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Transplantation of vascular endothelial growth factor-modified neural stem/progenitor cells promotes the recovery of neurological function following hypoxic-ischemic brain damage 被引量:12
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作者 Yue Yao Xiang-rong Zheng +4 位作者 Shan-shan Zhang Xia Wang Xiao-he Yu Jie-lu Tan Yu-jia Yang 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2016年第9期1456-1463,共8页
Neural stem/progenitor cell (NSC) transplantation has been shown to effectively improve neurological function in rats with hypoxic-isch- emic brain damage. Vascular endothelial growth factor (VEGF) is a signaling ... Neural stem/progenitor cell (NSC) transplantation has been shown to effectively improve neurological function in rats with hypoxic-isch- emic brain damage. Vascular endothelial growth factor (VEGF) is a signaling protein that stimulates angiogenesis and improves neural regeneration. We hypothesized that transplantation of VEGF-transfected NSCs would alleviate hypoxic-ischemic brain damage in neo- natal rats. We produced and transfected a recombinant lentiviral vector containing the VEGF165gene into cultured NSCs. The transfected NSCs were transplanted into the left sensorimotor cortex of rats 3 days after hypoxic-ischemic brain damage. Compared with the NSCs group, VEGF mRNA and protein expression levels were increased in the transgene NSCs group, and learning and memory abilities were significantly improved at 30 days. Furthermore, histopathological changes were alleviated in these animals. Our findings indicate that transplantation of VEGF-transfected NSCs may facilitate the recovery of neurological function, and that its therapeutic effectiveness is better than that of unmodified NSCs. 展开更多
关键词 nerve regeneration vascular endothelial growth factor TRANSFECTION neural stem/progenitor cells TRANSPLANTATION hypoxic-ischemicbrain damage cerebral cortex animal model NEUROPROTECTION neural regeneration
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Decreased numbers of circulating endothelial progenitor cells are associated with hyperglycemia in patients with traumatic brain injury 被引量:4
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作者 Hui-Jie Wei Li Liu +7 位作者 Fang-Lian Chen Dong Wang Liang Wang Zeng-Guang Wang Rong-Cai Jiang Jing-Fei Dong Jie-Li Chen Jian-Ning Zhang 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2019年第6期984-990,共7页
Hyperglycemia reduces the number of circulating endothelial progenitor cells, accelerates their senescence and impairs their function.However, the relationship between blood glucose levels and endothelial progenitor c... Hyperglycemia reduces the number of circulating endothelial progenitor cells, accelerates their senescence and impairs their function.However, the relationship between blood glucose levels and endothelial progenitor cells in peripheral blood of patients with traumatic brain injury is unclear. In this study, 101 traumatic brain injury patients admitted to the Department of Neurosurgery, Tianjin Medical University General Hospital or the Department of Neurosurgery, Tianjin Huanhu Hospital, China, were enrolled from April 2005 to March 2007. The number of circulating endothelial progenitor cells and blood glucose levels were measured at 1, 4, 7, 14 and 21 days after traumatic brain injury by flow cytometry and automatic biochemical analysis, respectively. The number of circulating endothelial progenitor cells and blood sugar levels in 37 healthy control subjects were also examined. Compared with controls, the number of circulating