全胸腔镜肺叶切除术对早期非小细胞肺癌患者术后康复及VAS评分的影响

目的探讨全胸腔镜肺叶切除术治疗对早期非小细胞肺癌患者术后康复及VAS评分的影响。方法选取我院2018年11月至2019年11月收治的早期非小细胞肺癌患者72例,随机分为两组各36例。观察组采用全胸腔镜肺叶切除术治疗,对照组采用常规开胸肺叶切除术治疗。比较两组的手术、康复指标,术后VAS评分以及并发症发生率。结果术后1~5 d,观察组的VAS评分均显著低于对照组(P<0.05)。观察组的引流时间、住院时间显著短于对照组,术中出血量显著少于对照组(P<0.05)。观察组的并发症发生率为5.56%,显著低于对照组的27.78%(P<0.05)。结论全胸腔镜肺叶切除术治疗早期非小细胞肺癌患者,可明显减轻患者疼痛,缩短住院时间,减少并发症,促进术后康复,具有较高的临床应用价值。

负性液晶垂面排列(VA)盒中壁的研究

文章从理论上概述了外场作用下向列相液晶盒中出现的Bloch壁,使用负性液晶对两种垂面排列(VA)盒进行实验研究。两种液晶盒均使用垂面聚酰亚胺(PI)作为取向层,一种盒涂敷PI后使用了后工艺过程,另一种盒涂敷PI而没有后工艺过程。第一种VA盒在强场作用下出现壁,它事实上验证了涂敷PI后工艺过程的有效性。在外场作用下,第二种VA盒出现不同的不稳定现象。

Myosin Va RNAi慢病毒载体的构建及对肺癌PG细胞运动和迁移能力的影响

目的构建人非常规肌球蛋白myosinVa基因RNAi慢病毒载体,并探讨其对人肺巨细胞癌PG细胞运动和迁移能力的影响。方法针对已经筛选确定的myosinVa基因RNAi有效靶序列,合成靶序列及其阴性对照的寡聚DNA,并连接到pSuper载体获得中间实验质粒pSuper-shM5A及阴性对照pSuper-shCON;然后将H1promoter-shM5A/shCON表达框重组到慢病毒载体plenti4上,分别得到plenti4-H1-shM5A和shCON载体,并进行慢病毒包装。随后用病毒上清感染PG细胞,并筛选出zeocin抗性的稳定细胞系PG-shM5A和shCON。通过RT-PCR方法检测PG-shM5A和shCON细胞的myosinVamRNA表达水平;用创伤愈合和Boyden小室实验测定PG-shM5A和shCON细胞的运动和迁移能力。结果限制性内切酶酶切和测序证实,成功构建myosinVaRNAi慢病毒载体plenti4-H1-shM5A。慢病毒包装成功后,感染PG细胞并获得zeocin抗性的细胞;用RT-PCR方法证明,myosinVamRNA被抑制70%以上。创伤愈合和Boyden小室实验表明,感染携带myosinVaRNAi慢病毒的PG细胞运动和迁移能力显著下调。结论成功构建myosinVaRNAi慢病毒载体plenti4-H1-shM5A,它能有效抑制人肺巨细胞癌PG细胞的myosinVa表达并降低其运动和迁移能力,初步揭示了myosinVa与肿瘤细胞恶性行为的相关性。

促根剂对VA菌根接种剂质量的影响

进行了复合细胞分裂素、ABT生根粉、发根土壤杆菌(Agrobacterium rhizogenes)发酵滤液等促根剂促进地豆(Phaseolus vulgaris L.)根量增加,从而提高 VA菌根接种剂质量的研究。结果表明:促根试验和盆栽试验中,三种促根剂在一定的浓度下均有一定的促根作用,其中以复合细胞分裂素5000倍液、生根粉 ABT_1 20ppm两处理效果较好,其基质中孢子产量和其它促根剂处理及对照比较,差异均达到显著水平。

