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过表达VHA-c4和VHA-c5基因对拟南芥根长的影响 被引量:2
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作者 苏杰 郭荣起 +1 位作者 李国婧 王瑞刚 《植物科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期765-774,共10页
为研究液泡H+-ATPase c亚基VHA-c4和VHA-c5基因在植物生长发育过程中的作用,本研究构建了拟南芥VHA-c4和VHA-c5过表达载体并转化野生型拟南芥,分别获得9个和7个T2代转基因纯合体株系。采用半定量RT-PCR方法对过表达VHA-c4和VHA-c5的转... 为研究液泡H+-ATPase c亚基VHA-c4和VHA-c5基因在植物生长发育过程中的作用,本研究构建了拟南芥VHA-c4和VHA-c5过表达载体并转化野生型拟南芥,分别获得9个和7个T2代转基因纯合体株系。采用半定量RT-PCR方法对过表达VHA-c4和VHA-c5的转基因纯合体进行阳性鉴定,发现其mRNA表达量均高于对照。对转基因纯合体进行暗培养和正常光照培养,结果显示,黑暗条件下,所有VHA-c4转基因株系的主根变短,而在正常光照下,所有VHA-c5转基因株系的主根变短,推测VHA-c4和VHA-c5分别在黑暗和光照条件下影响植物根的生长。用ABA和糖(葡萄糖和蔗糖)处理转基因纯合体,结果显示它们与野生型的表型无明显差异,表明VHA-c4和VHA-c5基因的过表达没有影响拟南芥对ABA和糖的响应。 展开更多
关键词 拟南芥 vha-c4 vha-c5 黑暗 正常光照 ABA
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过表达VHA-c1基因对拟南芥根长及ABA与糖响应的影响 被引量:3
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作者 苏杰 郭荣起 +3 位作者 姜树原 邸娜 李国婧 王瑞刚 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期865-871,共7页
为初步探讨液泡H+-ATPase c亚基基因(VHA-c1)在植物生长发育及信号转导中的作用,该实验构建了拟南芥VHA-c1的过表达载体,转化并获得转基因拟南芥纯合株系,通过半定量RT-PCR技术分析了VHA-c1的表达量,然后对其进行暗培养、ABA和糖处理。... 为初步探讨液泡H+-ATPase c亚基基因(VHA-c1)在植物生长发育及信号转导中的作用,该实验构建了拟南芥VHA-c1的过表达载体,转化并获得转基因拟南芥纯合株系,通过半定量RT-PCR技术分析了VHA-c1的表达量,然后对其进行暗培养、ABA和糖处理。结果显示:(1)该实验获得7个T2代转基因纯系,其mRNA表达水平均高于野生型,表明过表达载体的构建是有效的。(2)黑暗条件下,6个拟南芥VHA-c1过表达纯合株系的根长变短。(3)光照条件下,4个转基因株系主根伸长和子叶的展开以及7个转基因株系的种子萌发对ABA的抑制不敏感。(4)分别有5个和4个转基因株系的种子萌发对葡萄糖和蔗糖的抑制不敏感。推测VHA-c1可能参与了ABA和糖介导的信号转导途径,并可能影响了拟南芥根细胞的扩展。 展开更多
关键词 拟南芥 vha-c1 过表达 暗培养 ABA
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拟南芥VHA-c基因在非生物胁迫响应中的作用 被引量:4
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作者 徐萍 刘瑞香 +3 位作者 曾卫军 李国婧 王瑞刚 王水平 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2006年第1期19-22,共4页
利用RT-PCR技术检测VHA-c基因对高盐、水和ABA胁迫的响应,结果表明所有的VHA-c基因都参与了V-ATPase的抗盐胁迫反应;在响应水胁迫的反应中VHA-c2、VHA-c4和VHA-c5基因的表达量增加;在ABA胁迫反应中VHA-c1,VHA-c2,VHA-c3和VHA-c4基因的... 利用RT-PCR技术检测VHA-c基因对高盐、水和ABA胁迫的响应,结果表明所有的VHA-c基因都参与了V-ATPase的抗盐胁迫反应;在响应水胁迫的反应中VHA-c2、VHA-c4和VHA-c5基因的表达量增加;在ABA胁迫反应中VHA-c1,VHA-c2,VHA-c3和VHA-c4基因的表达水平均提高,但是VHA-c1和VHA-c3基因只在早期的ABA胁迫中增加其表达量。 展开更多
关键词 V-ATPASE C亚基 vha-c基因 非生物胁迫
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拟南芥VHA-c3基因的特异性表达和调节 被引量:5
