16S rRNA与Vitek-32对临床感染猪肠球菌鉴定结果比较

旨在利用两种常用的细菌分型方法对感染猪的肠球菌的鉴定结果进行比较和分析。将从河南洛阳、济源、许昌、南阳等地送检病猪体内分离的42株革兰阳性球菌纯培养后,分别用16S rRNA基因序列比较和Vitek-32全自动细菌鉴定系统进行鉴定。Vitek-32对42株分离菌中的34株鉴定到种的水平,分别是粪肠球菌(E.faecalis)10株、屎肠球菌(E.faecium)2株、铅黄肠球菌(E.casseliflavus)22株;另有8株未成功鉴定。16S rRNA基因序列分析对42株分离菌成功的鉴定结果是为粪肠球菌12株,屎肠球菌30株。经比较发现,Vitek-32鉴定的10株粪肠球菌中除1株被16S rRNA鉴定为屎肠球菌外,其余9株均相同;Vitek-32鉴定的2株屎肠球菌与16S rRNA鉴定结果相同;Vitek-32鉴定的22株铅黄肠球菌除了1株被16S rRNA鉴定为粪肠球菌外,其余全部被鉴定为屎肠球菌;8株未能被Vitek-32鉴定的肠球菌被16S rRNA方法分别鉴定为粪肠球菌(2株)和屎肠球菌(6株)。在感染猪的肠球菌分型鉴定中,Vitek-32对粪肠球菌鉴定结果与16S rRNA比较具有较高的一致性(75%);而对于屎肠球菌的鉴定结果与16S rRNA比较出现了较大的差异(93.3%)。

VITEK-32全自动细菌分析系统检测超广谱β-内酰胺酶结果的评价

目的评价VITEK-32全自动细菌分析系统检测肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶(ES-BLs)的可靠性。方法对122株肺炎克雷伯菌和116株大肠埃希菌用VITEK-32全自动细菌分析系统和革兰阴性杆菌药敏卡测定ESBLs,同时用美国临床实验室标准化委员会推荐的纸片扩散确证法进行对照。结果仪器法、确证法检测ESBLs菌株阳性率分别为39.2%、38.4%。结论选择准确快速的检测方法,提高ESBLs菌株的阳性检出率,具有重要意义。

Vitek-32在全国细菌室间质评中的应用

目的:评价Vitek-32全自动微生物分析仪对革兰氏阴性杆菌(G^-b),革兰氏阳性菌,酵母类真菌的鉴定情况。方法:笔者从1997年使用Vitek-32检测卫生部发放的菌株,4年中,共收到质探菌株51株,检测了47株。结果:Vitek-32对23株G^-b的鉴定正确率为100％,鉴定值均在95％以上(NPP≥95％),且耗时短,在4h左右能将多数菌鉴定到种,13h后能鉴定其中的95.7％;Vitek-32对G^+球菌的鉴定符合率分别为葡萄球菌属66.7％,链球菌属71.4％;对酵母类真菌的鉴定符合率为83.3％。结论:Vitek-32对肠杆菌科细菌、非发酵菌、弧菌科细菌的鉴定效果好,准确性高、快速;对葡萄球菌、链球菌的鉴定较满意;对真菌的鉴定,适当结合形态学观察,鉴定正确率较高、时间短,较传统方法提前24～48h。总之,Vitek-32的运用,可有效提高工作效率,有助于临床上快速诊断和治疗患者。

Vitek-32微生物分析仪检测耐甲氧西林葡萄球菌评价

目的以聚合酶链反应(PCR)检测mecA基因作为标准方法,评价Vitek-32微生物分析仪检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)及凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的可靠性。方法收集金黄色葡萄球菌72株,MRCNS64株,采用微生物分析仪Vitek-32配套的GPS-110卡检测MRSA与MRCNS,并与PCR及头孢西丁纸片扩散法进行比较。结果Vitek-32微生物分析仪检测MRSA及MRCNS的灵敏度及特异性分别为100.0%和89.7%、100.0%和80.0%;头孢西丁纸片扩散法的灵敏度及特异性均为100.0%。结论微生物分析仪Vitek-32操作简单、快速,检测MRSA及MRCNS的灵敏度高,是一种较好的方法。对于可疑株,用头孢西丁纸片扩散法复查可提高特异性。

VITEK-32506卡检测产ESBLs大肠埃希菌可靠性分析

目的评价VITEK-32 GNS-506药敏卡检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌耐药性的可靠性。方法用VITEK-32 GNS-506药敏卡、NCCLS推荐的筛选法、表型确证法同时对288株大肠埃希菌进行ESBLs检测,以表型确证法和筛选法作为对照比较结果。结果 288株大肠埃希菌中,仪器法检测出ESBLs146株,表型确证法检测140株,筛选法检测132株,阳性率分别为50.7%、48.6%、45.8%。仪器法高于筛选法和表型确证法。结论 VITEK-32 GNS-506药敏卡检测ESBLs细菌耐药性具有快速、简便、准确性高等优点,可推荐为临床实验室常规检测方法。

