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基于Penton蛋白禽腺病毒血清4型间接ELISA抗体检测方法的建立
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作者 李鹏 雷梦瑶 +9 位作者 冯丽丽 王振伟 管春晓 郑洪双 王俊茹 王利平 李炎锦 吴欣媛 刘兴友 金前跃 《河南农业科学》 北大核心 2024年第7期133-141,共9页
Penton蛋白是构成禽腺病毒血清4型(Fowl adenovirus serotype 4,FAdV-4)衣壳的主要结构蛋白,具备高度保守性与良好的免疫原性。以纯化的Penton蛋白为包被抗原,建立一种基于禽腺病毒血清4型Penton蛋白的间接ELISA抗体检测方法。结果显示,... Penton蛋白是构成禽腺病毒血清4型(Fowl adenovirus serotype 4,FAdV-4)衣壳的主要结构蛋白,具备高度保守性与良好的免疫原性。以纯化的Penton蛋白为包被抗原,建立一种基于禽腺病毒血清4型Penton蛋白的间接ELISA抗体检测方法。结果显示,Penton蛋白最佳包被质量浓度为2μg/mL,血清稀释倍数为200倍,酶标抗体稀释倍数为1∶5000,阳性临界值为0.222,敏感性可达到1∶6400,与鸡传染性支气管炎病毒、鸡传染性法氏囊病病毒、鸡传染性喉气管炎病毒均无交叉反应,特异性良好,批间批内重复性变异系数均<10%,在100份临床血清中阳性检出率为77%,与商品化试剂盒检出符合率可达98%。综上,建立的ELISA抗体检测方法可以用于禽腺病毒4型临床抗体检测。 展开更多
关键词 禽腺病毒血清4 Penton蛋白 间接ELISA 抗体检测
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猪细小病毒4型单克隆抗体制备及抗原表位鉴定
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作者 柴书军 杨苏珍 +5 位作者 刘运超 冯华 魏蔷 王方雨 金前跃 张改平 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2024年第8期77-84,共8页
为了制备猪细小病毒(PPV)4型Cap蛋白单克隆抗体(mAb)并鉴定其抗原表位,试验采用原核表达的Cap重组蛋白免疫BALB/c小鼠,将其脾细胞与SP2/0细胞进行融合,通过酶联免疫吸附测定(ELISA)、血凝抑制(HI)和免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)筛... 为了制备猪细小病毒(PPV)4型Cap蛋白单克隆抗体(mAb)并鉴定其抗原表位,试验采用原核表达的Cap重组蛋白免疫BALB/c小鼠,将其脾细胞与SP2/0细胞进行融合,通过酶联免疫吸附测定(ELISA)、血凝抑制(HI)和免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)筛选阳性克隆,最终获得2E7、4D6和5C9这3株特异性杂交瘤细胞株;然后用mAb对Cap蛋白多肽进行ELISA检测,鉴定分析其抗原表位。结果显示:4D6和5C9 mAb识别表位为线性表位,分别为387RRQDN^(391)和578QRKE^(581),而2E7 mAb识别的表位为构象表位;通过对Cap蛋白3D结构定位分析,387RRQDN^(391)和578QRKE^(581)抗原表位位于蛋白表面,且在PPV4亚型中高度保守,而与猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪乙型脑炎病毒(JEV)和猪博卡病毒(PBoV)基因序列同源性低。本研究为PPV4诊断试剂的开发和新型疫苗的研制提供了参考。 展开更多
关键词 猪细小病毒4 单克隆抗体 抗原表位
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血清4型禽腺病毒Fiber蛋白的原核表达及其在抗体检测中的应用
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作者 王圆梦 王伟康 +5 位作者 李拓凡 万志敏 邵红霞 秦爱建 叶建强 谢泉 《中国家禽》 北大核心 2024年第7期51-59,共9页
为建立特异的血清4型禽腺病毒(FAdV-4)血清学抗体检测技术,试验将FAdV-4纤突蛋白基因fiber-2克隆至载体pET-28a中,构建原核表达载体pET-28a-Fiber-2,获得纯化的重组蛋白His-Fiber-2,以纯化的His-Fiber-2作为包被抗原建立检测Fiber-2抗... 为建立特异的血清4型禽腺病毒(FAdV-4)血清学抗体检测技术,试验将FAdV-4纤突蛋白基因fiber-2克隆至载体pET-28a中,构建原核表达载体pET-28a-Fiber-2,获得纯化的重组蛋白His-Fiber-2,以纯化的His-Fiber-2作为包被抗原建立检测Fiber-2抗体的间接ELISA方法,对该方法进行特异性、重复性、稳定性、灵敏性试验,并与BioChek FAdV商品化ELISA试剂盒检测结果进行比较。结果显示:建立的ELISA仅与抗FAdV-4阳性鸡血清发生反应,与检测的抗其他病原的血清以及SPF鸡血清均无反应性,批间重复性与批内重复性良好,其变异系数分别在4.345%~6.983%和4.326%~9.391%之间,包被酶标板保存12个月后,变异系数为4.4%~10.0%,其检测灵敏度是间接免疫荧光检测技术的8~32倍,是基于包被GST-Fiber-2蛋白ELISA的2倍;建立的ELISA对FAdV-4灭活疫苗免疫的鸡血清检出率高于BioChek试剂盒,两者对临床感染FAdV-4的鸡血清的检测结果一致。研究表明,试验构建的基于重组蛋白His-Fiber-2的检测FAdV-4抗体的间接ELISA方法为临床上FAdV-4感染监测以及疫苗的免疫评价提供了技术,具有良好的应用前景。 展开更多
关键词 血清4型禽腺病毒 原核表达 间接ELISA 抗体检测
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Anti-glial fibrillary acidic protein antibody and anti-aquaporin-4 antibody double-positive neuromyelitis optica spectrum disorder:A case report
