白术茯苓汤不同配比对脾虚型克罗恩病大鼠结肠VIP及其受体的影响

目的:观察脾虚型克罗恩病(CD)大鼠结肠粘膜中血管活性肠肽(VIP)及其受体(VIPR1)表达的变化,以及白术茯苓汤不同配比对其的影响。方法:采用破气耗气加饥饱失常之复因脾虚造模法结合Morris方法复制脾虚型CD动物模型,白术茯苓汤不同配比灌胃给药,免疫组化法检测结肠组织VIP及VIPR1的蛋白表达。结果:与空白组相比,模型组大鼠结肠VIP及其受体VIPR1蛋白表达明显增高(P<0.05);与模型组比较,B5组(白术∶茯苓=12∶15)、B6组(白术∶茯苓=15∶12)、B7组(白术∶茯苓=18∶9)结肠组织VIP及其受体VIPR1蛋白表达明显降低(P<0.05)。结论:白术茯苓汤B5组、B6组、B7组剂量配比能下调脾虚型克罗恩病结肠组织VIP及其受体VIPR1蛋白表达,从而防止致炎因子的分泌,减轻结肠的炎症反应,发挥其治疗作用。

实验性脾虚证平滑肌细胞VIP受体信号传导障碍

[目的]以血管活性肠肽 (VIP)受体为研究对象 ,在胃肠肽平滑肌细胞受体 (信号接收系统)水平测定实验性脾气虚证大鼠胃肠动力紊乱的信号传导障碍以及香砂六君子汤治疗机制。[方法]逆转录聚和酶链反应 (RT -PCR)法测定胃、空肠和降结肠的VIP两种受体VIPR1和VIPR2mRNA的分布及半定量分析。[结果]在胃窦部 ,仅有VIPR2表达。与对照组相比 ,脾气虚组VIPR2mRNA含量降低 ;治疗组VIPR2含量明显升高。在空肠和降结肠 ,各组VIPR1和VIPR2均有表达 ,各组VIPR1mRNA含量均明显高于VIPR2。脾气虚组VIPR1、VIPR2mR NA含量低于对照组 ;治疗组VIPR1、VIPR2mRNA含量明显高于自然恢复组。[结论]VIP受体在胃肠道不同部位的分布差异可能与脾气虚所致胃与肠道肠动力紊乱表现的截然不同有一定关系 。

^(125)I-VIP与人胃肠腺癌及癌旁组织细胞膜的体外受体结合特性研究

探讨^（１２５）Ｉ－血管活性肠肽（ＶＩＰ）与人胃腺癌及癌旁组织细胞膜、结肠腺癌及癌旁组织细胞膜的体外受体结合特性。^（１２５）Ｉ－ＶＩＰ采用ＣＨ－Ｔ法制备， Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－５０柱层析纯化，硅胶６０Ｆ_（２５４）薄板层析（ＴＬＣ）检测。^（１２５）－Ｉ－ＶＩＰ与人胃肠腺癌及癌旁组织细胞膜进行体外时间－温度结合实验、饱和结合实验和竞争结合实验。结果显示：碘标记率７０％，^（１２５）Ｉ－ＶＩＰ比活度１８ＴＢｑ／ｍｍｏｌ，放射化学纯度９８％；^（１２５）Ｉ－ＶＩＰ与人胃腺癌及癌旁组织细胞膜、结肠腺癌及癌旁组织细胞膜的结合具有温度与时间依赖性、可饱和性及特异性；Ｓｃａｔｃｈａｒｄ作图均为一直线，提示上述组织细胞膜含有单一位点ＶＩＰ受体；胃腺癌细胞膜及癌周组织细胞膜、结肠腺癌细胞膜及癌周组织细胞膜上ＶＩＰ受体的Ｋ_ｄ值分别为１．９１、１．２６、０．９７、１．５３ｎｍｏｌ／Ｌ；Ｂ_（ｍａｘ）分别为３３９、１５６、３０４、 １５１ｆｍｏｌ／ｍｇ。研究结果表明人胃肠腺癌细胞膜与其癌旁组织细胞膜相比， ＶＩＰ受体亲和力无明显变化，最大结合容量明显增加，为ＶＩＰ受体显像奠定了直接的实验依据。

