脂脉宁对H_2O_2诱导VEC-304细胞表达NF-kB及HSP-70的影响

目的探讨脂脉宁对过氧化氢(H2O2)诱导血管内皮(VEC)-304细胞NF-kB及HSP-70表达的影响。方法将VEC-304细胞分4组:对照组、H2O2组、试验1组(脂脉宁大剂量)、试验2组(小剂量)。采用免疫组化、Western blot分析法,观察H2O2诱导VEC-304细胞的NF-kB及HSP70蛋白的表达。结果H2O2组NF-kB、HSP-70的表达比对照组均明显上调;而试验1、2组细胞NF-kB、HSP-70的表达均明显较H2O2组下调;1组与2组比,NF-kB的下调更明显。结论H2O2可诱导VEC-304细胞NF-kB、HSP-70高表达,而脂脉宁可使其表达下调。

脂脉宁对香烟提取物诱导血管内皮-304细胞损伤的保护作用

目的观察脂脉宁药物血清对香烟提取物(CSE)诱导的血管内皮(VEC)-304细胞损伤的影响。方法将培养细胞分为CSE组、空白组、脂脉宁大剂量组、脂脉宁小剂量组。采用MTT、免疫组化和TUNEL等方法,观察各组细胞存活率和凋亡率、相关凋亡蛋白表达及氧化反应指标的变化。结果 CSE组存活率最低,凋亡率最高,Wp53、p21、Bax、Caspase-3表达均明显升高,Bcl-2、mp53表达降低,超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、总抗氧化能力(T-AOC)活性、谷胱甘肽(GSH)含量均降低,丙二醛(MDA)含量及一氧化氮合酶(NOS)活性升高,与空白组比较差异有统计学意义;脂脉宁大、小剂量组存活率明显升高,凋亡率降低,Wp53、p21、Bax、Caspase-3表达下调,Bcl-2、mp53表达上调;SOD、GSH-Px、T-AOC活性及GSH含量均升高,MDA含量及NOS活性降低,而脂脉宁大剂量组更明显。结论 CSE诱导的VEC-304细胞凋亡与其过氧化反应密切相关,脂脉宁有抑制细胞凋亡及抗氧化作用。

低频超声联合微泡剂对血管内皮细胞的生物学效应

目的:研究低频超声联合微泡剂对血管内皮细胞VEC-304的作用,为超声治疗的临床应用提供实验依据。方法:将细胞分为空白对照(A)组;单纯微泡剂(B)组;单纯超声(C)组,因给予不同时间的超声辐照又分为C1组(60 s)、C2组(90 s)、C3组(120 s)和C4组(150 s);超声联合微泡剂(D)组,因加入微泡剂后立即给予不同时间的超声辐照又分为D1组(60 s)、D2组(90 s)、D3组(120 s)和D4组(150 s)。MTT法观察细胞增殖的抑制作用,分光光度法检测细胞培养液中活性氧(ROS)和超氧化物歧化酶(SOD)活力的变化,流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡。结果:超声联合微泡剂能够显著抑制细胞增殖;C3、D3组培养液中ROS活力显著高于A、B两组(P<0.01),SOD活力显著低于A、B两组(P<0.01),且D3组效应比C3组更为明显;C3、D3组细胞凋亡率明显高于A、B组(P<0.01),D3组高于C3组(P<0.05)。结论:低频超声联合微泡剂可能是通过增加细胞外ROS的活力来诱导对细胞的损伤和凋亡。