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作者 Ting-Yu Jin Bing-Tong Lin +3 位作者 Li-Jv Dai Xia Lu Han Gao Jin Hu 《World Journal of Clinical Cases》 SCIE 2023年第34期8192-8199,共8页
BACKGROUND A case of neuromyelitis optica spectrum disorder(NMOSD)with positive cerebrospinal fluid(CSF)anti-aquaporin-4 antibody(AQP4-IgG)and anti-glial fibrillary acidic protein IgG(GFAP-IgG)at the time of relapse w... BACKGROUND A case of neuromyelitis optica spectrum disorder(NMOSD)with positive cerebrospinal fluid(CSF)anti-aquaporin-4 antibody(AQP4-IgG)and anti-glial fibrillary acidic protein IgG(GFAP-IgG)at the time of relapse was reported.The exact roles of GFAP-IgG in NMOSD are not fully understood and are the subject of ongoing research.This study revealed the possible connection between GFAPIgG and the occurrence or development of diseases.CASE SUMMARY A 19-year-old woman was admitted to the hospital due to a constellation of symptoms,including dizziness,nausea,and vomiting that commenced 1 year prior,reoccurred 2 mo ago,and were accompanied by visual blurring that also began 2 mo ago.Additionally,she presented with slurred speech and ptosis,both of which emerged 1 mo ago.Notably,her symptoms deteriorated 10 d prior to admission,leading to the onset of arm and leg weakness.During hospitalization,magnetic resonance imaging showed high T2-fluid attenuated inversion recovery signals,and slightly high and equal diffusion-weighted imaging signals.The serum antibody of AQP4-IgG tested positive at a dilution of 1:100.CSF antibody testing showed positive results for GFAP-IgG at a dilution of 1:10 and AQP4-IgG at a dilution of 1:32.Based on these findings,the patient was diagnosed with NMOSD.She received intravenous methylprednisolone at a daily dose of 500 mg for 5 d,followed by a tapering-off period.Afterward,the rate of reduction was gradually slowed down and the timely use of immunosuppressants was implemented.CONCLUSION The CFS was slightly GFAP-IgG-positive during the relapse period,which can aid in the diagnosis and treatment of the disease. 展开更多
关键词 Anti-glial fibrillary acidic protein antibody Neuromyelitis optica spectrum disorder Anti-aquaporin-4 antibody Cerebrospinal fluid Case report
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禽腺病毒4型Fiber-2蛋白单克隆抗体的制备及双抗体夹心ELISA检测方法的建立
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作者 刘文健 王帅雯 +5 位作者 吉梅 刘萌 汤智辉 张硕 宋素泉 闫丽萍 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2024年第6期101-109,共9页
旨在制备禽腺病毒4型(FAdV-4)Fiber-2蛋白的单克隆抗体并建立Fiber-2蛋白的定量检测方法。本研究将原核表达的Fiber-2蛋白免疫BALB/c雌鼠,通过细胞融合技术制备杂交瘤细胞,并通过免疫印迹、间接免疫荧光和抗体相加试验筛选杂交瘤细胞株... 旨在制备禽腺病毒4型(FAdV-4)Fiber-2蛋白的单克隆抗体并建立Fiber-2蛋白的定量检测方法。本研究将原核表达的Fiber-2蛋白免疫BALB/c雌鼠,通过细胞融合技术制备杂交瘤细胞,并通过免疫印迹、间接免疫荧光和抗体相加试验筛选杂交瘤细胞株;以制备的单克隆抗体为捕获抗体和酶标检测抗体,通过优化捕获抗体包被浓度和酶标抗体稀释度等条件,建立特异性检测Fiber-2蛋白的双抗体夹心ELISA方法。结果:本研究成功筛选到3株能够稳定传代的杂交瘤细胞株1H2、2A9和3E1,其分泌的抗体均与FAdV-4全病毒具有良好的反应性,可识别不同抗原表位;进一步发现,以1H2为捕获抗体、2A9为酶标检测抗体,能够建立检测Fiber-2蛋白的ELISA方法;该方法具有良好的重复性,批内重复及批间重复试验变异系数均小于10%;敏感性高,Fiber-2蛋白检测限为0.078 ng/μL;特异性好,不与FAdV-4的其他结构蛋白及鸭腺病毒3型的Fiber-2蛋白发生反应。综上,本研究成功制备了3株Fiber-2蛋白单克隆抗体,并建立了定量检测Fiber-2蛋白的双抗体夹心ELISA方法,为后续FAdV-4基础研究和Fiber-2亚单位疫苗研究奠定了物质基础。 展开更多
