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水貂阿留申病诊断抗原研究概述 被引量:3
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作者 于凯 倪佳 +2 位作者 冯二凯 万洪理 陈立志 《动物医学进展》 北大核心 2017年第4期116-119,共4页
近年来,随着水貂养殖行业的不断发展,一些疫病也成为了制约水貂养殖业发展的重要因素。水貂阿留申病作为毛皮动物的三大疫病之一(阿留申病、犬瘟热、病毒性肠炎),是导致母貂产仔率下降、公貂配种能力降低和毛皮质量下降的一种高度接触... 近年来,随着水貂养殖行业的不断发展,一些疫病也成为了制约水貂养殖业发展的重要因素。水貂阿留申病作为毛皮动物的三大疫病之一(阿留申病、犬瘟热、病毒性肠炎),是导致母貂产仔率下降、公貂配种能力降低和毛皮质量下降的一种高度接触性传染病。至今为止,还没有商品化的疫苗来控制该病的传播及蔓延。控制水貂阿留申病最好的方法是通过检测淘汰所有抗体为阳性的水貂,进而达到净化貂群的目的。而在抗体检测过程中,诊断抗原的制备和纯化决定着检测方法的敏感性、特异性和准确性。论文对目前阿留申病毒细胞抗原及基因工程抗原研究进展做一综述,为今后该病病原检测工作提供参考。 展开更多
关键词 水貂阿留申病 诊断抗原 VP2基因 对流免疫电泳
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Pathogenic Antigenic and Molecular Characterization of the Very Virulent Strain(Gx) of Infectious Bursal Disease Virus Isolated in China 被引量:15
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作者 WANGXiao-mei FUChao-yang +4 位作者 GAOHong-lei SONGXiou-long ZENGXiang-wei ZHANGMan-fu WallaceBLlim 《Agricultural Sciences in China》 CAS CSCD 2003年第5期566-572,共7页
The very virulent infectious bursal disease virus (vvIBDV) strain Gx was isolated from a poutl-try farm in Guangxi Province, China, during 1996. The mortality in the infected flock was 80% and occurred 5 days after im... The very virulent infectious bursal disease virus (vvIBDV) strain Gx was isolated from a poutl-try farm in Guangxi Province, China, during 1996. The mortality in the infected flock was 80% and occurred 5 days after immunization with serotype I IBD vaccine. The results of antigen-capture ELISA (AC-ELISA), pathogenicity testing, cloning and sequence analysis of the VP2 gene showed that the deduced amino acid sequence of strain Gx VP2 was the same as vvIBDV UK661, which is considered as a reference strain for European vvIBDVs. The antigenicity of the Gx strain was the same as an European vvIBDV strain 849. The EID50 of Gx virus was 10-8.25/0. 2 ml, and the mortality was 64% when 4 week-old SPF chickens were challenged at dosage of 2×10~3EID50. We have demonstrated that the IBDV strain Gx isolated in China is vvIBDV according to European standards. 展开更多
关键词 Infectious bursal disease Very virulent strain(Gx) PATHOGENICITY VP2 gene
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Analysis of Genetic Variation of VP2 Gene in 6 FPV Strainsin China 被引量:2
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作者 Jianxin Wen Zhiqiang Wang Jianwei Ren 《Advances in Microbiology》 2021年第4期191-198,共8页
