电针“次髎”穴对逼尿肌反射亢进大鼠骶髓排尿中枢VR1表达的影响

目的:探讨电针次髎对逼尿肌反射亢进的效应及作用机理。方法:成年雌性SD大鼠44只,脊髓横断术后纳入37只,分为手术后电针组16只、手术后模型组16只、正常组(假手术组)5只,电针组于大鼠出现尿失禁后给予电针双侧次髎,20Hz连续波每日1次,每次2h,共治疗14次,模型组、正常组不治疗,3组均于首次治疗前、末次治疗结束后进行尿流动力学检测,于末次疗后用免疫组化染色法观察辣椒素受体VR1表达的情况。结果:逼尿肌反射亢进大鼠(电针组和模型组)的最大膀胱内压升高(P<0.05),最大膀胱顺应性降低(P<0.05),骶髓排尿中枢VR1表达增多(P<0.05)。治疗后,电针组的最大膀胱内压明显降低(P<0.05),与正常组无显著差异(P>0.05);模型组的最大膀胱内压亦明显降低(P<0.05),但与正常组有显著差异(P<0.05)。疗后电针组的最大膀胱顺应性明显升高(P<0.05),模型组的最大膀胱顺应性无明显变化(P>0.05)。疗后电针组骶髓排尿中枢VR1表达比模型组少,比正常组多,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:电针"次髎"穴能抑制脊髓横断大鼠的膀胱活动过度状态,可以降低骶髓排尿中枢VR1的表达,表明C纤维活动减弱,这可能是电针"次髎"治疗逼尿肌反射亢进的机制之一。

VR1^+细胞模型的构建和Nielsen假说的验证

为研究类香草素受体(vanilloidreceptortype1,VR1)作为刺激性室内空气污染物的触发性生物靶分子的生理作用,在VR1cDNA质粒基础上,应用分子克隆和细胞转染技术构建了体外培养的VR1+HEK293细胞模型,应用此细胞模型进行辣椒素和甲醛致VR1+HEK293细胞死亡实验.结果表明,VR1+HEK293细胞模型构建成功,VR1+细胞死亡实验是一种简便有效的鉴定VR1体外表达的实验方法;甲醛能够激活VR1,且激活反应能被VR1特异性拮抗剂capsazepine所阻断,从而推断甲醛对气道的刺激作用也是通过VR1所介导的.用体外细胞学实验证实了VR1是甲醛作用的生物靶分子,以实验证实了Nielsen假说的正确性.

VR1受体在原发性肝细胞癌中的表达及意义

目的辣椒素受体-1(VR1)主要表达在神经元细胞上,但也参与肿瘤形成过程。为了阐明其在人类原发性肝细胞癌形成过程中的作用,该实验检测VR1在原发性肝细胞癌样本中癌组织和非癌组织中的表达。方法收集62例原发性肝细胞癌病例的病理标本和临床资料。用原位杂交和免疫组织化学实验来检验VR1受体的表达及其与临床病理特征之间的关系。结果(1)原位杂交实验结果:VR1mRNA在肝癌的癌组织和非癌组织中高表达的百分率为40.0%(6/15)、60.0%(9/15)。(2)免疫组织化学实验结果:62例肝癌的非癌组织中,VR1表达显著多在肝硬化组织中[31/38(81.6%)];在肝癌组织中VR1受体的高表达30例30/62(48.4%)。(3)临床病理评估结果:VR1受体的高表达与肿瘤细胞分化程度(P=0.001)二者之间存在显著的相关性。结论辣椒素受体-1在原发性肝细胞癌的非癌组织和癌组织中均有高表达,VR1受体的高表达与肝癌临床病理特征的肿瘤细胞分化程度二者之间存在显著性的相关。本组结果表明:VR1可能在原发性肝细胞癌的发生过程中起作用。

VR1受体稳定真核表达细胞系的建立

[目的 ]为研究VR1(Vanilloidreceptorsubtype1)受体的功能 ,建立VR1稳定真核表达细胞系。 [方法 ]采用RT -PCR的方法从大鼠脊髓克隆VR1cDNA ,并构建VR1表达载体。将VR1质粒通过电穿孔方法转染HEK2 93细胞 ,经G4 18筛选获得稳定表达的细胞克隆。采用RT -PCR、Westernblotting、免疫荧光、细胞Ca2 +浓度测定等方法检测VR1受体的表达。 [结果 ]筛选的阳性细胞克隆含有VR1的mRNA及蛋白质 ,细胞Ca2 +浓度的改变提示VR1受体的功能性表达。 [结论 ]建立了稳定表达VR1受体的真核表达细胞系。