关键词 禽腺病毒血清4 单克隆抗体 双抗体夹心ELISA
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高纯度RBP4抗体的制备及在水动力转染小鼠肝癌模型中的应用
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作者 张起 李泳锋 +7 位作者 成晓静 欧美珍 廖舟翔 温莎 宋振宇 黄雪静 杨丽超 何敏 《广西医科大学学报》 CAS 2024年第4期524-531,共8页
目的:制备高纯度视黄醇结合蛋白4(RBP4)单克隆抗体并应用其检测高压水动力转染小鼠肝癌模型中RBP4的表达水平。方法:将RBP4重组蛋白表达菌株培养并诱导表达,使用AKTA系统纯化蛋白,通过杂交瘤的方式制备高纯度RBP4单克隆抗体;将7周龄SPF... 目的:制备高纯度视黄醇结合蛋白4(RBP4)单克隆抗体并应用其检测高压水动力转染小鼠肝癌模型中RBP4的表达水平。方法:将RBP4重组蛋白表达菌株培养并诱导表达,使用AKTA系统纯化蛋白,通过杂交瘤的方式制备高纯度RBP4单克隆抗体;将7周龄SPF级C57BL/6J小鼠随机分为实验组和对照组,每组6只,雌雄各半,利用高压水动力转染法联合SB11转座子系统与CRISPR/Cas9系统构建实验组小鼠肝癌模型;将RBP4单克隆抗体应用于免疫组化法检测小鼠肝癌组织中RBP4的表达水平。结果:成功获得纯度95%以上的重组RBP4蛋白,制备RBP4单克隆抗体过程中杂交瘤细胞融合率60%,最终获得3株阳性单克隆细胞株,经纯化获得高效价(1∶243 000)、高纯度(96.77%)单克隆抗体。成功建立高压水动力转染小鼠肝癌模型,实验组肝癌发生率100%,肝脏呈现典型肝癌病理特征,对照未出现肝癌。利用制备的RBP4单克隆抗体进行免疫组化检测,发现实验组肝癌组织中RBP4表达水平显著低于对照组(P<0.001)。结论:本研究制备的RBP4单克隆抗体具有高效价和高纯度特点,RBP4蛋白表达水平在高压水动力转染小鼠肝癌组织中明显降低,RBP4与肝癌发生和发展的关系值得进一步研究。 展开更多
关键词 视黄醇结合蛋白4 抗体 肝癌 水动力转染
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血清4型禽腺病毒Fiber-1蛋白截短表达及多克隆抗体制备
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作者 罗昕雨 赵磊 +5 位作者 陈玉晴 缪欣怡 石家鑫 顾有方 李文超 刘欣超 《安徽科技学院学报》 2024年第2期25-30,共6页
目的:制备血清4型禽腺病毒(FAdV-4)Fiber-1基因截短蛋白多克隆抗体,为FAdV-4病的诊断、检测及致病机制研究奠定基础。方法:对FAdV-4的CH/AHMC/2015分离株Fiber-1基因序列(MG148335.1:30459-31754)进行信号肽、疏水性和抗原决定簇分析,... 目的:制备血清4型禽腺病毒(FAdV-4)Fiber-1基因截短蛋白多克隆抗体,为FAdV-4病的诊断、检测及致病机制研究奠定基础。方法:对FAdV-4的CH/AHMC/2015分离株Fiber-1基因序列(MG148335.1:30459-31754)进行信号肽、疏水性和抗原决定簇分析,截取具有较高免疫原性的片段,设计合成特异性引物,以CH/AHMC/2015分离株基因组DNA为模板进行PCR扩增,获得截短Fiber-1(sFiber-1)基因片段,将其连接至原核表达载体pET-32a,验证后转化至大肠杆菌BL21感受态中,诱导表达sFiber-1蛋白。纯化后的蛋白与佐剂乳化后免疫SD大鼠,制备多克隆抗体,并测定多克隆抗体效价。用Western-blot检测抗体免疫原性。结果:成功构建了sFiber-1的原核表达载体,获得FAdV-4的sFiber-1重组蛋白,经SDS-PAGE鉴定,重组sFiber-1蛋白大小约为52 kDa,主要以包涵体形式表达;间接ELISA法测得sFiber-1多克隆抗体效价为1∶2^(13);Western blot结果显示制备的多克隆抗体能特异性识别出重组sFiber-1蛋白。结论:本研究成功表达了FAdV-4的重组sFiber-1蛋白,制备了具有较高免疫活性的sFiber-1多克隆抗体,可为FAdV-4的检测及诊断奠定基础。 展开更多
关键词 血清4型禽腺病毒 Fiber-1基因 重组蛋白 多克隆抗体
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超声造影及TgAb、SP1和KLF4表达水平对分化型甲状腺癌临床分期的诊断价值
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作者 张文涛 董汉华 +1 位作者 赵亚鹏 康志强 《实用癌症杂志》 2024年第5期701-704,709,共5页
目的探讨超声造影及血清甲状腺球蛋白抗体(TgAb)、特异性蛋白1(SP1)和Krüppel样因子4(KLF4)基因表达对分化型甲状腺癌(DTC)的诊断价值,并分析其相关性。方法采用便利抽样法选取手术治疗的130例DTC患者为研究对象,术前使用彩色多普... 目的探讨超声造影及血清甲状腺球蛋白抗体(TgAb)、特异性蛋白1(SP1)和Krüppel样因子4(KLF4)基因表达对分化型甲状腺癌(DTC)的诊断价值,并分析其相关性。方法采用便利抽样法选取手术治疗的130例DTC患者为研究对象,术前使用彩色多普勒超声诊断仪进行甲状腺检查,记录超声造影参数造影剂达峰时间(TIP)、平均通过时间(MTT)以及峰值强度(PI)。术前采集患者晨起空腹静脉血,检测血清TgAb、SP1和KLF4水平。收集患者术后病理标本,根据AJCC分级系统对DTC临床分期进行评估,比较不同分期患者的超声造影参数与血清TgAb、SP1、KLF4表达水平的差异;采用Spearman法进行DTC临床分期与TIP、MTT、PI、TgAb、SP1、KLF4水平相关性分析;绘制受试者工作特征曲线(ROC)分析超声造影与血清TgAb、SP1、KLF4水平对DTC临床分期的诊断效能。结果Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期和Ⅳ期,DTC患者TIP、MTT、PI和KLF4 mRNA相对表达水平依次降低,血清TgAb水平和SP1mRNA相对表达水平依次升高(P<0.001)。DTC临床分期与TIP、MTT、PI和血清KLF4 mRNA水平负相关(P<0.05),与血清TgAb、SP1 mRNA水平正相关(P<0.05)。超声造影、TgAb水平、SP1与KLF4 mRNA表达水平单一及联合诊断DTC的AUC依次为0.808、0.715、0.689、0.667、0.853,其中联合诊断AUC最大。结论DTC临床分期与超声造影参数TIP、MTT、PI和血清KLF4表达呈负相关关系,与血清TgAb、SP1表达呈正相关关系,将超声造影与血清TgAb、SP1和KLF4联合用于鉴别诊断DTC临床分期的效能最高。 展开更多
