大黄通便片中非法成分土大黄苷的定性筛查和定量测定研究

目的:建立大黄通便片中土大黄苷的定性筛查和定量测定方法。方法:采用薄层色谱(TLC)法初筛,高效液相色谱(HPLC)法定量测定及超高效液相色谱-质谱联用(UHPLC-MS)法定性确证。结果:TLC法检测结果显示专属性强,耐用性好。HPLC法方法学考察结果显示:土大黄苷质量浓度在2.59~259.6μg·mL^(-1)范围内呈良好的线性关系(R^(2)=0.9999);精密度、重复性、稳定性试验RSD均小于2.0%;平均加样回收率为97.89%(RSD=0.61%)。UHPLC-MS/MS法确证结果与TLC、HPLC法结果一致,阳性检出样品与土大黄苷对照品呈现同一保留时间的提取离子对(421.1→258.9,421.1→199.0)。结论:该方法灵敏、准确,可作为大黄通便片中非法成分土大黄苷的检查方法。

加速溶剂萃取-超高效液相色谱-串联质谱法测定婴幼儿配方乳粉中17种磺胺类药物残留

建立了加速溶剂萃取(ASE)-超高效液相色谱-串联质谱法(UHPLC-MS/MS)测定婴幼儿配方乳粉中17种磺胺类药物残留的方法,并对方法的线性、灵敏度、回收率及基质效应等进行验证分析,同时将该方法应用于市场采集的婴幼儿配方乳粉样品中磺胺类药物残留进行分析和确证。试验结果表明,17种磺胺类药物在0.5~100μg·kg^(-1)范围内呈线性,决定系数均大于0.998,不同添加浓度下的回收率为75.3%~103.6%,相对标准偏差(RSD)均小于11.0%,基质效应为0.4~1.0,检出限为0.1~3.0μg·kg^(-1),定量限为0.3~10μg·kg^(-1)。该方法具有萃取便捷、灵敏度和准确度高等特点,可同时对婴幼儿配方乳粉中17种磺胺类药物残留进行测定。

超高效液相串联质谱仪快速测定鱼肉中黄霉素A含量

[目的]建立鱼肉中黄霉素A含量的快速定量检测方法。[方法]样品经氨化甲醇溶液提取后,加入水饱和正己烷除去脂肪,取适量净化液氮气吹干、复溶后经超高效液相串联质谱仪测定。[结果]黄霉素A在1.0~50 ng/mL范围内线性关系良好,相关系数r>0.999,鱼肉中黄霉素A的平均回收率为64.97%~71.43%,相对标准偏差(RSD)为2.10%~13.40%,方法检出限为1.0μg/kg,定量限为3.0μg/kg。[结论]超高效液相串联质谱仪具有简单快捷、对环境友好、准确度高、灵敏度好等优势,可用于快速大批量测定鱼肉及水产制品中黄霉素A残留量。

木瓜蛋白酶中具有水解壳聚糖活性的酶组分分离纯化

采用超滤、制备电泳对木瓜蛋白酶进行分离纯化。结果显示:超滤后木瓜蛋白酶的蛋白酶和壳聚糖酶比活力分别从435.10U/mg和2.17U/mg提高到531.39U/mg和2.65U/mg,纯化倍数均提高了1.22倍。制备电泳图谱上显示有五条明显的酶条带,酶活性测定显示条带2具有较高的壳聚糖酶比活力。采用SDS-PAGE和HPLC对此纯化酶组分进行纯度鉴定,结果显示为单一条带和单一峰,说明木瓜蛋白酶中存在具有水解壳聚糖活力的酶组分。HPLC-MS/MS测定该纯化酶组分的氨基酸序列为MRITISGSPG SGTTTLGRSI AEKYSYRYVS AGEVFRGL AK ERNMDLAAFG KIAETDPAID LEIADARQKEI GESSDDIILE GRLAGWMVEN ADLKILLCAS PECRSTRIAA REGLTEKQ AFEMTIERE ACEAGRYMEYYEI DILDFSPYDL ILNSETFSAN ELFAIVDAAVS SLLKRE。

分散固相萃取-HPLC及UPLC-MS/MS法测定豆干和调味品中的二甲基黄和二乙基黄

建立豆干和调味品中二甲基黄、二乙基黄的高效液相色谱初步筛查方法和超高效液相色谱-串联质谱确证方法。样品用酸化乙腈提取,经旋转蒸发浓缩和分散固相萃取净化后,采用高效液相色谱仪进行筛查,遇到阳性样品时,结合超高效液相色谱-串联质谱法进行确证分析,并对方法的有效性进行验证。结果表明,在高、中、低3个水平进行加标回收实验,高效液相色谱法和超高效液相色谱-串联质谱法回收率分别在92.2%~102.6%和84.7%~110.7%之间,相对标准偏差分别为0.14%~6.71%和0.16%~6.43%。高效液相色谱法成本较低、操作简单,适用于样品的筛查工作;超高效液相色谱-串联质谱法灵敏度高、定性准确性强,适用于阳性样品的确证。