VR1受体在大鼠食管传入纤维的表达

目的研究辣椒素(capsaicin)受体VR1在大鼠食管传入神经纤维的表达,纤维的形态特征及分布。方法应用激光共聚焦显微镜结合免疫组织化学双标技术。结果VRl阳性(VR1-IR)纤维和终末主要分布于食管的黏膜层、黏膜下层、平滑肌以及血管周围,其形态多为一些含有小棘及串珠样结构的细纤维。有(92.3±3.7)%VR1-IR纤维与代表脊神经节源性传入纤维的神经肽CGRP共存。VR1在脊神经节和结状神经节中的表达类似,为中小型神经元。脊神经节中有(41.5±4.5)%VRl-IR神经元含有CGRP和(67.9±3.2)%CGRP-IR神经元表达VR1。CGRP-IR细胞在结状神经节较少,仅有(4.7±1.4)%VR1-IR神经元含有CGRP。结论大鼠食管壁内的脊神经源性感觉纤维表达VR1受体。

大鼠VR1基因siRNA表达载体的构建及体内研究

目的探讨辣椒素受体(vanilloid receptor subtype1,VR1)在慢性疼痛发生机制中的作用,构建携带VR1siRNA的慢病毒载体并检测其对大鼠DRG神经元VR1基因的干扰作用。方法设计靶向大鼠VR1基因的发夹状siRNA,合成两对互补的寡核苷酸序列,退火后克隆到酶切的pRNAT-U6.2/Lenti siRNA载体,通过PCR和DNA测序鉴定重组质粒。空载体及重组质粒分别与慢病毒包装质粒共转染293T细胞生成慢病毒载体。通过蛛网膜下腔将慢病毒载体注射到大鼠体内,采用RT-PCR方法检测L4-L6DRG神经元内VR1的沉默效果。结果测序鉴定证实目的寡核苷酸片段被克隆到pRNAT-U6.2/Lenti载体中;经蛛网膜下腔注射后,pRNAT-U6.2/Lenti-siVR1可下调正常大鼠L4-L6DRG神经元内VR1mRNA的表达。结论成功构建了靶向VR1基因的siRNA载体,可有效抑制VR1mRNA的表达,为深入研究和治疗慢性痛提供了有力的工具。

脊髓辣椒素受体1(VR1)参与热敏感性的证据:老龄大鼠行为学和形态学相结合观察结果(英文)

以往的研究表明外周热伤害性感受器辣椒素受体 1(VR1,也称为 TRPV1)在热伤害性感觉中发挥着重要作用 ,但是脊髓 VR1在其中扮演的角色尚不清楚。因此本实验利用老龄大鼠蜜蜂毒 (BV)模型热痛敏 (仅持续 2 4h)和机械性痛敏 (持续 1月以上 )时程分离的行为学特点研究了在老龄大鼠中脊髓 VR1在外周组织损伤和炎性痛状态下的热敏感性中扮演的角色。在 BV注射后 4h(即热痛敏和机械性痛敏均存在时 )、2周 (即热痛敏消失而机械性痛敏存在时 )和 2月 (即两种痛敏均消失时 ) ,验证了热敏感性 (辐射热刺激 )和机械敏感性 (von-Frey纤维刺激 ) ,随后进行脊髓背角的 VR1免疫组织化学染色。结果如下 :(1)在未处理老龄大鼠组 ,VR1样免疫反应产物 (L I)在脊髓背角主要分布于 I、II层 ;(2 )在经 BV处理老龄大鼠组 ,外周损伤后 4h脊髓背角 VR1-L I有轻微增加 ,但在 2周后 VR1-LI表达水平明显低于对照水平 ,而且在 BV注射 2月后 ,即两种痛敏均消失时 ,VR1-L I表达水平下调仍非常明显。本结果表明脊髓背角的 VR1在空间分布上不随年龄改变而改变 ,但在周围化学组织损伤或炎症状态下 ,VR1-LI的表达水平可能与热敏感性的变化有动态相关性。由此我们提出除了外周位点 ,脊髓背角的

