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Overexpression of vacuolar proton pump ATPase(V-H^+-ATPase) subunits B, C and H confers tolerance to salt and saline-alkali stresses in transgenic alfalfa(Medicago sativa L.) 被引量:5
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作者 WANG Fa-wei WANG Chao +9 位作者 SUN Yao WANG Nan LI Xiao-wei DONG Yuan-yuan YAO Na LIU Xiu-ming CHEN Huan CHEN Xi-feng WANG Zhen-min LI Hai-yan 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2016年第10期2279-2289,共11页
The vacuolar proton pump ATPase(V-H^+-ATPase), which is a multi-subunit membrane protein complex, plays a major role in the activation of ion and nutrient transport and has been suggested to be involved in several ... The vacuolar proton pump ATPase(V-H^+-ATPase), which is a multi-subunit membrane protein complex, plays a major role in the activation of ion and nutrient transport and has been suggested to be involved in several physiological processes, such as cell expansion and salt tolerance. In this study, three genes encoding V-H^+-ATPase subunits B(Sc VHA-B, Gen Bank: JF826506), C(Sc VHA-C, Gen Bank: JF826507) and H(Sc VHA-H, Gen Bank: JF826508) were isolated from the halophyte Suaeda corniculata. The transcript levels of Sc VHA-B, Sc VHA-C and Sc VHA-H were increased by salt, drought and saline-alkali treatments. V-H^+-ATPase activity was also examined under salt, drought and saline-alkali stresses. The results showed that V-H^+-ATPase activity was correlated with salt, drought and saline-alkali stress. Furthermore, V-H^+-ATPase subunits B, C and H(Sc VHA-B, Sc VHA-C and Sc VHA-H) from S. corniculata were introduced separately into the alfalfa genome. The transgenic alfalfa was verified by Southern and Northern blot analysis. During salt and saline-alkali stresses, transgenic lines carrying the B, C and H subunits had higher germination rates than the wild type(WT). More free proline, higher superoxide dismutase(SOD) activity and lower malondialdehyde(MDA) levels were detected in the transgenic plants under salt and saline-alkali treatments. Moreover, the Sc VHA-B transgenic lines showed greater tolerance to salt and saline-alkali stresses than the WT. These results suggest that overexpression of Sc VHA-B, Sc VHA-C and Sc VHA-H improves tolerance to salt and saline-alkali stresses in transgenic alfalfa. 展开更多