API 20E、VITEK-32在临床细菌鉴定中的应用

目的对API 20E、VITEK-32在临床细菌鉴定中的应用效果进行评价。方法利用API 20E、VITEK-32对临床收集的67株肠道杆菌进行了鉴定,并用常规生化和血清学方法对鉴定结果进行确认。结果 API 20E试条和VITEK-32对67株肠道杆菌的鉴定结果与常规鉴定法符合率为100%。结论 API 20E、VITEK-32鉴定系统快速、准确,可用于临床细菌的鉴定。

应用VITEK32检验奶粉中阪崎肠杆菌的探讨

目的阪崎肠杆菌(Enterobacter sakazakii)是乳制品中新发现的引起广泛关注的一种致病菌,加强对该菌的检验,对预防与控制由该菌所致的感染流行十分重要。方法采用中华人民共和国出入境检验检疫行业标准:SN/T1632.1-2005《奶粉中阪崎肠杆菌检验方法》第1部分:奶粉中阪崎肠杆菌的分离与计数方法,应用VITEK32(全自动微生物鉴定和药敏分析仪)进行检验。结果从原产法国的婴幼儿营养配方奶粉中检出阪崎肠杆菌。结论检出菌株与质控菌株的生化特征基本一致,该方法可使样品中极少量的阪崎肠杆菌被检测和定量。

猪源粪肠球菌和屎肠球菌多重PCR快速鉴定方法的建立

粪肠球菌和屎肠球菌是引起猪感染发病的优势肠球菌种,以肠球菌的16 S rRNA基因设计属特异性引物,利用SodA基因多态性设计种特异性引物,同时优化反应条件,建立了能同时测定猪源粪肠球菌和屎肠球菌多重PCR方法。通过对来源于猪的临床菌株、粪便菌株和鲜猪肉菌株进行测定,均能成功扩增出属特异性片段和种特异性片段。经过与快速生化鉴定试剂盒(Vitek-32)和16 S rRNA测序方法比较,多重PCR与16 S rRNA测序方法对猪的临床菌株、粪便菌株和鲜猪肉菌株的鉴定符合率100%;与Vitek-32鉴定符合率为62.3%,其中,与分离于感染猪的临床菌株符合率仅有46.7%,特别是感染猪的屎肠球菌,符合率仅为22.3%。

一株致仔猪关节炎粪肠球菌的鉴定

对1株分离自关节炎病仔猪的肠球菌进行鉴定。选用常规方法进行染色特性、培养特性观察以及药物敏感性和致病试验,然后利用Vitek-32全自动细菌鉴定系统进行生化特性鉴定,并用PCR方法扩增分离株的16 S rRNA基因,克隆并测序,与GenBank上登录的相关菌株及3个粪肠球菌标准菌株进行16 SrRNA序列比较、同源性分析并构建系统发育树。结果显示,该分离株形态及染色特性与肠球菌一致,对仔猪具有一定的致病性,并对临床常用的7种药物产生了耐受性;Vitek-32生化鉴定和16 S rRNA基因同源性分析及比对结果均显示其为粪肠球菌(E.faecalis)。试验证实了粪肠球菌可导致仔猪关节炎。

62株阴沟肠杆菌的生化特性和药敏结果

目的 探讨临床分离阴沟肠杆菌的实用鉴定方法。方法 对VITEK 32微生物分析仪鉴定所得的 6 2株阴沟肠杆菌的生化反应和药敏结果作回顾性分析。结果 6 2株阴沟肠杆菌用鉴定卡鉴定的可信度在 94 %～99% ,其中 5 1株为 99%、占 82 3% ,4株为 95 %、占 6 5 % ,其他 7株、占 11 2 %。阴沟肠杆菌对除外亚胺培南的 2 0种抗生素均有不同程度的耐药。结论 脲酶、侧金盏花醇、精氨酸水解和赖氨酸脱羧等试验对肠杆菌属中 5个常见菌种 (阴沟、坂崎、产气、聚团和格高菲肠杆菌 )

两种仪器在微生物室间质评中的应用与比较

目的通过VITEK-32和Microscan AS-4微生物鉴定系统对室间质控菌株的鉴定,了解两种仪器的差异性及与质评结果的符合程度。方法对39株不同批次的质控菌株按操作规程进行分离与培养,用VITEK-32和Microscan AS-4进行鉴定并作比较。结果VITEK-32和Microscan AS-4能直接鉴定到种的菌株与39株质控株的符合率分别为76.9%和69.5%,经血清学或进一步生化验证后符合率分别为89.7%和76.9%,其中,二者对22株革兰阴性菌的鉴定符合率分别为90.9%和81.8%,对17株革兰阳性菌的鉴定符合率则分别为88.2%和58.8%。结论VITEK-32对微生物的检出率和准确性均优于Microscan AS-4,尤其在肠球菌属和链球菌属鉴定方面;二者对革兰阴性菌的鉴定准确性较好,对革兰阳性球菌的鉴定准确性稍差,而对需要血清学证实的沙门菌属、志贺菌属都不能鉴定到种。

