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EFFECT OF QUERCETIN ON CULTURED HUMAN VASCULAR ENDOTHELIAL CELLS
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作者 林蓉 刘俊田 +1 位作者 李旭 陈葳 《Academic Journal of Xi'an Jiaotong University》 2000年第1期17-18,封四,共3页
Objective To study the effects of quercetin (Que) on the release of endothelin-1 (ET-1) and prostacylin(PGI2) by normal human vascuiar endothelial cell (VEC). Methods Radioimmunoassay(RIA) was used to assess the amoun... Objective To study the effects of quercetin (Que) on the release of endothelin-1 (ET-1) and prostacylin(PGI2) by normal human vascuiar endothelial cell (VEC). Methods Radioimmunoassay(RIA) was used to assess the amount of ET-1 and PGI2 produced by VEC. VEC prollferation was assessed by tetrazolium(MTT) assay. Results Que increased the normal VEC prollferation at the concentration or 5, 2o, 4o, 8o, 1oompol/L and increased the production of PG12 and inhibits the release of ET by the normal VEC at the concentratiou or 5, 2o and 8ompol/L. Que at the concentration of 5, 2o and 8omol/L had no direct effect on morphology of the normal VEC. ConcIusion Que can stimulate the proliferation of VEC and inhibit tbe reIease of ET-1 and increase the formation of PGI2. The data suggest that Que might be beneficial for the prevention and treatment of vascular endothelial injury-related cardiovascular diseases, such as atherosclerosls and thromboembolism diseases. 展开更多
关键词 QUERCETIN vascular endothelium cultured cells
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Migraine attack restores the response of vascular smooth muscle cells to nitric oxide but not to norepinephrine
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作者 Raffaele Napoli Vincenzo Guardasole +9 位作者 Emanuela Zarra An-tonietta De Sena Francesco Saccà Antonio Ruvolo Simona Grassi Speranza Giugliano Giovanna De Michele Antonio Cittadini Pietro Biagio Carrieri Luigi Saccà 《World Journal of Cardiology》 CAS 2013年第10期375-381,共7页
AIM:To clarify whether the vasoconstrictory response is impaired and to study vascular function in patients with migraine during the headache attack.METHODS:We studied vascular reactivity in the resistance arteries by... AIM:To clarify whether the vasoconstrictory response is impaired and to study vascular function in patients with migraine during the headache