关键词 vacuolar proton pump salt tolerance saline-alkali tolerance alfalfa
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空泡型质子泵在骨巨细胞瘤多核巨细胞中表达 被引量:2
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作者 赵宁侠 于世风 +1 位作者 庞淑珍 高岩 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 1997年第4期17-20,共4页
通过电镜观察附着于骨片的骨巨细胞瘤多核巨细胞,表明在骨吸收时具有褶皱缘结构。采用可标记破骨细胞褶皱缘的空泡型质子泵31KD亚基的抗体,对体外培养的骨巨细胞瘤细胞进行免疫组织化学染色,结果显示多核巨细胞为阳性,间质细胞... 通过电镜观察附着于骨片的骨巨细胞瘤多核巨细胞,表明在骨吸收时具有褶皱缘结构。采用可标记破骨细胞褶皱缘的空泡型质子泵31KD亚基的抗体,对体外培养的骨巨细胞瘤细胞进行免疫组织化学染色,结果显示多核巨细胞为阳性,间质细胞为阴性,阳性区主要分布于多核巨细胞浆内的空泡区及伪足区。通过mRNA原位杂交方法检测到,多核巨细胞和间质细胞中均有空泡型质子泵的3lKD亚基mRNA表达。结果提示多核巨细胞与破骨细胞可能有相似的骨吸收泌酸机制。 展开更多
关键词 多核巨细胞 骨巨细胞瘤 骨吸收 破骨细胞 阳性 KD 间质细胞 表达 质子泵 瘤细胞
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PPIs抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路逆转胃癌细胞的化疗多药耐药 被引量:7
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作者 李建琦 陈敏 +3 位作者 张松 王军 许春红 邹晓平 《胃肠病学》 2012年第10期579-586,共8页
背景:前期实验显示质子泵抑制剂(PPIs)可抑制空泡型质子泵(V-H+-ATPases)和多药耐药蛋白P-gp、MRP1表达,增强胃癌细胞的化疗敏感性。目的:探讨PPIs抑制空泡型质子泵逆转胃癌细胞化疗多药耐药与PI3K/Akt/mTOR信号通路的关系。方法:应用... 背景:前期实验显示质子泵抑制剂(PPIs)可抑制空泡型质子泵(V-H+-ATPases)和多药耐药蛋白P-gp、MRP1表达,增强胃癌细胞的化疗敏感性。目的:探讨PPIs抑制空泡型质子泵逆转胃癌细胞化疗多药耐药与PI3K/Akt/mTOR信号通路的关系。方法:应用不同浓度埃索美拉唑或泮托拉唑预处理人胃腺癌细胞敏感株SGC7901和多药耐药株SGC7901/MDR,或以V-H+-ATPases siRNA干扰SGC7901/MDR细胞内的V-H+-ATPases表达,或以雷帕霉素阻断mTOR表达,以蛋白质印迹法检测经不同方式处理的细胞内V-H+-ATPases、P-gp、MRP1蛋白表达以及PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α信号通路及其信号旁路TSC1/2-Rheb中的相关蛋白表达;以免疫荧光法检测经埃索美拉唑预处理的SGC7901/MDR细胞内的V-H+-ATPases、P-gp蛋白表达和定位。结果:PPIs可呈浓度依赖性地抑制SGC7901/MDR细胞内的V-H+-ATPases、PI3K、Akt、mTOR、HIF-1α、TSC1、TSC2、Rheb、P-gp、MRP1表达以及Akt底物和TSC2磷酸化,改变V-H+-ATPases、P-gp的胞内定位,对SGC7901细胞则无上述影响。以V-H+-ATPases siRNA抑制SGC7901/MDR细胞内的V-H+-ATPases表达,作用与PPIs预处理相似。以雷帕霉素阻断mTOR可呈浓度依赖性地抑制SGC7901/MDR细胞内的HIF-1α、P-gp表达。结论:PPIs抑制空泡型质子泵逆转胃癌细胞化疗多药耐药的机制与抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路有关。 展开更多
关键词 空泡型质子泵 质子泵抑制剂 胃肿瘤 化疗 多药耐药 缺氧诱导因子1 P糖蛋白
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白细胞介素1β对破骨细胞空泡型质子泵活性与胞内酸化的影响 被引量:1
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作者 朱伟平 郑晶 +1 位作者 李一杰 李中和 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期749-753,共5页