关键词 分化型甲状腺癌 临床分期 超声造影参数 甲状腺球蛋白抗体 特异性蛋白1 Krüppel样因子4
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MOG抗体阳性和AQP4抗体阳性视神经炎治疗方法的研究进展
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作者 王锴琦 赵洁 《医药前沿》 2024年第3期30-32,共3页
视神经炎是一种主要累及青年,以视神经各种炎性病变为特征的致盲性眼科疾病。近些年随着水通道蛋白-4抗体和髓鞘少突胶质细胞糖蛋白抗体在部分患者血清中的发现,越来越多的学者认为这两种抗体介导的视神经炎区别于多发性硬化相关性视神... 视神经炎是一种主要累及青年,以视神经各种炎性病变为特征的致盲性眼科疾病。近些年随着水通道蛋白-4抗体和髓鞘少突胶质细胞糖蛋白抗体在部分患者血清中的发现,越来越多的学者认为这两种抗体介导的视神经炎区别于多发性硬化相关性视神经炎,且分别具有独特的临床特征。本文对目前这两种特异性抗体相关视神经炎的治疗方法的相关研究进行综述,以期为临床工作提供帮助。 展开更多
关键词 视神经炎 髓鞘少突胶质细胞糖蛋白抗体 水通道蛋白-4抗体
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1例疣鼻天鹅Ⅰ群禽腺病毒血清4型的诊断与治疗
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作者 王小雨 喇斐燕 +1 位作者 马旭晨 张浩 《现代畜牧科技》 2024年第8期117-120,共4页
为给临床兽医及科研工作者提供疣鼻天鹅禽腺病毒4型诊断与治疗的借鉴。方法:该文通过临床诊断、血清学检测、粪便检测、荧光PCR检测等手段对伊犁州林草局野生动物保护办公室发现的4只4月龄患病疣鼻天鹅进行诊断。结果:血清学检测结果显... 为给临床兽医及科研工作者提供疣鼻天鹅禽腺病毒4型诊断与治疗的借鉴。方法:该文通过临床诊断、血清学检测、粪便检测、荧光PCR检测等手段对伊犁州林草局野生动物保护办公室发现的4只4月龄患病疣鼻天鹅进行诊断。结果:血清学检测结果显示天鹅血清样本中禽流感和新城疫抗体水平为0,荧光PCR检测结果显示4只疣鼻天鹅禽呼肠孤、鸭坦布苏均为阴性,禽腺病毒4型为阳性。结论:可判定该群疣鼻天鹅感染Ⅰ群禽腺病毒血清4型,通过使用腺病毒卵黄抗体并配合抗生素和对症治疗,4只天鹅5 d后均治愈,治愈率100%。 展开更多
关键词 疣鼻天鹅 血清学诊断 荧光PCR 禽腺病毒4 卵黄抗体
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禽腺病毒4型Penton和Fiber1蛋白原核表达及多克隆抗体的制备
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作者 方天 李乔斌 +3 位作者 冯孝傲 朱二鹏 陈常秀 程振涛 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2024年第3期54-61,共8页
为开展禽腺病毒4型(FAdV-4)五邻体蛋白(Penton)和纤丝蛋白(Fiber1)多克隆抗体的制备及评价,研究通过对Penton和Fiber1基因优势抗原表位基因片段进行生物信息学分析,设计特异性引物PCR扩增获得Penton和Fiber1优势抗原表位基因片段,将其... 为开展禽腺病毒4型(FAdV-4)五邻体蛋白(Penton)和纤丝蛋白(Fiber1)多克隆抗体的制备及评价,研究通过对Penton和Fiber1基因优势抗原表位基因片段进行生物信息学分析,设计特异性引物PCR扩增获得Penton和Fiber1优势抗原表位基因片段,将其克隆至原核表达载体pColdⅠ,转入表达宿主菌BL21(DE3)进行异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,将纯化、鉴定后的目的蛋白免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体,对抗体进行Western blot鉴定及间接ELISA抗体效价测定。结果可见,FAdV-4 Penton基因序列共编码525个氨基酸,Fiber1基因序列共编码432个氨基酸,其优势抗原表位点分别有7、6个区域,且均集中于N端;成功构建pColdⅠ-P和pColdⅠ-F1重组原核表达质粒,其诱导表达的重组蛋白Penton和Fiber1均与His标签单抗发生特异性反应,动物免疫获得的Penton、Fiber1多克隆抗体均能与目的蛋白反应形成特异性条带,且Penton多克隆抗体效价高于Fiber1多克隆抗体。综上,研究获得的纯化重组蛋白Penton较Fiber1蛋白表达量更高,免疫后血清抗体效价更高,更具有制备多克隆抗体的优势。 展开更多
关键词 禽腺病毒4 Penton蛋白 Fiber1蛋白 生物信息学分析 多克隆抗体
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基于TLR4-Ig融合蛋白探究TLR4信号在溃疡性结肠炎中的关键作用
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作者 钱珂文 王楚棋 +7 位作者 张淑怡 李光耀 邹宜覃 郑欣亚 艾泓如 傅文燕 雷长海 胡适 《海军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期535-543,共9页
