孔石莼(Ulva pertusa Kjellm)凝集素提取工艺的研究

目的研究孔石莼(Ulva pertusa Kjellm)凝集素的最佳提取条件。方法通过研究各因素(缓冲液、料液比、浸泡时间、烘干温度)对孔石莼(Ulva pertusa Kjellm)凝集素(lectin)(UPL)提取液血凝活性的影响,得出每个因素的最佳提取效果。从各个单因素中选出提取的最适条件及与最适条件相临的2个水平(共3个水平)进行4因素3水平的正交试验。结果温度为50℃、缓冲液为pH 7.2PBS、料液比为1∶15、浸泡时间为15h。结论相比较其它条件,这一组合对孔石莼提取效果最好。

孔石莼(Ulva pertusa)中一种抗TMV活性蛋白的纯化及其特性(英文)

采用硫酸铵盐析和阳离子交换柱层析(CM—Sepharose Fast Flow)，从孔石莼(Ulva pertusa Kjellm)藻体中分离纯化得到1个蛋白，命名为UPCM40。经SDS—PAGE确定其分子量约为36kD，Native—PAGE可知其为单一组分；该蛋白不含糖；其全波长扫描结果显示，该蛋白在190～220nm和250～300nm处有特征吸收峰，在250～300nm范围中的最大吸收峰在270～275nm处。经测定发现该蛋白具较好的抗烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus，TMV)的活性，当蛋白质浓度为50μg/mL时，对TMV的抑制效果为：在枯斑寄主心叶烟上的侵染抑制率达85．6％，在苋色藜上为90．2％。测定该蛋白对6种供试真菌的抑制效果发现，对镰刀菌(Fusarium oxysporum f．sp．cucumerinum)、立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)和香蕉炭疽菌(Gloeosporium musarum)均有一定程度的抑菌作用，但抑制活性很低。

孔石莼多糖降血脂活性的初步研究

为开发我国的孔石莼资源,在研究了其多糖化学组成的基础上,进行了孔石莼多糖对高脂血症的活性研究。结果表明:3个剂量的多糖样品组均有显著的降甘油三酯作用;中、高剂量组可显著降低血清中总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),升高高密度脂蛋白胆固醇(HLD-C)从而增加HDL-C/TC的比值;高剂量组的降脂活性与阳性对照药烟酸肌醇酯相近;血清中脂蛋白胆固醇的改善状况有明显的剂量依赖性。并对孔石莼多糖降血脂活性的机理进行了讨论。

气相色谱/质谱法分析孔石莼中的脂肪酸

建立了孔石莼脂肪酸的气相色谱/质谱(GC/MS)测定方法。使用Folch法提取了孔石莼中的总脂,经过2mol/LHCl-甲醇溶液的甲酯化处理后,采用GC/MS法对其脂肪酸组成进行了分离分析,同时结合有机质谱学规律,分别对饱和脂肪酸甲酯、单不饱和脂肪酸甲酯和多不饱和脂肪酸甲酯的裂解规律和质谱特征进行了分析归纳。通过质谱数据库检索和标准品对照,鉴定出孔石莼中的24种脂肪酸,其中9,12,15-十八碳三烯酸、4,7,10,13-十六碳四烯酸和6,9,2,15-十八碳四烯酸3种主要多不饱和脂肪酸占总脂肪酸含量的45.14%。通过对孔石莼中脂肪酸的分析,表明特征离子在脂肪酸甲酯尤其是多不饱和脂肪酸甲酯的定性方面具有很好的应用价值。

孔石莼多糖的分离分析

研究孔石莼中多糖的提取分离方法,并对多糖进行了灰分、总糖、水解硫酸根含量、特性粘度等测定,以及元素分析、单糖气相色谱分析、氨基酸分析、红外光谱和核磁共振光谱等仪器分析。

UV-B辐射增强对海洋大型藻与微型藻种群生长关系的影响

选用孔石莼和青岛大扁藻为海洋大型藻和微型藻的代表,通过室内添加模拟试验研究了UV-B辐射增强对孔石莼(重量固定)与青岛大扁藻(密度不同)种群生长关系的影响。结果表明:(1)在单养情况下,4个UV-B辐射剂量都对孔石莼的生长产生抑制作用;对青岛大扁藻生长的影响却不同,低剂量(U-1)的UV-B辐射对青岛大扁藻的生长有促进作用,而高剂量的UV-B辐射则有显著的抑制作用;且因初始接种密度不同而各异。(2)在共养情况下,微藻对孔石莼的生长表现出一定的抑制作用,随着微藻初始接种密度的增加,其抑制作用亦增加;反之,在共培养的初始阶段(6 d内)孔石莼对微藻的生长也有抑制作用,但后期阶段(9 d后)表现出促进作用。(3)在共培养的同时附加UV-B辐射处理,随着初始接种密度的增加,青岛大扁藻对孔石莼生长的抑制作用更加明显;同时,与共养相比较,孔石莼对微藻生长的抑制作用亦趋于明显。