attack.METHODS:We studied vascular reactivity in the resistance arteries by using the forearm perfusion technique associated with plethysmography.We measuredforearm blood flow by strain-gauge plethysmography during intra-brachial infusion of acetylcholine,sodium nitroprusside or norepinephrine in 11 controls and 13patients with migraine,11 of them(M) in the interval between the migraine attacks and 4 during a headache attack(MH).Written informed consent was obtained from patients and healthy controls,and the study was approved by the Ethics Committee of the University Federico Ⅱ.RESULTS:Compared to healthy control subjects,in patients with migraine studied during the interictal period,the vasodilating effect of acetylcholine,that acts through the stimulation of endothelial cells and the release of nitric oxide,was markedly reduced,but became normal during the headache attack(P<0.05by analysis of variance).The response to nitroprusside,which directly relaxes vascular smooth muscle cells(VSMCs),was depressed in patients with migraine studied during the interictal period,but normal during the headache attack(P<0.005).During norepinephrine infusion,forearm blood flow decreased in control subjects(-40% ± 5%,P<0.001).In contrast,in patients with migraine,either when studied during or free of the headache attack forearm blood flow did not change compared to the baseline value(-3%±13% and-10.4%±15%,P>0.05).CONCLUSION:In migrainers,the impaired relaxation of VSMCs is restored during the headache attack.The vasoconstrictory response is impaired and remains unchanged during the migraine attack. 展开更多
关键词 MIGRAINE NITRIC oxide endothelium vascular smooth muscle cells
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榛蘑多糖对乙醇所致大鼠血管内皮细胞损伤的保护作用
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作者 张俊慧 陈然然 +1 位作者 丛贺 沈明花 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第7期127-134,共8页
探究榛蘑多糖对乙醇所致大鼠血管内皮细胞损伤的保护作用。将40只SD大鼠随机分成4组(正常对照组、损伤组、榛蘑多糖低剂量组、榛蘑多糖高剂量组)。除正常对照组外的其余各组均按10 mL/kg mb灌胃体积分数40%乙醇诱导血管内皮细胞损伤。... 探究榛蘑多糖对乙醇所致大鼠血管内皮细胞损伤的保护作用。将40只SD大鼠随机分成4组(正常对照组、损伤组、榛蘑多糖低剂量组、榛蘑多糖高剂量组)。除正常对照组外的其余各组均按10 mL/kg mb灌胃体积分数40%乙醇诱导血管内皮细胞损伤。榛蘑多糖低、高剂量组分别以100、400 mg/kg mb灌胃榛蘑多糖,其余组以等体积生理盐水代替,实验共进行4周。