目的:通过体外实验研究白细胞介素1β(IL-1β)对破骨细胞空泡型质子泵与细胞内pH值的影响,以探讨IL-1β促进破骨细胞骨吸收的机制。方法:骨髓单核巨噬细胞经过诱导成为破骨细胞后,予以0.1、0.3和0.5μg/L的IL-1β干预48 h,检测破骨细胞... 目的:通过体外实验研究白细胞介素1β(IL-1β)对破骨细胞空泡型质子泵与细胞内pH值的影响,以探讨IL-1β促进破骨细胞骨吸收的机制。方法:骨髓单核巨噬细胞经过诱导成为破骨细胞后,予以0.1、0.3和0.5μg/L的IL-1β干预48 h,检测破骨细胞空泡型质子泵mRNA和蛋白的表达以及IL-1β对破骨细胞胞内酸化的影响,观察空泡型质子泵活性的改变与破骨细胞骨吸收功能的变化。结果:研究结果提示破骨细胞经IL-1β干预48 h后,空泡型质子泵的表达与活性均显著增加,并且细胞内pH值下降。破骨细胞与含有IL-1β的细胞培养液共同孵育后,其骨吸收能力增强,培养液中IL-1β的浓度越高,该作用越趋明显。结论:IL-1β可能是通过上调空泡型质子泵的表达与酶的活性,促进氢离子的产生和(或)转运,引发破骨细胞骨吸收活动增加,最终导致骨质破坏,由此参与骨关节炎症性疾病的发生。 展开更多
关键词 白细胞介素1Β 空泡型质子泵 破骨细胞
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枇杷果实液泡膜V-ATPase D亚基基因的克隆及表达 被引量:2
5
作者 谢晓清 陈发兴 赖钟雄 《莆田学院学报》 2013年第5期51-54,共4页
提取枇杷果实总RNA,根据RNAseq数据库查找得到的(液泡膜质子泵V-ATPase)基因片段序列11个。设计引物,采用RACE技术,获得质子泵V-ATPase cDNA的全长,对测序结果进行分析,并将序列在NCBI上进行blast比对,结果显示核苷酸序列和氨基酸同源... 提取枇杷果实总RNA,根据RNAseq数据库查找得到的(液泡膜质子泵V-ATPase)基因片段序列11个。设计引物,采用RACE技术,获得质子泵V-ATPase cDNA的全长,对测序结果进行分析,并将序列在NCBI上进行blast比对,结果显示核苷酸序列和氨基酸同源性均在80%以上,为质子泵酶基因V-ATPase D亚基基因。经qPCR分析表明,该基因对枇杷果实有机酸具有明显调控作用。 展开更多
关键词 枇杷 有机酸 液泡膜质子泵 V-ATPASE
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质子泵抑制剂和化疗药物的协同效应 被引量:3
6
作者 周海辉 张海霞 葛卫红 《药学与临床研究》 2018年第5期365-367,共3页
质子泵抑制剂(PPIs),H+/K+-ATPase抑制剂,是治疗胃食管反流征和消化性溃疡的最常用药物,它们很安全,而且耐受性好。由于PPIs经常被用于癌症患者,研究PPIs和抗癌药物之间的相互作用对于实现有效和安全的癌症化疗具有特别重要的意义。研... 质子泵抑制剂(PPIs),H+/K+-ATPase抑制剂,是治疗胃食管反流征和消化性溃疡的最常用药物,它们很安全,而且耐受性好。由于PPIs经常被用于癌症患者,研究PPIs和抗癌药物之间的相互作用对于实现有效和安全的癌症化疗具有特别重要的意义。研究表明,PPIs不仅抑制胃壁细胞中H+/K+-ATPase,还抑制肿瘤细胞中表达的空泡型ATP酶(V-ATPase),以及与药代动力学和/或各种肾脏药物蓄积相关的有机阳离子转运蛋白2(OCT2),对化疗有减毒和增效作用。本文总结了PPIs对于化疗安全性和有效性的影响,为质子泵抑制剂更广的临床研究提供参考。 展开更多
关键词 质子泵抑制剂 化疗药 药物相互作用 空泡性ATP酶
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靶向肿瘤酸性微环境的抗肿瘤新策略 被引量:11
7
作者 沈秋瑾 覃文新 《生命科学》 CSCD 2008年第5期795-799,共5页
越来越多的体内体外实验及临床检测都证明了肿瘤酸性微环境对肿瘤的发生、发展和迁移起着重要作用。在肿瘤酸性微环境的重要调节因子中,V型ATP酶(V-ATPases)的作用至关重要。这些蛋白能将离子泵出膜外,在正常细胞和肿瘤细胞中都有着多... 越来越多的体内体外实验及临床检测都证明了肿瘤酸性微环境对肿瘤的发生、发展和迁移起着重要作用。在肿瘤酸性微环境的重要调节因子中,V型ATP酶(V-ATPases)的作用至关重要。这些蛋白能将离子泵出膜外,在正常细胞和肿瘤细胞中都有着多种功能。本文回顾和总结了该领域的最新研究成果:在异种移植人肿瘤细胞的动物模型中,体内实验显示,采用小分子干扰RNA(siRNA)可抑制V-ATPases的功能,加入药物性质子泵抑制剂可显著地抑制人肿瘤细胞的生长。这些结果提示V- ATPases可作为癌症治疗中一个重要的新选择靶标。 展开更多
关键词 V型ATP酶(V-ATPases) 肿瘤酸性微环境 质子泵抑制剂 细胞外基质 抗肿瘤药物
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牛脑液泡型质子泵70kD和33kD亚基基因的表达
8
作者 张瑛 彭生斌 谢小松 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1994年第4期342-347,共6页
已分离了编码牛脑液泡型质子泵的70kD亚基的cDNA,利用聚合酶链反应(PCR)扩增了70kD亚基的编码片段,同时直接从牛脑cDNA库中得到了33kD亚基的编码片段.分别将相应片段连接到PET载体上完成70kD和33... 已分离了编码牛脑液泡型质子泵的70kD亚基的cDNA,利用聚合酶链反应(PCR)扩增了70kD亚基的编码片段,同时直接从牛脑cDNA库中得到了33kD亚基的编码片段.分别将相应片段连接到PET载体上完成70kD和33kD亚基基因在大肠杆菌中的表达.SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳和蛋白质印迹分析表明70kD和33kD亚基基因均得到明显表达. 展开更多
