青梅果超氧化物歧化酶粗酶的提取及活性研究

[目的]测定青梅果超氧化物歧化酶（SOD）活性，筛选青梅果SOD粗酶提取最有效的方法。[方法]以重庆綦江青梅果为原料，采取不同料液比提取青梅SOD粗酶，以Sevage法除去杂蛋白，硫酸铵分级沉淀。同时对各步骤所得S0D粗酶活性、蛋白量、比活的检测结果进行比较。[结果]H3P04缓冲液的用量对SOD粗酶的提取有直接影响。当H3PO4缓冲液与梅果的比例为3：1时，测得酶的比活最高，为25．34U／mg蛋白；粗酶液按3：1体积比加入的氯仿-乙醇混合液除去杂蛋白效果明显；粗酶液添加（NH4）2SO4至90％饱和度沉淀SOD效果好，比活较提取液上升51．43U／mg蛋白。[结论]青梅果SOD粗酶提取的最佳条件：H3PO4缓冲液与青梅比例为3：1，温度为25～30℃，pH值为7．8，Sevage法除去杂蛋白，（NH4）2SO4盐析从35％添加至90％饱和度沉淀SOD。该条件下，总蛋白为215．13mg，酶总活力为5415．74U／mg蛋白，比活为25．34U／mg蛋白。