目的探究Toll样受体4(TLR4)信号与溃疡性结肠炎(UC)发生、发展的关系。方法收集UC患者结直肠活检组织样本(n=63),根据Matts组织病理学分级标准分为1~5级,利用免疫组织化学染色检测TLR4表达情况。利用FreeStyle 293表达系统制备TLR4-Ig... 目的探究Toll样受体4(TLR4)信号与溃疡性结肠炎(UC)发生、发展的关系。方法收集UC患者结直肠活检组织样本(n=63),根据Matts组织病理学分级标准分为1~5级,利用免疫组织化学染色检测TLR4表达情况。利用FreeStyle 293表达系统制备TLR4-Ig融合蛋白。体外培养健康者来源的外周血单个核细胞(PBMC),在培养基中添加100μg/mL脂多糖诱导炎症模型,并加入100μg/mL TLR4-Ig阻断TLR4,检测粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子、干扰素γ、IL-1β、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-8、IL-10和TNF-α的分泌水平。以葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导小鼠急性结肠炎模型,分别采用20 mg/kg TLR4-Ig、40 mg/kg TLR4-Ig、抗生素+40 mg/kg TLR4-Ig进行干预,取小鼠结肠组织测量结肠长度并进行组织病理学评估。结果UC患者结肠组织Matts分级越高TLR4高表达的样本比例越高(P<0.001)。TLR4-Ig融合蛋白能够以高亲和力结合TLR4配体,阻断TLR4信号介导的PBMC活化和炎症因子分泌。TLR4-Ig融合蛋白对TLR4信号的阻断加重了DSS诱导的小鼠急性结肠炎,而抗生素处理则对TLR4信号阻断造成的小鼠急性结肠炎加重有缓解作用。结论TLR4信号与肠道菌群的信号交流是UC发生早期的重要保护机制,TLR4信号的缺失不利于缓解急性炎症和修复肠黏膜。 展开更多
关键词 TOLL样受体4 溃疡性结肠炎 抗体融合蛋白 免疫组织化学 葡聚糖硫酸钠
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PD-1/CTLA-4双抗治疗妇科恶性肿瘤的疗效和安全性观察
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作者 谭化明 韩修臣 +2 位作者 刘文丽 盛修贵 祁淑英 《实用妇科内分泌电子杂志》 2024年第19期20-23,共4页
目的分析妇科恶性肿瘤患者应用PD-1/CTLA-4双抗治疗后的血常规、影像学等相关数据,评价该药物在妇科恶性肿瘤患者治疗中的有效性及安全性。方法选取22例妇科恶性肿瘤患者,均接受程序性细胞死亡蛋白1(PD-1)/靶向细胞毒性T淋巴细胞相关抗... 目的分析妇科恶性肿瘤患者应用PD-1/CTLA-4双抗治疗后的血常规、影像学等相关数据,评价该药物在妇科恶性肿瘤患者治疗中的有效性及安全性。方法选取22例妇科恶性肿瘤患者,均接受程序性细胞死亡蛋白1(PD-1)/靶向细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)双抗治疗加或不加化疗或靶向治疗,观察近期疗效、不良反应发生率。结果CR患者4例,占18.2%,PR 2例,占9.1%,SD 6例,占27.3%,总有效率27.3%(CR+PR),临床获益率54.5%(CR+PR+SD)。PD 10例,占45.5%。随访至2023年10月31日,存活患者14例,占63.6%,死亡患者8例,占36.4%。治疗相关不良事件(TRAEs)发生率95.5%(21/22),其中重度不良反应发生率为50.0%(11/22):血红蛋白降低发生率9.1%(2/22),白细胞减少发生率27.3%(6/22),中性粒细胞减少发生率13.6%(3/22),ALT及AST升高、血小板减低、过敏反应发生率均为4.5%(1/22)。与免疫治疗相关的重度不良反应发生率为:重度血红蛋白降低、重度血小板减低、重度肝功能损伤均为4.5%(1/22)。结论应用PD-1/CTLA-4双抗治疗晚期/复发妇科恶性肿瘤患者临床获益率较高,不良反应发生率低,具有较高的推广价值。 展开更多
关键词 晚期/复发妇科恶性肿瘤 PD-1/CTLA-4双抗 临床疗效 安全性
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Analysis of Specific Th1/Th2 Helper Cell Responses and IgG Subtype Antibodies in Anti-CD4 Monoclonal Antibody Treated Mice with Autoimmune Cardiomyopathy
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作者 汪朝晖 廖玉华 +3 位作者 袁璟 张景辉 董继华 王金平 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2008年第4期409-414,共6页
The cytokine repertoire of ADP/ATP carrier-specific humoral immune responses and the cytokine-dependent anti-ADP/ATP carrier antibody IgG subclasses were examined in a cohort of ADP/ATP carrier-immunized BALB/c mice t... The cytokine repertoire of ADP/ATP carrier-specific humoral immune responses and the cytokine-dependent anti-ADP/ATP carrier antibody IgG subclasses were examined in a cohort of ADP/ATP carrier-immunized BALB/c mice treated with anti-CD4 monoclonal antibody. Eighteen male BALB/c mice (6–8 weeks old) were randomized into 3 groups: dilated cardiomyopathy (DCM) group, DCM-tolerance (Tol) group and control group. The mice in DCM group were immunized with the peptides derived from human ADP/ATP carrier protein for 6 months and mice in the