使用苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察颈动脉组织病理变化;检测血清甘油三酯(triglyceride,TG)、总胆固醇(total cholesterol,T-CHO)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、内皮型一氧化氮合酶、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、一氧化氮(NO)、内皮素1(endothelin 1,ET-1)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平。此外,以600μmol/mL乙醇诱导人脐静脉内皮细胞损伤模型,分析不同剂量(100、400μg/mL)榛蘑多糖对细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)、线粒体跨膜电位、细胞凋亡以及凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤2(B cell lymphoma 2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)和Caspase-3表达的影响。结果表明:榛蘑多糖减轻乙醇所致的血管内膜损伤,降低T-CHO、TG、LDL-C、iNOS、NO、ET-1和MDA水平,提高HDL-C和SOD活性;在体外条件下,榛蘑多糖降低细胞ROS水平,抑制乙醇所致的线粒体跨膜电位的下降和细胞凋亡,并提高Bcl-2/Bax,下调Cleaved caspase-3表达水平。综上,榛蘑多糖对乙醇诱导的大鼠血管内膜损伤有保护作用,机制可能与其降脂、抗氧化和抗凋亡作用有关。 展开更多
关键词 榛蘑多糖 血管内皮细胞损伤 乙醇 降脂 抗氧化
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黄芪甲苷对氯吡格雷致大鼠胃黏膜损伤的治疗作用及机制
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作者 张静 张秋瓒 王艳荣 《山东医药》 CAS 2023年第7期55-57,共3页
目的 探讨黄芪甲苷对氯吡格雷致大鼠胃黏膜损伤的治疗作用及机制。方法 将50只SD大鼠随机分为对照组、模型组及黄芪甲苷低、中、高剂量组,每组10只,分别予生理盐水1 mL/100 g、氯吡格雷15.6 mg/kg、氯吡格雷15.6 mg/kg+黄芪甲苷15、30、... 目的 探讨黄芪甲苷对氯吡格雷致大鼠胃黏膜损伤的治疗作用及机制。方法 将50只SD大鼠随机分为对照组、模型组及黄芪甲苷低、中、高剂量组,每组10只,分别予生理盐水1 mL/100 g、氯吡格雷15.6 mg/kg、氯吡格雷15.6 mg/kg+黄芪甲苷15、30、60 mg/kg灌胃,每日1次,干预1周后脱颈处死大鼠。用损伤指数评分评价胃黏膜损伤情况,用免疫组化SABC染色法检测胃黏膜组织中血管内皮细胞生长因子(VEGF)、磷酸化血管内皮细胞生长因子受体2(p-VEGFR2)蛋白表达。结果 与对照组比较,模型组胃黏膜损伤指数评分高,VEGF、p-VEGFR2蛋白表达低(P均<0.05);与模型组比较,各黄芪甲苷组胃黏膜损伤指数评分均低,VEGF、p-VEGFR2蛋白表达高(P均<0.05);黄芪甲苷低、中、高剂量组胃黏膜损伤指数评分逐渐降低,VEGF、p-VEGFR2蛋白表达逐渐升高(P均<0.05)。结论 黄芪甲苷可减轻氯吡格雷所致胃黏膜损伤,其作用机制可能与上调VEGF、p-VEGFR2表达有关。 展开更多
关键词 胃黏膜损伤 氯吡格雷 黄芪甲苷 血管内皮细胞生长因子 磷酸化血管内皮细胞生长因子受体2 大鼠
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硫酸多糖对体外人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用 被引量:19
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作者 胡茂稳 周序斌 +1 位作者 张黎华 徐红岩 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第9期641-645,共5页
研究表明,硫酸多糖体外对多聚阳离子和氧自由基损伤的人脐静脉内皮细胞有保护作用。肝素、硫酸软骨素A抗多聚阳离子损伤作用比同浓度低分子肝素和甘糖酯强。肝素、硫酸软骨素A、甘糖酯抗氧自由基损伤作用优于同浓度低分子肝素。结果... 研究表明,硫酸多糖体外对多聚阳离子和氧自由基损伤的人脐静脉内皮细胞有保护作用。肝素、硫酸软骨素A抗多聚阳离子损伤作用比同浓度低分子肝素和甘糖酯强。肝素、硫酸软骨素A、甘糖酯抗氧自由基损伤作用优于同浓度低分子肝素。结果显示硫酸多糖有保护血管内皮的作用,其作用可能与所带阴离子基团有关。 展开更多
关键词 硫酸多糖 血管内皮 细胞培养 保护作用 氧自由基
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血清SOD、MDA、NO在波动性高血糖糖尿病大鼠中的表达 被引量:13
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作者 王露 王薇 +3 位作者 杨咪咪 包国荣 索琳娜 张微 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期806-808,813,共4页