爱普列特对原代培养大鼠输精管上皮细胞及bcl-2表达的影响

目的 探讨爱普列特对原代培养SD大鼠输精管上皮细胞及原癌基因bcl 2表达的影响。方法 应用HE染色、电镜、流式细胞术和免疫组化方法研究爱普列特对输精管上皮细胞形态改变、细胞凋亡率以及bcl 2表达的影响。结果 0 1 μmol·L- 1 爱普列特对细胞形态无显著影响 ;0 3和 1 0 μmol·L- 1 爱普列特作用 72h后 ,细胞呈核固缩、深染、碎裂、染色质边集等多种形态改变 ,电镜下可见典型的凋亡细胞特征 ;流式细胞仪分析结果显示 ,溶剂对照组细胞凋亡率为 3 42 %± 1 49% ,0 1、0 3和 1 0 μmol·L- 1 爱普列特作用 72h后 ,细胞凋亡率分别为 4 66 %± 2 2 3 % ,39 0 4 %± 1 0 69%和 52 74%± 8 91 % ;免疫组化结果显示输精管上皮细胞bcl 2阳性率为 76 96 %± 9 2 5 % ,0 1、0 3和 1 0 μmol·L- 1 爱普列特作用 72h后 ,Bcl 2阳性表达的百分率分别为 63 93 %± 3 40 %、52 82 %± 8 66 %和 2 9 64 %± 8 74%。结论 0 1 μmol·L- 1 爱普列特对大鼠输精管上皮细胞无影响 ,0 3和 1 0 μmol·L- 1 可诱导大鼠输精管上皮细胞发生凋亡 ,其作用机制可能与降低bcl

免疫细胞在牦牛附睾和输精管的分布规律

旨在研究免疫细胞在健康雄性牦牛附睾和输精管的分布。采用免疫组织化学和实时荧光定量(qRT-PCR)方法对幼龄(5~6月龄)及成年(3~4岁)牦牛附睾(头、体、尾)和输精管中CD68+巨噬细胞、CD3+T淋巴细胞、CD79α+B淋巴细胞、IgA+和IgG+浆细胞的分布特征及其表面标志分子的表达水平进行研究。结果显示:CD68+巨噬细胞、CD3+T淋巴细胞、CD79α+B淋巴细胞、IgA+和IgG+浆细胞主要分布在附睾管和输精管的上皮和间质;另外,CD68和CD3 mRNA和蛋白水平在各年龄组牦牛附睾头和附睾体显著高于附睾尾和输精管(P<0.05),而CD79α、IgA和IgG mRNA和蛋白水平在附睾尾和输精管显著高于附睾头和附睾体(P<0.05);此外,在成年牦牛附睾和输精管CD3、CD79α、IgA、IgG、CD68 mRNA和蛋白水平均显著高于幼龄牦牛(P<0.05)。综上提示,牦牛附睾头可能主要是细胞免疫发生的位点,而附睾尾和输精管则主要进行体液免疫应答,此外,成年牦牛附睾和输精管的局部免疫可能更完善,以上数据为进一步研究高原牦牛局部生殖免疫和病理提供了形态学资料。

Notch信号对高糖诱导人视网膜血管内皮细胞凋亡的保护作用

目的探讨Notch1信号对高糖情况下多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶-1[Poly(ADPribose)polymeras-1,PARP-1]和核因子-κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)的p50亚单位(NF-κB50)介导的人视网膜血管内皮细胞(retinal vascular endothelial cells,RVECs)凋亡的抑制作用。方法体外培养人RVECs及HEK293T细胞,并进行传代,同时构建高糖(葡萄糖浓度为30 mmol·L-1)人RVECs细胞模型。构建p CMV-ScriptNotch1和p CMV-Script-DLL4质粒,酶切鉴定后Western Blot法检测重组质粒表达目的基因的效果,同时合成si Notch1并转染高糖培养的人RVECs,Western Blot法检测Notch基因敲除效果。应用免疫共沉淀及Western Blot法检测si Notch1对高糖下PARP-1和NF-κB的相互作用的影响;应用Western Blot法检测高糖条件下Notch1/DLL4上调和下调后人RVECs中PARP-1、p-AKT、NF-κB50及caspase-3的表达变化。结果人RVECs复苏后24 h贴壁,细胞呈扁平梭形,3 d左右细胞开始融合呈铺路石样,单层生长,铺满瓶底,并可见接触抑制现象。免疫共沉淀结果显示高糖组培养的人RVECs其PARP-1结合的NF-κB50的量较正常对照组增加;将si Notch1转染高糖组培养的人RVECs后或同时加入DLL4,则人RVECs中PARP-1结合的NF-κB50的量较前增加显著,提示Notch能抑制高糖下PARP-1和NF-κB50的相互作用。Western Blot检测结果显示高糖条件下,Notch1和DLL4上调后其PARP-1及caspase-3表达量较前显著降低;Notch1下调后其PARP-1及caspase-3表达量较前增加;p-AKT表达量则相反;提示Notch信号能抑制高糖诱导的PARP-1及caspase-3的激活及表达。结论高糖情况下Notch信号可调控PARP-1和NF-κB的相互作用,并抑制PARP-1激活引起的人RVECs的凋亡。