endothelial progenitor cells in traumatic brain injury patients was decreased at 1 day after injury, and then increased at 4 days after injury,and reached a peak at 7 days after injury. Compared with controls, blood glucose levels in traumatic brain injury patients peaked at 1 day and then decreased until 7 days and then remained stable. At 1, 4, and 7 days after injury, the number of circulating endothelial progenitor cells was negatively correlated with blood sugar levels(r =-0.147, P < 0.05). Our results verify that hyperglycemia in patients with traumatic brain injury is associated with decreased numbers of circulating endothelial progenitor cells. This study was approved by the Ethical Committee of Tianjin Medical University General Hospital, China(approval No. 200501) in January 2015. 展开更多
关键词 nerve REGENERATION endothelial PROGENITOR cells vascular repair vascular remodeling angiogenesis NEOvascularIZATION blood glucose HYPERGLYCEMIA traumatic BRAIN injury mobilization suppression senescence alternative therapy BRAIN damage neural REGENERATION
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Yiqi-Liangxue Recipe Improves Recovery of Injured Endothelia by Promoting the Proliferation and Migration of Vascular Endothelial Cells and Balancing Damage-associated in Flammatory Mediators 被引量:1
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作者 Fei Su Xiao-Yun Cui +1 位作者 Ya-Nan Sun Qian Lin 《World Journal of Traditional Chinese Medicine》 2016年第4期55-61,共7页
Aim: Yiqi-Liangxue Recipe(YL) is a compound preparation of Chinese medicine used for preventing cardiovascular events after percutaneous coronary intervention(PCI)(Patent No. 200810240175.4). Maintaining the integrity... Aim: Yiqi-Liangxue Recipe(YL) is a compound preparation of Chinese medicine used for preventing cardiovascular events after percutaneous coronary intervention(PCI)(Patent No. 200810240175.4). Maintaining the integrity of endothelia is one of the most effective approaches to prevent restenosis. Given its clinical protective effects on long-term prognosis, we investigated the mechanisms of YL in protecting vascular endothelial cells.Methods: We prepared drugs serum and human umbilical vein endothelial cell(HUVEC) lines. The injured model was employed with Angiotensin II(Ang II). The YL group was employed with YL treatment. The ARB medicine group was employed with Losartan Potassium treatment. The combination of Chinese medicine and western medicine(YL+ARB) group was employed with both YL and ARB. The control group was unemployed with injury and medical treatment. For each group the cell migration rate(CM) and cell proliferation rate(CP) were measured. The concentration of Nitric Oxide(NO), Reactive Oxygen Species(ROS), Endothelin-1(ET-1) were assessed. The gene expression level of ET-1 was observed.Results: YL+ARB group significantly promoted the speed of the CM/CP of the injured HUVECs. Compared with model group, the concentration of NO increased after the drug intervention, and the concentration of ET-1 decreased. Compared with YL+ARB group, YL and ARB group each had the similar weaker effects, but did not have significant difference. The fluorescence of ROS in YL, ARB and YL+ARB group had no difference because the fluorescence was too strong. Compared with model group, the-2ΔΔCt values were decreased in the YL, ARB and YL+ARB group. The gene expression level of ET-1 was inhibited after the drug intervention, although with no significant difference.Conclusion: Treatment with YL ameliorates the injury of vascular endothelial cells and YL+ARB has better curative effect. The mechanisms are associated with improving the speed of the CM/CP; increasing the release of NO and attenuating the concentration of damage-associated mediators like ROS, ET-1 and the gene expression level of ET-1. The results suggest that YL may be an option for preventing cardiovascular events after PCI. 展开更多