目的观察血糖波动对糖尿病大鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)表达水平的影响。方法SD大鼠60只,随机分成正常饲料喂养组(正常组,n=20)和高糖高脂饲料喂养模型组(模型组,n=40),模型组SD大鼠6周后用小剂量链尿佐菌素... 目的观察血糖波动对糖尿病大鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)表达水平的影响。方法SD大鼠60只,随机分成正常饲料喂养组(正常组,n=20)和高糖高脂饲料喂养模型组(模型组,n=40),模型组SD大鼠6周后用小剂量链尿佐菌素(STZ)建立SD大鼠糖尿病模型,之后随机分为持续高血糖组(MS组,n=20)和血糖波动组(MF组,n=20),MF组错时腹腔注射葡萄糖、胰岛素,制备糖尿病血糖波动大鼠模型,正常组和MS组均同时腹腔注射等量生理盐水。测定各组大鼠血糖(Glu)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)及血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)水平。结果 (1)MS和MF组TG、LDL-C均明显高于正常组(P<0.01),而HDL-C均显著低于正常组(P<0.01);(2)与正常组比较,MS组和MF组SOD、MDA、NO值均有统计学差异(P均<0.05),MF组SOD、MDA、NO水平高于MS组(P<0.05)。结论 2型糖尿病大鼠体内存在血管内皮损伤和氧化应激;持续高血糖可以损伤血管内皮细胞;血糖的剧烈波动较持续性高血糖引起SOD、MDA、NO变化更为显著,可能导致更为严重的血管内皮细胞损伤。 展开更多
关键词 血糖波动 血管内皮细胞 超氧化物歧化酶 丙二醛 一氧化氮
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钙通道阻滞剂的血管内皮保护作用 被引量:16
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作者 张宇辉 党爱民 +1 位作者 吴海英 刘国仗 《中国新药杂志》 CAS CSCD 1999年第2期81-83,共3页
随着对钙通道阻滞剂的研究,逐渐发现其对血管内皮有一定的保护作用,且并不依赖于其抗高血压和抗缺血的作用。主要机制有:阻止或恢复受损血管内皮的舒张功能;影响内皮细胞和平滑肌细胞间的相互作用;阻止内皮细胞与血细胞如白细胞和... 随着对钙通道阻滞剂的研究,逐渐发现其对血管内皮有一定的保护作用,且并不依赖于其抗高血压和抗缺血的作用。主要机制有:阻止或恢复受损血管内皮的舒张功能;影响内皮细胞和平滑肌细胞间的相互作用;阻止内皮细胞与血细胞如白细胞和血小板间的相互作用;降低缺血或其他因素损伤的内皮细胞的通透性; 展开更多
关键词 钙通道阻滞剂 血管内皮细胞 细胞保护 药理
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同型半胱氨酸对培养内皮细胞损伤的研究 被引量:27
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作者 王玉芳 王树人 +2 位作者 陈海艳 杨志梅 顾玲 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期268-270,T002,共4页
目的 :本研究拟探讨同型半胱氨酸对培养人脐静脉内皮细胞的损伤效应 ,以揭示同型半胱氨酸致动脉粥样硬化的可能机制。方法 :将人脐静脉内皮细胞暴露于不同浓度的同型半胱氨酸 2 4h后 ,观察细胞形态并测定细胞的乳酸脱氢酶释放率、总蛋... 目的 :本研究拟探讨同型半胱氨酸对培养人脐静脉内皮细胞的损伤效应 ,以揭示同型半胱氨酸致动脉粥样硬化的可能机制。方法 :将人脐静脉内皮细胞暴露于不同浓度的同型半胱氨酸 2 4h后 ,观察细胞形态并测定细胞的乳酸脱氢酶释放率、总蛋白含量、凋亡及脂质过氧化的程度。结果 :(1)同型半胱氨酸不仅可诱导细胞凋亡而且在较高浓度时可致细胞坏死 ;(2 )同型半胱氨酸有较强的促脂质过氧化的效应 ,并呈量效关系 ;(3)同型半胱氨酸的上述效应因加入LDL而增强 ,示同型半胱氨酸与LDL有协同作用。结论 :同型半胱氨酸可能是通过氧化应激机制导致内皮细胞出现坏死 。 展开更多
关键词 高半胱氨酸 血管内皮细胞 同型半胱氨酸 动脉粥样硬化
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光动力疗法对血管内皮细胞和视网膜色素上皮细胞的影响 被引量:6
9
作者 金陈进 周少博 +3 位作者 胡卫群 葛坚 江儒章 陈凌燕 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期207-210,共4页