莲心碱对血管平滑肌细胞增殖及热应激蛋白70和P53表达的影响

采用培养的内皮素所致血管平滑肌细胞增殖模型。用氚－胸腺嘧核苷掺入法，流式细胞术，Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ及Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ分析方法，观察了莲心碱对血管平滑肌细胞增殖的作用及对热应激蛋白７０及其ｍＲＮＡ和抑菩基因Ｐ５３表达的影响。结果发现，莲心碱能逆转内皮素所致的＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入量增多，阻止血管平滑肌细胞由Ｇｏ／Ｇ１期进入ＤＮＡ合成期和有丝分裂期，并能使热应激蛋白７０及ｍＲＮＡ表达减弱，

维生素A和锌过量摄入对大鼠脾脏的损伤作用

目的探讨维生素A(VA)、锌(Zn)摄入过量对成年大鼠脾脏抗氧化能力和细胞周期的影响。方法通过灌胃造成VA、Zn单独及联合摄入过量的成年Wistar大鼠动物模型,分别在实验第2周末、第3周末处死半数动物,制备脾脏组织匀浆,测定脾脏总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活力及丙二醛(MDA)含量;流式细胞术测定脾脏细胞周期。结果实验第3周末,各实验组脾脏T-AOC水平均低于对照组;联合组、Zn组SOD含量明显高于对照组(P<0.05);VA组和联合组S期和G2/M期细胞较对照组明显增多(P<0.05)。结论短期大剂量补充VA和(或)Zn可阻抑脾脏的抗氧化能力和细胞周期,以联合过量作用更为明显。

APON的帧结构和MAC协议设计及其性能分析

本文参照以ATM为基础的无源光网络 (APON)的G 983建议 ,提出了一种新的传输帧结构和媒质接入控制 (MAC)协议 .传输帧长选为 12 5 μs,这有利于STM业务的接入 .考虑到话音业务对时延敏感并且传输速率较低的特点 ,MAC协议对话音业务实行固定带宽分配 .对其它类型的业务则采用基于预留的动态带宽分配方案 .通过建模仿真分析了协议的信元时延 (CD)和信元时延变化 (CDV)特性 .

阿折地平对西罗莫司洗脱支架致血管内皮损伤的干预作用及机制探讨

目的观察阿折地平对西罗莫司洗脱支架致血管内皮损伤的干预作用,并探讨其作用机制。方法培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),将HUVEC分为对照组、模型组和实验组。对照组不加药物,模型组给予西罗莫司500 nmol/L,实验组给予阿折地平10μmol/L+西罗莫司500 nmol/L。各组处理24 h后,HE染色观察细胞形态变化,测定培养液中的NO,Fluo-3/AM荧光探针标记细胞内Ca2+,JC-1荧光探针检测线粒体膜电位,Annexin V FITC/PI染色法测算细胞凋亡率。结果各组处理24 h后,对照组细胞呈多角形、单层铺路石样排列;模型组细胞肿胀,胞质出现空泡,部分细胞核固缩、碎裂;实验组细胞基本呈多角形、单层铺路石样排列,少见细胞肿胀及胞质空泡。与对照组相比,模型组与实验组细胞培养液中NO水平降低、胞质Ca2+浓度升高、细胞凋亡率升高、线粒体膜电位下降(P均<0.05);与模型组相比,实验组细胞培养液中NO水平升高、胞质Ca2+浓度及细胞凋亡率降低、线粒体膜电位升高(P均<0.05)。结论阿折地平可在一定程度上抑制西罗莫司洗脱支架导致的血管内皮损伤,其机制可能与提高细胞内NO水平、降低细胞内Ca2+浓度、抑制线粒体膜电位降低、减少细胞凋亡有关。