关键词 质子泵 液泡型 亚基 基因表达
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蓖麻液泡膜质子泵RcVP1基因克隆与表达分析 被引量:1
9
作者 李惠根 王晓宇 +5 位作者 李平 从娇娇 张丽雪 张继星 冀照君 穆莎茉莉 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2018年第2期251-258,共8页
为挖掘耐盐基因,培育耐盐蓖麻新种质,本研究设计特异性引物克隆蓖麻液泡膜H+-PPase基因,将其命名为Rc VP1,该基因开放阅读框为2 304 bp,编码767个氨基酸,其编码蛋白质的分子量和等电点分别为8.04×104和4.94。Rc VP1含有保守的H+-PP... 为挖掘耐盐基因,培育耐盐蓖麻新种质,本研究设计特异性引物克隆蓖麻液泡膜H+-PPase基因,将其命名为Rc VP1,该基因开放阅读框为2 304 bp,编码767个氨基酸,其编码蛋白质的分子量和等电点分别为8.04×104和4.94。Rc VP1含有保守的H+-PPase结构域,包括CS1、CS2、CS3高度保守区,有13个跨膜结构域。多重序列比对结果表明Rc VP1氨基酸序列与毛白杨的相似性最高,达95.00%,与Ⅰ型H+-PPase拟南芥AVP1的相似性高达88.53%,与Ⅱ型H+-PPase拟南芥AVP2的相似性只有36.41%,属于Ⅰ型液泡膜H+-PPase跨膜蛋白质。半定量PCR分析结果表明,该基因在蓖麻叶片、茎中受盐胁迫诱导上调表达,在种子中抑制表达。 展开更多
关键词 蓖麻 液泡膜质子泵 基因克隆 表达分析
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原发性甲状旁腺功能亢进症的手术疗效 被引量:4
10
作者 陈曦 杨卫平 +1 位作者 蔡伟耀 李宏为 《普外临床》 CSCD 1997年第1期34-36,共3页
原发性甲状旁腺功能亢进症的手术疗效陈曦,杨卫平,蔡伟耀,李宏为原发性甲状旁腺功能亢进症(primaryhyperparathyroidism,PHPT)为一种较常见的内分泌疾病。大多数患者仅有血清生化指标的改变,如血... 原发性甲状旁腺功能亢进症的手术疗效陈曦,杨卫平,蔡伟耀,李宏为原发性甲状旁腺功能亢进症(primaryhyperparathyroidism,PHPT)为一种较常见的内分泌疾病。大多数患者仅有血清生化指标的改变,如血甲状旁腺素和血钙的升高,即所谓的“... 展开更多
关键词 甲状旁腺 机能亢进 外科手术
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急性化脓性甲状腺炎 被引量:3
11
作者 杨植 唐伟松 《普外临床》 CSCD 1997年第1期59-60,共2页
急性化脓性甲状腺炎杨植,唐伟松急性化脓性甲状腺炎(acutesuppurativethyroiditis,AST)是一种少见的疾病,多发生于儿童,症状不典型者常易误诊。1979年Takai[1]首先提出梨状窝瘘(py... 急性化脓性甲状腺炎杨植,唐伟松急性化脓性甲状腺炎(acutesuppurativethyroiditis,AST)是一种少见的疾病,多发生于儿童,症状不典型者常易误诊。1979年Takai[1]首先提出梨状窝瘘(pyriformsinusfistul... 展开更多
关键词 甲状腺素 AST 病因 诊断 治疗
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外科在原发性甲状腺功能亢进症治疗中的地位 被引量:8
12
作者 邝耀麟 《普外临床》 CSCD 1997年第1期32-33,共2页
外科在原发性甲状腺功能亢进症治疗中的地位邝耀麟原发性甲状腺功能亢进症(以下简称甲亢)的治疗,仍存在着分歧的意见,是目前内分泌外科和内科医生主要争论的问题。抗甲状腺药物、外科手术、放射性碘各有其优缺点。虽然对某些治疗方... 外科在原发性甲状腺功能亢进症治疗中的地位邝耀麟原发性甲状腺功能亢进症(以下简称甲亢)的治疗,仍存在着分歧的意见,是目前内分泌外科和内科医生主要争论的问题。抗甲状腺药物、外科手术、放射性碘各有其优缺点。虽然对某些治疗方法的选择可能有共同的认识,但对个别... 展开更多
关键词 甲状腺机能亢进 外科手术
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类癌研究进展 被引量:3
13
作者 陈玉泉 章臣楠 朱斌 《普外临床》 CSCD 1997年第1期43-47,共5页
类癌研究进展陈玉泉,章臣楠,朱斌内分泌系统包括两大类:弥散性内分泌系统(DENS)和非弥散性内分泌系统。按WHO1980年分类,类癌应属DENS中除外胰腺内分泌瘤、甲状腺髓样癌、嗜铬细胞瘤、小细胞肺癌、皮肤Merke... 类癌研究进展陈玉泉,章臣楠,朱斌内分泌系统包括两大类:弥散性内分泌系统(DENS)和非弥散性内分泌系统。按WHO1980年分类,类癌应属DENS中除外胰腺内分泌瘤、甲状腺髓样癌、嗜铬细胞瘤、小细胞肺癌、皮肤Merkel细胞瘤的肿瘤[1]。近年来,随着... 展开更多
关键词 肿瘤 类癌 研究进展
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