孔石莼营养成份的研究

对辽宁沿海生长的绿藻——孔石莼的营养成份进行了研究。孔石莼干粉含蛋白质6.03％、粗脂肪3.12％、总糖38.88％、水分12.27％、灰分39.7％,根据气相色谱测得孔石莼多糖是由鼠李糖、葡萄糖、木糖、三碳糖、岩藻糖、半乳糖、甘露糖、阿拉伯糖组成。同时还含有钙、镁、锌、硒等无机元素。实验结果表明:孔石莼可开发研制成有营养价值的功能食品。

尿素包合法纯化孔石莼不饱和脂肪酸

用Folch法提取孔石莼总脂,经皂化后酸化制得脂肪酸,再对脂肪酸进行尿素包合,使其中饱和脂肪酸与不饱和脂肪酸分离,从而提高不饱和脂肪酸的含量。在脂肪酸:尿素:无水乙醇比为1:2:20,温度为4℃,包合12h的条件下进行尿素包合结晶,效果较好,不饱和脂肪酸含量由72·43%增加到96·91%,其中十六碳四烯酸由13·63%增加到22·92%,增加68·16%,十八碳四烯酸由20·99%增加到38·82%,增加84·95%。

孔石莼多糖及其磺化衍生物HU体外结合脂类和胆固醇的研究

目的研究孔石莼多糖及其磺化孔石莼多糖HU在体外结合脂类和胆固醇的能力,并进一步阐明其可能作用的机制。方法在体外模拟人体消化环境,测定孔石莼多糖U及磺化孔石莼多糖HU对脂肪、胆固醇和胆酸盐的结合能力。结果孔石莼多糖进行磺化后显著增强了它对胆固醇和胆盐的结合能力,但相对减弱了它对脂肪的结合能力。结论孔石莼多糖及其磺化衍生物在体外对脂类和胆固醇具有很强的结合能力,孔石莼多糖中硫酸基的含量是影响其吸收脂类和胆固醇的重要因素。

影响辐射小鼠肝脏SOD及MDA活性的孔石莼多糖研究

目的:了解不同相对分子量段孔石莼多糖对因辐射导致小鼠肝脏SOD及MDA活性含量改变的影响。方法:将通过膜分离纯化得到的三种不同相对分子量段的孔石莼多糖(≧100ku、30～100ku及≦30ku)分别给相应设置的三个实验组小鼠进行灌服,另设辐照对照组和空白对照组;辐照后制备各组动物的肝脏组织匀浆,对其SOD和MDA活性进行测定,并对其结果进行比较。结果:孔石莼多糖对辐射降低SOD活性及提高MDA活性均有一定的抑制作用,其中30～100ku和≦30ku两种相对分子量的孔石莼多糖的抑制作用最为显著,具有显著性差异(P<0.01)。结论:相对分子量低的孔石莼多糖对辐射引起小鼠肝脏组织氧化损伤具有一定的抑制作用,由此推断相对较低的分子量段孔石莼多糖具有一定的抗辐射抗氧化作用。

孔石莼多糖对糖尿病小鼠抗氧化能力的影响

目的:研究孔石莼多糖抗氧化活性。方法:采用传统的水提醇沉法提取孔石莼多糖,以四氧嘧啶诱导的糖尿病小鼠为模型,分为孔石莼多糖低、高剂量组、阳性对照组、模型组及正常组。分别以不同剂量孔石莼多糖(250mg/kg、1000mg/kg)、二甲双胍(1000mg/kg)和蒸馏水灌胃,28d后测定小鼠肝脏和肾脏组织中SOD、GSH-Px、CAT活性和MDA含量。结果:高剂量孔石莼多糖能显著提高糖尿病小鼠肝脏和肾脏组织中SOD、GSH-Px和CAT的活性,降低MDA含量。结论:孔石莼多糖具有显著的抗氧化作用。

赤潮异弯藻对孔石莼生长及其某些生理特性的影响

通过实验生态学和生物化学的方法,研究了赤潮异弯藻[Heterosigma akashiwo(Hada)Hada]对孔石莼(Ulva pertusa Kjellman)生长及其叶绿素a(Chl-a)含量、丙二醛(MDA)含量、总抗氧化能力(T-AOC)、过氧化氢酶(CAT)活力、超氧化物歧化酶(SOD)活力和谷胱甘肽过氧化酶(GPX)活力的影响。结果表明:孔石莼的克生作用会明显抑制赤潮异弯藻的生长,同时赤潮异弯藻也会抑制孔石莼的生长,且孔石莼生理生化特性对其有明显的响应。赤潮异弯藻会使孔石莼CAT活力和MDA含量呈现升高的趋势;GPX活力呈现下降的趋势;T-AOC和T-SOD活力呈现先下降后升高趋势;Chl-a含量并无明显变化。推测赤潮异弯藻克生作用诱导孔石莼产生活性氧自由基,是藻体受损伤的主要原因。

IDENTIFICATION OF CYTOKININ IN A GREEN ALGAE EXTRACT

Jsopentenyladenosine (i6 Ado) was identified, and trans-zeatin (trans-Z) and trans -zeatin riboside (trans-ZR) were detected by high pressure liquid chromatography (HPLC) but not verified with chromatography-mass spectrometry (GC-MS) analysis of cytokinin from the extracts of green algae (Ulva pertusa (Kjellm), Enteromopha compressa and Monostroma sp.). This indicated that the green algae mixture contained cytokinin - like substances.