control group were sham-immunized, while the mice in DCM-Tol group were immunized with ADP/ATP carrier protein and anti-CD4 McAb simultaneously. Serum autoantibody against ADP/ATP carrier and IgG subclasses were measured by ELISA, intracellular cytokines IFN-γ and IL-4 of Th cells were moni- tored with flow cytometry, and splenic T cell cytokines IFN-γ, IL-2, IL-4 and IL-6 were detected by using real-time fluorescent quantitative PCR. The results showed that the autoantibody against ADP/ATP carrier was found in all mice in DCM group, and the antibody level, serum IgG1 and IgG2a subclasses, cytokines in T cells and Th cells were all elevated in DCM group, as compared with those in control group (P〈0.01). On the other hand, in DCM-Tol group, the autoantibody level and contents of all the cytokines were significantly different from those in DCM group (P〈0.01), and were close to those in control group. And the levels of IgG1, IgG2a, IgG2b and IgG3 were influenced, to varying degrees, by anti-CD4 McAb as compared with those in DCM group. All these four types of IgG subclasses were substantially decreased in DCM-Tol group as compared with DCM group. It is concluded that the treatment with anti-CD4 McAb could prevent the activation of T cells, reverse the abnormal secretion of cytokines and the imbalance between Th1/Th2 cell subsets and abnormal production of autoantibody against ADP/ATP carrier, and eventually avoid myocardial injuries. 展开更多
关键词 CD4 monoclonal antibody AUTOIMMUNITY Th1/Th2 immune response ADP/ATP carrier peptides
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水通道蛋白4抗体阴性视神经炎临床与磁共振影像研究
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作者 温延斌 郭年波 +2 位作者 栾丽娟 刘平兰 刘其生 《上海医药》 CAS 2024年第17期73-76,共4页
目的:通过水通道蛋白4(AQP4)抗体阴性视神经炎临床与磁共振影像研究,探讨影响视神经的独立危险因素。方法:回顾性分析我院50例AQP4抗体阴性视神经炎患者的临床资料。结果:在基线水平上及治疗后的随访终点发现50例患者中分别有85、26只... 目的:通过水通道蛋白4(AQP4)抗体阴性视神经炎临床与磁共振影像研究,探讨影响视神经的独立危险因素。方法:回顾性分析我院50例AQP4抗体阴性视神经炎患者的临床资料。结果:在基线水平上及治疗后的随访终点发现50例患者中分别有85、26只眼睛的最佳矫正视力低于0.1;急性期视神经炎患者核磁共振成像(MRI)有36例出现多节段受累;多元逐步回归分析发现,基线视力水平、视神经受累节段数量是影响视神经的独立危险因素(P<0.05);分析随访资料发现,单相病程、疾病复发、转变为视神经脊髓炎谱系疾病分别为40例、9例、1例。结论:AQP4抗体阴性视神经炎病发率较高,预后视功能较差;易复发,但不易转变为视神经脊髓炎谱系疾病。 展开更多
关键词 视神经炎 水通道蛋白4 抗体 临床资料 磁共振影像
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补髓生血颗粒对慢性再生障碍性贫血患者骨髓VLA-4和VLA-5 mRNA表达的影响 被引量:9
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作者 王金环 李鹤然 +7 位作者 郝晶 栾仲秋 孙凤 赵伟 王小东 田飞 孙岸弢 孙伟正 《广州中医药大学学报》 CAS 2019年第12期1871-1875,共5页
【目的】观察补髓生血颗粒对慢性再生障碍性贫血(CAA)患者的骨髓极迟活化抗原4(VLA-4)和极迟活化抗原5(VLA-5)mRNA表达的影响及其可能的作用机制。【方法】选取30例CAA肾阴阳两虚型患者为试验组,另招募10例无血液疾病及免疫系统疾病的... 【目的】观察补髓生血颗粒对慢性再生障碍性贫血(CAA)患者的骨髓极迟活化抗原4(VLA-4)和极迟活化抗原5(VLA-5)mRNA表达的影响及其可能的作用机制。【方法】选取30例CAA肾阴阳两虚型患者为试验组,另招募10例无血液疾病及免疫系统疾病的健康志愿者为正常对照组。试验组患者给予补髓生血颗粒治疗,疗程6个月。采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(PT-PCR)法检测CAA患者治疗前后骨髓VLA-4和VLA-5 mRNA表达水平,并与正常对照组作比较。【结果】治疗前,CAA患者骨髓VLA-4 mRNA呈低表达状态,VLA-5 mRNA呈高表达状态,与正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);应用补髓生血颗粒治疗后,试验组患者VLA-4 mRNA表达水平较治疗前升高,VLA-5 mRNA表达水平较治疗前降低,差异均有统计学意义(P<0.05),但均未恢复到正常对照组水平,差异均有统计学意义(P<0.05)。【结论】CAA患者VLA-4和VLA-5 mRNA的异常表达可能参与CAA的发病过程;补髓生血颗粒可能通过调节VLA-4和VLA-5 mRNA的表达来改善CAA患者骨髓造血功能和恢复造血微环境的状态。 展开更多