洋葱伯克霍尔德菌在几种肠道选择性培养基上的生长比较及对VITEK鉴定的影响

目的:了解洋葱伯克霍尔德菌在几种肠道选择性培养基上的生长及使用不同肠道选择性培养基对VITEK-32鉴定的影响。方法:将洋葱伯克霍尔德菌接种在基础琼脂、麦康凯、中国蓝和伊红美蓝上培养24～36h后相互转种观察生长情况,同时使用VITEK-32配套的NFC、GNI+鉴定卡对临床分离株对后3种培养基上的菌落进行鉴定各1次,对一株质控菌株取各培养基上各阶段菌龄连续鉴定10次。结果:VITEK对洋葱伯克霍尔德菌临床分离株在中国蓝上的鉴定准确率较高,为97.37%,其次为伊红美蓝85.53%,麦康凯为77.63%。质控株在基础琼脂和中国蓝上各阶段菌龄VITEK均能正确鉴定,而伊红美蓝和麦康凯在菌龄42h之后鉴定能力差。结论:VITEK-32对中国蓝上的洋葱伯克霍尔德菌的鉴定准确率较高,使用中国蓝作为常规培养基可提高临床对该菌的检出率。

基因扩增和3种表型筛查法检测耐甲氧西林葡萄球菌的应用评价

目的比较4种方法检测耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)的阳性检出率、灵敏度和特异度,以便临床检测MRS时选择。方法用Vitek-32全自动细菌鉴定仪法、苯唑西林琼脂稀释法、头孢西丁纸片扩散法和mecA基因检测法分别检测175株葡萄球菌中的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS),经行×列表资料的χ2检验比较阳性检出率,并以mecA基因检测法为"金标准"计算其他3种方法的灵敏度和特异度。结果4种方法检出MRSA的阳性率无差别(χ2=1.640,P>0.05),但检测MRCNS的阳性率有差别(χ2=9.478,P<0.05),其中Vitek-32全自动细菌鉴定仪法和苯唑西林琼脂稀释法检出MRCNS的阳性率高于mecA基因检测法;3种表型检测法检测MRSA的灵敏度和特异度分别为100%、96.3%、96.3%和88.2%、100%、100%,检测MRCNS的灵敏度均为100%,特异度分别为50%、46.1%和65.4%。结论最终判定MRS时,要考虑到mecA基因和苯唑西林最低抑菌浓度两个因素,并区别对待mecA基因介导的MRS和非mecA基因介导的MRS。

耐甲氧西林葡萄球菌3种检测方法的实验比较及临床应用

目的通过对200株临床分离的葡萄球菌耐苯唑西林的检测,比较3种表型检测法的阳性率并对其临床实用性进行评价。方法采用美国NCCLS 2004年制订的头孢西丁-纸片扩散法、V ITEK 32微生物鉴定仪检测及苯唑西林盐琼脂法测试m ecA介导的葡萄球菌耐药。结果200株被检测的葡萄球菌中,头孢西丁-纸片扩散法检出耐苯唑西林的阳性率为68%(136/200);苯唑西林盐琼脂法的阳性率为67.5%(135/200);V ITEK 32仪的阳性率为68.5%(137/200);且耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(M RCN S)的耐药率(86.2%)高于耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(26.23%)。3种检测方法结果经χ2检测差异无显著性。结论3种方法操作都简便,但各有优缺点,V ITEK32仪器检测葡萄球菌耐笨唑西林费用高,一般小型医院不具备条件;盐琼脂筛选法判读直观,但要掌握好孵育时间;NCCLS 2004版的纸片扩散法较经济实用,不仅可检测被检菌是否耐笨唑西林,同时还可获得大环内酯-林可霉素-链阳霉素(M LSB)结果,但是当头孢西丁的判断折点在临界时应当复检,建议与盐琼脂筛选法同步检测。

福州市134株肠球菌的耐药性分析

目的了解肠球菌的耐药状况,指导临床合理用药。方法对临床分离的134株肠球菌,用法国生物梅里埃公司的全自动细菌鉴定仪VITEK-32进行鉴定分析。结果134株肠球菌中,粪肠球菌113株(占84.3%),屎肠球菌19株(占14.2%),鸡肠球菌与铅黄肠球菌各1株(占1.5%),耐万古霉素肠球菌(VRE)与庆大霉素高水平耐药(HLGR)肠球菌分别占肠球菌感染标本总数的4.5%和52.3%,未发现对万古霉素和高浓度庆大霉素双重耐药株。结论肠球菌对临床常用8种抗生素以万古霉素、呋喃妥因最敏感,对其他抗生素均有不同程度耐药。对肠球菌引起的感染应选择根据分离株的耐药特点和药敏显示敏感的抗生素来治疗。

肉雏鸡腹泻病原的分离与鉴定

通过对发生腹泻肉雏鸡进行剖解,临床观察,采用VITEK-32全自动微生物鉴定系统对分离到的2株细菌进行生化鉴定、药物敏感性试验,确定2分离株为奇异变形杆菌和阴沟肠杆菌。发病鸡使用庆大霉素、头孢噻肟后,治疗效果显著。