In order to understand the variation of FPV strains in the Jinan area, Shandong Province, China, the VP2 gene of 6 FPV strains was sequenced, and the analysis of the genetic relationship, evolution and main functional... In order to understand the variation of FPV strains in the Jinan area, Shandong Province, China, the VP2 gene of 6 FPV strains was sequenced, and the analysis of the genetic relationship, evolution and main functional site variation was carried out. It was found that FPV-XY2, FPV-XY3 and FPV-XY6 were the same strain with 100% homology, and also close to FPV-XY1, and the homology between FPV-XY4 and FPV-XY5 was close. The homology between the reference strain and the test strain was over 99.3%. According to the evolutionary analysis, the genetic relationship among FPV-XY1, FPV-XY2, FPV-XY3, FPV-XY6 was close, and the genetic relationship between FPV-XY4 and FPV-XY5 was close, and the result was similar to the homologous result. Compared with the VP2 amino acid sequence of the standard strain FPV-CU4, the VP2 protein of all the test strains changed from I to t on the 101st Amino acid, this may be the cause of immune failure in these 6 cases;the change of a to s in the 91st amino acid position of FPV-XY1, FPV-XY2, FPV-XY3, FPV-XY6 may be the cause of enhanced virulence of FPV. This study provides a reference for exploring the epidemic law of FP in the Jinan area, the standard of FP treatment plan and the research and development of FPV subunit vaccine. 展开更多
关键词 Feline Panleukopenia Feline Panleukopenia Virus VP2 Gene EVOLUTIONARY
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猪博卡病毒VP2基因的克隆及生物信息学分析 被引量:5
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作者 蔡雨函 朱玲 +3 位作者 周远成 李新琼 赵洲 徐志文 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1945-1950,共6页
为研究猪博卡病毒VP2蛋白的结构与功能,应用套式PCR技术对猪博卡病毒VP2基因进行分子克隆,并对其进行生物信息学分析。结果显示,获得了1 656bp的猪博卡病毒VP2基因(GenBank登录号为KF806730),此序列与其他PBoV分离株核苷酸序列同源性为8... 为研究猪博卡病毒VP2蛋白的结构与功能,应用套式PCR技术对猪博卡病毒VP2基因进行分子克隆,并对其进行生物信息学分析。结果显示,获得了1 656bp的猪博卡病毒VP2基因(GenBank登录号为KF806730),此序列与其他PBoV分离株核苷酸序列同源性为82%~89%,进化树分析结果显示,KF806730与PBoV5在一个分支,说明两者之间具有较近的亲缘关系。经生物信息学分析,此序列编码551个氨基酸,相对分子质量为61 261.7,理论等电点(PI)为5.98,体外半衰期为30h(体外哺乳动物类网状细胞),不稳定系数为34.36,脂肪系数为54.88,平均亲水性为-0.766,最大疏水指数为1.733,最小疏水指数为-3.378;在同一氨基酸的不同密码子的选择上存在一定程度的偏向性;无信号肽和跨膜区;综合多种方法分析预测其主要抗原表位可能位于第78-80aa、311-314aa、507-509aa区域;二级结构、三维结构预测显示VP2蛋白主要以无规则卷曲为主,存在多个螺旋和折叠区域。本试验成功获得猪博卡病毒VP2基因,为以后研究此基因的生物学功能和建立该病毒的诊断方法奠定了基础。 展开更多