过量摄入维生素A和锌对肝脏细胞周期的影响

目的探讨单独或联合维生素A(VA)、锌(Zn)摄入过量对成年大鼠肝脏细胞周期的影响,为进一步明确VA、Zn互作效应的量效关系提供科学依据。方法64只大鼠随机分为4组:对照组(C),VA实验组(VT),Zn实验组(ZT),VA+Zn联合实验组(UT)。通过灌胃法使各组大鼠每日分别摄入0·5ml相应受试物。分别在实验第2周末、第3周末各处死一半动物,流式细胞仪测定肝细胞在细胞周期各时相所占比例和凋亡细胞百分比。结果实验第2周末、第3周末,VT、ZT和UT各组大鼠体重、摄食量和肝脏指数与C比较均无明显变化(P>0·05)。光镜观察各实验组在第2周均出现不同程度水样变,其中VT有散在点状嗜酸性染色加深灶。随实验时间延长,各实验组细胞变性均有进行性加重趋势。实验第2周末,VT细胞增殖旺盛(P<0·01),ZT和UT无明显变化(P>0·05);第3周末,VT细胞增殖有下降趋势,ZT细胞增殖明显(P<0·01),UT细胞增殖无明显变化(P>0·05)。在不同时间点,VT、ZT有个别大鼠出现亚G1峰,2周时VT亚G1为1·8;3周时VT亚G1为1·5,ZT为2·1;UT无此峰。结论健康成年大鼠单独摄入高于适宜摄入量100倍的VA或12倍的Zn,对肝脏细胞周期的影响比同时摄入同等剂量VA和Zn更大。

带状疱疹后遗神经痛与Th1/Th2细胞因子及血清炎性因子相关性探讨

目的探讨研究带状疱疹后遗神经痛(postherpetic neuralgia,PHN)与Th1/Th2细胞因子及血清炎性因子相关性。方法选取2014年8月至2015年8月在我院接受治疗的120例带状疱疹后遗神经痛患者,进行低频脉冲电治疗结合神经营养药物(弥可保)注射治疗,比较治疗前后患者的疼痛视觉模拟(visual analogue scale,VAS)评分,Th1/Th2细胞因子水平及血清炎性因子水平,并研究VAS评分与二者的相关性。结果 PHN患者治疗后7d、1个月的VAS评分显著低于治疗前(P<0.05),治疗后IFN-γ、IL-4水平与治疗前差异没有统计学意义(P>0.05),而IL-10水平与治疗前相比显著降低(P<0.05),PHN患者治疗后的IL-1β及TNF-α水平均比治疗前显著降低(P<0.05);Spearman秩相关分析结果表明,治疗前后,PHN患者疼痛程度与炎性因子IL-1β和TNF-α及Th1/Th2细胞因子IL-10显著正相关(P<0.05)。结论在PHN治疗中,低频脉冲电治疗结合神经营养药物(弥可保)注射治疗有显著的近期效果,患者的疼痛程度与Th1/Th2细胞因子及血清炎性因子有一定的相关性。

丝裂原活化蛋白激酶参与血小板源生长因子刺激的大鼠主动脉平滑肌细胞增殖(英文)