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作者 徐萍 李小方 +1 位作者 曾卫军 王水平 《华东师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期98-104,111,共8页
利用RT-PCR技术检测VHA-c基因在拟南芥中的表达,结果表明VHA-c3基因在拟南芥的果荚、花、叶、茎和根中都有表达,但是,在叶中的表达量远远高于其它的组织.以GUS基因作为报告基因构建了不同长度的VHA-c3基因启动子缺失突变体,利用农... 利用RT-PCR技术检测VHA-c基因在拟南芥中的表达,结果表明VHA-c3基因在拟南芥的果荚、花、叶、茎和根中都有表达,但是,在叶中的表达量远远高于其它的组织.以GUS基因作为报告基因构建了不同长度的VHA-c3基因启动子缺失突变体,利用农杆菌介导的瞬时表达系统检测GUS基因的表达,研究发现在VHA-c3基因起始密码子上游2812~2234bp之间的区域内存在着控制VHA-c3基因高表达的转录调控元件. 展开更多
关键词 V-ATPASE C亚基 vha-c3基因 启动子
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温度和光照对拟南芥VHA-c基因启动子活性的调节 被引量:4
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作者 于秀敏 武燕 王瑞刚 《河南师范大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2013年第4期120-123,共4页
转VHA-c2-GUS,VHA-c3-GUS和VHA-c5-GUS基因烟草在4℃和40℃温度胁迫以及25℃光/暗处理条件下叶片GUS表达水平表明,VHA-c具有光调控性,并可被逆境温度所调节.VHA-c2,VHA-c3和VHA-c5均可被4℃低温和光照促进表达.40℃高温可显著促进VHA-c... 转VHA-c2-GUS,VHA-c3-GUS和VHA-c5-GUS基因烟草在4℃和40℃温度胁迫以及25℃光/暗处理条件下叶片GUS表达水平表明,VHA-c具有光调控性,并可被逆境温度所调节.VHA-c2,VHA-c3和VHA-c5均可被4℃低温和光照促进表达.40℃高温可显著促进VHA-c3的表达,对VHA-c5有轻微的促进,而对VHA-c2则表现出轻微的抑制作用. 展开更多
关键词 拟南芥 vha-c GUS 温度 光照
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拟南芥VHA-c3启动子的GUS基因融合表达 被引量:4
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作者 郭荣起 苏杰 +4 位作者 王福慧 徐萍 伊莉佳 姜树原 王瑞刚 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期58-62,共5页
VHA-c3基因是拟南芥液泡H+-ATPasec亚基的5个同源基因之一,已有研究结果表明其与植物抗非生物胁迫有关。在克隆不同长度VHA-c3基因上游调控序列的基础上,利用GUS报告基因,研究了VHA-c3基因的植物组织及器官定位。结果表明:VHA-c3起始密... VHA-c3基因是拟南芥液泡H+-ATPasec亚基的5个同源基因之一,已有研究结果表明其与植物抗非生物胁迫有关。在克隆不同长度VHA-c3基因上游调控序列的基础上,利用GUS报告基因,研究了VHA-c3基因的植物组织及器官定位。结果表明:VHA-c3起始密码子上游772bp的序列内存在着VHA-c3基因的基本启动子元件,可指导基因组成型表达在拟南芥的叶片、表皮毛、叶柄、根、雄蕊、柱头和萼片;在VHA-c3起始密码子ATG上游2812bp~2234bp片段和1496bp~772bp片段中各存在一个负调控元件,在2234bp~1496bp片段中存在一个正调控元件,它们的存在可控制基因在气孔中的表达。 展开更多
关键词 拟南芥 V-ATPASE vha-c3基因 启动子
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过表达VHA-c3基因拟南芥对黑暗、ABA与糖的响应 被引量:3
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作者 苏杰 郭荣起 +1 位作者 李国婧 王瑞刚 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期89-95,共7页
为研究液泡H+-ATPase c亚基基因(VHA-c3)在植物生长发育及非生物胁迫应答过程中的作用,构建了VHA-c3过表达载体转化拟南芥,获得过表达VHA-c3的转基因纯合体植株,采用半定量RT-PCR技术分析了转基因拟南芥中VHA-c3的表达量,然后对转基因... 为研究液泡H+-ATPase c亚基基因(VHA-c3)在植物生长发育及非生物胁迫应答过程中的作用,构建了VHA-c3过表达载体转化拟南芥,获得过表达VHA-c3的转基因纯合体植株,采用半定量RT-PCR技术分析了转基因拟南芥中VHA-c3的表达量,然后对转基因拟南芥进行暗培养、ABA和糖处理。结果获得6个T2代株系转基因纯合体株系,其m RNA表达量均高于对照;黑暗条件下,5个VHA-c3转基因株系的根长变短;在正常光照下,3个转基因株系主根伸长和子叶的展开以及5个转基因株系的种子萌发对ABA的抑制不敏感;分别有5个和6个转基因株系的种子萌发对葡萄糖和蔗糖的抑制不敏感。推测VHA-c3可能影响根细胞的扩展,并可能参与ABA和糖介导的信号转导途径。 展开更多
