粗根荨麻不同部位多糖的提取及其对巨噬细胞的调节作用

目的:研究粗根荨麻(Urtica macrorrhiza Hand.-Mazz.)不同部位粗多糖的含量及化学组成,初步评价其对巨噬细胞的调节作用。方法:利用热水提取、乙醇分级沉淀的方法分别制备粗根荨麻根、茎、叶粗多糖;通过高效液相色谱法分析其分子量及单糖组成;全波长扫描及红外光谱分析其结构特征;MTT法研究其细胞毒性;中性红染色法考察其对巨噬细胞吞噬活性的影响;Griess法和ELISA法分别检测其对巨噬细胞NO、TNF-α分泌的影响。结果:提取得到粗根荨麻叶(UML40、UML60),茎(UMS40、UMS60),根(UMR40、UMR60)共6种粗多糖,其中叶粗多糖得率最高为4.62%,UML40为占77.92%,茎粗多糖和根粗多糖得率分别为0.69%和1.13%;各粗多糖平均重均分子量从2.11 kDa到802.21 kDa不等,主要由D-Glc、D-Gal、D-Ara和D-GalA组成,但不同部位粗多糖的单糖组成摩尔比不同。此外,不同部位、不同分子量的粗根荨麻多糖免疫活性存在较大差异,其中UML40、UMS40、UMR40均能够显著活化巨噬细胞,促进其吞噬活性及NO、TNF-α分泌水平(P<0.05);UMR60虽然不能促进巨噬细胞吞噬但能显著促进细胞因子的分泌(P<0.001);UML60细胞毒性较大且活性较低;UMS60无激活巨噬细胞的活性。结论:粗根荨麻不同部位多糖在组成及免疫调节活性上存在一定差异,在对其进行研究以及开发利用时应当注意质量控制。

粗根荨麻水提取部分对AA大鼠腹腔巨噬细胞PGE_2水平及体外LPS诱导腹腔巨噬细胞COX-2 mRNA表达的影响

目的观察滇产粗根荨麻水提取部分Urtica macrorrhiza Hand-Mazz,Ur对佐剂性关节炎(adjuvant arthritis,AA)大鼠腹腔巨噬细胞(peritoneal macrophages,PMφ)分泌前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)水平及对体外LPS诱导PMφCOX-2 mRNA表达的影响,探讨其治疗类风湿性关节炎可能的作用机制。方法建立AA大鼠模型,Ur水提取部分连续灌胃给药14 d或21 d后分次获取PMφ,LPS诱导PGE2的产生,用酶联免疫吸附法检测培养上清液中PGE2水平。体外培养PMφ,RT-PCR方法检测LPS诱导COX-2 mRNA表达。结果Ur水提取部分(400,200 mg/kg)对LPS诱导的AA PMφ分泌PGE2水平有明显抑制作用。Ur(200,100μg/ml)能显著抑制LPS诱导的COX-2 mRNA的表达。结论滇产粗根荨麻水提取部分对佐剂性关节炎的治疗作用可能与其抑制PMφ分泌PGE2及COX-2 mRNA表达有关。

滇产粗根荨麻不同提取部位的镇痛抗炎作用研究

为探讨滇产粗根荨麻不同部位的镇痛抗炎活性,并作有效部位筛选,本文采用醋酸扭体法和角叉菜胶致大鼠足肿胀模型筛选有效部位。正丁醇部分(200 mg/kg)对醋酸诱发小鼠扭体有抑制作用与空白及溶媒对照组比较(P<0.05);水部分(100,200,400 mg/kg)对角叉菜胶致大鼠足肿胀有明显抑制作用,与空白及溶媒对照组比较(P<0.01);正丁醇部分(400 mg/kg)可减轻角叉菜胶致大鼠足肿胀,与空白及溶媒对照组比较(P<0.05)。滇产粗根荨麻正丁醇部分有一定的镇痛抗炎作用,水部分具较强抗炎作用。

滇产粗根荨麻水提取部分对大鼠佐剂性关节炎作用研究

观察滇产粗根荨麻水提取部分对大鼠佐剂性关节炎的治疗作用。用佐剂性大鼠关节炎模型观察不同剂量滇产粗根荨麻水提取部分对佐剂性关节炎模型大鼠足肿胀及关节炎指数改变的影响。滇产粗根荨麻水提取部分（400、200mg／kg）能明显抑制佐剂性关节炎大鼠的足肿胀并能降低其关节炎指数。滇产粗根荨麻水提取部分具有抗大鼠佐剂性关节炎作用。

粗根荨麻多糖对人脐血单核细胞源树突细胞表面分子表达的影响

研究粗根荨麻多糖在体外对人脐血单核细胞向树突细胞分化及成熟的作用。用淋巴细胞分离液分离脐血获得脐血单个核细胞,将获得的单核细胞分为3组,实验组:在含有粗根荨麻多糖(200 mg/L)的RPMI1640完全培养液中培养;阴性对照组:在无药物的RPMI1640完全培养液中培养;阳性对照组:在含有细胞因子(IL-4、GM-CSF、TNF-α)的RPMI1640完全培养液中培养;收集第10 d细胞用流式细胞术检测DCs成熟表型(CD1a、CD80、CD83、CD86、HLA-DR)。结果表明,与阴性对照组比较,实验组和阳性对照组CD80、CD83、CD86、HLADR、CD1a的表达明显增加。粗根荨麻多糖可诱导脐血单核细胞分化成熟的DCs。

正交法研究云南粗根荨麻多糖的提取条件

目的研究提取和测定云南粗根荨麻多糖的方法。方法用正交法对云南粗根荨麻多糖的提取条件进行研究,用硫酸-苯酚比色法对多糖的含量进行测定。结果粗根荨麻水提物、粗多糖、精制多糖的多糖含量分别为12.3%、30.4%、42.7%。结论提取和测定粗根荨麻多糖的方法简便易行,稳定可靠。