关键词 Yiqi-Liangxue Recipe PCI vascular endothelial cells cell migration damage-associated mediators
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Evidence for a therapeutic effect of Braintone on ischemic brain damage
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作者 Yuanyuan Qin Yu Luo +5 位作者 Weiwei Gu Lei Yang Xikun Shen Zhenlun Gu Huiling Zhang Xiumei Gao 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2013年第19期1743-1755,共13页
This study used a novel combination of in vivo and in vitro experiments to show that Braintone had neuroprotective effects and clarified the molecular mechanisms underlying its efficacy. The Chinese herbal extract Bra... This study used a novel combination of in vivo and in vitro experiments to show that Braintone had neuroprotective effects and clarified the molecular mechanisms underlying its efficacy. The Chinese herbal extract Braintone is composed of Radix Rhodiolase Essence, Radix Notoginseng Essence, Fofium Ginkgo Essence and Rhizoma Chuanxiong. In vivo experiments showed that cerebral infarction volume was reduced, hemispheric water content decreased, and neurological deficits were alleviated in a rat model of permanent middle cerebral artery occlusion after administration of 87.5, 175 or 350 mg/kg Braintone for 7 consecutive days. Western blot analysis showed that Braintone enhanced the expression of hypoxia-inducible factor la, heme oxygenase-1 and vascular endothe- lial growth factor in the ischemic cortex of these rats. The 350 mg/kg dose of Braintone produced the most dramatic effects. For the in vitro experiments, prior to oxygen-glucose deprivation, rats were intragastrically injected with 440, 880 or 1 760 mg/kg Braintone to prepare a Braintone-co ntaining serum, which was used to pre-treat human umbilical vein endothelial cells for 24 hours. Human umbilical vein endothelial cell injury was alleviated with this pre-treatment. Western blot and real-time PCR analysis showed that the Braintone-containing serum increased the levels of hy- poxia-inducible factor la mRNA and protein, heine oxygenase-1 protein and vascular endothelial growth factor mRNA in oxygen-glucose deprived human umbilical vein endothelial cells. The 1 760 mg/kg dose produced the greatest increases in expression. Collectively, these experimental findings suggest that Braintone has neuroprotective effects on ischemia-induced brain damage via the up-regulation of hypoxia-inducible factor la, heme oxygenase-1 and vascular endothelial growth factor expression in vascular endothelial cells. 展开更多
关键词 neural regeneration traditional Chinese medicine Braintone ischemic brain damage oxygen-glucosedeprivation endothelial cells hypoxia inducible factor la heme oxygenase-1 vascular endothelial growthfactor grants-supported paper NEUROREGENERATION
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Clinical Study on Protective Effect of Xinmaitong Capsule on Damage of Vascular Endothelial Cells
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作者 丘瑞香 贺敬波 蓝军 《Chinese Journal of Integrative Medicine》 SCIE CAS 1998年第3期217-217,共0页