关键词 慢性再生障碍性贫血 补髓生血颗粒 vla-4 MRNA vla-5 MRNA 造血微环境
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川芎嗪对同基因骨髓移植小鼠骨髓中VCAM-1/VLA-4表达的影响 被引量:4
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作者 吴宁 孙汉英 +5 位作者 刘文励 何莉 孟凡凯 李春蕊 刘丹 徐惠珍 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2005年第1期20-24,共5页
为了探讨同基因骨髓移植 (BMT)小鼠骨髓细胞表面黏附分子VCAM 1 VLA 4 (CD4 9d)的表达及川芎嗪对其影响 ,取健康BALB c小鼠 ,随机分为 3组 :正常组 (不做处理 ) ,骨髓移植对照组 (简称BMT组 )和骨髓移植 +川芎嗪治疗组 (简称川芎嗪组 )... 为了探讨同基因骨髓移植 (BMT)小鼠骨髓细胞表面黏附分子VCAM 1 VLA 4 (CD4 9d)的表达及川芎嗪对其影响 ,取健康BALB c小鼠 ,随机分为 3组 :正常组 (不做处理 ) ,骨髓移植对照组 (简称BMT组 )和骨髓移植 +川芎嗪治疗组 (简称川芎嗪组 )。BMT组和川芎嗪组分别胃饲生理盐水 0 .2ml 只和川芎嗪注射液每次 2mg 只 ,2次 天。在BMT后第 7、14、2 1、2 8天处死小鼠 ,采用免疫组织化学方法检测骨髓基质细胞VCAM 1蛋白表达水平 ,用RT PCR检测骨髓基质细胞VCAM 1mRNA表达水平 ;用流式细胞术检测骨髓有核细胞表面VLA 4的表达水平。结果发现 :BMT后第 7、14、2 1、2 8天川芎嗪组VCAM 1 VLA 4的表达水平、骨髓有核细胞计数均高于BMT组 (P <0 .0 5或P <0 .0 1)。结论 :川芎嗪能提高BMT小鼠骨髓造血细胞和基质细胞黏附分子的表达 ,促进造血干 祖细胞的归巢 ,加速移植后骨髓的造血重建。 展开更多
关键词 川芎嗪 骨髓移植 造血重建 VCAM-1 vla-4
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Fut8基因通过促进VLA-4/VCAM-1表达影响B细胞发育 被引量:5
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作者 焦鑫艳 马彪 +2 位作者 王旭 刘庆平 李文哲 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期683-686,共4页
目的探讨核心岩藻糖基化修饰对VLA-4/VCAM-1表达及B细胞发育的影响。方法通过RNA干扰技术使前B细胞(70Z/3)和基质细胞(ST2)的Fut8基因沉默,免疫沉淀和Western blot检测Fut8基因沉默效率,以细胞黏附实验和克隆形成实验分别研究Fut8基因对... 目的探讨核心岩藻糖基化修饰对VLA-4/VCAM-1表达及B细胞发育的影响。方法通过RNA干扰技术使前B细胞(70Z/3)和基质细胞(ST2)的Fut8基因沉默,免疫沉淀和Western blot检测Fut8基因沉默效率,以细胞黏附实验和克隆形成实验分别研究Fut8基因对VLA-4/VCAM-1之间亲和力和对B细胞分化发育的影响。结果 Fut8基因沉默使VLA-4/VCAM-1之间的亲和力以及前B细胞和基质细胞之间的黏附作用降低,并使前B细胞的克隆形成能力明显下降。流式细胞仪分析结果也表明,Fut8-/-祖B细胞向前B细胞分化过程受阻。结论本实验揭示了Fut8基因调节VLA-4/VCAM-1之间结合能力以及前B细胞克隆形成的机理,为B细胞分化发育研究提供理论依据。 展开更多
关键词 vla-4 VCAM-1 前B细胞 Fut8 相互作用
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LFA-1和VLA-4参与人高增殖潜能内皮祖细胞与血管内皮的黏附和跨内皮迁移 被引量:7
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作者 段华新 卢光琇 程腊梅 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2008年第3期671-675,共5页
为了了解淋巴细胞功能相关抗原1(lymphocyte function-associated antigen 1,LFA-1)和极迟反应抗原4(very late antigen 4,VLA-4)在高增殖潜能内皮祖细胞(high proliferative potential endothelial progenitor cells,HPP-EPCs)归巢过... 为了了解淋巴细胞功能相关抗原1(lymphocyte function-associated antigen 1,LFA-1)和极迟反应抗原4(very late antigen 4,VLA-4)在高增殖潜能内皮祖细胞(high proliferative potential endothelial progenitor cells,HPP-EPCs)归巢过程中与血管内皮的黏附和跨内皮迁移中的作用,利用流式细胞术检测HPP-EPC中整合蛋白β1和β2的表达以及小鼠骨髓内皮细胞相应的受体的表达。利用体外黏附和迁移实验研究经过功能级别的中和抗体阻断VLA-4和LFA-1后HPP-EPC黏附和迁移细胞数目的变化。结果表明,HPP-EPC表达整合蛋白β1和β2,活化后小鼠骨髓内皮细胞表达细胞间黏附分子1(intercellular adhesion molecule 1,ICAM-1)和血管细胞黏附分子1(vascular cell adhesion molecule 1,VCAM-1);加CD11a抗体组黏附细胞或CD49d抗体组黏附和迁移细胞均较同型对照抗体组少,而且加CD11a和CD49d两种抗体联用组黏附和迁移细胞明显减少,其细胞数较任何单一抗体组少。结论:LFA-1和VLA-4在HPP-EPC与血管内皮的黏附和跨内皮迁移中发挥了重要的作用。 展开更多