香肠中红色2G的HPLC法及UPLC-MS/MS检测

建立香肠中红色2G色素的高效液相色谱法(HPLC)测定和确证的超高压液相色谱-质谱/质谱法(UPLC-MS/MS)。以0.662mol/L氨水为提取液,样品均质提取两次,离心后用C18柱净化,采用高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)检测,流动相为乙酸-乙酸铵缓冲液-甲醇(55:45,V/V),等度洗脱,流速为1mL/min,检测波长为530nm,阳性结果用UPLC-MS/MS确证。HPLC-DAD法在0.0212～1.06mg/L范围内,红色2G的峰面积与其相应浓度呈现良好相关性,r>0.999,方法测定限为0.106mg/kg,在空白样品中添加已知浓度的红色2G色素,平均回收率在79.0%～86.5%之间,相对标准偏差(RSD)在3.19%～5.06%之间。UPLC-MS/MS法的测定限为0.005mg/kg,平均回收率在75.5%～80.2%之间,RSD在3.62%～9.97%之间。该方法可用于香肠中红色2G的检测及确证。

Comparative pharmacokinetics of five saponins after intravenous administration of TSFS injection and TSFS injection plus TFFG in rats under different physiological states

Sanqi is a popular traditional Chinese medicine and commonly used for promoting blood circulation and removing blood stasis. Notoginsenoside R1, ginsenoside Rg1, Re, Rb1 and Rd are the major active constituents of Sanqi. The purpose of the study was to investigate the pharmacokinetic behavior of the five active constituents from total saponin from Sanqi when it was used in the blood stasis animals or in combination with Gegen. The concentrations of the five active constituents in rat plasma were determined by an ultra-HPLC-ESI-MS/MS method. The main pharmacokinetic parameters were calculated and statistically analyzed using the unpaired student＆#39;s t-test. It was found that the pharmacokinetic parameters of notoginsenoside R1, ginsenoside Rg1 and Rb1 represented a statistically significant difference （Po0.05） between the normal rats and the blood stasis rats after administration of total saponin from Sanqi （TSFS）. And there were statistically significant differences （Po0.05） in the pharmacokinetic parameters of all the five constituents between administration of TSFS alone and combined with total flavonoid from Gegen （TFFG） in blood stasis rats. It suggested that the pharmacokinetic behavior of the active constituents from TSFS could be changed when it was used in blood stasis animals or in combination with TFFG.

SPE净化-液质联用测定氨基糖苷类药物残留

建立了生鲜乳中新霉素、链霉素、大观霉素、卡那霉素等4种氨基糖苷类抗生素残留的超高效液相色谱-串联质谱(UPLCMS/MS)检测方法。样品经质量分数为5%的三氯乙酸溶液提取,再经弱阳离子固相萃取柱净化;采用CORTECS HILIC液相色谱柱分离,电喷雾串联四级杆质谱检测。对样品的前处理、液相色谱及质谱条件进行了优化。结果表明:4种物质在质量浓度为100～2000μg/L范围内线性良好,方法的检出限在10～20μg/kg之间,加标回收率在74.5%～95.4%之间。该方法灵敏、准确、简单,适合生乳中对这4种氨基糖苷类抗生素的同时检测。

超高效液相色谱-串联质谱法检测饲料中喹烯酮和喹乙醇

本文应用超高效液相色谱-串联质谱技术,建立了饲料中喹烯酮和喹乙醇的检测方法。样品经0.1%甲酸乙腈溶液提取后,通过PRiME HLB固相萃取柱净化;采用0.1%甲酸乙腈溶液作为流动相进行梯度洗脱,经AtlantisT3色谱柱分离,通过多反应监测模式进行测定。在5～500 ng/mL时线性关系良好,相关系数均大于0.996。在0.2、0.4、2 mg/kg添加水平下,平均回收率为80%～95.5%,相对标准偏差均小于10%。检测限为0.06 mg/kg,定量限为0.2 mg/kg,该法准确、简单、快速。

UPLC-MS/MS检测2种中兽药制剂中非法添加庆大霉素的研究

应用超高效液相色谱－串联质谱技术建立了兽用中药制剂穿心莲注射液和鱼腥草注射液中非法添加庆大霉素的检测方法。样品经水溶解后稀释，采用20 mmol／L七氟丁酸（ HFBA）乙腈与20 mmol／L HFBA水溶液作为流动相进行梯度洗脱，经ACQUITY HSS PFP色谱柱分离，通过多反应监测模式进行测定。庆大霉素在0．02～2μg／mL的范围内线性关系良好，相关系数0．9998。平均回收率为98．2％～100．3％，相对标准偏差小于2．4％。检测限为2 mg／mL，定量限为4 mg／mL，该法准确、简单、快速。

超高效液相色谱-串联质谱法检测清瘟败毒散中非法添加金刚烷胺的研究

应用超高效液相色谱-串联质谱技术，建立了兽用中药制剂清瘟败毒散中非法添加金刚烷胺的检测方法。样品经提取液提取后，稀释。采用0．2％甲酸水溶液与甲醇作为流动相进行梯度洗脱，经BEH C18色谱柱分离，通过多反应监测模式进行测定。金刚烷胺在0．05～25 ng/mL的范围内线性关系良好，相关系数大于0．999；平均回收率为86．9％～95．2％，批内、批间相对标准偏差均小于3．8％，检测限为0．025 mg/g，定量限为0．1 mg/g。该法准确、简单、快速，可用于清瘟败毒散中非法添加金刚烷胺的检测。