气态甲醛所致大鼠肺部VR1-mRNA表达的初步研究

目的从分子水平研究中等浓度气态甲醛环境暴露对呼吸系统中类香草素受体(van illo id recep-tor sub type 1,VR 1)基因表达的影响。方法用WH-2型环境气候舱释放的甲醛和净空气,分别通入2只各放有5只幼年大鼠的染毒缸中连续灌流72 h后,迅速取肺,用RT-PCR方法检测大鼠在中等浓度甲醛环境暴露下肺VR 1和管家基因G 3PD表达水平。结果中等浓度甲醛3.0 m g/m3灌流比清洁空气灌流导致幼年大鼠肺VR 1-mRNA表达增加。结论中等浓度甲醛灌流导致幼年大鼠肺部VR 1-mRNA表达量增加。

应用RNAi技术调节VR1基因表达

目的: 通过调节辣椒素受体1(VR1)基因表达,对VR1 基因的功能及疼痛的基因治疗进行基础研究。方法: 应用RNA干扰(RNAi)技术干扰VR1基因在猴肾Cos-7细胞系中的表达。结果:应用RNAi技术特异性抑制了VR1基因在Cos -7细胞中的表达。随着小片段干扰性RNA(siRNA)浓度的增加,VR1 蛋白的表达量逐渐减少。结论:应用RNAi技术可抑制VR1基因的表达,为开发更有效、安全、合理的镇痛药提供实验依据。

SHARP PA-VR10数码录音笔

苹果优异的工业设计水平早已为举世所公认。所谓树大招风．其他厂商或多或少、有意无意地总喜欢在自家的产品上“借鉴”一下。初见这款最新的夏普（SHARP)PA—VR10数码录音笔就有种似曾相识之感，它浑身洋溢着个性时尚而又不张扬的气息。在众多外观雷同的数码录音笔中显得卓而不群，在采访或会议录音时也能凸现自己的独到品位。这款录音笔内置了64MB闪存．最多能持续大约28小时的录音。

小儿久咳合剂对感染后咳嗽(肺热阴虚证)大鼠肺匀浆中SP含量及肺组织中SP、VR1及PGP-9.5表达的影响

目的:观察小儿久咳合剂对感染后咳嗽(肺热阴虚证)大鼠肺匀浆中P物质(SP)含量及肺组织中SP、类香草素受体1(VR1)及蛋白基因产物9.5(PGP-9.5)表达的影响,探讨该药对大鼠气道神经源性炎症的调节作用。方法:从50只SD大鼠中随机选取10只作为空白组,其余40只采用烟熏+内毒素滴鼻+甲状腺素灌胃+辣椒素雾化诱咳法建立感染后咳嗽(肺热阴虚证)大鼠模型,造模成功后随机分为模型组、孟鲁司特钠组、小儿久咳合剂小剂量组、小儿久咳合剂大剂量组,每组10只。各组分别予以相应药物进行干预,空白组及模型组则给予同体积0.9%氯化钠溶液灌胃。ELISA法检测治疗前后各组大鼠肺匀浆中SP含量,免疫组化法检测治疗前后大鼠肺组织中SP、VR1及PGP-9.5表达情况。结果:与模型组比较,小儿久咳合剂大、小剂量组大鼠肺匀浆中SP含量明显降低(P<0.01),肺组织中SP、VR1及PGP-9.5蛋白表达也明显减少。结论:小儿久咳合剂能通过降低肺匀浆中SP含量,减少肺组织中SP、VR1及PGP-9.5的表达来减轻气道神经源性炎症,进而发挥治疗作用。

200 mm厚度加氢反应器用特厚板12Cr2Mo1VR(H)的开发

介绍了加氢反应器特厚板12Cr2Mo1VR(H)钢的成分设计、冶炼、浇铸和轧制工艺,利用JMatPro软件计算热扩散率、热容量、钢板导热能力等重要相变参数,并分析了热处理制度对其组织、回火脆化性能、高温持久与蠕变性能的影响。生产过程中通过调整Cr、Mo(Mn)和V含量,控制各组织的形态和分布,促进晶内铁素体形核,利用洁净钢冶炼技术将有害元素控制在较低水平,减少有害元素晶界偏聚产生的回火脆化现象,利用水冷模浇铸技术和控制轧制技术控制原始晶粒度,性能检测结果显示,12Cr2Mo1VR(H)钢的抗回火脆化温度达到-51℃,钢板经模拟热循环后X向、Y向、Z向的三个位置拉伸性能差异范围在15 MPa以内,厚度截面表层、厚度1/4、厚度1/2、厚度3/4位置冲击功均达到280 J以上,无较大的位置趋向差异,在540℃温度下,加载力为210 MPa时,持续1 010 h未断裂,高温蠕变弹性伸长率为0.147 5%,总塑性伸长率1.454 5%。