【目的】研究光动力疗法(PDT)在体外对视网膜色素上皮细胞和血管内皮细胞的影响。【方法】将体外培养的视网膜色素上皮(RPE)细胞和血管内皮细胞与PDT治疗年龄相关性黄斑变性时血药浓度(1.0μg/ mL)相当的光敏剂verteporfin共同孵育,根... 【目的】研究光动力疗法(PDT)在体外对视网膜色素上皮细胞和血管内皮细胞的影响。【方法】将体外培养的视网膜色素上皮(RPE)细胞和血管内皮细胞与PDT治疗年龄相关性黄斑变性时血药浓度(1.0μg/ mL)相当的光敏剂verteporfin共同孵育,根据孵育时间的不同,每种细胞分成7组,即0 min组、5 min组、15 min组、30 min组、60 min组、120min组和对照组,孵育至上述时间后,分别用光敏剂最大吸收波长的光照(689nm、功率密度为600 mW/cm2的二极管激光),能量密度为2.4 J/cm2,用MTT法检测24 h后各处理组细胞的存活率。所有实验数据均以均数±标准差的形式表述,数值为3次独立重复实验的平均值,资料统计采用方差分析和t检验。【结果】PDT后24 h,RPE细胞在0 min组、5 min组、15 min组、30min组、60min组和120 min组的细胞平均存活率分别为:0.94±0.07、0.68±0.13、0.68±0.11、0.65±0.12、0.49±0.11和0.21±0.11,细胞的存活率随与光敏剂孵育时间的延长而下降,经单因素方差分析,不同时间组的细胞存活率有显著性差异(P =0.000),SNK-q检验,5 min组、15 min组、30min组、60 min组、120 min组与0 min组比较都有统计学差异:血管内皮细胞在上述各时间组的平均存活率分别为:1.02±0.05、0.78±0.08、0.71±0.11、0.69±0.08、0. 展开更多
关键词 光动力疗法 色素上皮 血管内皮 细胞活力 视网膜
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烧伤大鼠血清诱导骨髓间充质干细胞分化为表皮细胞和血管内皮细胞的实验研究 被引量:12
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作者 韩冰 付小兵 +5 位作者 梁雪梅 周岗 白晓东 孙丹 陈伟 孙同柱 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第8期652-654,共3页
目的 观察烧伤大鼠血清对体外培养的大鼠骨髓间充质干细胞 (MSCs)表型变化的影响 ,为MSCs在创伤修复中的应用奠定实验基础。方法 取Wistar大鼠 ,处死 ,分离骨髓 ,原代培养MSCs,传代后分别用含有 10 %胎牛血清 (F组 )、正常大鼠血清 (N... 目的 观察烧伤大鼠血清对体外培养的大鼠骨髓间充质干细胞 (MSCs)表型变化的影响 ,为MSCs在创伤修复中的应用奠定实验基础。方法 取Wistar大鼠 ,处死 ,分离骨髓 ,原代培养MSCs,传代后分别用含有 10 %胎牛血清 (F组 )、正常大鼠血清 (N组 )和烧伤大鼠血清 (B组 )的F 12培养基培养 ,取第 5代细胞用免疫组化染色法和流式细胞仪技术检测MSCs内CK和Ⅷ因子 (FⅧ )的表达。结果 用含有 10 %烧伤大鼠血清的F 12培养基传代培养的MSCs能同时表达CK和FⅧ ,而F组和N组细胞均无阳性表达。经流式细胞仪检测 ,B组MSCs表达CK和FⅧ的阳性率高于F组和N组 (P <0 0 1) ,后两组的阳性率与阴性对照比较差异无统计学意义 (P >0 0 5 )。结论 烧伤大鼠血清能诱导MSCs同时向血管内皮细胞和表皮细胞分化 ,这种作用可能促使MSCs参与组织损伤后的修复过程。 展开更多
关键词 细胞分化 内皮 血管 细胞 表皮 骨髓间充质干细胞 烧伤
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葡萄糖诱导人血管内皮细胞凋亡及其对bax和bcl-2表达的影响 被引量:21
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作者 黄雌友 文格波 +2 位作者 曹仁贤 刘江华 欧阳贵 《中国糖尿病杂志》 CAS CSCD 2003年第1期37-41,共5页
目的 探讨糖尿病 (DM)状态下葡萄糖 (Glu)对人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)凋亡的影响及其分子机制。 方法 细胞凋亡用吖啶橙 (AO)荧光染色、原位末端标记 (TUNEL)法、流式细胞仪分析检测。同时行bcl 2和bax免疫细胞化学染色和定量分析。... 目的 探讨糖尿病 (DM)状态下葡萄糖 (Glu)对人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)凋亡的影响及其分子机制。 方法 细胞凋亡用吖啶橙 (AO)荧光染色、原位末端标记 (TUNEL)法、流式细胞仪分析检测。同时行bcl 2和bax免疫细胞化学染色和定量分析。 结果 高浓度Glu( 2 0mmol/L、4 0mmol/L)能够诱导HUVEC凋亡 ,且呈浓度和时间依赖性。高糖 ( 2 0mmol/L)培养HUVEC 72h后bax表达的MOD×area值由 387± 97升至 136 9± 2 2 5 (P <0 .0 1) ,对照组和高糖组bcl 2染色的MOD×area分别为 15 0± 36和 186± 76 ,两者间差异无显著意义 (P >0 .0 5 )。 结论 DM状态下高血糖能诱导内皮细胞凋亡 ,其机制可能与bax基因表达上调有关。 展开更多
关键词 葡萄糖 人血管内皮细胞 细胞凋亡 基因表达 糖尿病
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青蒿琥酯抑制新生血管生成的作用 被引量:22