关键词 拟南芥 vha-c3 黑暗 ABA
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拟南芥VHA-c基因的矿质营养调节 被引量:1
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作者 张春霖 尚世辉 王瑞刚 《河南科技大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2014年第5期79-81,112,共3页
对Ca2+和MS营养处理转VHA-c-GUS烟草叶片的GUS表达活性进行分析。研究结果表明:VHA-c2和VHA-c3可被Ca2+促进表达,而VHA-c5的表达则被Ca2+抑制。同时,MS营养成分可显著促进VHA-c2、VHA-c3和VHA-c5基因的表达。这说明VHA-c基因可被Ca2+和M... 对Ca2+和MS营养处理转VHA-c-GUS烟草叶片的GUS表达活性进行分析。研究结果表明:VHA-c2和VHA-c3可被Ca2+促进表达,而VHA-c5的表达则被Ca2+抑制。同时,MS营养成分可显著促进VHA-c2、VHA-c3和VHA-c5基因的表达。这说明VHA-c基因可被Ca2+和MS等营养成分调控表达。 展开更多
关键词 拟南芥 Ca2 + MS 培养基 离子转运 反向传递体
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NaCl对拟南芥VHA-c基因的调节
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作者 胡佳 刘伟 王瑞刚 《济南大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2014年第5期342-346,共5页
将烟草叶片以不同浓度的NaCl溶液处理下,研究转三磷酸腺苷酶(V-ATPase c)亚基基因(VHA-c)的β-葡萄糖苷酸酶(GUS)基因表达水平的变化。结果表明,V-ATPase c2亚基基因(VHA-c2)和V-ATPase c3亚基基因(VHA-c3)的表达活性有所降低,V-ATPase... 将烟草叶片以不同浓度的NaCl溶液处理下,研究转三磷酸腺苷酶(V-ATPase c)亚基基因(VHA-c)的β-葡萄糖苷酸酶(GUS)基因表达水平的变化。结果表明,V-ATPase c2亚基基因(VHA-c2)和V-ATPase c3亚基基因(VHA-c3)的表达活性有所降低,V-ATPase c5亚基基因(VHA-c5)的表达被50 mmol/L的NaCl促进,被200 mmol/L的NaCl抑制,说明VHA-c2、VHA-c3和VHA-c5均可被NaCl溶液调控,且VHA-c2的表达不存在与NaCl溶液浓度的协同关系,VHA-c3和VHA-c5对较低浓度的NaCl溶液胁迫更为敏感,对高浓度的NaCl处理并不敏感。 展开更多
关键词 拟南芥 VHA—c GUS NACL 盐胁迫
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Research on Tobacco Transformation of Vacuolar H^+-ATPase Subunit c Gene from Iris lacteal
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作者 Wu Duo Zhou Ai-min +2 位作者 Shi Sheng-feng Li Shan-shan Wang Jin-gang 《Journal of Northeast Agricultural University(English Edition)》 CAS 2012年第3期43-48,共6页
Vacuolar ATPase is the key enzyme in the aspect of plant stress, which contains 13 subunits. In this study, VHA-c which was cloned from the salt-tolerant plants Iris lacteal was transformed into tobacco, and then trea... Vacuolar ATPase is the key enzyme in the aspect of plant stress, which contains 13 subunits. In this study, VHA-c which was cloned from the salt-tolerant plants Iris lacteal was transformed into