Objective: To assess the effect of Xinmaitong (XMT) capsule in treating coronaryheart disease (CHD). Methods: Thirty-eightpatients of coronary heart disease with myocardial ischemia were divided randomly intoXMT group... Objective: To assess the effect of Xinmaitong (XMT) capsule in treating coronaryheart disease (CHD). Methods: Thirty-eightpatients of coronary heart disease with myocardial ischemia were divided randomly intoXMT group (20 cases) and control group (18cases). Conventional western medical therapywas given to both groups and the XMT groupreceived additional XMT treatment. Thechanges of endothelin (ET ) and calcitoningene-related peptide (CGRP) levels, ST segment of ECG and clinical symptoms aftertreatment in all the patients were observed.Data of 14 healthy persons were taken as normal control. Results: The ET level of all patients was significantly higher than that of thenormal control (P < 0. 001 ), and level ofCGRP in patients was not different from normal control significantly (P > 0. 05 ). Aftertreatment, results showed that: (1 ) The ETlevels and the scores of clinical symptoms ofboth groups decreased significantly (P <0. 01 ), and ST segment elevated markedly(P< 0. 01) as compared with before treatment, and the changes revealed more evidentin XMT group in comparison with those of thecontrol group (P < 0.05 - 0.01 ). (2 ) Thelevel of CGRP was significantly increased inXMT group (P < 0. 01 ) while unchanged inthe control group (P > 0. 05 ). Conclusions:There is severe damage of vascular endothelialcells in CHD patients. XMT could not only reduce significantly the plasma ET content, butalso enhance markedly the production and release of CGRP, so it has a good anti--ischemiceffect, which may be closely related with itsaction on improving the function of vascularendothelial cells and regulating metabolism ofET and CGRP. 展开更多
关键词 Clinical Study on Protective Effect of Xinmaitong Capsule on damage of vascular endothelial cells
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内皮微粒包裹的miR-204-3p介导川崎病血管炎性损伤的机制探讨
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作者 赵颖 赵欣 +1 位作者 娄萍 罗英 《心脏杂志》 CAS 2024年第1期13-20,共8页
目的 探讨内皮微粒(EMP)包裹的miR-204-3p介导川崎病(KD)血管炎性损伤的作用机制。方法 2016年4月至2021年3月,58例KD患者和50例对照组入选本研究。其中,18例KD患者伴有冠状动脉瘤(CAA),其余为无冠状动脉瘤(NCAA)。分离各组血清样品中E... 目的 探讨内皮微粒(EMP)包裹的miR-204-3p介导川崎病(KD)血管炎性损伤的作用机制。方法 2016年4月至2021年3月,58例KD患者和50例对照组入选本研究。其中,18例KD患者伴有冠状动脉瘤(CAA),其余为无冠状动脉瘤(NCAA)。分离各组血清样品中EMP,并进行全基因组miRNA测序。在体外试验中,将VSMC或预转染miR-204-3p模拟物(AgomiR-204-3p)、miR-204-3p抑制剂(AntagomiR-204-3p)的VSMC与各组EMP共培养。结果 通过全基因组miRNA测序以及RT-qPCR分析证实miR-204-3p在KD EMP中显著增加,并且EMP中miR-204-3p水平根据冠状动脉病理严重程度显著降低,顺序为NCAA>SCAA>MCAA>GCAA。与对照组EMP共培养相比,VSMC与NCAA EMP共培养48 h后增殖率显著降低(P<0.05),VSMC分化标志物(ACTA2和CNN1)表达显著增加(P<0.05),去分化标志物(OPN和PDGFRβ)表达显著降低(P<0.05)。双荧光素酶报告基因检测证实,EMP中miR-204-3p在功能上靶向VSMC中的PDGFRβ。在与NCAA EMP孵育的VSMC中,使用AntagomiR-204-3p可显著降低分化标记物(ACTA2和CNN1)的表达,并增加去分化标记物(OPN和PDGFRβ)的表达。在与CAA EMP孵育的VSMC中,给予AgomiR-204-3p显著增加分化标记物的表达,并降低去分化标记物的表达。结论 EMP将miR-204-3p转移到VSMC并通过靶向PDGFRβ部分介导KD血管炎性损伤。因此,靶向miR-204-3p-PDGFRβ轴可能为KD诱导的血管病变提供新的治疗选择。 展开更多
关键词 内皮微粒 miR-204-3p 川崎病 血管炎性损伤 血管平滑肌细胞
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银杏素调节TGF⁃β1/Smad通路对ox⁃LDL诱导血管内皮细胞损伤的影响
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作者 李贺 曹慧 冯莉莉 《解剖学研究》 CAS 2024年第1期19-24,39,共7页
目的探讨银杏素调节转化生长因子⁃β1(TGF⁃β1)/Smad信号通路对ox⁃LDL诱导血管内皮细胞损伤的影响。方法将人脐静脉血管内皮细胞HUVEC分为对照组(未处理的HUVEC细胞)、模型组(50μg/mL ox⁃LDL处理的HUVEC细胞)、银杏素组(50μg/mL ox⁃LD... 目的探讨银杏素调节转化生长因子⁃β1(TGF⁃β1)/Smad信号通路对ox⁃LDL诱导血管内皮细胞损伤的影响。方法将人脐静脉血管内皮细胞HUVEC分为对照组(未处理的HUVEC细胞)、模型组(50μg/mL ox⁃LDL处理的HUVEC细胞)、银杏素组(50μg/mL ox⁃LDL+12.5μmol/L银杏素处理HUVEC细胞)、SRI⁃011381组(50μg/mL ox⁃LDL+10μmol/L的TGF⁃β1/Smad激活剂SRI⁃011381处理HUVEC细胞)、银杏素+SRI⁃011381组(50μg/mL ox⁃LDL+12.5μmol/L银杏素+10μmol/L的SRI⁃011381共同处理HUVEC细胞)。ELISA试剂盒检测HUVEC细胞丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)、IL⁃6、IL⁃1β、TNF⁃α水平;CCK⁃8法检测HUVEC细胞增殖;流式细胞术检测HUVEC细胞凋亡率;Western blot检测细胞上皮间质转化(EMT)、TGF⁃β1/Smad通路相关蛋白表达。结果与对照组相比,模型组IL⁃1β、IL⁃6、TNF⁃α、MDA水平、细胞凋亡率、TGF⁃β1、Smad3、神经型钙黏附蛋白(N⁃cadherin)、波形蛋白(Vimentin)蛋白水平显著增加(P<0.05),A值、GSH、SOD水平、上皮钙黏附素(E⁃cadherin)蛋白水平显著降低(P<0.05);与模型组相比,银杏素组IL⁃1β、IL⁃6、TNF⁃α、MDA水平、细胞凋亡率、TGF⁃β1、Smad3、N⁃cadherin、Vimentin蛋白水平显著下降(P<0.05),A值、GSH、SOD水平、E⁃cadherin蛋白水平显著升高(P<0.05),而SRI⁃011381组趋势相反,SRI⁃011381减弱了银杏素对ox⁃LDL诱导的HUVEC细胞损伤的抑制作用。结论银杏素可能通过下调TGF⁃β1/Smad信号通路对ox⁃LDL诱导的血管内皮细胞损伤起到改善作用。 展开更多