选择大鼠主动脉平滑肌细胞作为细胞模型 ,观察丝裂原活化蛋白激酶 ( MAPK)信号通路在血小板源生长因子 ( PDGF)诱导的血管平滑肌细胞( VSMC)增殖中的作用。用 [3 H]Td R参入率作为衡量 VSMC增殖的指标 ,以 Western-印迹方法 ,用磷酸化一抗测 MAPK磷酸化的程度作为衡量 MAPK活性的指标 ,实验结果发现 ,PDGF( 0 .0 2 - 2 0μg·L-1)诱导 VSMC增殖呈剂量依赖性。 PDGF( 2μg· L-1)能持续性激活 MAPK。用 PD980 59( 1 0 -1 0 0 mol· L-1)预处理 1 5min后 ,MAPK活性较对照组均有明显差别 ( P<0 .0 5) .MAPK反义寡核苷酸能明显抑制 PDGF诱导的 MAPK的激活 ,并明显抑制 VSMC[3 H]Td R参入。上述结果表明 ,MAPK参与 PDGF促细胞增殖的信号途经 ,它的持续性激活与细胞增殖有关 ,针对 p42 /p44MAPK设计的反义寡核苷酸类能有效抑制 PDGF诱导的血管平滑肌细胞增殖。

EfFect of manoalide on apoptosis induced by deprivation of growth factors in vascular endothelial celLs

研究ｍａｎｏａｌｉｄｅ对除去生长因子（ａＦＧＦ和血清）而诱导的血管内皮细胞凋亡的影响．方法：通过细胞形态观察，ＤＮＡ凝胶电泳及荧光显微术等方法确定ｍａｎｏａｌｉｄｅ对细胞凋亡的抑制或促进作用．结果：向去除ａＦＧＦ和血清的培养液中加低浓度的ｍａｎｏａｌｉｄｅ（１－４μｍｏｌ·Ｌ－１），培养细胞４８ｈ，细胞的脱壁和ＤＮＡ片断化受到抑制；ｍａｎｏａｌｉｄｅ浓度为７μｍｏｌ·Ｌ－１时，促进细胞脱壁和ＤＮＡ片断化．结论：低浓度的ｍａｎｏａｌｉｄｅ（２μｍｏｌ·Ｌ－１）抑制血管内皮细胞凋亡，而较高浓度的ｍａｎｏａｌｉｄｅ（７μｍｏｌ·Ｌ－１）促进该细胞凋亡．

冠心病患者末梢动脉血流图及冷激发试验前后的变化

目的 探讨通过冷激发 (冷加压 )试验前后描记末梢动脉血流图这一无创性检测来评估血管内皮细胞的功能。方法 检测 3 7例冠心病患者 (试验组 )与 2 6例健康成人 (对照组 )的血中内皮素 (ET)、一氧化氮 (NO) ,同时做冷激发试验并描记末梢动脉血流图。结果 试验组ET高于对照组 (P <0 .0 1) ,NO低于对照组 (P <0 .0 5 ) ;两组冷激发前末梢动脉血流波幅无明显差异 (P >0 .0 5 ) ,试验组冷激发后末梢动脉血流波幅低于冷激发前 (P <0 .0 0 1)。而对照组冷激发后波幅高于冷激发前 (P <0 .0 0 1)。两组血管反应指数 (冷激发后波幅 /冷激发前波幅 )相比有非常显著性差异 (P <0 .0 1)。并且试验组弹性波低、诱发痉挛波例数明显高于对照组 (P <0 .0 0 1)。结论 冠心病外周末梢动脉也存在内皮功能不全 。

ADAM17调控CGRP对血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞增殖的抑制效应

目的阐明肿瘤坏死因子α转化酶(ADAM17)调控降钙素基因相关肽(CGRP)的抗血管平滑肌细胞(VSMC)增殖效应。方法以大鼠源性胸主动脉平滑肌细胞株(A10VSMC)为研究对象,采用RNA干扰抑制ADAM17表达;采用蛋白质免疫印迹和实时定量PCR检测蛋白和mRNA表达水平;采用噻唑蓝比色法评估细胞活性。结果 CGRP显著抑制血管紧张素Ⅱ介导的VSMC增殖。血管紧张素Ⅱ刺激24 h后,VSMC中ADAM17表达显著增加。CGRP预处理30 min能显著降低VSMC中ADAM17表达,而CGRP受体拮抗剂CGRP8-37可抑制或逆转上述效应。ADAM17 RNA干扰可显著抑制血管紧张素Ⅱ介导的VSMC增殖。结论降低ADAM17表达可能是CGRP抑制血管紧张素Ⅱ介导的VSMC增殖效应的机制。

一氧化氮和K^+通道参与乙酰胆碱引起的大鼠离体输精管平滑肌细胞超极化(英文)