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作者 王玮琴 周慧君 +1 位作者 陈欢欢 吴国东 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期32-36,共5页
目的 为研究青蒿琥酯成为抗血管生成药物的可能性 ,观察其对新生血管的影响 ,并初步探讨其机制。方法 采用鸡胚绒毛尿囊膜、大鼠主动脉环无血清培养、人脐静脉内皮细胞损伤迁移等实验 ,检测青蒿琥酯对新生血管增殖与迁移的抑制作用。... 目的 为研究青蒿琥酯成为抗血管生成药物的可能性 ,观察其对新生血管的影响 ,并初步探讨其机制。方法 采用鸡胚绒毛尿囊膜、大鼠主动脉环无血清培养、人脐静脉内皮细胞损伤迁移等实验 ,检测青蒿琥酯对新生血管增殖与迁移的抑制作用。结果 鸡胚绒毛尿囊膜实验表明 ,青蒿琥酯有较强的血管增殖抑制作用 ,对微血管作用强于大血管 ;大鼠主动脉环无血清培养实验表明 ,青蒿琥酯能明显推迟血管新生 ,减少新生血管数量 ;人脐静脉内皮细胞损伤迁移实验表明青蒿琥酯对内皮细胞具有增殖和迁移抑制作用。在这些体内外实验中 ,青蒿琥酯抑制血管生成作用呈剂量依赖性。结论 青蒿琥酯具有抑制新生血管生成作用 ,此作用可能与抑制血管内皮细胞迁移有关。 展开更多
关键词 青蒿琥酯 新生血管化 鸡胚绒毛尿囊膜 细胞增殖 抗血管生成药 抗肿瘤药
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肺血管内皮细胞在大鼠急性肺损伤发生中的作用 被引量:26
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作者 杨红 斯琴 孙仁宇 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第9期831-834,共4页
目的 :观察肺血管内皮细胞受损在大鼠急性肺损伤发病中的作用及地塞米松的影响。方法 :给Wistar大鼠静脉注射脂多糖 (LPS 5mg/kgBW)复制急性肺损伤模型。采用ELISA、放射免疫、原位杂交等多种方法测定肺组织ICAM - 1mRNA表达、iNOS活性... 目的 :观察肺血管内皮细胞受损在大鼠急性肺损伤发病中的作用及地塞米松的影响。方法 :给Wistar大鼠静脉注射脂多糖 (LPS 5mg/kgBW)复制急性肺损伤模型。采用ELISA、放射免疫、原位杂交等多种方法测定肺组织ICAM - 1mRNA表达、iNOS活性、血中TNF -α、NO-2 /NO3-、ACE含量及肺血管通透性、肺泡灌洗液中细胞数、蛋白含量等的变化。结果 :注射LPS后 ,肺血管ICAM - 1mRNA表达增加 ,从 1h开始至 2 4h达高峰。肺组织匀浆iNOS活性升高、肺血管通透性升高、肺泡灌洗液中中性粒细胞数量增加 ,巨噬细胞数量减少、蛋白含量增加 ,血中TNF -α、NO2 -/NO3-含量升高而ACE含量下降等变化多在注LPS后 2h明显。预先给予地塞米松对上述多种指标的变化有明显缓解作用。结论 :提示LPS通过损伤肺血管内皮细胞导致急性肺损伤 。 展开更多
关键词 内毒素 急性肺损伤 肺血管内皮细胞 大鼠
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总丹酚酸对过氧化氢诱导内皮细胞损伤的抑制作用(英文) 被引量:25
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作者 任德成 杜冠华 张均田 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期333-337,共5页
目的 研究总丹酚酸对过氧化氢 (H2 O2 )诱导血管内皮细胞损伤的影响。方法 培养的人脐静脉内皮细胞 ,用MTT法测定内皮细胞的存活率。用碘化丙啶 (PI)染色和TUNEL法测定H2 O2 诱导内皮细胞的凋亡作用。用荧光法测定半胱天冬酶 (cas pas... 目的 研究总丹酚酸对过氧化氢 (H2 O2 )诱导血管内皮细胞损伤的影响。方法 培养的人脐静脉内皮细胞 ,用MTT法测定内皮细胞的存活率。用碘化丙啶 (PI)染色和TUNEL法测定H2 O2 诱导内皮细胞的凋亡作用。用荧光法测定半胱天冬酶 (cas pase) 3的活性。用Fura 2 /AM测定内皮细胞内游离钙离子浓度 ([Ca2 + ] i)。结果  1 0 0 μmol·L-1 H2 O2可使内皮细胞的存活率下降 40 .2 % ,提前 1h给予总丹酚酸 1 0和 1 0 0mg·L-1 使存活率分别增加8.4%和2 8.6 %。 1 0 0 μmol·L-1 H2 O2 还可引起内皮细胞的凋亡 ,PI染色的结果显示 ,H2 O2 处理内皮细胞 1 8h后 ,凋亡率从 (7.1 %± 0 .7) %升至 (38.1±4.0 ) %。总丹酚酸 1 0 0mg·L-1 提前处理内皮细胞1h,可使内皮细胞凋亡率降至 (1 3 .6± 0 .8) %。TUNEL方法检测结果显示 ,H2 O2 处理内皮细胞后 ,TUNEL染色阳性的细胞从 (3 .0± 0 .8) %升至 (30 .5±2 .9) % ,总丹酚酸 1 0 0mg·L-1 可使TUNEL阳性细胞率降至 (1 9.0± 3 .7) %。此外 ,H2 O2 处理细胞后 ,内皮细胞半胱天冬酶 3的活性增加 1 76% ,[Ca2 + ] i 升高 1 0 1 % ,而总丹酚酸可以抑制H2 O2 引起的半胱天冬酶 3活性的增加和 [Ca2 + ] i 升高。结论 总丹酚酸对H2 O2 展开更多