VIP-^(125)I-ASON的制备及其在荷瘤裸鼠体内的分布

目的通过制备VIP-^(125)I-ASON(反义寡核苷酸)并观察其在荷瘤裸鼠体内的分布,探讨以血管活性肠肽(VIP)作为载体进行肿瘤放射性反义治疗的可行性。方法以三氯化铊作为氧化剂,将与C-mycmRNA互补的15个碱基的ASON进行125I标记。碘化的ASON与血管活性肠肽-多聚赖氨酸(VIP-PL)通过静电作用结合形成放射性反义复合物。荷瘤BALB/c裸鼠尾静脉注射VIP-^(125)I-ASON或^(125)I-ASON后,于不同时相观察各脏器及肿瘤组织的放射性分布情况。结果125I-ASON主要浓聚在肝、肾,另外肺、脾、胃、肠也有较少浓聚,而其它组织放射性分布极少。除肝、脾、骨外,其余组织的清除速度较快。VIP-^(125)I-ASON在体内的分布以肝为最高,其次为肺、脾、肾脏,其它组织放射性分布较少,各组织中放射性清除较125I-ASON为慢。VIP-^(125)I-ASON在肿瘤组织中摄取增高,2h达最大,为5.89%ID/g,明显高于未经VIP受体介导的125I-ASON肿瘤组织的摄取,其最大值仅为1.98%ID/g。肿瘤/血液及肿瘤/肌肉的放射性比值在4h达最大。结论VIP与125I-ASON偶联后,使其经肾脏排泄减少,血液及组织内清除速度有所减慢,在肿瘤组织摄取增高,可望用于肿瘤的显像诊断与治疗。

肿瘤VIP受体显像的实验研究

探讨了放射性碘标记血管活性肠肽（VIP）实现肿瘤VIP受体显像的可能性。应用氯胺-T法标记、SephadexG－50柱层析分离纯化制备125I－VIP，硅胶TLC与体外竞争结合实验检测标记VIP的稳定性与生物活性；研究125I－VIP在荷SGC7901裸鼠体内分布。结果显示：125I标记率为73．8％；标记VIP的比活度为18．2PBq／mol；放化纯为98％，-80℃贮存48天后为96．3％；VIP以剂量依赖方式抑制125I-VIP与SGC7901细胞结合；各时相肿瘤放射性均高于肌肉（P＜0.05—0.01），高峰摄取时间为30min（3．58±0．48％ID／g），T／N峰比值（3.05）出现于60min；肺放射性高于血液（P＜0．05），肠道放射性始终处于低水平；体内放射性主要经肾脏排泄。本研究表明放射性核素标记VIP可望成为一有效的肿瘤VIP受体显像剂。

血管活性肠肽对肺表面活性物质结合蛋白A表达的影响

目的 :研究血管活性肠肽 (VIP)对肺表面活性物质结合蛋白A(SP A)表达的影响以及VIP调控SP A表达的细胞内信号转导途径。方法 :运用免疫组织化学和RT PCR技术研究VIP对SP A表达的影响 ;并进一步运用受体拮抗、蛋白激酶抑制、反义寡核苷酸阻断等手段探讨VIP促进SP A表达的信号转导途径。结果 :①VIP(10 -8mol/L)促进肺泡Ⅱ型细胞 (ATⅡ )细胞中的SP A蛋白表达和提高肺组织SP AmRNA含量 :②VIP受体拮抗剂 (10 -6mol/L)可取消VIP(10 -8mol/L)促进SP A表达的效应 ;③蛋白激酶C抑制剂H7(10 -5mol/L)和c fos基因的反义寡核苷酸 (9× 10 -6mol/L)均可阻断VIP促进SP A表达的作用。结论 :VIP通过其受体促进SP A的表达 ,PKC及c fos蛋白在介导VIP促进SP A表达的细胞内信号转导过程中起重要作用。

血管活性肠肽及其受体与胆囊胆固醇结石患者胆囊排空的相关研究

目的 探索胆囊胆固醇结石患者胆囊排空与血浆和胆汁血管活性肠肽 (VIP)的浓度及其胆囊壁VIP受体 (VIP R)表达的关系以及在胆囊结石形成中的意义。方法 采用B超测定胆囊排空功能 ,同时抽空腹静脉血及胆囊结石手术病人胆汁放免测定VIP浓度 ,免疫组化测定VIP R的表达。结果 胆囊结石病人胆囊排空障碍 ;血浆VIP浓度正常人为 ( 8.2 8± 0 .98)ng/L ,胆囊结石病人为 ( 15 .64± 2 .5 1)ng/L ,显著升高 ( P <0 .0 1) ;胆汁VIP高于血浆VIP ;空腹容积越大 ,血浆VIP(P <0 .0 5 )和胆汁VIP(P <0 .0 1)浓度越高 ,VIP R表达越强。结论 胆囊排空功能在胆囊结石形成中起重要作用 ,胆囊结石病人胆囊排空障碍与VIP明显相关 。