关键词 银杏素 TGF⁃β1/Smad信号通路 氧化低密度脂蛋白 血管内皮细胞 氧化损伤
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淋巴细胞功能相关抗原-1在冻融PMN介导的VEC损伤中的作用 被引量:4
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作者 王敏 刘嘉瀛 +2 位作者 杨增仁 颜培华 曹伟 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期52-55,共4页
目的 :探讨组织冻结融化造成血管内皮细胞 (VEC)损伤的机理。方法 :采用密度梯度离心法分离大鼠外周血嗜中性粒细胞 (PMN) ,速率冷冻仪冷冻PMN后水浴复温建立冻融PMN模型。冻融后 4、1 2和 2 4h ,测定PMN表面淋巴细胞功能相关抗原 1 (L... 目的 :探讨组织冻结融化造成血管内皮细胞 (VEC)损伤的机理。方法 :采用密度梯度离心法分离大鼠外周血嗜中性粒细胞 (PMN) ,速率冷冻仪冷冻PMN后水浴复温建立冻融PMN模型。冻融后 4、1 2和 2 4h ,测定PMN表面淋巴细胞功能相关抗原 1 (LFA 1 )的表达 ;将冻融PMN与正常VEC共同孵育后测定培养液中乳酸脱氢酶活性及冻融PMN与VEC的粘附。结果 :①冻融后 2 4h内 ,冻融PMN表面LFA 1的表达呈时间依赖性增强。②冻融PMN与VEC相互作用后 ,PMN VEC粘附明显增强、VEC受到明显损伤。③抗LFA 1单克隆抗体明显抑制冻融PMN与VEC粘附的增强、明显减轻VEC损伤。结论 :冻融可诱发PMN表面LFA 1的表达 ,进而增强PMN 展开更多
关键词 血管内皮细胞 vec 嗜中性粒细胞 PMN 淋巴细胞功能相关抗原-1 LFA-1 冻融损伤
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LncRNA SNHG12调控miR-138-5p/HIF-1α轴改善缺氧/复氧人血管内皮细胞损伤的研究 被引量:2
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作者 魏宗强 王琳茹 +4 位作者 胡文贤 张娟子 黄贤明 李林 李强 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期2494-2500,共7页
目的:研究长链非编码RNA(LncRNA)小核仁RNA宿主基因12(SNHG12)调控miR-138-5p/低氧诱导因子-1α(HIF-1α)轴改善缺氧/复氧(H/R)人血管内皮细胞损伤的作用。方法:体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),随机分为对照组、H/R模型组、H/R+LncRN... 目的:研究长链非编码RNA(LncRNA)小核仁RNA宿主基因12(SNHG12)调控miR-138-5p/低氧诱导因子-1α(HIF-1α)轴改善缺氧/复氧(H/R)人血管内皮细胞损伤的作用。方法:体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),随机分为对照组、H/R模型组、H/R+LncRNA SNHG12过表达组、H/R+miR-138-5p mimics组、H/R+共转染组、H/R+共转染阴性对照组,各转染组分别进行转染处理,除对照组外,其余各组给予5 h缺氧,再进行复氧1 h处理,诱导细胞模型,然后通过CCK-8实验检测各组细胞活力情况;通过流式细胞实验检测各组细胞凋亡情况,比较各组细胞凋亡率;通过试剂盒测量各组细胞活性氧(ROS)、乳酸脱氢酶(LDH)及炎症因子IL-6、IL-17、IL-18水平;通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)实验测定各组细胞miR-138-5p及HIF-1αmRNA表达;通过免疫印迹实验检测各组细胞凋亡蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(caspase-9)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)及HIF-1α蛋白表达。结果:与对照组相比,H/R模型组细胞凋亡率、细胞ROS、LDH、IL-6、IL-17及IL-18水平、细胞HIF-1αmRNA和蛋白水平、细胞caspase-9、Bax及HIF-1α蛋白水平升高(P<0.05),细胞活力、miR-138-5p水平降低(P<0.05)。与H/R模型组、H/R+共转染组相比,H/R+LncRNA SNHG12过表达组细胞活力、细胞HIF-1αmRNA及蛋白水平升高(P<0.05),细胞凋亡率、细胞ROS、LDH、IL-6、IL-17及IL-18水平、细胞caspase-9与Bax蛋白水平、miR-138-5p水平降低(P<0.05);H/R+miR-138-5p mimics组细胞活力、细胞HIF-1αmRNA及蛋白水平降低(P<0.05),细胞凋亡率、细胞ROS、LDH、IL-6、IL-17及IL-18水平、细胞cas⁃pase-9与Bax蛋白水平升高(P<0.05)。与H/R模型组相比,H/R+共转染阴性对照组、H/R+共转染组细胞各指标水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论:LncRNA SNHG12可通过下调miR-138-5p表达,上调HIF-1α表达,抑制H/R诱导的HUVECs炎症与氧化应激,减轻细胞损伤及凋亡。 展开更多
关键词 LncRNA SNHG12 miR-138-5p/HIF-1α 缺氧/复氧 人血管内皮细胞 损伤
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氧化应激和DNA损伤在小剂量电离辐射诱导血管内皮细胞损伤中的作用研究 被引量:2
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作者 刘萌萌 宋曼 +2 位作者 田梅 刘青杰 高玲 《中国医学装备》 2023年第2期171-175,共5页