关键词 过氧化氢 总丹酚酸 内皮细胞损伤 血管 抑制作用 细胞凋亡
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成人骨髓间充质干细胞定向诱导为血管内皮样细胞 被引量:8
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作者 张超纪 任华 +2 位作者 杜振宗 马国涛 刘洪生 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2005年第10期901-905,共5页
目的通过体外分离和纯化成人骨髓间充质干细胞,体外定向诱导分化为血管内皮样细胞,探讨为组织工程血管的构建提供种子细胞的可能性。方法收集骨髓血,提取单个核细胞进行体外培养扩增,用含10μg/L VEGF培养液诱导细胞,利用免疫组织化学... 目的通过体外分离和纯化成人骨髓间充质干细胞,体外定向诱导分化为血管内皮样细胞,探讨为组织工程血管的构建提供种子细胞的可能性。方法收集骨髓血,提取单个核细胞进行体外培养扩增,用含10μg/L VEGF培养液诱导细胞,利用免疫组织化学、流式细胞仪技术、电镜技术、放射免疫技术鉴定和观察细胞特性。结果分析了5个标本,每个标本体外扩增10代可获细胞数为8×1010个左右;诱导14 d后细胞VWF强阳性表达,接近汇合的细胞外观呈现特征性的鹅卵石样形态,透射电镜显示胞质内可见大量吞饮小泡,细胞接种在细胞外基质凝胶(ECM-gel)中可形成毛细血管样结构,细胞上清液中6-酮-前列素F1α含量为(29.939±19.935)μg/(109.L)。结论实验结果提示利用本实验方法,可以获得足够量较为单一、具有较强增殖能力的间充质干细胞,间充质干细胞可以在体外定向分化为具有内皮血管细胞特性的细胞。 展开更多
关键词 间充质干细胞 内皮样细胞 骨髓
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人外周血内皮祖细胞分离培养与鉴定 被引量:5
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作者 郭新宾 崔维韵 +2 位作者 刘庆国 张建宁 刘丽 《中国现代神经疾病杂志》 CAS 2009年第2期159-163,共5页
目的探讨人外周血内皮祖细胞体外分离培养和诱导分化的实验方法,为其在神经系统疾病中的应用提供理论依据。方法抽取健康成年男性志愿者外周血10ml,密度梯度离心获得单个核细胞,经体外培养后于倒置相差荧光显微镜下观察细胞生长情况及... 目的探讨人外周血内皮祖细胞体外分离培养和诱导分化的实验方法,为其在神经系统疾病中的应用提供理论依据。方法抽取健康成年男性志愿者外周血10ml,密度梯度离心获得单个核细胞,经体外培养后于倒置相差荧光显微镜下观察细胞生长情况及形态变化;免疫荧光染色检测细胞表面标志物CD133、CD34和凝血因子Ⅷ表达水平;流式细胞术检测CD133-FITC和CD34-PE双阳性细胞所占比例及CD34-PE单阳性细胞所占比例。结果倒置相差荧光显微镜下观察,人外周血单个核细胞经体外培养至第2天时,呈贴壁生长;至第4~6天时细胞集落形成,集落周围有内皮样细胞,细胞质和细胞膜呈红色和绿色双色荧光,细胞核呈蓝色荧光,提示内皮祖细胞特异性吸附Dil标记的乙酰化低密度脂蛋白和FITC标记的Ⅰ型荆豆凝集素,具有内皮细胞功能。免疫荧光染色CD133、CD34和凝血因子Ⅷ表达阳性;流式细胞术检测CD133-FITC和CD34-PE双阳性细胞所占比例为38.30%,CD34-PE单阳性细胞所占比例为82.60%。结论初步确立人外周血内皮祖细胞体外分离培养和诱导分化的实验方法,为内皮祖细胞的移植研究奠定了基础。 展开更多
关键词 干细胞 内皮 血管 细胞 培养的 细胞分离 细胞培养技术
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内皮抑素治疗人喉癌裸鼠模型的实验研究 被引量:13
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作者 姚鸿超 金德均 +2 位作者 孙亚男 任明华 李晓丹 《中华耳鼻咽喉科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第7期394-398,共5页
目的 研究内皮抑素对裸鼠喉鳞状细胞癌皮下移植模型的抑瘤作用,探讨其抑瘤机制及人喉癌生物治疗新方法。方法 建立人喉癌Hep-Ⅱ细胞株裸鼠皮下接种模型。应用内皮抑素治疗,观察肿瘤生长情况,对用药后肿瘤组织进行病理学检查,通用型二步... 目的 研究内皮抑素对裸鼠喉鳞状细胞癌皮下移植模型的抑瘤作用,探讨其抑瘤机制及人喉癌生物治疗新方法。方法 建立人喉癌Hep-Ⅱ细胞株裸鼠皮下接种模型。应用内皮抑素治疗,观察肿瘤生长情况,对用药后肿瘤组织进行病理学检查,通用型二步法免疫组化检查及电镜观察。计数微血管密度(microvessel density,MVD),计算增殖细胞核抗原(proliferationg cell nuclear antigen,PCNA)和血管内皮生长因子(vascuoar endothelial growth factor,VEGF)阳性率。结果 在实验组与对照组之间,鼠净重、瘤重、瘤体积及瘤重/鼠净重,经t检验P值<0.05或<0.01,差异均有显著性意义,抑瘤率为45.9%。病理学检查及电镜观察表明,实验组应用内皮抑素治疗肿瘤生长受到抑制,细胞分裂少见,可见肿瘤细胞的坏死凋亡,新生血管明显减少。MVD、PCNA及VEGF表达在实验组明显低于对照组,经t检验P值分别为<0.01、<0.05、<0.05,差异均有显著性意义。结论 内皮抑素可显著抑制人喉癌裸鼠模型肿瘤的生长和发展,其可能机制为抑制肿瘤血管生成。 展开更多