伤害性热受体VR1与神经肽能神经元的关系

最近,有两种接受伤害性热刺激的受体被克隆,分别命名为VR1(Vanilloid receptor subtype 1)和VRL1(Vanilloid receptor like protein 1)。本研究探讨了VR1作为原发性感觉神经元和伤害感受神经元可认识的肽P物质(SP)与降钙素基因关联肽(CGRP)能神经元的关系。

新型外周镇痛药物作用靶点——辣椒素受体

辣椒素受体是表达于感受痛觉的中枢感觉神经元伤害性感受器上的阳离子通道 ,与人体对伤害性冲动的感受和痛觉的产生密切相关。实验条件下 ,辣椒素受体激动 ,机体会产生痛觉反应。而敲除辣椒素受体的动物则对某些伤害性刺激 ,如辣椒素、H+ 、热 (>43℃ )极不敏感。随着研究的深入 。

非致炎浓度的福尔马林激活小鼠皮肤辣椒素受体

目的:探索非致炎浓度的福尔马林对小鼠皮肤辣椒素受体(vanilloid receptor type 1,VR1)的激活作用。方法:选用KM小鼠随机分为3组:福尔马林(formalin,FM)组、辣椒素(capsaicin,CAP)组和Capsazepine(CPZ)组。采用注射后5 m in内小鼠舔舐注射脚掌的时间作为评价疼痛反应的指标,对各组小鼠的痛反应进行观测。结果:0.025%FM和200μmol/L CAP是理想的实验浓度,既能引起显著疼痛反应,又不引起炎性损伤的致痛浓度,适于研究受体拮抗剂的抗疼痛作用;1μmol/L CPZ分别与200μmol/L CAP和0.025%FM共注射能有效的拮抗CAP和FM引起的疼痛反应。结论:非致炎浓度FM所致的疼痛反应在外周可能由VR1介导。

辣椒素受体与神经痛

辣椒素受体(vanilloid receptor subtype1,VR1)是一种非选择性的阳离子通道,主要分布于伤害性感觉神经元。这些神经元的轴索主要是无髓鞘的C类纤维,以及一部分Aδ纤维。VR1可被一些化学、机械和热刺激(如温度>43℃)、酸(pH<6.0)等激活,阳离子(主要是Ca2+)从胞外进入胞内,从而产生痛觉。随着对VR1不断深入的研究,越来越多的研究表明VR1参与了神经痛的发生机制,因而寻找以VR1为作用靶点的治疗神经痛的药物成为目前镇痛药物研发的热点。该文结合近几年的研究结果,对VR1与神经痛的关系作一综述。

高血压患者社区医疗护理的体会

对象 随机选择居住较远、就医不便、家庭成员中无医护人员的10户家庭计42人为调查对象。其中男28人，女14人；60yr以上8人，50～59yr11人，40～49yr4人，30～39yr11人，29vr以下8人。按WHO(1996年)制订的高血压诊断标准，42名中诊断为高血压者14例，其中60yr以上5例，50～59yr7例，40～49vr1例，30～39yr1例。文化程度：中学以上的5例，小学以下9例。自知患高血压者4例。

临氢设备用12Cr2Mo1VR(H)钢板的研制

介绍了某临氢设备用12Cr2Mo1VR(H)钢板的技术要求和生产工艺,同时对不同热处理状态下的组织和性能进行研究。研究结果表明,采用正火(加速冷却)+回火工艺生产的100 mm厚12Cr2Mo1VR(H)钢板,显微组织主要以贝氏体为主,成分均匀、杂质元素含量低、综合力学性能优良,特别是经过模拟焊后热处理和步冷处理后,钢板仍然具有良好的力学性能和优良的抗回火脆化性能。

12Cr2Mo1VR钢SH-CCT曲线测定及分析

文中叙述了在Gleeble-3180热模拟试验机上采用热膨胀法进行12Cr2Mo1VR钢的热模拟试验,获得不同冷却速率下的相变点、显微组织和维氏硬度,并对其进行分析,绘制出12Cr2Mo1VR钢的模拟焊接热影响区奥氏体连续冷却转变图。结果表明:冷却速率小于0.25℃/s时,组织转变为铁素体和珠光体;冷却速率为0.25℃/s及以上时,贝氏体转变开始,硬度逐渐升高。