目的:评估氧化应激和DNA损伤在小剂量X射线对EA.hy926人脐静脉内皮细胞(HUVEC)(简称EA.hy926细胞)损伤中的作用。方法:将EA.hy926细胞进行X射线照射,根据照射剂量将其分为对照组(0 mGy)、187.5 mGy组、375 mGy组和750 mGy组。X射线照射... 目的:评估氧化应激和DNA损伤在小剂量X射线对EA.hy926人脐静脉内皮细胞(HUVEC)(简称EA.hy926细胞)损伤中的作用。方法:将EA.hy926细胞进行X射线照射,根据照射剂量将其分为对照组(0 mGy)、187.5 mGy组、375 mGy组和750 mGy组。X射线照射后使用2,7-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)水平,并用比色法测定细胞内脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性。利用蛋白免疫印迹法(Westernblot)检测4组X射线照射后的生物蛋白γ-H2AX及磷酸化P65蛋白(p-P65蛋白)表达变化。结果:X射线照射EA.hy926细胞后1 h和24 h,187.5 mGy组、375 mGy组和750 mGy组均较对照组细胞内2’,7’-二氯荧光素(DCF)荧光强度显著增加,差异有统计学意义(F=107.5,F=20.60;P<0.05)。X射线照射后24 h,EA.hy926细胞内MDA含量较对照组显著升高,而SOD活性较对照组显著下降,差异均有统计学意义(F=52.12,F=506.40;P<0.05)。照射后1 h,γ-H2AX蛋白表达在呈剂量依赖性显著增加,p-P65蛋白表达显著升高,与对照组相比差异均有统计学意义(F=176.00,F=105.50;P<0.05);照射后24 h,375 mGy组和750 mGy组γ-H2AX蛋白和p-P65蛋白表达量与对照组相比显著升高,差异均有统计学意义(F=623.50,F=232.60;P<0.05)。结论:电离辐射可诱导内皮细胞发生氧化应激和DNA损伤,并可伴随NF-κB信号通路的激活,引起EA.hy926细胞损伤。 展开更多
关键词 电离辐射 血管内皮细胞(vec) 氧化应激 DNA损伤
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大鼠主动脉血管内皮细胞原代培养方法改良及氧化损伤模型构建
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作者 马露 杨雷 +7 位作者 晏凡晨 刘晓丹 丁煌 谭维 李菀榆 唐映红 张伟 邓常清 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期2192-2198,共7页
目的改良大鼠原代主动脉血管内皮细胞(vascular endothelial cells,VECs)的提取和培养方法,并构建稳定的AVECs氧化损伤模型。方法采用六孔板植块联合胶原酶消化改良法建立大鼠原代AVECs提取和培养方法,倒置显微镜下观察细胞形态,免疫荧... 目的改良大鼠原代主动脉血管内皮细胞(vascular endothelial cells,VECs)的提取和培养方法,并构建稳定的AVECs氧化损伤模型。方法采用六孔板植块联合胶原酶消化改良法建立大鼠原代AVECs提取和培养方法,倒置显微镜下观察细胞形态,免疫荧光染色法检测vW因子(vWF)进行细胞鉴定。选用2~4代的AVECs,用不同浓度的POVPC干预24 h,检测细胞增殖、细胞骨架、成管能力、细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS),构建POVPC诱导的AVECs氧化损伤模型。结果植块联合胶原酶消化法提取培养的内皮细胞具有典型的“铺路石”样特性,生长状态良好,vWF免疫荧光染色阳性,阳性率占0.95,鉴定为内皮细胞。该法可缩短细胞传代时间。采用4.375~70μmol·L^(-1)的POVPC干预培养AVECs,POVPC在17.5~70μmol·L^(-1)时可明显抑制AVECs增殖(P<0.05);POVPC在8.75~70μmol·L^(-1)时,可导致细胞骨架交叉断裂堆积、解聚、结构模糊,且细胞成管能力明显降低(P<0.01),细胞内ROS水平明显升高(P<0.05)。以上改变在POVPC浓度为35μmol·L^(-1)时尤为明显。结论采用六孔板植块联合胶原酶消化改良法可获得较多的内皮细胞,细胞生长状态良好,缩短了细胞的生长周期,是一种简便、可行的AVECs培养方法。17.5~705μmol·L^(-1)的POVPC可构建稳定AVECs氧化损伤模型。 展开更多
关键词 血管内皮细胞 主动脉 POVPC 模型 活性氧 氧化损伤
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脂肪干细胞与放射损伤成纤维细胞共培养后细胞因子表达的差异
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作者 秦岭 阎海萍 +3 位作者 尹小芳 杨超 栗颖利 李敏 《中国美容医学》 CAS 2023年第7期86-89,共4页
目的:探讨脂肪干细胞(Adipose derived stem cells,ADSCs)与放射损伤成纤维细胞(Fibroblast,Fb)共培养后细胞因子表达的差异。方法:使用剂量8 Gy的X线放射源,对大鼠的成纤维细胞进行单次照射,建立ADSCs与放射后成纤维细胞共培养模型。... 目的:探讨脂肪干细胞(Adipose derived stem cells,ADSCs)与放射损伤成纤维细胞(Fibroblast,Fb)共培养后细胞因子表达的差异。方法:使用剂量8 Gy的X线放射源,对大鼠的成纤维细胞进行单次照射,建立ADSCs与放射后成纤维细胞共培养模型。分别把未干预的成纤维细胞设为空白对照Fb1组,放射后成纤维细胞设为Fb2组,ADSCs与放射后成纤维细胞共培养组设为Fb3组,利用蛋白质芯片检测各组差异表达的细胞因子,并通过Elisa检测验证。结果:研究结果发现Fb2组粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(Granulocyte-macrophage colony stimulating factor,GM-CSF)的表达水平低于Fb1组(P<0.05),Fb3组GM-CSF表达水平高于Fb2(P<0.01);Fb3组血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)表达水平高于Fb2组(P<0.05);各组表皮细胞因子(Epidermal growth factor,EGF)和血小板衍生因子(Platelet derived growth factor,PDGF)含量差异无统计学意义。结论:ADSCs与放射后成纤维细胞共培养后多种生长因子、黏附因子、趋化因子上调,部分炎性因子下调;ADSCs可能主要通过VEGF和GM-CSF促进成纤维细胞放射损伤的修复。 展开更多
关键词 脂肪干细胞 成纤维细胞 放射损伤 细胞因子 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 血管内皮生长因子
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补阳还五汤对血瘀证大鼠血管内皮细胞黏附分子表达的影响 被引量:23
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作者 陈利国 屈援 +3 位作者 葛红颖 胡小勤 聂优爱 何孟栖 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期706-709,共4页
目的研究补阳还五汤对血瘀证大鼠血管内皮细胞黏附分子表达的影响。方法采用免疫组织化学和RT-PCR方法观察补阳还五汤不同剂量对血瘀证大鼠血管内皮细胞细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)、血小板-内皮细胞黏附分子... 目的研究补阳还五汤对血瘀证大鼠血管内皮细胞黏附分子表达的影响。方法采用免疫组织化学和RT-PCR方法观察补阳还五汤不同剂量对血瘀证大鼠血管内皮细胞细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)、血小板-内皮细胞黏附分子-1(PECAM-1)和诱生型一氧化氮合酶(iNO S)表达的影响。结果模型组ICAM-1、VCAM-1、PECAM-1、iNO S高表达,补阳还五汤能减少造模动物ICAM-1、VCAM-1、PECAM-1、iNO S的表达,而且随着药物剂量的减少,各分子表达呈递增趋势,具有明显的量效关系。结论补阳还五汤能显著降低血瘀证大鼠血管内皮细胞黏附分子高表达,且量效关系明显。 展开更多
关键词 血瘀证 血管内皮细胞 补阳还五汤 黏附分子 免疫组织化学法 RT—PCR
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血管紧张素-Ⅱ对急性缺氧时血管内皮细胞分泌内皮素的影响及金钠多的保护作用研究 被引量:10