关键词 猪博卡病毒 VP2基因 克隆 生物信息学分析
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珍珠鸡传染性法氏囊病病毒超强毒株的分离及其VP2基因的分子遗传特征 被引量:3
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作者 刘永相 刘春国 +8 位作者 刘大飞 李秀云 刘鑫 蒋艳妹 郭冬春 田进 仇铮 邹希明 曲连东 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期293-297,共5页
为了确诊某动物园珍禽的疑似传染性法氏囊病(IBD)疫情,通过RT-PCR和病毒分离的方法对采集的病料进行鉴定,并对病毒的VP2基因进行分子和遗传分析。结果显示,分离到了1株传染性法氏囊病病毒(IBDV),其VP2基因与荷兰株D6948的亲缘关系最近,... 为了确诊某动物园珍禽的疑似传染性法氏囊病(IBD)疫情,通过RT-PCR和病毒分离的方法对采集的病料进行鉴定,并对病毒的VP2基因进行分子和遗传分析。结果显示,分离到了1株传染性法氏囊病病毒(IBDV),其VP2基因与荷兰株D6948的亲缘关系最近,达到98.8%,同属于超强毒株分支;VP2蛋白关键氨基酸位点及七肽基序均符合超强毒的分子特征,从分子水平上证实此次珍禽疫情是由超强IBDV感染导致的;同时本试验首次发现IBDV导致白鹇和孔雀的发病死亡,说明IBDV的感染谱正在不断拓宽。结果表明,加强野生禽类IBD的分子流行病学研究,对IBD的防控具有重要意义。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病病毒 超强毒株 VP2基因 分子特征 遗传分析
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一株水貂阿留申病毒VP2基因的高变区测序分析 被引量:2
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作者 张蕾 胡博 +7 位作者 白雪 张海玲 赵建军 王振军 马凡舒 闫喜军 吴威 徐淑娟 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期226-230,共5页
为分析我国水貂阿留申病(Aleutian disease,AD)跨宿主传播的分子机制,扩增获得一株吉林地区水貂阿留申病毒(Aleutian disease virus,ADV)VP2基因高变区片段。序列分析表明,第235位存在与参考毒株不同的氨基酸位点,进化树分析结果表明,... 为分析我国水貂阿留申病(Aleutian disease,AD)跨宿主传播的分子机制,扩增获得一株吉林地区水貂阿留申病毒(Aleutian disease virus,ADV)VP2基因高变区片段。序列分析表明,第235位存在与参考毒株不同的氨基酸位点,进化树分析结果表明,该毒株与丹麦高致病毒株ADV-K亲缘关系较近。ADV第235位氨基酸位点可能与病毒的感染能力相关。 展开更多
关键词 水貂阿留申病毒 VP2高变区 跨宿主传播
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传染性法氏囊病病毒VP2基因与鸡IL-18成熟蛋白基因在杆状病毒表达系统中的双表达 被引量:1
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作者 孔娜 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期628-632,共5页
为了研制针对传染性法氏囊病病毒(IBDV)的新型疫苗,将IBDV的VP2基因和鸡IL-18成熟蛋白(mChIL-18)基因分别插入到双表达载体pFastBacDual的启动子P10和PH的下游,构建重组转移质粒pFastBacDual-VP2-IL-18。将其转座入大肠杆菌DH10Bac,获... 为了研制针对传染性法氏囊病病毒(IBDV)的新型疫苗,将IBDV的VP2基因和鸡IL-18成熟蛋白(mChIL-18)基因分别插入到双表达载体pFastBacDual的启动子P10和PH的下游,构建重组转移质粒pFastBacDual-VP2-IL-18。将其转座入大肠杆菌DH10Bac,获得了重组杆状病毒质粒,然后在昆虫细胞Sf9中双表达VP2-IL-18蛋白,并对双表达的VP2-IL-18进行生物学活性测定。结果显示,同一细胞中能分别表达出VP2蛋白和鸡IL-18蛋白,且表达的蛋白位于细胞胞质内。当VP2-IL-18的质量浓度为200ng/mL时能刺激鸡脾淋巴细胞产生IFN-γ,IFN-γ的活性最高可达2.8×104 U/mL。当VP2-IL-18诱导产生的IFN-γ的浓度≥10U/mL时就能产生抑制水泡性口炎病毒的效果。结果表明,双表达蛋白VP2-IL-18可以产生较强的生物学活性,为研制新型传染性法氏囊病IBD疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病病毒 VP2基因 白介素18基因 杆状病毒表达系统
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犬细小病毒SH14株的分离鉴定及其VP2基因的序列分析 被引量:6