孔石莼对养虾废水营养盐吸收的研究

研究了孔石莼对不同浓度养殖废水的水质净化效果.结果表明,孔石莼对水体中氮、磷营养盐的清除效果明显:对NO3--N、NO2--N、NH4+-N、PO43--P移除率分别可达99.8%、99.6%、95.9%、98.7%;对总无机氮的移除率可达98.6%.孔石莼在吸收氨氮同时对硝态氮和亚硝态氮也有吸收,但NH4+-N的吸收大部分在第1天完成,而NO3--N和NO2--N的大部分吸收需要2 d或3 d完成.孔石莼在养殖废水中生长良好,鲜质量逐日增加,日生长率均较大.

孔石莼多糖降血糖作用研究

研究孔石莼多糖(PUPK)的降血糖作用。以四氧嘧啶诱发糖尿病小鼠模型,并分为孔石莼多糖低、中、高剂量组与糖尿病阳性药物组、高糖模型组、多糖对照组及正常小鼠组对照。分别以不同剂量孔石莼多糖、二甲双胍灌胃,实验结束后记录小鼠体重,采血测定小鼠血糖值及组间差异。结果表明:孔石莼多糖对四氧嘧啶高血糖小鼠有显著的降血糖作用,高剂量多糖降血糖效果最佳,作用效果优于二甲双胍,且对正常小白鼠血糖无影响。

孔石莼克生作用对赤潮异弯藻生长和抗氧化系统活性的影响

通过实验生态学和生物化学的方法,研究了孔石莼(Ulva pertusa Kjellman)克生作用对赤潮异弯藻[Heterosigma akashiwo (Hada) Hada]生长及其叶绿素a(Chl-a)含量、可溶性蛋白含量、丙二醛(MDA)含量、总抗氧化能力(T-AOC)、过氧化氢酶(CAT)活力、超氧化物歧化酶(SOD)活力和谷胱甘肽过氧化酶(GPX)活力的影响。结果表明:孔石莼的克生作用会明显抑制赤潮异弯藻的生长,且赤潮异弯藻抗氧化系统活性对其有明显的响应。克生作用会使T-AOC和SOD活力呈现降低的趋势;MDA含量和CAT活力呈现升高的趋势;GPX活力呈现先升高而后下降趋势;Chl-a含量和可溶性蛋白含量并无明显变化。推测孔石莼克生作用诱导赤潮异弯藻产生活性氧自由基,是藻体受损伤的主要原因。

响应面法优化孔石莼多糖提取工艺

目的以响应面分析法优化孔石莼水溶性多糖提取工艺。方法以多糖得率为响应值,考察提取温度、提取时间、料液比对孔石莼多糖提取率的影响。在单因素试验的基础上,利用Box-Behnken中心组合试验和响应面分析法,对孔石莼多糖提取工艺参数进行优化分析。结果孔石莼多糖提取的最优工艺条件为:提取温度91℃,提取时间1.1h,料液比1∶21。提取3次后,多糖得率为10.19%。结论实测值与响应曲面法回归模型的预测值接近,与模型高度拟合,该工艺简洁,得率较高,可用于孔石莼多糖的提取。

孔石莼多糖对辐射诱发小鼠骨髓微核抑制作用研究

目的:孔石莼中含有4种相对分子量的水溶性多糖(151.7、64.5、58.0ku和28.2ku)。了解不同相对分子量段孔石莼多糖对辐射诱发小鼠骨髓细胞微核形成的抑制作用及效果比较。方法:将通过膜分离纯化得到的3种不同相对分子量段的孔石莼多糖(≥100ku、30～100ku及≤30ku)分别给相应设置的3个实验组小鼠进行灌服,另设辐照对照组和空白对照组;辐照后制备各组动物的骨髓涂片,计数多染性红细胞的微核发生率。结果:低相对分子量段的孔石莼多糖对辐射诱发的小鼠骨髓细胞微核具有一定的抑制效应,其中≤30ku相对分子量的孔石莼多糖对其造成的抑制作用最为显著(P<0.01)。结论:低相对分子量孔石莼多糖对辐射引起小鼠染色体损伤具有一定的抑制作用,由此推断低相对分子量孔石莼多糖具有一定的抗辐射作用。

正交法提取孔石莼膳食纤维工艺的研究

目的以孔石莼为原料,采用酶与化学结合的方法提取膳食纤维。方法就影响膳食纤维含量7个因素:酶用量、酶解时间、酶解温度、氢氧化钠浓度、氢氧化钠提取温度、氢氧化钠用量、氢氧化钠提取时间进行了单因素试验和正交试验。结果最佳提取工艺条件为蛋白酶与纤维素酶用量比为20:1,在40℃提取1.5h,用20倍1.5%氢氧化钠溶液在75℃提取2h,其产率达到了21%左右,色泽近淡黄褐色。结论研究确立了提取孔石莼膳食纤维的最佳工艺条件。