UPLC-MS/MS法同时测定不同动物源性食品中硝基呋喃代谢物残留

采用超高效液相色谱串联质谱法(UPLC-MS/MS),建立了猪肉、猪肝、螃蟹和虾4种不同动物源性食品中同时测定4种硝基呋喃类药物代谢物的检测方法,优化了样品前处理的条件以及UPLC-MS/MS仪器条件,样品经盐酸水解,2-硝基苯甲醛衍生,乙酸乙酯提取,ESI正离子模式扫描,多反应监测(MRM)测定。结果表明:采用本方法在4种动物源性样品基质中4种代谢物浓度在1~100 ng/mL范围内线性关系良好;4种代谢物的平均回收率为84.6%~118.1%;相对标准偏差RSD为2.9%~8.1%;在4种样品基质中,3-氨基-2-唑烷基酮(AOZ)的检出限为0.1μg/kg,定量限为0.4μg/kg,氨基脲(SEM)和5-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基酮(AMOZ)的检出限为0.2μg/kg,定量限为0.5μg/kg,1-氨基乙内酰脲(AHD)的检出限为0.5μg/kg,定量限为1.0μg/kg,均满足国家标准要求。采用本方法对市场上随机购买的80份动物源性样品和鸡肉中硝基呋喃代谢物质控样进行检测,结果与国家标准方法GB/T 20752-2006测定结果相近,质控样的检测结果在量值范围内。该方法前处理操作简便,较传统方法节省时间和成本,可为硝基呋喃类药物残留检测技术提供理论支撑和参考。

超高效液相色谱-串联质谱法检测双黄连口服液中3种有效成分

应用超高效液相色谱-串联质谱技术，建立了同时测定双黄连口服液中3种有效成分（黄芩苷、绿原酸、连翘苷）的检测方法。采用BEHC18色谱柱，以0．2％甲酸-乙腈作为流动相进行梯度洗脱。在ESI负离子模式下，通过多反应监测模式进行测定。黄芩苷、绿原酸、连翘苷的线性范围分别为0．02—10g／mL（r=0．9991）、0．02-10g／mL（r=0．9998）、0．025—10g／mL（r=0．9996）。定量限分别为0．02mg／kg、0．02mg／kg、0．025mg／kg。3种成分的回收率为98％-101．7％，相对标准偏差均小于2．5％。该法快捷、准确、重复性好，可用于双黄连口服液中的3种有效成分含量的同时测定。

超高效液相色谱-三重四极杆质谱测定盐酸法舒地尔中2种烷基磺酸酯类基因毒杂质

目的 建立盐酸法舒地尔中2种烷基磺酸酯类基因毒杂质的超高效液相色谱-三重四极杆质谱(UPLC-MS/MS)测定方法。方法 采用Waters ACQUITY UPLC BEH C_(18)色谱柱(50 mm×2.1 mm,1.7μm),以0.1%甲酸水溶液-0.1%甲酸甲醇溶液为流动相进行等度洗脱,流速0.3 ml/min,柱温40℃,进样量1μl;在正离子电喷雾多反应监测模式(MRM)下测定5-异喹啉磺酸甲酯、5-异喹啉磺酸乙酯的含量。结果 2种烷基磺酸酯类基因毒杂质分别在2.05~205.32,1.90~190.24 ng/ml浓度范围内线性关系良好,相关系数(r)分别为0.9997,0.9998,方法检出限分别为0.51,0.48 ng/ml,定量限分别为2.05,1.90 ng/ml,平均加标回收率为102.84%~107.11%。7批样品中均未检出2种烷基磺酸酯类基因毒杂质。结论 该方法专属性强、灵敏度高、操作简单、定量准确,适用于盐酸法舒地尔中2种烷基磺酸酯类基因毒杂质的测定。

牛羊肉中6种抗肝片吸虫药残留测定的HPLC-MS/MS方法研究

建立了超高效液相色谱-串联质谱检测牛羊肉中6种抗肝片吸虫药残留的分析方法。样品经乙腈溶液提取和MAX固相萃取柱净化后,采用WatersC18色谱柱(50mm×2.1mm,1.7μm)分离,以乙腈和0.1%(v/v)甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱。在电喷雾电离源(ESI)、负离子模式下,采用MRM监测模式进行数据采集。结果表明,6种抗肝片吸虫药浓度在0.5~50μg/L内均呈良好的线性关系,相关系数(R2)均大于0.997,方法检出限(LOD)为0.2~0.8μg/kg。在2、10、100μg/kg的加标水平下,6种抗肝片吸虫药的回收率为72.3%~107%,相对标准偏差为1.5%~9.2%。该方法满足动物组织中该类药物多残留的检测要求,为应对动物源性食品中筛查风险隐患和监控非法添加提供了新思路。