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作者 唐井玉 李传峰 +5 位作者 戚伟强 贾仿阔 陈宗艳 王权 王桂军 刘光清 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期1153-1158,共6页
为分离犬细小病毒(canine parvovirus,CPV),用疑似犬CPV感染的病犬肠组织研磨液接种猫肾细胞(CRFK),进行病毒分离,并利用常规病毒学和分子生物学方法以及动物回归试验鉴定分离的病毒,并对其VP2基因序列进行测定及分析。结果显示,该病毒... 为分离犬细小病毒(canine parvovirus,CPV),用疑似犬CPV感染的病犬肠组织研磨液接种猫肾细胞(CRFK),进行病毒分离,并利用常规病毒学和分子生物学方法以及动物回归试验鉴定分离的病毒,并对其VP2基因序列进行测定及分析。结果显示,该病毒能在CRFK细胞上良好生长并产生细胞变圆、脱落等特征性细胞病变;细胞培养物能扩增出CPV的特异性基因组;对病毒的VP2基因序列和推导的氨基酸序列进行分析,结果表明,本研究的分离毒株属于New CPV-2a型,与CPV SH-2/2011株的亲缘关系最近,其核苷酸同源性和氨基酸同源性分别为99.83%和100%。上述结果表明,成功分离到1株New CPV-2a型犬细小病毒,将其暂命名为SH14株。本研究结果为进一步研究我国犬细小病毒的进化和变异,以及疫苗的研制奠定了物质基础。 展开更多
关键词 犬细小病毒 VP2基因 鉴定 序列分析
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蓝舌病毒1型VP2基因在昆虫杆状病毒表达系统中的表达 被引量:2
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作者 李扬帆 独军政 +4 位作者 邵军军 高闪电 林彤 赵付荣 常惠芸 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期265-269,共5页
为了研制蓝舌病新型亚单位疫苗,将蓝舌病毒1型(BTV1)VP2基因克隆到pFastBacHTB载体中,得到重组转座载体pVP2,并转化至DH10Bac感受态细胞,获得了重组杆粒rVP2。然后采用脂质体转染法转染Sf9昆虫细胞,通过克隆筛选获得重组杆状病毒。SDS-P... 为了研制蓝舌病新型亚单位疫苗,将蓝舌病毒1型(BTV1)VP2基因克隆到pFastBacHTB载体中,得到重组转座载体pVP2,并转化至DH10Bac感受态细胞,获得了重组杆粒rVP2。然后采用脂质体转染法转染Sf9昆虫细胞,通过克隆筛选获得重组杆状病毒。SDS-PAGE分析结果显示,获得了约110ku的表达产物,与预期结果相符。Western-blot结果显示,目的蛋白能被BTV1感染的山羊阳性血清识别。结果表明,经杆状病毒体系表达的可溶性重组VP2蛋白具有良好的反应原性,为进行蓝舌病新型亚单位疫苗的研制奠定了基础。 展开更多
关键词 蓝舌病毒1型 VP2基因 杆状病毒 表达
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水貂细小病毒IgG抗体间接ELISA半定量检测方法的初步建立 被引量:1
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作者 朱翔宇 蔡熙姮 +7 位作者 鲁荣光 卜研 柏玲 朱言柱 廉士珍 白雪 闫喜军 胡博 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期661-669,共9页
通过建立一种检测水貂细小病毒(mink enteritis virus,MEV)IgG抗体的间接ELISA方法,旨在为MEV感染检测与免疫效果评价提供技术手段。以纯化的重组MEV VP2蛋白作为包被抗原,以HRP-羊抗雪貂IgG为二抗,通过优化反应条件,建立了检测MEV特异... 通过建立一种检测水貂细小病毒(mink enteritis virus,MEV)IgG抗体的间接ELISA方法,旨在为MEV感染检测与免疫效果评价提供技术手段。以纯化的重组MEV VP2蛋白作为包被抗原,以HRP-羊抗雪貂IgG为二抗,通过优化反应条件,建立了检测MEV特异性IgG抗体的间接ELISA方法,并对该方法进行了特异性、敏感性及重复性试验;通过临床样品检测评价ELISA方法与HI试验的符合率,制备阳性参考品并设定酶联免疫单位(enzyme immune units,EIU)的计算方法,以测定样品中抗MEV IgG抗体的相对含量,分析ELISA方法检测血清特异性IgG抗体水平与中和抗体的相关性。结果显示,ELISA方法的最佳抗原包被质量浓度为1.425mg/L,待检血清和酶标抗体的工作浓度分别为1∶80与1∶2000倍稀释。结果表明,该ELISA方法能够特异地检测MEV抗体,与水貂犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)、水貂阿留申病毒(Aleutian disease virus,ADV)的抗血清无交叉反应,批内和批间重复性试验的变异系数低于5%,血清特异性IgG抗体水平与中和抗体效价之间存在线性关系,呈显著的正相关(r=0.9461,P<0.001)。 展开更多
关键词 水貂细小病毒 VP2蛋白 可溶性蛋白 间接ELISA
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