tobacco, and then treated the transgenic tobacco with 0.7% NaC1 for 7 days. Detected the MDA content, the SOD activity and the POD activity. Moreover, the transgenic plants displayed obviously better growth than the normal plants under salt stress. These results suggested that VHA-c could confer the stress tolerance through enhancing the POD and the SOD activities, and by protecting membranes from damage by decreasing lipid peroxidation under salt stress. 展开更多
关键词 vha-c Nicotiana tabacum L.cv. salt stress
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拟南芥液泡H^+-ATPase c亚基基因对外源激素的响应 被引量:1
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作者 邸娜 韩海军 《河套学院论坛》 2009年第2期31-39,44,共10页
对V-ATPase c亚基的分析发现拟南芥液泡H^+-ATPase c亚基由VHA-c1,VHA-c2,VHA-c3,VHA-c4和VHA-c5五个同源基因编码。本试验采用定量RT-PCR技术研究了IAA、ABA、ACC处理条件下拟南芥五个VHA-c基因的表达量的变化,探讨了VHA-c基因对外源... 对V-ATPase c亚基的分析发现拟南芥液泡H^+-ATPase c亚基由VHA-c1,VHA-c2,VHA-c3,VHA-c4和VHA-c5五个同源基因编码。本试验采用定量RT-PCR技术研究了IAA、ABA、ACC处理条件下拟南芥五个VHA-c基因的表达量的变化,探讨了VHA-c基因对外源激素的响应,推测了V-ATPase c亚基在植物生长发育过程中的作用. 展开更多
关键词 拟南芥 vha-c IAA ABA ACC
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拟南芥液泡H^+-ATPase c亚基基因功能研究进展 被引量:1
12
作者 邸娜 《河套学院论坛》 2007年第2期36-41,共6页
液泡型H+-ATPase(vacuolar H+-ATPase,V-ATPase)是一类特殊的膜转运结合蛋白,其由8-12个亚基组成,包括V0和V1两个结构域。V-ATPase可利用水解ATP产生的能量将质子泵入细胞区室内,通过调节细胞和细胞器的pH值,产生跨膜质子电化学势梯度,... 液泡型H+-ATPase(vacuolar H+-ATPase,V-ATPase)是一类特殊的膜转运结合蛋白,其由8-12个亚基组成,包括V0和V1两个结构域。V-ATPase可利用水解ATP产生的能量将质子泵入细胞区室内,通过调节细胞和细胞器的pH值,产生跨膜质子电化学势梯度,从而驱动离子与代谢物质的转运、调节细胞膨压、生长以及气孔的开闭。同时,V-ATPase在植物处于干旱、盐碱、低温等非生物胁迫条件下,起到重要而积极的作用。拟南芥V-ATPase的c亚基是V0域的重要组成部分之一,现已明确其由五个同源基因编码,以6拷贝的形式组成V-ATPase离子进出的通道,是植物响应逆境胁迫中最为敏感的亚基。但其在植物抗非生物胁迫中的作用机理上不清楚,仍有待于进一步研究。 展开更多
关键词 拟南芥 V-ATPASE vha-c 功能
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拟南芥液泡H^+-ATPasec亚基基因对非生物胁迫的响应
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作者 邸娜 《河套学院论坛》 2015年第1期107-112,共6页
拟南芥V-ATPase c亚基由五个同源基因编码,且这五个基因对植物的生长发育具有比较重要的调控作用,同时可提高植物对逆境的耐受性。采用定量RT-PCR技术研究茉莉酸甲酯、水杨酸、氯化钠以及PEG 6000处理下拟南芥五个VHA-c基因表达量的变化... 拟南芥V-ATPase c亚基由五个同源基因编码,且这五个基因对植物的生长发育具有比较重要的调控作用,同时可提高植物对逆境的耐受性。采用定量RT-PCR技术研究茉莉酸甲酯、水杨酸、氯化钠以及PEG 6000处理下拟南芥五个VHA-c基因表达量的变化,发现在上述处理条件下,VHA-c基因的表达量均有不同程度的增加,说明VHA-c基因有助于提高植物对非生物胁迫的抵抗能力。 展开更多
关键词 拟南芥 vha-c MEJA SA PEG NACL
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