ureI和ctB-ureI真核质粒构建及表达分析

目的：构建ureI和ctB—ureI真核表达质粒并分析其在细胞的表达情况。方法：用pIRES-RD2真核表达载体分别在5’端连接ureI和ctB—ureI基因，经双酶切和测序鉴定正确后，相应质粒用脂质体转染HEK293T细胞，用荧光显微镜观察荧光标签，确定质粒的转染率；用人抗幽门螺旋杆菌抗体和马抗CtB抗体，采用免疫荧光和免疫酶组织化学等方法研究该两种真核表达质粒在细胞中目的蛋白表达情况。结果：成功构建了ureI和ctB—ureI的真核表达质粒pIRES—RD2-ureI和pIRES-RD2-ctB—ureI，用此质粒转染HEK293T细胞48～72h后，荧光显微镜显示该两种质粒的转染率约为80％；用免疫荧光和免疫酶组织化学方法表明了该两种基因均能在HEK293T细胞表达并有免疫反应性，表达的ureI主要分布在胞质内或细胞膜附近，ctB—ureI在CtB信号肽引导下分布于HEK293T细胞质、细胞膜附近以及细胞外。结论：成功构建了真核载体pIRES2-DsRed2-ureI和pIRES2-DsRed2-ctB—ureI，目的蛋白表达于HEK293T细胞胞质内并有一定免疫反应性。

腔静脉后输尿管的诊断与治疗

目的：提高对腔静脉后输尿管的认识及治疗水平。方法：回顾性分析12例腔静脉后输尿管患者的临床资料。其主要症状有腰部不适、右。肾绞痛、血尿等；静脉尿路造影、逆行。肾盂造影等多可明确诊断；11例行输尿管端端吻合术，1例行右。肾切除术。结果：随访1～9年，右。肾积水缓解，输尿管通畅，肾功能正常，临床症状消失；1例发现输尿管吻合口上段结石，行输尿管镜碎石后留置双J管，4周后拔除，上述各项检查正常。结论：静脉尿路造影、逆行肾盂造影多能确诊、诊断困难时联合MRU或CT检查可明确诊断，不主张Presman法；手术是其首选治疗方法。

幽门螺杆菌ureI和lpp20乳酸乳球菌表达载体的构建及鉴定

目的以幽门螺杆菌尿素通道蛋白ureI和外膜脂蛋白lpp20为目的基因,分别构建乳酸乳球菌表达重组载体pNZ8112/ureI和pNZ8112/lpp20,为H.pylori乳酸乳球菌活菌口服疫苗的研制奠定实验基础。方法根据幽门螺杆菌尿素通道蛋白UreI和脂蛋白Lpp20的全基因序列,利用PRIMER5.0各设计一对引物,进行PCR扩增,获得ureI和lpp20目的基因片段,将其与分泌表达载体pNZ8112进行连接,通过电击转化进入宿主菌乳酸乳球菌NZ9000细胞内,通过酶切分析,PCR鉴定及测序鉴定,筛选阳性重组体,并进行重组疫苗菌稳定性检测。结果以H.pylori标准株基因组DNA为模板分别扩增出特异的ureI和lpp20基因片段,大小分别为588 bp和528 bp;双酶切及测序鉴定证明成功构建了H.pylori乳酸乳球菌表达重组载体pNZ8112/ureI和pNZ8112/lpp20。结论PCR扩增得到了大小约为588 bp和528 bp的H.pylori ureI和lpp20目的基因片段;并成功构建了幽门螺杆菌ureI及lpp20基因乳酸乳球菌表达重组载体。

成人先天性巨输尿管症的临床治疗

目的探讨成人先天性巨输尿管症的临床治疗方法，评估开放手术与腹腔镜手术的临床治疗效果。方法成人先天性巨输尿管症24例，13例行开放输尿管中下段裁剪输尿管膀胱再植术，11例行腹腔镜输尿管成形术。结果开放手术时间2．0～3．0h，出血60—120ml．住院时间8～12天。腹腔镜手术时间2．0～4．0h，出血20～40ml．住院时间5～8天。两组均于术后3个月拔除双J管，无腰痛和发热。随访3个月-5年输尿管均无梗阻。结论腹腔镜输尿管成形术出血少，损伤小，住院时间短，效果好。

互引系统情报元评价

论述互引系统情报元评价模型研究的主要成果。在引用有向赋权图来表达复杂的互引系统的基础上,综述评价情报元地位的几种模型,指出通常使用的简单统计方法只是上述模型粗略的近似模型,在本原连通条件下给出存在性、唯一性、初值无关性定理,并用图表及实例进行说明。