THE AUTOCRINE REGULATORY EFFECT OF VASOACTVE INTESTINAL PEPTIDE ON THE GROWTH OF HUMAN PANCREATIC CARCINOMA CELLS

In the present study, the effects of VIP on the growth of two human pancreatic carcinoma cell lines PU-PAN-l and PANC-I were determined using tritiated thymidine incorporation. VIP receptors. intracellular cAMP and polyamines were investigated. The results indicated that VIP at a concentration of 10-8 mol/L to 10-7 mol/L can significantly stimulate the growth of PU-PAN-I cells but not PANC-1 cells. This effect is dose-dependent and abolished by VIP receptor antagonist, [4-C1-Phe6 . Leu17] VIP, suggesting VIP receptors in PU-PAN-I cells may mediate this effect. VIP can markedly elevate the levels of intracellular cAMP and polyamines in PU-PAN-I cells.indicating that the growth-promoting effect stimulated by VIP may be via a rapid increase in the biosyntheses of cAMP and polyamines. In addition, the VIP-antibody inhibited the growth of PU-PAN-I cells in serum-free culture mediurn. The results above suggested that VIP has an autocrine regulatory effect on this pancreatic carcinoma cell line (PU-PAN-1).

结肠腺瘤和腺癌肠血管活性多肽及胰泌素受体表达

目的了解结肠腺瘤和腺癌肠血管活性多肽vasoactiveintestinalpeptideVIP受体和胰泌素受体表达的变化。方法:采用储磷放射自显影技术测定并显示无肿瘤结肠、结肠腺瘤、结肠癌、结肠癌肝转移灶及无肿瘤肝脏的组织切片上的VIP和胰泌素受体。结果:无肿瘤结肠、结肠腺瘤、结肠癌、结肠癌肝转移灶组织均表达了VIP和胰泌素受体。结肠癌肝转移灶中的VIP受体亲和力Kd=3.30nmol显著低于无肿瘤结肠Kd=0.82nmolP<0.05。与之相反,结肠癌肝转移灶中的胰泌素受体亲和力Kd=1.9nmol显著高于无肿瘤结肠Kd=5.3nmolP<0.05。结论:在结肠癌发生发展过程中,属于同一家族的VIP和胰泌素两种受体亲和力的变化恰好相反,前者降低,后者增加。结肠癌肝转移灶中VIP受体结合量的显著降低可能有助于理解结肠癌细胞转移的现象。

黄秋葵粗多糖对脾虚便秘模型小鼠的作用及机制研究

目的探讨黄秋葵粗多糖对脾虚便秘模型小鼠的作用及机制。方法将60只昆明小鼠随机分为正常组、模型组、麻仁丸组(0.8 g·kg^(-1))及黄秋葵粗多糖低、中、高剂量组(0.4、0.8、1.6 g·kg^(-1))。采用灌胃番泻叶水煎液(每日0.8 mL)结合限制饮食饮水、饥饱失常的方法复制脾虚便秘模型小鼠。模型复制成功后,连续灌胃给药(15 mL·kg^(-1))7 d,每日观察小鼠状态。进行小鼠排便功能实验;测定血清中D-木糖含量;计算小肠墨汁推进率;采用免疫组化法测定小鼠肠组织酪氨酸激酶受体(c-kit)及血管活性肠肽(VIP)表达水平。结果与模型组比较,黄秋葵粗多糖中、高剂量组小鼠的首便时间显著缩短(P<0.01),6 h内排便数量、粪便质量及含水量均明显升高(P<0.05,P<0.01);墨汁推进长度、墨汁推进率及血清D-木糖浓度均明显升高(P<0.05,P<0.01);c-kit阳性细胞像素面积比值和H-score评分明显升高(P<0.01),VIP阳性细胞像素面积比值和H-score评分明显降低(P<0.01)。结论黄秋葵粗多糖对脾虚便秘小鼠具有治疗作用,可能与上调肠道组织中的c-kit表达水平及下调VIP表达水平有关。

荔波瑶山鸡血管活性肠肽及其受体基因变异与繁殖性状的关联性

【目的】探明血管活性肠肽(VIP)及其受体VIPR-1和VIPR-2基因与荔波瑶山鸡繁殖性状的关联性,找出可作为荔波瑶山鸡繁殖性状的重要标记。【方法】采用PCR测序法对VIP基因编码区及部分内含子区、VIPR-1和VIPR-2基因部分序列区域进行变异检测,并与繁殖性状进行关联分析。【结果】在瑶山鸡群体中,VIP基因检测到1个内含子变异位点,VIPR-1基因检测到1个编码区变异位点,1个插入/缺失变异以及14个内含子区域SNP位点,VIPR-2基因检测到1个编码区变异位点以及2个内含子变异位点。VIPR-1基因的6个多态位点(基因位置39 109、39 114、39 227、68 817、69 061、97 123)和VIPR-2基因的3个多态位点(基因位置3739、3184、49 246)与300日龄产蛋量、就巢性状呈显著或极显著相关(P<0.05或P<0.01)。【结论】以上多态位点可作为荔波瑶山鸡繁殖性状有显著或极显著影响指标的辅助选择标记。