关键词 LFA-1 vla-4 高增殖潜能内皮祖细胞 黏附 跨内迁移
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Generation of Antibodies Against DMRT1 and DMRT4 of Oreochromis aurea and Analysis of Their Expression Profile in Oreochromis aurea Tissues 被引量:6
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作者 曹谨玲 曹哲民 吴婷婷 《Journal of Genetics and Genomics》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第6期497-509,共13页
Sex determination is composed of somatic and germ-line sex differentiation hierarchies whose interaction is poorly understood. A single gene known to control somatic sex determination, the DM-domain containing (Doubl... Sex determination is composed of somatic and germ-line sex differentiation hierarchies whose interaction is poorly understood. A single gene known to control somatic sex determination, the DM-domain containing (Doublesex/Mab-3 DNA-binding motif) gene, is highly conserved across species. Vertebrate DMRT1 (DM-related transcription factor 1) expression occurs predominantly in the testis. Here, however, isolated two distinct DM-domain cDNA from Oreochromis aurea ovary and testis have been named DMRT4 (DM-related transcription factor 4) and DMRT1 by BLAST, respectively. Despite high homology in the DM-domain there is little similarity outside the DM-domain.To better understand the structure, function, and possible roles of DMRT4 and DMRT1 as potential candidates for sex differentiation and sex determination, the intact regions encoding DMRT4 and DMRT1 obtained by PCR were sub-cloned into the vector pMAL-c2x and introduced into the Escherichia coli TB1 cell for efficient fusion expression. After purification and cleavage, DMRT4 and DMRT1 proteins were used to immunize adult rabbits following standard protocols. Consequently, it was found by using Western blot analysis that polyclonal antibodies against DMRT4 and DMRT1 had high specificity. The relative expression levels of DMRT4 and DMRT1 mRNA were determined by fluorescent Real-time RT-PCR in female and male Oreochromis aurea with 13-actin as the internal standard. DMRT1 was expressed only in testis, whereas DMRT4 was over expressed in the ovary, but in both female and male, a slight expression in the brain was also detected. Statistical analysis showed that in the brain, mean DMRT4 mRNA levels in female were significantly higher than in male. Meanwhile, the expression of DMRT4 and DMRT1 protein was also analyzed using the purified antibodies through Western blot and immunohistochemistry. It was found that DMRT4 was exclusively expressed in the ovary and DMRT1 in the testis. Study on DMRT4 and DMRT1 expression facilitated the elucidation of their roles and the understanding of sex differentiation of fish. 展开更多
关键词 DMRT 1 DMRT4 prokaryotic expression polyclonal antibody expression profile
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