本文旨在探讨大鼠新鲜离体输精管平滑肌细胞中乙酰胆碱(acetylcholine, ACh)引起超极化反应的机制,采用细胞内微电极记录技术和细胞内荧光标记技术研究 ACh 对大鼠输精管不同走行方向平滑肌细胞的作用。用尖端含 0.1% 碘化吡啶(propidium iodide, PI)的记录电极标记电生理记录后的平滑肌细胞,其中 37 个为外层纵行细胞,17 个为内层环行细胞。它们的平均静息膜电位分别为(–53.56±3.88) mV 和 (–51.62±4.27) mV,膜输入阻抗分别为(2 245.60±372.50) MΩ和 (2 101.50±513.50)MΩ。ACh 引起的膜超极化反应是浓度依赖性的, EC50 为 36 μmol/L。ACh 引起的超极化反应可被非选择性的毒蕈碱(muscarinic receptor, M) 受体阻断剂阿托品(atropine, 1 μmol/L)和选择性的 M3 受体阻断剂 diphenylacetoxy-N-methylpiperidine-methiodide (DAMP, 100 nmol/L)阻断。ACh 引起的超极化还能被一氧化氮合酶抑制剂L-硝基-精氨酸甲酯(N-nitro-L-arginine methylester, L-NAME, 300 μmol/L)阻断,并可被 ATP 敏感的钾通道阻断剂 glipizide (5 μmol/L) 或内向整流钾通道阻断剂钡离子(50μmol/L)部分阻断。Glipizide 和钡离子联合使用可完全阻断 ACh 引起的超极化反应。上述结果表明:ACh 通过作用于大鼠输精管平滑肌细胞膜上的M3 受体引起超极化反应,一氧化氮、ATP 敏感性钾通道和内向整流钾通道参与了ACh 引起的超极化反应 。

蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛平滑肌超微结构研究

采用盐酸和胶原酶消化动脉外膜的技术,对正常的脑动脉、蛛网膜下腔出血后痉挛的脑动脉及经前列腺素F2α(prostaglandin F2α,PGF2α)处理的脑动脉平滑肌细胞构筑进行研究。结果显示:正常平滑肌细胞是梭形的,沿着血管长轴环行分布,细胞间通过突起相连,肌细胞外膜面通常是光滑的;痉挛的脑动脉和经PGF2α处理的脑动脉平滑肌外膜面均出现非常相似的膜皱折和卷曲,肌间隙增宽。透射电镜显示急性痉挛管壁病理变化轻微;迟发性痉挛出现明显病理性超微结构改变。实验结果提示急性脑血管痉挛是由平滑肌收缩引起,病理变化轻微;迟发性脑血管痉挛是血管持久收缩伴病理性超微结构改变。

脂多糖对大鼠肺微血管内皮细胞cAMP的影响

目的探讨脂多糖(LPS)作用后,大鼠肺微血管内皮细胞(RPMVEC)cAMP浓度变化及其与β-AR变化的关系。方法分别在100ml培养瓶内接种等量RPMVEC,细胞单层汇合后分为3组:LPS组加LPS10μg/ml;LPS+山莨菪碱组加LPS10μg/ml和山莨菪碱10μg/ml;正常对照组加等量稀释液(各组n=4)。于作用后15、90min,采用放免法测定各组RPMVECcAMP浓度。结果正常对照组RPMVECcAMP浓度为(11.83±1.35)fmol/μl;LPS组和LPS+山莨菪碱组15、90min两个时相点RPMVECcAMP浓度均显著高于正常对照组(P<0.01)。10μg/mlLPS作用15min,cAMP浓度显著低于10μg/mlLPS作用90min(P<0.01);LPS+山莨菪碱组作用15min,cAMP浓度也显著低于作用90min(P<0.01)。LPS组作用15min与LPS+山莨菪碱组作用15min比较,细胞内cAMP浓度无显著差异(P>0.05);两组作用90min比较,cAMP浓度也无显著差异(P>0.05)。结论LPS作用可引起RPMVECcAMP浓度显著升高,其机制可能与LPS引起的腺苷酸环化酶活化有关,而与LPS引起的β-AR变化下调无关。