加味芪榔方治疗药物依赖性气阴两虚型便秘患者的疗效及对外周血MTL,VIP,5-HT和5-HT4R的影响

目的:探究加味芪榔方对药物依赖性气阴两虚型便秘患者的临床疗效及对血清血管活性肠肽(VIP),胃动素(MTL),5-羟色胺(5-HT),5-羟色胺4受体(5-HT4R)的影响。方法:选取符合药物依赖性气阴两虚型便秘诊断标准的患者160例,随机分为观察组与对照组,每组80例;观察组予加味芪榔方治疗,对照组予乳果糖口服溶液治疗,连续治疗8周。观察2组患者临床疗效,中医证候及血清VIP,MTL,5-HT,5-HT4R水平变化。比较2组临床疗效并进行至少8周复发率、中医证候随访。结果:观察组患者治疗后总有效率90.91%,对照组75.00%,观察组明显高于对照组(Z=-6.514,P<0.05)。2组患者治疗前血清VIP,MTL,5-HT,5-HT4R差异无统计学意义。连续用药8周后,2组患者血清VIP水平较治疗前降低(P<0.05),且观察组低于对照组(P<0.05);2组患者血清MTL水平均较治疗前升高(P<0.05),且观察组明显高于对照组(P<0.05);治疗后观察组5-HT水平明显高于对照组(P<0.05);观察组5-HT4R水平较治疗前略有升高(P<0.05),但2组患者治疗后5-HT4R水平差异无统计学意义。随访至少8周,第2,4周观察组复发率明显低于对照组(P<0.05),第8周后观察组复发率57.14%(40/70),对照组复发率64.81%(35/54),差异无统计学意义。结论:加味芪榔方治疗药物依赖性气阴两虚型便秘临床近、中期疗效优于乳果糖,远期疗效不显著,其治疗机制或与调节患者血清VIP,MTL,5-HT水平有关。

气道上皮屏障在支气管哮喘防御机制中的研究进展

支气管哮喘（简称哮喘）是一种气道慢性炎症性疾病,但是它的发病机制还不完全清楚.哮喘是由多种因素引起的复杂的疾病,气道上皮屏障的损伤是其主要特征.本文将对气道上皮屏障在哮喘中的防御机制作一综述.

气道上皮屏障在支气管哮喘防御机制中的研究进展

支气管哮喘(简称哮喘)是一种气道慢性炎症性疾病,但是它的发病机制还不完全清楚。哮喘是由多种因素引起的复杂的疾病,气道上皮屏障的损伤是其主要特征。本文将对气道上皮屏障在哮喘中的防御机制作一综述。

血管活性肠肽对人胰腺癌细胞生长的自分泌调节作用及其机制的研究

采用３Ｈ－胸腺嘧啶掺入研究了血管活性肠肽（ＶＩＰ）对我院所建一株人胰腺癌细胞生长的影响，并对该细胞株进行ＶＩＰ受体、受体后细胞内介质ｃＡＭＰ和多胺产生的研究。发现ＶＩＰ在１０－８Ｍ和１０－７Ｍ对具有ＶＩＰ受体的人胰腺癌细胞有明显促生长作用，且成浓度依赖关系，这种作用可被其受体拮抗剂（４－Ｃｌ－Ｄ－ｐｈｅ６，Ｌｅｕ１７）ＶＩＰ所阻断；ＶＩＰ能显著促进本株人胰腺癌细胞细胞内ｃＡＭＰ及多胺的产生，表明ＶＩＰ的促生长作用可能与细胞内ｃＡＭＰ和多胺的生物合成增加有关；本株细胞在培养过程中可向培养基中分泌一定量的ＶＩＰ，ＶＩＰ抗体能抑制其在无血清培养基中生长，提示ＶＩＰ对本株人胰腺癌细胞的生长有自分泌调节作用。

糖尿病相关VPAC、PAC受体及其药物研发的进展

VPAC、PAC受体是近年发现的开发2型糖尿病药物的重要靶标,垂体腺苷酸环化酶激活多肽(PACAP)、血管活性肠肽(VIP)则是它们的天然配体,与受体结合激活后能促进葡萄糖依赖性胰岛素分泌,既能保护细胞又不引起胰高血糖素分泌和糖原分解,因此其配体相关化合物的开发研究成为开发2型糖尿病药物的重要方向。目前针对VPAC、PAC受体开发的配体类似物主要包括了肽类和非肽类小分子两大类,但它们仍然存在诸多不足,至今仅有一个药物进入到临床研究阶段。本综述系统总结了目前针对VPAC、PAC受体为靶标的肽类和非肽小分子药物的开发研究现状,可为将来此类药物的研发提供参考。