨）急性中毒大鼠肺组织TNF-α、IL-6、IL-10及核因子14B（NF-KB）的动态变化及乌司他丁（UTl）对其的影响。方法将96只清洁级SD大鼠随机分为正常对照组（NS组，n=8）．UTI对照组（UTI组，n=8），H2s染毒模型组（H2s组，n=40）和UTI干预组（H2S＋UTI组，n=40），分别予以空气、H2s及UTI。建模后在不同时点处死后采用ELISA法和RT-PCR法测定肺组织中IL-6、IL-10、TNF—α的水平和mRNA表达变化：RT—PCR法和Westernblot法检测肺组织NF-KBmRNA和蛋白的表达；并观察肺组织病理学改变。结果与NS组比较，2、6、12、24、48hH2s组大鼠肺组织TNF-OC、IL-6、IL-10水平和mRNA表达以及NF—KBmRNA和蛋白表达均明显升高（均P〈0．01）；与H2s组比较。H2s＋UTI组2、6、12、24、48hTNF-α、IL-6水平和mRNA表达以及NF—KBmRNA和蛋白表达均明显降低（P〈0．05或O．01）。IL-10水平和mRNA表达明显升高（均P〈0．01）。光镜下见H2S组在染毒后24h肺组织损害明显，H2S＋UTI组肺损伤有所减轻。结论H2S吸入性中毒可致急性肺损伤，早期肺组织中NF-KB表达增加，细胞因子TNF-α、IL-6及IL-10水平升高，而UTI干预能显著降低NF-KB表达及TNF-α、IL-6水平，提高抗炎因子IL-10水平，减轻肺损伤。

硫化氢急性中毒大鼠肺组织氧化应激和Nrf2基因表达及乌司他丁的影响

目的 研究硫化氢急性中毒大鼠肺组织氧化应激水平及核转录因子NF-E2相关因子2（nuclear factor E2-related factor 2,Nrf2）基因表达的变化及乌司他丁（ulinastatin,UTI）的影响.方法 将96只清洁级SD大鼠随机分为正常对照组（8只）、UTI对照组（8只）、硫化氢染毒组（40只）、UTI干预组（40只）.正常对照组和UTI对照组大鼠于染毒柜内吸人与硫化氢同样流量的空气1h,UTI对照组大鼠立即腹腔注射UTI（10万U/kg）,2h后处死.硫化氢染毒组和UTI干预组大鼠在染毒柜内吸入硫化氢（浓度为283.515 mg/m3）1h,UTI干预组大鼠立即腹腔注射UTI（10万U/kg）,两组大鼠分别于2、6、12、24、48 h处死,每组8只.检测肺组织中丙二醛（MDA）含量及超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化氢酶（GSH-Px）活力和谷胱甘肽（GSH）含量及Nrf2 mRNA的表达,观察肺组织病理学改变并行肺损伤评分.结果 与正常对照组比较,2、6、12 h硫化氢染毒组大鼠肺组织中SOD、CAT活力和GSH含量及2、6、12、24h GSH-Px活力明显降低,差异有统计学意义（P＜0.01或P＜0.05）；2、6、12、24h硫化氢染毒组大鼠肺组织中MDA含量明显升高,差异有统计学意义（P＜0.01）.与相应时间点硫化氢染毒组比较,UTI干预组6、12h时GSH-Px活力,2、6、12h时CAT活力,2、6、12、24h时GSH含量及2、6、12、24、48 h时SOD活力明显升高,差异均有统计学意义（P＜0.01或P＜0.05）；UTI干预组2、6、12h时MDA含量明显低于相应时间点硫化氧染毒组,差异有统计学意义（P＜0.01）.染毒后2、6、12、24 h,硫化氢染毒组肺组织中Nrf2 mRNA表达（0.314±0.011、0.269±0.010、0.246±0.011、0.221士0.018）明显高于正常对照组（0.149±0.012）,差异有统计学意义（P＜0.01）；与相应时间点硫化氢染毒组比较,2、6、12、24、48 h UTI干预组的Nrf2 mRNA表达（0.383：±-0.017、0.377±-0.014、0.425±0.017、0.407±0.011、0.381±0.010）明显升高,差异均有统计学意义（P＜0.01）.光学显微镜下观察可见,硫化氢染毒组染毒后24h大鼠肺组织损害明显,UTI干预组大鼠肺损伤较硫化氢染毒组有所减轻.UTI干预组12、24、48 h时肺损伤评分明显低于相应时间点硫化氢染毒组,差异有统计学意义（P＜0.01）.结论 氧化应激和Nrf2活化是参与硫化氢中毒急性肺损伤的重要因素,UTI能抑制氧自由基产生,纠正氧化还原失衡,上调Nrf2 mRNA表达水平,减轻氧化应激损伤,对肺组织损伤有保护作用.

乌司他丁对硫化氢急性中毒大鼠肺组织氧化应激损伤的干预作用及机制研究

目的 观察硫化氢（hydrogen sulfide,H2S）急性中毒大鼠肺组织血红素氧合酶-1（heme oxygenase 1,HO-1）、醌氧化还原酶-1（NAD（P）H：quinine oxidoreductase 1,NQO-1）和核转录因子红系相关因子-2（nuclear factor E2-related factor 2,Nrf2）的动态变化及乌司他丁（ulinastatin,UTI对其的影响.方法 将清洁级SD大鼠96只随机（随机数字法）分为健康对照组（NS组,n=8）,UTI对照组（UTI组,n=8）,H2S染毒模型组（H2S组,n=40,采用在染毒柜内暴露吸入体积分数200×10-6的H2S1h,构建H2S急性染毒模型）和UTI干预组（H2S＋UTI组,n=40,建立模型后立即腹腔注射UTI 10万U/kg）.后两组大鼠于染毒后2、6、12、24、48 h时点麻醉后活杀,留取肺标本.观察大鼠行为学变化,ELISA法测定肺组织中HO-1和NQO-1活力的动态变化；RT-PCR法检测肺组织HO-1、NQO-1和Nrf2 mRNA表达,Western blot法检测Nrf2蛋白表达.观察肺组织病理学改变并行肺损伤评分.结果 与NS组比较,H2S组在染毒后2、6、12h时点HO-1活力和mRNA表达均明显升高（P＜0.01）,其中2h呈高峰；与同时间点H2S组比较,H2S＋ UTI组染毒后6、12、24、48 h时点HO-1活力和mRNA表达显著升高（P＜0.01）.与 、NS组比较,H2S组在染毒后2、6、12、24 h时点NQO-1活力和mRNA表达均明显升高（P＜0.01）其中2h呈高峰；与同时间点H2S组比较,H2S＋UTI组染毒后6、12、24、48 h时点NQO-1活力和mRNA表达显著升高（P＜0.01）.与NS组比较,H2S组在染毒后2、6、12 h时点Nrf2mRNA和蛋白表达均明显升高（P＜0.01或P＜0.05）,其中2h呈高峰；与同时间点H2S组比较,H2S＋UTI组染毒后6、12、24、48 h时点Nrf2 mRNA和蛋白表达显著升高（P＜0.01）.光镜下,H2S组在染毒后24 h大鼠肺组织损害明显；H2S＋UTI组大鼠肺损伤较H2S组有所减轻.在染毒后12、24、48 h时点H2S＋UTI组的肺损伤评分明显低于H2S组（P＜0.01）.结论 HO-1、NQO-1和Nrf2参与了H2S中毒急性肺损伤的病理生理学过程；UTI干预治疗能显著提高HO-1、NQO-1及Nrf2的活力及表达,减轻H2S中毒急性肺损伤.