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作者 李鸣皋 马贵喜 +5 位作者 孙运峰 韩磊 刘玉 李靖 蒙果 刘昕 《中国全科医学》 CAS CSCD 2005年第19期1575-1577,1581,共4页
目的观察急性缺氧条件下,血管紧张素-Ⅱ对血管内皮细胞分泌内皮素的影响及金钠多的保护作用。方法将培养的血管内皮细胞分为7个组:对照组、单纯缺氧组、单纯血管紧张素-Ⅱ组、缺氧加血管紧张素-Ⅱ组、缺氧加血管紧张素-Ⅱ加高浓度金钠... 目的观察急性缺氧条件下,血管紧张素-Ⅱ对血管内皮细胞分泌内皮素的影响及金钠多的保护作用。方法将培养的血管内皮细胞分为7个组:对照组、单纯缺氧组、单纯血管紧张素-Ⅱ组、缺氧加血管紧张素-Ⅱ组、缺氧加血管紧张素-Ⅱ加高浓度金钠多组、缺氧加血管紧张素-Ⅱ加中浓度金钠多组和缺氧加血管紧张素-Ⅱ加低浓度金钠多组。除对照组和单纯血管紧张素-Ⅱ组外,其他各组置于低压舱内上升至5000m高度、停留30min,对培养的各组血管内皮细胞进行缺氧。用放射免疫法测定缺氧及血管紧张素-Ⅱ和金钠多作用前、作用后0·5h、6·0h、24·0h各组细胞培养液中的内皮素含量。结果(1)急性缺氧和单纯血管紧张素-Ⅱ均可明显促进血管内皮细胞分泌内皮素(P<0·01),在急性缺氧和血管紧张素-Ⅱ双重因素作用下促血管内皮细胞分泌内皮素的作用高于单纯缺氧组和单纯血管紧张素-Ⅱ组(P<0·01)。(2)金钠多能显著降低缺氧加血管紧张素-Ⅱ促血管内皮细胞分泌内皮素的作用,在缺氧加血管紧张素-Ⅱ作用后0·5h,高浓度金钠多的保护作用要优于中、低浓度金钠多,而在缺氧加血管紧张素-Ⅱ作用后6·0h和24·0h,则中浓度和低浓度金钠多的作用要优于高浓度组。结论在急性缺氧条件下,血管紧张素-Ⅱ可显著增加培养的血管内皮细胞分泌内皮素的功能,金钠多能显著抑制缺氧条件下血管紧张素-Ⅱ促血管内皮细胞分泌内皮素的作用,且中、低浓度的金钠多的保护作用要明显强于高浓度金钠多。 展开更多
关键词 血管内皮细胞 内皮素 缺氧 血管紧张素-Ⅱ 金钠多
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扇贝糖胺聚糖对受氧化损伤的内皮细胞功能的影响 被引量:6
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作者 张杰 刘赛 +1 位作者 苏玉文 杨曙光 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第13期990-993,共4页
目的观察血管内皮细胞受到氧自由基损伤后,血管内皮细胞粘附分子-1(VCAM-1)、血小板衍生生长因子B链(PDGF-BB)表达、内皮素(ET)以及血管紧张素Ⅱ(AⅡ)分泌的改变,研究扇贝裙边提取物-糖胺聚糖(SS-GAG)对上述变化的影响,探讨SS-GAG对血... 目的观察血管内皮细胞受到氧自由基损伤后,血管内皮细胞粘附分子-1(VCAM-1)、血小板衍生生长因子B链(PDGF-BB)表达、内皮素(ET)以及血管紧张素Ⅱ(AⅡ)分泌的改变,研究扇贝裙边提取物-糖胺聚糖(SS-GAG)对上述变化的影响,探讨SS-GAG对血管内皮细胞损伤的保护作用。方法体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),建立氧自由基诱导的HUVEC损伤模型,采用ELISA法观察SS-GAG对Fenton体系所引发的氧化损伤后HUVEC表达VCAM-1,PDGF-BB的影响;应用放射免疫方法,观察SS-GAG对氧化损伤的HUVEC分泌ET及AⅡ的影响。结果与对照组比较,Fenton体系损伤组血管内皮细胞(VEC)VCAM-1,PDGF-BB的表达明显提高(P<0.01),ET及AⅡ的分泌明显增多(P<0.01)。而细胞经不同浓度的SS-GAG预先处理后,上述表达及分泌均减少(P<0.01)。结论SS-GAG可减少氧自由基损伤血管内皮细胞后VCAM-1,PDGF-BB的表达以及ET和AⅡ的分泌,提示SS-GAG具有保护血管内皮细胞的作用,此作用可能是其抗AS的机制之一。 展开更多
关键词 扇贝 糖胺聚糖 血管内皮细胞 损伤 动脉粥样硬化
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疮灵液载入胶原对血管新生影响的实验研究 被引量:5
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作者 张宇轩 姚昶 +4 位作者 朱永康 赵辉 何鹏 曹东阳 郭檬檬 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期251-254,共4页
目的探讨疮灵液及其载入胶原后对血管新生的影响。方法将不同剂量的疮灵液及其载入胶原后,通过鸡胚尿囊膜模型(CAM)测定筛选其血管新生疗效;通过血管内皮细胞增殖实验(MTT)、迁移划痕实验、血管生成素1(Ang1)、血管内皮生长因子(VEGF)... 目的探讨疮灵液及其载入胶原后对血管新生的影响。方法将不同剂量的疮灵液及其载入胶原后,通过鸡胚尿囊膜模型(CAM)测定筛选其血管新生疗效;通过血管内皮细胞增殖实验(MTT)、迁移划痕实验、血管生成素1(Ang1)、血管内皮生长因子(VEGF)与整合素(Integraаv)Western blot检测探查筛选适合剂量的疮灵液胶原的作用靶点与机制。结果 CAM实验显示疮灵液0.2mL及0.3mL组血管新生少于控制组(P<0.05),创灵液0.2mL与0.3mL组之间没有明显差异;载入胶原后其抑制微血管新生作用得到逆转,结果与控制组无统计学差异。选择疮灵液0.2mL及其载入胶原进行细胞实验,结果显示修饰后胶原可以显著促进HUVEC的增殖,增殖率达86%,而单纯疮灵液则抑制了HUVEC增殖约21%,相同剂量疮灵液载入胶原后,增殖率得到升高,高于控制组约24%(P<0.01);疮灵液组显著抑制了细胞的迁移运动,在12、24h时均显著低于其他各组;疮灵液载入胶原后,细胞迁移速度开始加速,24h迁移速度显著快于控制组(P<0.01);机制在于疮灵液组Integraаv蛋白表达明显低于控制组,而Ang1表达高于控制组,载入胶原后Integraаv、VEG F及Ang1蛋白表达均明显上升。结论疮灵液抗血管内皮细胞的迁移与增殖,抑制血管新生;将疮灵液载入胶原后,可以改善其抑制血管新生的作用,有利血管成熟,提高了其促进创面愈合的疗效。 展开更多
关键词 疮灵液 胶原 血管新生 鸡胚尿囊膜 血管内皮细胞
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黑莓花色苷对过氧化氢诱导血管内皮细胞损伤的保护作用 被引量:9
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作者 张丽霞 周剑忠 +1 位作者 黄开红 顾振新 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第13期257-261,共5页
目的:研究黑莓花色苷提取物对过氧化氢(H2O2)诱导损伤的血管内皮细胞的保护作用及机理。方法:采用倒置相差显微镜观察凋亡细胞的形态学特征,MTT法观察细胞存活率,试剂盒法测定抗氧化酶活性,流式细胞计法测定细胞凋亡。结果:用不同剂量... 目的:研究黑莓花色苷提取物对过氧化氢(H2O2)诱导损伤的血管内皮细胞的保护作用及机理。方法:采用倒置相差显微镜观察凋亡细胞的形态学特征,MTT法观察细胞存活率,试剂盒法测定抗氧化酶活性,流式细胞计法测定细胞凋亡。结果:用不同剂量的黑莓花色苷预处理,细胞形态与损伤组相比较为完整。经50~200μg/mL黑莓花色苷预处理,内皮细胞存活率由106.5%升至157.0%,显著降低H2O2对血管内皮细胞增殖的抑制作用(P<0.01);黑莓花色苷预处理可显著提高血管内皮细胞过氧化物酶(POD)和超氧化物歧化酶(SOD)活性,200μg/mL黑莓花色苷预处理使POD活性提高50%;而血管内皮细胞的早期凋亡率从12.96%降低到5.21%,晚期凋亡从18.16%降低到2.01%,与H2O2处理比,极显著降低(P<0.01)。结论:黑莓花色苷通过提高细胞存活率,提高细胞抗氧化酶活性,抑制细胞凋亡,对H2O2诱导的血管内皮细胞损伤起到保护作用。 展开更多