关键词 内皮抑素 治疗 喉癌 裸鼠 动物模型 实验
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构建组织工程皮肤种子细胞的人血管内皮细胞的培养 被引量:10
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作者 王军琳 刘源 +3 位作者 金岩 郭征 王新文 赵宇 《中国临床康复》 CSCD 2003年第8期1243-1244,F002,共3页
目的探讨如何以简便快捷的方法获得大量生长状态良好的人血管内皮细胞,以作为构建含血管组织工程皮肤的种子细胞。方法以新生儿脐带静脉作为细胞来源,用消化法获得血管内皮细胞,用本实验室设计的方法对细胞进行纯化培养,倒置显微镜观察... 目的探讨如何以简便快捷的方法获得大量生长状态良好的人血管内皮细胞,以作为构建含血管组织工程皮肤的种子细胞。方法以新生儿脐带静脉作为细胞来源,用消化法获得血管内皮细胞,用本实验室设计的方法对细胞进行纯化培养,倒置显微镜观察细胞形态,结合免疫组化检测(第Ⅷ因子)和透射电镜(Weibel-Palade小体)鉴定细胞来源。结果用本实验室的纯化方法获得的血管内皮细胞未见成纤维细胞污染,细胞增殖旺盛,处于良好的生长状态。结论结果表明本实验方法可以获得大量处于良好生长状态的高纯度血管内皮细胞,可以用于含血管组织工程皮肤的构建。 展开更多
关键词 组织工程 皮肤种子细胞 人血管内皮细胞 细胞培养 脐带静脉 人工皮肤
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大鼠骨髓间充质干细胞多向分化潜能的研究 被引量:5
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作者 汪浩文 何志旭 +1 位作者 王志华 刘俊峰 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期528-532,共5页
目的分离和培养大鼠骨髓间充质干细胞(marrow mesenchymal stem cells,MSCs),并行多向分化潜能的鉴定。方法经Percoll梯度分离法获得大鼠骨髓单个核细胞。贴壁培养后,通过倒置显微镜进行细胞形态学观察,并采用流式细胞术进行分析。传至... 目的分离和培养大鼠骨髓间充质干细胞(marrow mesenchymal stem cells,MSCs),并行多向分化潜能的鉴定。方法经Percoll梯度分离法获得大鼠骨髓单个核细胞。贴壁培养后,通过倒置显微镜进行细胞形态学观察,并采用流式细胞术进行分析。传至第3代后,分别进行成脂肪细胞、神经元样细胞、血管内皮样细胞的诱导,并行免疫组织化学鉴定。结果骨髓间充质干细胞大小较为均匀,基本上呈梭形或星形的上皮样细胞,传代培养后的细胞体积增大,成纤维样细胞逐渐增多。经反复传代纯化的MSCs检测CD71、CD29呈阳性表达并证实骨髓间充质干细胞经诱导后分化为脂肪细胞、神经元样细胞、血管内皮样细胞。结论在体外,大鼠骨髓间充质干细胞具有多向分化潜能,可作为组织工程的种子细胞。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 脂肪细胞 神经元样细胞 血管内皮样细胞
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氨氯地平抑制氧化型胆固醇诱导的血管内皮细胞凋亡 被引量:10
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作者 崔鸣 陈凤荣 +1 位作者 宋清华 朱应葆 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期104-107,共4页
目的 :研究氧化型胆固醇 (Triol与 2 5 -OH)对人脐静脉内皮细胞凋亡的诱导作用 ,并观察氨氯地平对氧化型胆固醇诱导内皮细胞凋亡的影响。方法 :体外培养人脐静脉内皮细胞 ,利用光镜、电镜、DNA电泳及流式细胞仪测定作为凋亡检测指标。结... 目的 :研究氧化型胆固醇 (Triol与 2 5 -OH)对人脐静脉内皮细胞凋亡的诱导作用 ,并观察氨氯地平对氧化型胆固醇诱导内皮细胞凋亡的影响。方法 :体外培养人脐静脉内皮细胞 ,利用光镜、电镜、DNA电泳及流式细胞仪测定作为凋亡检测指标。结果 :对照及胆固醇组未检测到细胞凋亡 ,Triol与 2 5 -OH处理组光镜、电镜下可见典型的细胞凋亡形态学改变 ,电泳示“DNAladder” ,流式细胞仪检测出现亚二倍体峰 ,凋亡率分别为 3 2 2 5 %与 2 3 0 4 %,而氨氯地平使其凋亡率分别下降至 13 42 %与 11 77%。结论 :氧化型胆固醇 (Triol与 2 5 -OH)可以诱导人脐静脉内皮细胞发生凋亡 ,而氨氯地平抑制其凋亡诱导作用。 展开更多
关键词 胆固醇 内皮 血管 细胞 凋亡 氨氯地平
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