关键词 黑莓花色苷 血管内皮细胞 氧化损伤 凋亡
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复方血栓通对人视网膜血管内皮细胞抗氧化损伤的保护作用及其机制 被引量:9
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作者 陈晓云 李建桥 +5 位作者 朱晓波 肖伟 黄娟 李涛 唐仕波 罗燕 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期872-878,共7页
背景氧化损伤是引起内皮细胞功能障碍和细胞死亡的重要因素之一,它还可导致视网膜血管性疾病的发生。复方血栓通对多种视网膜血管性疾病有一定的疗效,但分子机制尚不明确。目的研究复方血栓通对叔丁基过氧化氢(t—BHP)诱导的人视网... 背景氧化损伤是引起内皮细胞功能障碍和细胞死亡的重要因素之一,它还可导致视网膜血管性疾病的发生。复方血栓通对多种视网膜血管性疾病有一定的疗效,但分子机制尚不明确。目的研究复方血栓通对叔丁基过氧化氢(t—BHP)诱导的人视网膜血管内皮细胞(RVECs)氧化损伤的保护作用及其机制。方法分离健康人供体眼的视网膜,用组织块培养法进行人RVECs的原代培养,并用FITC-vwF染色流式细胞仪对培养细胞进行鉴定。取3~5代的细胞用于实验,在含有5×10^4个/L细胞密度的培养孔中分别加入质量浓度为0.0625、0.1250、0.2500、0.5000、1.000g/L复方血栓通溶液,各质量浓度复方血栓通组和t-BHP模型组均加入终浓度为100μmol/Lt-BHP,干预24h后用MTT法检测各组人RVECs的吸光度(A490)值以评估复方血栓通的细胞毒性。t-BHP模型组分别加入终浓度为75、100、200和300μmol/L的t-BHP,相应的复方血栓通组在不同浓度t-BHP造成细胞氧化损伤的同时均加入终质量浓度为0.2500g/L复方血栓通溶液,干预6h后,用MTT法检测复方血栓通对t-BHP引起氧化损伤的作用。用Annexin V—FITC/PI双染流式细胞仪检测各组细胞的凋亡和坏死率;用倒置显微镜和Hoechst33258细胞核染色观察各组细胞的形态学,利用免疫荧光法检测人RVECs中蛋白氧化损伤和DNA氧化损伤的生物标记物硝基酪氨酸(NT)和8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)的表达;Western blot法检测t-BHP损伤6、12、24h各组细胞核转录因子.KB(NF—KB)、p53、bcl-2和bax的蛋白表达水平。结果正常对照组、0.0625、0.1250、0.2500、0.5000、1.000g/L复方血栓通组人RVECs的A490值总体比较差异无统计学意义(F=1.989,P〉0.05),75、100、200和300μmol/L的t-BHP作用后细胞存活率下降,而相应的复方血栓通组细胞存活率均较t-BHP模型组升高,差异均有统计学意义(t=14.57、13.82、21.51、32.64,P〈0.05)。分别用75、100、200、300μmol/Lt-BHP干预6h后细胞凋亡率和细胞坏死率升高,而细胞正常率均明显低于相应的复方血栓通组,差异均有统计学意义(t=14.908、5.495、17.165、26.330,P〈0.01)。t-BHP模型组随着t-BHP浓度的增加,变形和死亡的人RVECs数目增加,但复方血栓通组细胞形态无明显变化,死亡细胞数减少。与相应的t-BHP模型组相比,不同质量浓度的复方血栓通组人RVECs中NT及8-OHdG的表达明显减少,NF—KB、p53和bax蛋白的表达水平明显降低,而bcl-2蛋白的表达升高,差异均有统计学意义(P〈0.05)。结论复方血栓通可保护人RVECs免受t-BHP诱导的氧化损伤,其机制可能是通过下调细胞中NF—κB、p53和bax蛋白的表达并上调bcl-2蛋白的表达。 展开更多
关键词 复方血栓通 视网膜血管内皮细胞 氧化损伤 核转录因子-ΚB 凋亡
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四种莲子心生物碱对H_2O_2诱导血管内皮细胞损伤的保护作用 被引量:12
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作者 张玉玲 杨光明 +1 位作者 李萍 潘扬 《中国生化药物杂志》 CAS 2015年第3期1-5,共5页
目的探讨中药莲子心中4种生物碱莲心季铵碱(Lot)、莲心碱(Lien)、异莲心碱(Iso)和甲基莲心碱(Nef)对H2O2诱导人脐静脉内皮细胞株ECV304氧化损伤的保护作用。方法采用MTT法测定不同浓度Lot、Lien、Iso和Nef对正常和H2O2损伤ECV304细胞活... 目的探讨中药莲子心中4种生物碱莲心季铵碱(Lot)、莲心碱(Lien)、异莲心碱(Iso)和甲基莲心碱(Nef)对H2O2诱导人脐静脉内皮细胞株ECV304氧化损伤的保护作用。方法采用MTT法测定不同浓度Lot、Lien、Iso和Nef对正常和H2O2损伤ECV304细胞活性的影响,通过比色法测定并比较各组细胞一氧化氮(NO)及一氧化氮合酶(NOS)的水平。结果 Lot、Lien、Iso和Nef对正常ECV304细胞形态和活性均无影响;Lot为100μmol/L,Lien、Iso和Nef为0.1μmol/L时,对H2O2致损内皮细胞活性有较好的缓解作用,此时细胞活性分别为H2O2损伤组的112.8%、129.3%、125.6和118.2%(P<0.01或0.05)。4种生物碱在上述剂量时对H2O2致损内皮细胞形态的改善作用与阳性药卡托普利基本相近,除Lot的作用较弱外,Lien、Iso和Nef均可使受损内皮细胞的细胞间隙缩小,细胞彼此相连增强,细胞边界变清晰。另外,且4种莲子心生物碱均可提高H2O2致伤内皮细胞的NO浓度(P<0.05),增加损伤内皮细胞的NOS活性(P<0.05)。结论莲心季铵碱、莲心碱、异莲心碱和甲基莲心碱均对H2O2诱导内皮细胞损伤的有一定的保护作用,其作用机制可能是通过增加NOS生成提高血管内皮细胞释放NO,从而发挥保护内皮的功能。 展开更多
关键词 莲心季铵碱 莲心碱 异莲心碱 甲基莲心碱 血管内皮细胞 H2 O2诱导损伤
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桔梗有效部位对糖尿病大鼠微血管病变干预作用研究 被引量:6
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作者 陈美娟 金嘉宁 +7 位作者 蒋层层 赵玉荣 席蓓丽 张春举 吴慧平 王明艳 詹瑧 张旭 《辽宁中医药大学学报》 CAS 2013年第2期23-25,共3页
目的 :研究桔梗有效部位对糖尿病大鼠血管并发症的干预作用。方法 :体外实验:采用高糖或H2O2进行血管内皮细胞造模,MTT法进行细胞活力测定,观察桔梗多糖或醇提上清对血管内皮细胞的保护作用;同时设计体外蛋白糖基化反应体系,NBT法测定... 目的 :研究桔梗有效部位对糖尿病大鼠血管并发症的干预作用。方法 :体外实验:采用高糖或H2O2进行血管内皮细胞造模,MTT法进行细胞活力测定,观察桔梗多糖或醇提上清对血管内皮细胞的保护作用;同时设计体外蛋白糖基化反应体系,NBT法测定糖基化蛋白,观察桔梗醇提上清对蛋白糖基化形成的干预作用。体内实验:采用STZ腹腔注射得到糖尿病模型小鼠,分别以含生药量2、4、8 g/kg的药物水溶液、拜唐苹或纯净水进行28 d灌胃实验,观察小鼠TG、TC、HDL、LDL等血脂指标及肾脏的组织形态学变化。结果 :体外实验表明,桔梗多糖部位对高糖引起的血管内皮细胞损伤的保护作用呈剂量依赖关系;桔梗水提醇沉上清部位能有效对抗H2O2对血管内皮细胞的损伤,且能抑制体外蛋白糖基化的形成。体内实验表明,高剂量(8 g/kg)的桔梗水提醇沉上清部分能显著降低糖尿病大鼠的血脂水平并有效抑制肾脏并发症。结论 :桔梗能通过降低高糖和H2O2对血管内皮细胞的损伤,并降低蛋白糖基化的形成,有效抑制糖尿病血管并发症和肾脏的损伤。 展开更多
关键词 桔梗有效部位 血管内皮细胞 糖基化蛋白 糖尿病大鼠 微血管病变
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